7. LAMPIRAN Lampiran 1. Perbedaan Karakteristik Bakteri Asam Laktat Tabel 7. Perbedaan Karakteristik Beberapa Jenis Bakteri Asam Laktat Karakter Batang Bulat Carnob. Lactob. Aeroc. Enteroc. Lactoc. Leuconoc. Pedioc. Streptoc. Tetragenoc. Weisella Vagoc. Oenoc. Tumbuh di 10 o C + ± + + + + ± - + + Tumbuh di 45 o C - ± - + - - ± ± - - Tumbuh di NaCl ND ± + + - ± ± - + ± 6,5% Tumbuh di NaCl - - - - - - - - + - 18% Tumbuh di ph 4,4 ND ± - + ± ± + - - ± Tumbuh di ph 9,6 - - + + - - - - + - Keterangan : ± : respon bervariasi antar spesies + : positif - : negative ND : tidak diuji (Salminen et al., 2004) 48
49 Lampiran 2. Data Kemampuan Tumbuh BAL pada Suhu, NaCl, dan kondisi ph yang Berbeda Tabel 8. Hasil Absorbansi Uji Pertumbuhan BAL pada Suhu 10 o C dan 45 o C Kode 24 Jam 48 Jam 10 o C 45 o C 10 o C 45 o C Ul-1 Ul-2 Ul-1 Ul-2 Ul-1 Ul-2 Ul-1 Ul-2 Y2 0,6898 0,8051 1,3190 0,9261 1,4464 1,6958 1,4248 0,9458 Y4 0,6698 0,7086 1,5748 1,0400 1,4233 1,5809 1,7863 1,0646 Y7 0,5671 0,3975 1,5690 1,1698 1,3511 1,4177 1,8270 1,3534 Y11 0,6407 0,6877 1,4248 0,8909 1,4585 1,6630 1,7894 1,0206 Y13 0,5599 0,6052 1,5995 0,7940 1,3844 1,4150 1,7417 0,9440 Y16 0,5497 0,5027 1,2118 1,2849 1,4554 1,3381 1,7927 1,4137 Y19 0,5195 0,6371 1,4984 1,1730 1,2738 1,4495 1,6278 1,2249 Y24 0,6473 0,6466 1,2964 1,1613 1,5911 1,5690 1,4495 1,3168 Y28 0,5500 0,6222 1,2285 1,1667 1,4646 1,6101 1,7202 1,2223 Y29 0,5323 0,6310 1,1931 0,5422 1,3768 1,6654 1,5314 0,6235 Y35 0,5754 0,6659 1,1195 0,6630 1,6080 1,4261 1,7286 0,8160 Y41 0,4166 0,4504 1,5404 0,6537 1,1251 1,2267 1,2708 0,5287 Y42 0,5507 0,5046 1,2367 1,1948 1,1915 1,3347 1,5068 1,1998 Y43 0,4122 0,4133 1,0459 1,3909 1,0885 1,1477 1,7830 1,5890 Y50 0,4193 0,4271 1,1161 0,6691 1,0970 1,4662 1,2468 0,8917 Z13 0,3799 0,3588 1,3511 1,3256 1,1331 1,2126 1,4028 1,4362 Z14 0,3508 0,4222 1,6038 1,5085 1,0707 1,1425 1,3174 1,4901 Z17 0,3463 0,4105 1,5535 1,0190 0,9758 1,1691 1,5592 1,0158 Z24 0,3234 0,3456 0,9379 0,6360 0,9984 1,2385 1,7230 1,0634 Z25 0,3987 0,3628 1,2169 0,8298 1,2880 1,3245 1,3245 1,2860 Z26 0,2771 0,3251 0,9519 1,0245 1,1484 1,2205 1,5189 1,0664 Z30 0,2292 0,2300 0,5613 1,0223 0,6940 1,0043 1,0573 1,0713 Z32 0,1190 0,1239 0,3861 0,5161 0,3192 0,4877 0,8884 0,9172 Z33 0,3682 0,3490 1,2357 1,0195 1,1210 1,0720 1,4934 1,0912 Z35 0,2886 0,3281 1,2496 0,7983 1,1202 1,2205 1,6323 1,0059 Z40 0,4185 0,4336 1,0033 1,1924 1,1432 1,0984 1,1432 1,3583 Z42 0,2240 0,2174 1,2621 1,0411 0,8234 1,1091 1,0465 0,9496 Z45 0,3434 0,4014 1,0447 1,1373 1,0162 1,2640 1,4233 1,2169 Z46 0,4045 0,4032 1,0470 1,1990 1,2621 1,2759 1,6605 1,3005 Keterangan : Ul = Ulangan
