23 HASIL Krkteristik Pertumuhn Mikro Pertumuhn P. eruginos C32 n C32 leih ept iningkn P. fluoresens Pf. Bikn C32 n C32 mmpu tumuh lm wktu 24 jm n menguh wrn mei King S B menji hiju kekuningn (Gmr 1). C32 C32 C32 Gmr 1 Isolt Pseuomons eruginos. Isolt P. fluoresens tumuh erpenr lm wktu 48 jm p meium gr King S B. Serrti mresens E31, Billus sp. I.5, Billus ereus I.21 n II.14, n B. firmus E65 itumuhkn p mei gr-gr miring NA, pertumuhnny ept lm wktu 24 jm p suhu rung. Koloni isolt B. firmus memiliki entuk tik erturn n menyer engn tepin eromk sert elevsi timul. Koloni isolt Billus sp., S. mresens, P. eruginos, n B. ereus iirikn engn entuk unr, tepin liin, sert elevsi emung. Isolt ptogen Xnthomons oryze pv. oryze Xoo menunjukkn pertumuhn koloni erwrn kekuningn erlenir engn entuk koloni ult, hlus, mengkilp.
24 Reksi Hipersensitif Isolt Uji sert Isolt Ptogen Xnthomons oryze pv. oryze terhp Tnmn Temku Pengujin reksi hipersensitif p un tnmn temku setelh 48 jm iinjeksi inokulum C32 n C32 menunjukkn iri-iri un gk menguning tetpi tik menyekn nekrosis (Gmr 2). Hsil injeksi engn inokulum ri isolt yng linny tik menunjukkn peruhn p un temku n tik terji nekrosis (Gmr 2, 2, n 2), rtiny kteri iokontrol tik ptogenik terhp tnmn temku sehingg tik menyekn jringn kolps n mti. Injeksi engn menggunkn inokulum Xoo menunjukkn nekrosis munulny erk u-u gelp n eruh menji keokltn p un temku (Gmr 2). Injeksi perlkun kontrol engn kues steril tik terji nekrosis (Gmr 2). Semu kteri iokontrol tik menimulkn reksi hipersensitif terhp tnmn temku sehingg pt ilnjutkn engn pengujin y hmt isolt-isolt terseut terhp Xoo, n pliksi p tnmn pi ser in vivo i rumh k. Pf Xoo k () () () () Gmr 2 Pengujin reksi hipersensitif p un temku setelh 48 jm inokulsi kteri. Keterngn: () n () menggunkn semu isolt uji termsuk kontrol (k), () Pf, n () Xoo. Potensi Isolt Uji lm Menghmt Pertumuhn Xnthomons oryze pv. oryze Isolt yng erpotensi menghmt pertumuhn Xoo itunjukkn engn pementukn zon hmt. Pertumuhn Xoo pt ihmt oleh isolt C32,
25 C32, Pf, I.21, n I.5 (Gmr 3). Perlkun kontrol negtif menggunkn kues steril, Xoo tumuh hingg memenuhi permukn wn erisi mei WA (Gmr 3). Sengkn p perlkun kontrol pemning kimi engn temg sulft menunjukkn zon hmt terhp pertumuhn Xoo (Gmr 3). 1 m 1 m I.21 I.5 1.5 m 2 m 2 m C32 C32 Pf 1 m Kontrol positif (Temg sulft) Kontrol negtif (Akues steril) Gmr 3 Pengujin ntgonis isolt uji terhp Xoo iningkn engn kontrol. Hsil pengujin efektivits ntgonisme kteri terhp kteri ptogen Xoo ser in vitro memperlihtkn ny penghmtn pertumuhn Xoo engn terentukny zon hmt (Tel 1). Isolt C32 n C32 pt 1 m
26 menghmt pertumuhn Xoo ser in vitro yng ere nyt terhp perlkun kontrol pemning kimi engn temg sulft. Tel 1 Zon hmt n ineks ktivits ntimikro isolt uji terhp Xoo. Perlkun Isolt Nili rt-rt zon hmt (m) Ineks ktivits mikro (%) C32 Pseuomons eruginos 1,3 325 C32 Pseuomons eruginos 1, 25 Pf Pseuomons fluoresens,8 2 E.31 Serrti mresens, e E.65 Billus firmus, e I.21 Billus ereus,5 125 II.14 Billus ereus, e I.5 Billus sp.,3 75 Temg -,4 1 sulft (+) Akues (-) -, e Angk-ngk yng iikuti oleh huruf yng sm p kolom yng sm tik ere nyt p trf 5% (DMRT) Apliksi Isolt Uji terhp Xnthomons oryze pv. oryze p Tnmn Pi i Rumh K Pnjng Lesio Hwr Dun Bkteri. Hsil uji in vivo gejl nekrosis p un pi yng telh iinokulsi Xoo muli terliht 2 hri setelh inokulsi (hsi) engn gejl erup un lyu seperti tersirm ir pns (wter soking) n erkemng menji gejl hwr sehingg un erwrn kekuningn muli 3 hsi (Gmr 4). Gejl penykit terseut memnjng i sepnjng tepi un tu i seluruh helin un. Pnjng lesio ertmh sepnjng wktu pengmtn hingg 18 hsi (Gmr 5). Gmr 4 Gejl HDB p ujung un menguning 3 hri setelh inokulsi Xoo.