50 Tabel 9. Hasil Absorbansi Uji Pertumbuhan BAL pada ph 4,4 dan ph 9,6 Kode 24 Jam 48 Jam 4,4 9,6 4,4 9,6 Ul-1 Ul-2 Ul-1 Ul-2 Ul-1 Ul-2 Ul-1 Ul-2 Y2 2,4082 2,3335 1,0554 1,8378 2,4082 2,5948 0,8206 0,8228 Y4 2,4662 2,4509 1,2039 2,0938 2,3662 2,2819 0,8901 0,9159 Y7 2,4082 2,3818 1,1698 2,3223 2,4819 2,4984 0,9875 0,9108 Y11 2,3335 2,3113 1,2539 2,2506 2,4509 2,4220 0,9147 0,8711 Y13 2,3818 2,3451 1,2002 1,1957 2,4362 2,3948 0,8783 1,1051 Y16 2,3948 2,3818 1,4615 2,3113 2,4662 2,4509 0,9552 0,8561 Y19 2,3948 2,3005 1,3680 2,2231 2,4362 2,4220 0,8864 0,8807 Y24 2,4082 2,4082 1,3857 2,3113 2,2220 2,2662 0,8748 0,8622 Y28 2,4220 2,3948 1,1223 2,3113 2,4819 2,4509 0,8988 0,9093 Y29 2,4220 2,3335 2,0269 1,9448 2,3509 2,1509 0,9471 0,9133 Y35 2,3451 2,3335 2,2601 1,0948 2,4662 2,4509 0,8414 0,8795 Y41 2,3335 2,3818 1,3140 2,4082 2,5154 2,4819 0,8868 0,8688 Y42 2,3571 2,3451 1,2762 2,2699 2,4509 2,2819 0,8463 0,8629 Y43 2,4819 2,4220 1,3872 2,3451 2,2509 2,3919 0,9896 0,9393 Y50 2,4819 2,3818 1,2900 2,4462 2,4984 2,5331 0,9191 0,9191 Z13 2,4220 2,3818 1,4406 2,4082 2,2509 2,2819 0,9818 0,9155 Z14 2,4509 2,3571 1,1351 2,3223 2,4509 2,4984 0,9208 0,8727 Z17 2,4509 2,3335 1,6255 2,2948 2,4862 2,4220 0,9147 0,8763 Z24 2,4509 2,3693 1,3425 1,4740 2,4220 2,2819 0,9486 0,9310 Z25 2,3948 2,3948 1,2699 1,4362 2,4082 2,4082 0,9199 0,8774 Z26 2,4220 2,2699 1,3101 1,1210 2,4220 2,4509 0,8151 0,9820 Z30 2,2412 2,3818 2,2601 1,3223 2,2120 2,3223 1,0049 0,9890 Z32 1,7994 2,1351 1,2601 1,4362 2,3693 2,2799 0,9723 0,9491 Z33 2,4509 2,3818 1,0900 1,3113 2,4662 2,4819 0,9778 0,8969 Z35 2,4362 2,4362 1,4854 1,2900 2,4662 2,5154 0,9509 0,9203 Z40 2,2799 2,0500 1,0658 1,0468 2,3571 2,4082 0,5460 0,6793 Z42 2,5516 2,5331 1,1040 1,3113 2,3818 2,4819 0,8583 0,9069 Z45 2,3693 2,3113 1,1958 1,3693 2,4362 2,4509 0,8633 0,9159 Z46 2,4509 2,4220 1,1621 1,3571 2,4509 2,4662 0,8625 0,8976 Keterangan : Ul = Ulangan
51 Tabel 10. Hasil Absorbansi Uji Pertumbuhan BAL pada Kadar NaCl 6,5% dan 18% Kode 24 Jam 48 Jam 6,5% 18% 6,5% 18% Ul-1 Ul-2 Ul-1 Ul-2 Ul-1 Ul-2 Ul-1 Ul-2 Y2 2,2321 2,2231 0,2314 0,2168 2,3451 2,3335 0,2628 0,2485 Y4 2,0938 2,0682 0,2074 0,0055 2,3571 2,3113 0,2222 0,0105 Y7 2,1140 2,0212 0,2246 0,0020 2,3005 2,2699 0,2124 0,0189 Y11 2,1351 2,1351 0,2069 0,2275 2,3335 2,3005 0,2320 0,2599 Y13 2,1891 2,1575 0,2557 0,0667 2,3005 2,3005 0,2124 0,0957 Y16 2,1140 2,0808 0,2386 0,1779 2,3335 2,2506 0,2046 0,1847 Y19 2,3113 2,2321 0,2050 0,2069 2,2140 2,0808 0,2269 0,2350 Y24 2,2321 2,1730 0,2345 0,2181 2,3571 2,3335 0,2346 0,2454 Y28 2,3335 2,2799 0,2585 0,2489 2,2412 2,1140 0,2952 0,2528 Y29 2,2412 2,0808 0,2789 0,2411 2,3571 2,3113 0,2665 0,2690 Y35 2,2601 2,1652 0,2404 0,1920 2,3223 2,2799 0,2473 0,1149 Y41 2,3451 2,2799 0,2166 0,0903 2,2140 2,1652 0,2473 0,1310 Y42 2,2699 2,1973 0,2363 0,0510 2,2900 2,1140 0,2528 0,0802 Y43 2,1973 2,1891 0,2308 0,0879 2,3335 2,3223 0,2637 0,0962 Y50 2,2412 2,1652 0,2258 0,0089 2,3948 2,2506 0,2579 0,0314 Z13 2,1891 2,1140 0,2083 0,0291 2,2799 2,3223 0,2244 0,0441 Z14 2,2699 2,2321 0,2217 0,1709 2,3105 2,3335 0,2433 0,1816 Z17 2,2601 2,2799 0,2151 0,2332 2,3571 2,3113 0,2288 0,2581 Z24 2,2321 2,2506 0,2395 0,0562 2,3113 2,3335 0,2639 0,0365 Z25 2,3223 2,3223 0,2133 0,0625 2,3451 2,2900 0,2243 0,0717 Z26 2,3223 2,2601 0,2321 0,1113 2,4082 2,3335 0,2292 0,1107 Z30 2,1575 2,1351 0,1874 0,1792 2,2799 2,2058 0,1961 0,1599 Z32 2,1351 2,0500 0,1838 0,0319 2,1281 2,0808 0,1813 0,0338 Z33 2,2506 2,2144 0,2020 0,1598 2,3223 2,2900 0,2164 0,1247 Z35 2,2506 2,2058 0,2139 0,1870 2,3005 2,2601 0,2549 0,1235 Z40 1,2267 0,9393 0,1815 0,1189 1,6779 1,7147 0,1137 0,1423 Z42 2,2506 2,2900 0,1959 0,2069 2,3571 2,3005 0,1803 0,2156 Z45 2,1499 2,1973 0,2540 0,2333 2,3223 2,3005 0,2137 0,2418 Z46 2,1730 2,1809 0,2271 0,2151 2,2799 2,2699 0,2233 0,2179 Keterangan : Ul = Ulangan Lampiran 3. Media yang Digunakan dalam Penelitian Medium deman Rogosa Sharpe Agar MERCK (MRSA) Komposisi MRSA dalam tiap liternya yaitu 2 gram di-kalium hydrogen phosphate, 14 gram agar-agar, 0,2 gram magnesium sulfate, 10 gram pepton kasein, 4 gram ekstrak yeast, 2 gram ammonium-hydrogencitrate, 1 gram tween 80, 5 gram sodium acetate, 20
52 gram D(+)-glucose, 0,04 gram manganese sulfate, serta 10 gram ekstrak daging. Cara pembuatan media ini yaitu dengan melarutkan 68,2 gram bubuk MRSA dengan 1 liter akuades. Media kemudian dihomogenkan menggunakan stirrer sambil dipanaskan diatas hot plate, lalu disterilisasi menggunakan autoklaf dengan suhu 121 o C selama 15 menit, sehingga didapatkan media MRSA steril. Medium deman Rogosa Sharpe Broth MERCK (MRSB) Komposisi media MRSB yaitu 4 gram ekstrak yeast, 5 gram sodium acetate, 8 gram ekstrak daging, 10 gram daging pepton/kasein, 2 gram