27 Pnjng lesio HDB yng terentuk 3 hsi engn pliksi kteri tik menunjukkn peren engn pliksi menggunkn kterisi yng mengnung temg sulft n Xoo. Penyemprotn engn suspensi kteri E31 menunjukkn pnjng lesio yng sm engn perlkun kontrol skit yng hny iinokulsi engn Xoo tnp pliksi iokontrol (Lmpirn 3). 9 7 1 8 11 5 6 4 3 2 1 Gmr 5 Gejl HDB p ujung un menguning 18 hri setelh inokulsi Xoo. Keterngn perlkun: (1) Akues steril, (2) C32, (3) Pf, (4) C32, (5) I.21, (6) Temg sulft, (7) I.5, (8) E65, (9) II.14, (1) E31, n (11) Xoo. Pnjng lesio HDB yng terentuk 6 hsi engn pliksi kteri C32 muli menunjukkn peren iningkn pliksi menggunkn kterisi yng mengnung temg sulft n Xoo (Gmr 6). Apliksi kteri C32 merupkn perlkun terik engn pnjng lesio terenh, sengkn isolt E31 menunjukkn pnjng lesio yng leih tinggi iningkn perlkun Xoo. Demikin jug p 9 hsi n 12 hsi menunjukkn hl yng sm. Nmun p 15 hsi pliksi kteri C32, Pf, n C32 menunjukkn tik ere engn perlkun menggunkn temg sulft (Gmr 6). Pengmtn p 18 hsi engn penyemprotn suspensi kteri C32 merupkn perlkun terik yng mmpu menekn intensits perkemngn penykit HDB engn pnjng lesio terenh (Lmpirn 3). Perlkun penyemprotn isolt C32 ere nyt terhp perlkun kterisi engn menggunkn temg sulft. Sengkn perlkun engn isolt E31 menunjukkn pnjng lesio tertinggi iningkn perlkun menggunkn Xoo.
28 Pnjng lesio 3 hsi Pnjng lesio 6 hsi.12.1.8.6.4.2. e 1..9.8.7.6.5.4.3.2.1. h ef e fg g efg Pnjng lesio 9 hsi Pnjng lesio 12 hsi 1.8 1.6 1.4 1.2 1..8.6.4.2. g e e f e 3.5 3. 2.5 2. 1.5 1..5. g e e f Pnjng lesio 15 hsi Pnjng lesio 18 hsi 6. 5. 4. 3. 2. 1.. g ef ef f e 4.5 4. 3.5 3. 2.5 2. 1.5 1..5. g e e f Gmr 6 Pnjng lesio HDB p un pi setelh inokulsi Xoo. Keterngn: Sumu X ilh perlkun kontrol n perlkun isolt kteri. Sumu Y ilh pnjng lesio HDB (m).
29 Pengukurn intensits perkemngn penykit HDB ini ser kumultif ilkukn engn penghitungn AUDPC. Penyemprotn engn suspensi kteri C32 menunjukkn nili AUDPC terenh hingg 49.1 m.hri (Gmr 7). Bersrkn hsil pengukurn intensits serngn penykit, perlkun engn isolt C32 mementuk grfik liner serngn HDB engn nili terenh (Gmr 7). Perlkun engn isolt Pf n temg sulft menunjukkn gris liner yng hmpir erhimpit kren memiliki nili yng hmpir sm yng menunjukkn keu perlkun ini tik ere nyt (Lmpirn 3). Sengkn isolt E31 menunjukkn gris yng tik liner n memiliki nili serngn penykit yng leih tinggi ri p kontrol skit engn Xoo. Hl ini menunjukkn hw pliksi isolt E31 kurng efektif untuk menekn perkemngn gejl penykit HDB. Intensits serngn HDB 14 12 1 8 6 4 2 6 9 12 15 18 AUDPC 69.19 11.8 91.34 92.42 64.71 49.1 7.63 8.92 11.88 97.65 Temg sulft Xoo II.14 I.5 Pf C32 C32 I.21 E.31 E.65 Wktu Pengmtn (Hri) Gmr 7 Intensits serngn HDB p tnmn pi n nili AUDPC (m.hri). Tinggi Tnmn. Tinggi tnmn pi 1 minggu setelh tnm (mst) menunjukkn perlkun penyemprotn engn suspensi temg sulft, E65, C32, n E31 tik ere engn perlkun kues steril (Gmr 8). Nmun perlkun engn penyemprotn suspensi I.5, C32, Pf, I.21 n II.14 menunjukkn peren engn perlkun kues steril (Lmpirn 4). Pengmtn tinggi tnmn p 2 n 3 mst menunjukkn perlkun penyemprotn engn suspensi E65, E31, I.21, C32, C32, n Pf tik ere engn perlkun kues steril. Perlkun E65, E31, C32, I.21, Pf, C32, n I.5 menunjukkn tinggi tnmn yng enerung sm engn perlkun yng isemprot kues steril