di-potassium hydrogen phosphate, 20 gram D (+)-glucose, 2 gram di-ammonium hydrogen citrate, 0,04 gram manganese sulfate, 1 ml tween 80, dan 0,2 gram magnesium sulfate. Cara pembuatan media yaitu dengan melarutkan 52,2 gram bubuk MRSB dalam 1 liter akuades. Media kemudian diaduk hingga homogen dan larut, kemudian disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit sehingga didapatkan media MRSB yang steril. Medium Nutrient Agar MERCK (NA) Komposisi media NA dalam setiap liternya yaitu 5 gram pepton daging, 12 gram agar, dan 3 gram ekstrak daging. Cara pembuatan media NA yaitu dengan mencampurkan sebanyak 20 gram bubuk NA dengan 1 liter akuades. Media kemudian dihomogenkan dengan stirrer sambil dipanaskan diatas hot plate. Media kemudian disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit untuk mendapatkan media NA yang steril. Lampiran 4. Larutan Standar McFarland 3 dan 5 pada Uji Antimikroba Larutan Standar McFarland 3 Larutan standar McFarland 3 dibuat dengan cara yaitu mencampurkan 9,7 ml H2SO4 1% dan 0,3 ml BaCl2 1%. Larutan McFarland 3 ini menunjukkan konsentrasi bakteri sebesar 900 CFU (x10 6 /ml).
53 Larutan Standar McFarland 5 Larutan standar McFarland 5 dibuat dengan mencampurkan 0,5 ml BaCl2 1% dan 9,5 ml H2SO4 1%. Larutan ini menunjukkan konsentrasi bakteri sebesar 1500 CFU (x10 6 /ml). Lampiran 5. Larutan Kimia yang Digunakan dalam Penelitian Larutan NaOH 0,01 M Pembuatan larutan NaOH 0,01 M dengan cara melarutkan 2 gram NaOh dalam 500 ml akuades. Larutan NaH2PO4 0,15 M Pembuatan larutan ini dilakukan dengan cara melarutkan sebanyak 5,85 gram NaH2PO4 dalam 250 ml akuades. Larutan 0,2 M CH3COONa. 3H2O Larutan ini dibuat dengan cara yaitu melarutkan sebanyak 27,22 gram CH3COONa.3H2O dalam akuades sebanyak 1 liter. Larutan Asetat Buffer 0,1 M ph 5,6 Pembuatan larutan asetat buffer ini dilakukan dengan cara menambahkan sebanyak 45,2 ml larutan 0,2 M CH3COONa. 3H2O dan 4,8 ml larutan 0,2 M asam asetat ke dalam labu takar 100 ml yang kemudian diencerkan dengan akuades hingga tanda tera. Larutan 1,3 dimethylbarbiturat 0,3 M Larutan 1,3 dimethylbarbiturat 0,3 M dibuat dengan cara melarutkan 70 mg 1,3 dimethylbarbiturat dengan 1,4 ml asetat buffer.
54 Larutan Chloramine T 0,15% Pembuatan larutan Chloramine T 0,15% dilakukan dengan cara melarutkan 75 mg Chloramine dalam 50 ml akuades. Lampiran 6. Hasil Pengujian Kimiawi dengan Analisa SPSS (One Way Anova) a. Kadar garam 2,5%
b. Kadar garam 5% 55