3 p 4 mst hingg 6 mst. Tinggi tnmn pi 7 mst menunjukkn perlkun penyemprotn engn suspensi isolt E65, E31, C32, I.5, C32, Pf, n I.21 tik ere engn perlkun kues steril. Pengmtn tinggi tnmn pi p 8 n 9 mst menunjukkn perlkun penyemprotn engn suspensi E65, E31, C32, C32, I.21, Pf, n I.5 jug tik ere engn perlkun kues steril. Nmun ser keseluruhn pengmtn ri 1 mst hingg 9 mst menunjukkn hw perlkun engn E65 memiliki keenerungn meningktkn tinggi tnmn pi hmpir sm engn tinggi tnmn pi p perlkun menggunkn kues steril. Sengkn ri pengmtn 3 mst hingg 9 mst menunjukkn hw perlkun engn penyemprotn temg sulft (kontrol pemning kimi) n suspensi II.14 memiliki keenerungn tinggi tnmn yng leih renh iningkn engn perlkun kontrol kues steril. Jumlh Ankn. St 1 mst jumlh nkn pi seluruh perlkun engn isolt kteri menunjukkn tik ere iningkn perlkun kues steril (Gmr 9). Jumlh nkn yng munul engn perlkun II.14 enerung leih nyk iningkn engn perlkun isolt-isolt linny (Lmpirn 5). Jumlh nkn pi 2 mst p perlkun isolt E31, C32, n I.21 menunjukkn jumlh nkn enerung leih nyk ri p perlkun kues steril. Penyemprotn engn suspensi E31 menunjukkn jumlh nkn enerung leih nyk ri p perlkun engn kues steril. Suspensi isolt I.21, E31, C32, C32, Pf, E65, II.14, I.5 n temg sulft yng isemprotkn p tnmn pi p 3 mst menunjukkn jumlh nkn tik ere engn perlkun kues steril. Nmun penyemprotn engn suspensi I.21 menunjukkn jumlh nkn senyk 1,11 leih nyk ri p jumlh nkn engn perlkun kues steril yitu 7,89 (Lmpirn 5). Jumlh nkn pi 4, 5, n 6 mst p perlkun isolt I.21, E31, C32, Pf, C32, E65, II.14, I.5 n temg sulft tik ere engn perlkun kues steril. Sengkn p pengmtn 7,8, n 9 mst perlkun I.21, E.31, C32, Pf, C32, E65, II.14, temg sulft, n I.5 tik e engn perlkun kues steril. Nmun ri 7 mst hingg 8 mst hny perlkun isolt I.21 yng menunjukkn jumlh nkn enerung leih nyk ri p perlkun kues steril. Bere hlny p 9 mst, perlkun menggunkn isolt E31
31 menunjukkn jumlh nkn leih nyk iningkn engn perlkun isoltisolt linny. 2 15 1 5 Tinggi tnmn pi mst 35 3 25 2 15 1 5 Tinggi tnmn pi 1 mst 6 5 4 3 2 1 Tinggi tnmn pi 2 mst 7 6 5 4 3 2 1 Tinggi tnmn pi 3 mst 8 6 4 2 Tinggi tnmn pi 4 mst 8 7 6 5 4 3 2 1 Tinggi tnmn pi 5 mst 1 8 6 Tinggi tnmn pi 6 mst 1 8 6 Tinggi tnmn pi 7 mst 4 4 2 2 1 Tinggi tnmn pi 8 mst 8 6 4 2 1 8 6 4 2 Tinggi tnmn pi 9 mst Gmr 8 Tinggi tnmn pi yng ieri perlkun engn isolt iokontrol. Keterngn: Sumu X ilh perlkun kontrol n perlkun isolt. Sumu Y ilh tinggi tnmn pi (m).
32 5. 4. 3. 2. 1.. Jumlh nkn pi mst 7. 6. 5. 4. 3. 2. 1.. Jumlh nkn pi 1 mst 1. 8. 6. 4. 2.. Jumlh nkn pi 2 mst 14. 12. 1. 8. 6. 4. 2.. Jumlh nkn pi 3 mst 14. 12. 1. 8. 6. 4. 2.. Jumlh nkn pi 4 mst 16. 14. 12. 1. 8. 6. 4. 2.. Jumlh nkn pi 5 mst 16. 14. 12. 1. 8. 6. 4. 2.. Jumlh nkn pi 6 mst 16. 14. 12. 1. 8. 6. 4. 2.. Jumlh nkn pi 7 mst 16. 14. 12. 1. 8. 6. 4. 2.. Jumlh nkn pi 8 mst 16. 14. 12. 1. 8. 6. 4. 2.. Jumlh nkn pi 9 mst Gmr 9 Jumlh nkn pi yng ieri perlkun engn isolt iokontrol. Keterngn: Sumu X ilh perlkun kontrol n perlkun isolt. Sumu Y ilh jumlh nkn pi.
33 Jumlh Mli. Pengmtn jumlh mli pi ilkukn st 9 mst. Perlkun penyemprotn engn isolt I.21, C32, Pf, C32, n E31 p tnmn pi yng terserng Xoo menunjukkn jumlh mli tik ere engn jumlh mli p perlkun engn kues steril (Gmr 1). Sengkn perlkun engn isolt II.14, temg sulft, E65, n I.5 menunjukkn jumlh mli yng enerung leih renh iningkn engn kues steril. Jumlh Mli 12 1 8 6 4 2 Akues Steril Temg sulft Gmr 1 Jumlh mli pi yng terserng Xoo n ieri perlkun engn isolt iokontrol n pnen 9 minggu setelh tnm. Prouksi Gh. Prouksi pi yng terserng Xoo enerung leih tinggi p perlkun engn penyemprotn kteri iokontrol C32, Pf, C32, n I.21 ri p engn kues steril. Penyemprotn engn isolt C32 menghsilkn prouksi gh pling tinggi iningkn perlkun yng lin yitu seesr 16,44 g untuk oot sh n 14,86 g untuk oot kering gh (Lmpirn 6). Sengkn perlkun engn isolt I.5, II.14, E31, E65, n temg sulft menunjukkn hsil gh yng leih renh ri p perlkun engn kues steril. Boot gh (g) 2 15 1 5 e e e Akues Temg Steril sulft Gmr 11 Boot gh pi yng terserng Xoo n ieri perlkun engn isolt iokontrol pnen pnen 9 minggu setelh tnm. Keterngn: ( ) Boot Bsh, ( ) Boot Kering. Xoo II.14 I.5 Pf C32 C32 I.21 E.31 E.65 e e e e Perlkun e e e Xoo II.14 I.5 Pf C32 C32 I.21 E.31 E.65 Perlkun
34 Apliksi engn isolt-isolt iokontrol tik menggnggu pertumuhn tnmn pi itinju ri tinggi tnmn, jumlh nkn, jumlh mli, sert oot gh hingg 9 mst, wlupun tnmn pi suh terserng Xoo. Nmun emikin untuk mengethui pkh pnjng lesio yng ikitkn oleh Xoo erkorelsi terhp prouksi pi p st pnen mk ilkukn nlisis regresi (Gmr 12). ) Jumlh Mli 1 8 6 4 2 y =,953x + 13,666 R² =,4957 2 4 6 8 1 Pnjng lesio HDB (m) ) ) Boot gh sh (g) 2 15 1 5 y = 3,19x + 32,848 R² =,8721 2 4 6 8 1 Pnjng lesio HDB (m) Boot gh kering (g) 2 15 1 5 y = 2,9171x + 3,5 R² =,8955 2 4 6 8 1 Pnjng lesio HDB (m) Gmr 12 Regresi pnjng lesio HDB terhp prouksi pi p st pnen. Keterngn grfik: () pnjng lesio HDB terhp jumlh mli pi, () pnjng lesio HDB terhp oot gh sh, n () pnjng lesio HDB terhp oot gh kering.
35 Hsil nlisis regresi engn korelsi seng memiliki kisrn nili,4,59, korelsi kut engn nili,6,79, n korelsi sngt kut engn nili,8 1 (Sugiyono 26). Hsil nlisis korelsi menunjukkn hw pnjng lesio HDB p tnmn pi terhp jumlh mli erkorelsi seng engn nili seesr,4957 (Gmr 12). Nmun pnjng lesio HDB menunjukkn korelsi yng kut terhp oot gh sh yng ihsilkn, hl ini terliht p nili korelsi yng menpi,8721 (Gmr 12). Dn pnjng lesio HDB jug menunjukkn korelsi yng kut terhp oot gh kering yng ihsilkn (Gmr 12).
37 PEMBAHASAN Bikn P. eruginos C32 n C32 mmpu tumuh lm wktu 24 jm n menguh wrn mei King s B menji hiju kekuningn kren isolt terseut mmpu mengelurkn ergi pigmen piosinin (iru-hiju), pioverin (kuning-hiju), n pioruin (merh-oklt) (King et l.1998). Bkteri ini termsuk Grm negtif, ero, erentuk tng, engn motlits unipolr. Sengkn P. fluoresens ilh kteri Grm negtif n erentuk tng. Mei King s B ilh mei yng memiliki knungn Fe sngt renh sehingg sesui untuk pementukn sierofor oleh P. fluoresens. Serrti mresens termsuk kteri Grm negtif n ersift nero fkulttif. Isolt B. ereus II.14 merupkn kteri Grm positif penghsil enospor, erentuk sel tng, pentn ernti n ersift eroik (Ty et l. 28). Enospor ri jenis kteri ini thn terhp pns n konisi lingkungn yng tik menguntungkn sert mmpu mementuk kemh lm lrutn yng mengnung NOH n HCl (Vehi & Drgo 26). Koloni kteri ptogen Xnthomons oryze pv. oryze (Xoo) erentuk ult, erwrn kuning, erlenir, permukn timul, engn tepin rt, ersift Grm negtif. Bkteri ini tumuh ik p mei WA menghsilkn koloni yng leih esr n lenir leih nyk, iningkn ketik kteri itumuhkn p mei NA. Menurut Ymski et l. (26) isolt Xoo erukurn,5-,8 µm x 1,3-2,3 µm, erentuk tng penek engn keu ujungny memult, menghsilkn pigmen yng tik lrut lm ir. Xoo memiliki kpsul, tik erspor, n ergerk engn stu ulu muk (flgellum monotris). Uji reksi hipersensitif isny menggunkn tnmn temku kren merupkn tnmn moel yng telh ikethui ser lengkp sekuen genny termsuk gen yng menynikn resistensi tnmn, sert rung i ntr pemuluh un ler, n permukn un tik mengnung lignin sehingg muh untuk menginfiltrsikn suspensi isolt. Selin itu tnmn temku muh iuiykn n ipelihr (Wiywti 28). Pengujin hipersensitif p un temku itni engn terji nekrosis tu tik p un temku yng iinjeksi isolt uji n isolt ptogen.
38 Menurut Zhu et l. (2) isolt yng menghsilkn reksi hipersensitif (HR) positif kn munul gejl nekrotik, errti ersift ptogenik sehingg tik pt ijikn segi iokontrol. Nekrosis ilh munulny erk gelp n eruh menji kuning keokltn yng mennkn terji kemtin jringn tnmn kit terinfeksi ptogen setelh inokulsi selm 48 jm. Tingkt keprhn penykit ertmh seiring pemnjngn wktu pengmtn. Injeksi engn menggunkn inokulum Xoo menyekn nekrosis. Sengkn injeksi engn isolt uji tik menunjukkn nekrosis, emikin jug engn kues steril segi kontrol negtif menunjukkn reksi yng sm. Reksi hipersensitif merupkn proses kemtin sel yng ept n terloklissi. Proses kemtin sel kren terjiny gregsi sitoplsm, penghentin lirn sitoplsm, hilngny permeilits memrn sel, meningktny respirsi, kumulsi n oksisi senyw fenol n pementukn fitoleksin. Reksi ini munul p tnmn yng terinfeksi st pengenln ptogen yng merupkn ush untuk menghmt pertumuhn ptogen (Wiywti 28). Respon hipersensitif igi menji tig thp yitu thp terinuksi, perioe lten, n kemtin sel tu jringn. Thp inuksi terji 1,5-3 jm setelh un iinjeksi engn suspensi kteri. P thp ini kteri menglmi multipliksi yng ilnjutkn engn kontk sel n pengenln sel kteri engn sel tnmn. Thp lten 7-1 jm setelh injeksi, p thp ini terji peningktn lju respirsi, peningktn permeilits memrn sel tnmn n keruskn orgnel-orgnel sel. P thp ini un elum menunjukkn gejl nekrotik. Kemtin sel merupkn thp khir yng terji 12-24 jm setelh injeksi. P thp ini terji reksi ntr senyw fenol yng terpt lm vkuol engn sutnsi yng i lm sitoplsm n terentuk senyw sitolitik. P khirny kn menimulkn gejl nekrosis. Inuksi hipersensitif n ptogenits ipengruhi oleh gen hrp yng umumny itemukn p kteri Grm negtif ptogen tnmn, termsuk kelompok Xnthomons sp. (Zhu et l. 2). Hsil pengujin in vitro menunjukkn pertumuhn Xoo pt ihmt oleh isolt C32, C32, Pf, I.21, n I.5 sehingg mementuk zon hmt. Zon
39 hmt yng terentuk kren setip mikro menghsilkn ntimikro p mei tumuh. Pementukn senyw ntimikro isekn erkurngny nutrisi yng iutuhkn untuk pertumuhn sel (Zou et l. 26). P pengujin in vitro isolt I.21 n I.5 menghsilkn zon hmt terkeil iningkn tig isolt linny, hl ini imungkinkn hw ntimikro keu isolt ini kurng efektif lm menghmt pertumuhn Xoo. Sengkn zon hmt teresr terhp Xoo terpt p isolt C32, C32, n Pf. Menurut Arwiynto et l. (27) ikn P. eruginos mmpu memprouksi enotoksin n prouk ekstrseluler yng menukung invsi lokl n penyern mikroorgnisme. Toksin n prouk ekstrseluler ini menkup protese ekstrseluler, sitotoksin, hemolisin, n piosinin. Bersrkn hsil penelitin Hssnein et l. (29) Pseuomons sp. memiliki kemmpun untuk memprouksi metolit sekuner yng ere-e seperti sierofor pengkelt esi (Fe), moni, n sini. Menurut Vershuere et l. (2) penghmtn pertumuhn tik sellu erkitn engn prouksi senyw ntimikro seperti ntiiotik, tetpi jug kren ihsilkn senyw metolit sekuner tu terji peruhn ph. Meknisme kerj ntimikro lm menghmt pertumuhn kteri ntr lin menghmt pementukn ining sel trget, menghmt pementukn sm nuklet tu protein, sert mementuk pori-pori p memrn sel trget sehingg permeilits sel tergnggu (Ty et l. 28). P wl pennmn pi igunkn pupuk NPK (1:1:1) senyk 1,5 g lm 5 Kg tnh, segi pemerin wl untuk memenuhi keutuhn unsur N seelum kr menpi pertumuhn n perkemngn mksimum. Unsur N erfungsi segi sumer teng untuk pertumuhn tnmn, pementukn nkn, hn klorofil untuk proses similsi yng khirny memprouksi pti untuk pertumuhn n pementukn gh. Unsur P gi tnmn untuk merngsng pertumuhn kr, khususny kr enih, memntu similsi n pernfsn, n memperept pemungn, pemskn iji n uh, sert merupkn unsur untuk menyusun inti sel tumuhn iperlukn ketik tnmn mementuk jringn ru. Sengkn unsur K segi komponen yng erpern lm reksi enzim lm tnmn, untuk memperiki renemen gh (Pmini 1997).
4 Dun pi IR64 yng iinokulsi engn kteri Xoo menunjukkn gejl HDB p 3 hsi, timulny gejl seperti tersirm ir pns p luk un pi. P gin ujung un yng igunting eruh menji hiju kusm kemuin munul gris kuning smpi keokltn yng memnjng sepnjng erks pemuluh. Menurut Ymski et l. (26) keerhsiln infeksi kteri ptogen p tnmn tergntung p kontk ntr kteri engn inng, pergerkn kteri, n pernykn kteri i lm jringn tnmn inng. Bkteri menginfeksi msuk mellui sistem vskulr tnmn pi p st pinh tnm tu p st iut ri tempt pemiitn sehingg krny rusk, tu sewktu terji keruskn un. Apil sel kteri msuk menginfeksi tnmn pi mellui kr n pngkl tng, tnmn kn menunjukkn gejl kresek. Kresek ilh gejl yng terji p tnmn erumur kurng ri 3 hri, terji p st persemin tu ru pinh tnm. Sengkn hwr merupkn gejl yng pling umum ijumpi p tnmn pi yng telh menpi fse tumuh nkn smpi fse pemskn. Gejl iwli engn timulny erk u-u kekuningn p tepi un. Gejl kn melus smpi seluruh un menji kering (Goto 1998). Sumer infeksi HDB pt ersl ri jermi yng telh terinfeksi, tunggul jermi, sis tnmn yng terinfeksi, enih, n gulm inng. Ser lmi penykit HDB pt itulrkn engn ntun ngin, gesekn ntr un yng terinfeksi HDB engn un yng seht, perikn ir hujn, n lirn irigsi ri stu lhn ke lhn yng linny. Bkteri Xoo pt menginfeksi mellui luk yng ikitkn oleh serngg, tu p st iit pi kn itnm isny gin ujung un igunting (Velusmy et l. 26). Bkteri Xoo mmpu menginfeksi tnmn pi mellui luk kit pengguntingn kemuin ergerk n ermultipliksi menuju xilem. Akumulsi i lm jringn pemuluh menyekn terhmtny pengngkutn ir n unsur hr yng iperlukn oleh tnmn, sehingg tnmn menji kering n mti (Roos & Httingh 1987). Lung-lung lmi p un seperti hito jug pt menji jln msukny Xoo ke lm tnmn pi (Mew et l. 1984). Nmun infeksi ptogen mellui luk leih muh iningkn mellui hito (Gnnmnikm et l. 1999). Zhu et l. (2) melporkn hw p
41 pi vriets IR36, kteri mmpu erkumulsi p gin pngkl trikom yng pth, kteri msuk mellui luk sehingg jringn isekitrny menji keokltn n mti kemungkinn kren nekrosis. Gejl lesio terentuk oleh teknn fisik yng ikitkn oleh infeksi mss kteri ptogen p rung ntr sel. P 3 hsi Xoo elum memperlihtkn pengruh ri pliksi kteri iokontrol terhp gejl HDB. Setelh 3 hsi Xoo, menunjukkn hw isolt Pseuomons eruginos C32 memiliki potensi leih ik iningkn temg sulft segi pemning kimi lm menghmt pertumuhn Xoo. Hl ini imungkinkn kren efisiensi n konsistensi pengenlin hyti sngt tergntung p ktivits, ensits n loklissi gen iokontrol p gin tnmn (Duijff et l. 1997). Kolonissi tnmn ser internl oleh kteri merupkn spek penting gi efeksi gen iokontrol, kemmpun sel-sel kteri memsuki jringn tnmn sekligus erkompetisi engn kteri lin yng ersosisi engn tnmn (Qut-Hllmn et l. 1977). Lm kolonissi un pi oleh kteri iug merupkn slh stu spek yng erpern lm menentukn ktivits ntgonis melinungi erh stomt p un pi. Selin itu kteri P. eruginos mmpu memprouksi piosinin, fenzin, n sm slisilt erivt piohelin yng pt menginuksi kethnn sistemik inue systemi resistne (ISR) p tnmn pi. Apliksi piosinin p iit pi hiroponik pt meningktkn H 2 O 2 p permukn kr n p permukn un (Vleesshuwer et l. 26). Hirogen peroksi pt menghmt ptogen ser lngsung tu mementuk rikl es yng memiliki efek ntimikro (Silv et l. 24). Piosinin pt menghmt penykit ls n hwr peleph p tnmn pi (Vleesshuwer et l. 26). Yun n Wng (211) melporkn hw temg merupkn mikroelemn penting gi tnmn n pestisi. Boreux erup mpurn CuSO 4 n kpur terhirsi mmpu mengenlikn penykit hwr un kteri yng isekn oleh Xoo. Gen X13 yng imiliki oleh Xoo n kerj sinergis engn u protein yng ikoekn oleh gen COPT1 n gen COPT5 ternyt pt menghilngkn temg i lm pemuluh xilem sehingg Xoo pt ermultipliksi, menyer i sekitr sel n menyekn penykit.
42 Bersrkn hsil pengukurn pnjng lesio ri 3 hsi smpi 18 hsi, menginiksikn hw perlkun preventif p st tnmn pi erumur 7, 14, 28 n 42 hri setelh tnm leih efektif, kren pliksi kteri iokontrol yng ersift ntgonis kn leih efektif menekn pertumuhn Xoo. Menurut Utkhee (25) gen iokontrol umumny leih efektif il ipliksikn segi perlkun preventif seelum penykit erkemng. Intensits serngn HDB p tnmn pi ersrkn nili AUDPC (kumultif nili pnjng lesio HDB) menunjukkn hw isolt Serrti mresens E31 kurng efektif menekn perkemngn gejl penykit HDB. Dengn kt lin terji peren perkemngn gejl penykit leih nyk isekn oleh peningktn pertumuhn tnmn yng semkin meningkt memsuki perioe genertif yng enerung leih rentn terhp infeksi ptogen. Somey et l. (25) melporkn hw perlkun preventif leih efektif, nmun pliksi lnjutn jug perlu ilkukn untuk memperoleh peneknn penykit yng pt erthn lm, nmun keefektifn gen iokontrol i lpngn sngt ipengruhi oleh fktor-fktor lingkungn, ik iotik mupun iotik. Selin itu, Suryi et l. (211) melporkn hw isolt E31 erpotensi menghmt pertumuhn enwn ptogen Pyriulri grise kren iug menghsilkn senyw metolit sekuner yng ersift ntifungi. Diukung oleh penelitin Jignesh et l. (27) hw S. mresens mmpu memprouksi enzim kitinolitik yng pt menegrsi ining sel enwn n menginuksi reksi perthnn tnmn ri ntifungi tertentu. Nmun p penelitin ini E31 kurng efektif menekn penykit HDB yng isekn oleh X. oryze pv. oryze yng merupkn kteri ptogen tnmn. Ji isolt E31 sngt efektif menghmt penykit yng isekn oleh fungi tertentu tetpi kurng efektif menghmt penykit yng isekn oleh kteri ptogen. Gejl lesio erkemng leih ept p suhu tinggi iningkn p suhu renh. Devth (1988) melporkn suhu yng sesui untuk pertumuhn Xoo erkisr ntr 24,3-34 C. Sengkn suhu p wktu sing hri menpi 31 C, n suhu mlm hri sekitr 26 C sehingg pt meningktkn pnjng lesio HDB. Penulrn HDB mellui perikn ir, hujn, ngin n gesekn ntr un pt memperprh tingkt penykit il terji peningktn suhu rt-rt.
43 Apliksi engn kteri iokontrol terhp tinggi tnmn menunjukkn hw setip perlkun tik terpt peren tinggi tnmn il iningkn engn perlkun menggunkn kues steril. Nmun ri pengmtn 1 smpi 9 minggu setelh tnm, perlkun menggunkn isolt Billus firmus E65 menunjukkn nili yng leih tinggi iningkn engn perlkun isolt linny, tetpi er i wh nili kues steril. Hl ini menunjukkn hw setip perlkun isolt ternyt msih mmpu erthn engn menghsilkn tinggi tnmn yng hmpir sm engn perlkun kontrol yitu penyemprotn engn kues steril wlupun setip perlkun suh iinokulsi engn Xoo. Hsil penelitin Syhroni (211) ternyt isolt E65 mmpu menghsilkn inole eti i (IAA). Menurut Wtne et l. (1987) IAA merupkn hormon pertumuhn kelompok uksin yng ergun untuk merngsng meningktkn pertumuhn tnmn. Auksin ergun untuk meningktkn pertumuhn sel tng, menghmt proses penggugurn un, n merngsng pementukn uh. Sengkn jumlh nkn pi ri pengmtn 1 hingg 9 minggu setelh tnm menunjukkn hsil hw setip perlkun isolt tik peren jumlh nkn engn perlkun kues steril. Perlkun kues steril leih nyk menghsilkn jumlh nkn pi, iug kit psokn oksigen untuk respirsi kr meningkt sehingg perkemngn perkrn ke lpisn tnh leih lm n kitny tnmn leih kokoh sert pementukn nkn leih nyk. Akn tetpi ri pengmtn 2 smpi 9 minggu setelh tnm perlkun isolt S. mresens E31 n B. ereus I.21 memiliki jumlh nkn enerung leih nyk iningkn perlkun isolt linny. Hl ini iug hw isolt E31 pt menghsilkn IAA yng pt meningktkn pertumuhn tnmn (Syhroni 211). Jumlh mli yng terentuk menunjukkn isolt Billus ereus I.21, Pseuomons eruginos C32, P. fluoresens Pf, P. eruginos C32, n S. mresens E31 tik terpt peren engn perlkun kues steril. Nmun jumlh mli p perlkun isolt I.21 enerung leih nyk iningkn engn perlkun kues steril. Hl ini menunjukkn hw wlupun tnmn pi suh iinokulsi engn Xoo nmun pliksi
44 menggunkn isolt iokontrol ternyt menghsilkn jumlh mli yng hmpir sm engn perlkun kontrol seht p kues steril tnp iinokulsi Xoo. Interksi kteri Billus sp., Pseuomons sp., n Serrti sp., engn tnmn pt meningktkn pertumuhn tnmn engn melinungi tnmn ri ergi fitoptogen n hm. Efek lngsung ri kteri terhp peningktn pertumuhn tnmn yitu engn pemerin nutrisi, mikroelemen, hormon untuk tnmn. Bkteri melkukn kolonissi p permukn jringn tnmn n menyeikn senyw yng menguntungkn untuk tnmn. Pseuomons fluoresens menghsilkn pigmen kuning hiju n ktivits sierofor erup pioverin tu pseuoktin yng pt menginuksi kethnn sistemik tnmn inng (Blno & Bkker 27). Menurut Rey et l. (1979) serngn kteri ptogen kn menyekn peningktn jumlh gh hmp n terji penurunn oot gh. Keruskn yng ikitkn oleh penykit HDB ser kuntittif menyekn turunny hsil pnen n renhny oot 1 iji, sengkn keruskn kulittif itunjukkn oleh tik sempurnny pengisin gh n gh muh peh p st igiling. Nmun prouksi pi menunjukkn oot gh sh n oot gh kering p perlkun C32, Pf, C32, n I.21 ere nyt terhp perlkun kues steril. Hl ini menunjukkn hw penyemprotn engn kteri-kteri terseut memerikn pengruh nyt terhp oot gh. Bkteri-kteri yng igunkn segi iokontrol ini merupkn kteri potensil yng pt memu pertumuhn tnmn pi. Billus sp. menghsilkn IAA yng tinggi n pelrut fosft yng ik sehingg pt meningktkn ketersein fosft lm tnh yng pt imnftkn oleh tnmn segi sumer nutrisi (Nishijim et l. 25). Pseuomons sp. jug merupkn kteri penghsil IAA n pt menghmt pertumuhn kteri ptogen (Shnthini et l. 25). Hsil nlisis regresi menunjukkn hw pnjng lesio HDB p tnmn pi terhp jumlh mli, oot gh sh, n oot gh kering pi menunjukkn korelsi positif. Pnjng lesio HDB p tnmn pi terhp jumlh mli pi menunjukkn korelsi seng engn nili seesr,4957. Hl ini menjelskn hw hny 49,5% keterlitn pnjng lesio HDB yng
45 memiliki keenerungn mempengruhi jumlh mli, kemungkinn vriel es linny yng mmpu mempengruhi jumlh mli ukn hny pnjng lesio HDB (Sugiyono 26). Sengkn pnjng lesio HDB terhp oot gh sh menunjukkn korelsi sngt kut engn nili seesr,8721. Hl ini menjelskn hw 87,21% pnjng lesio HDB memiliki keenerungn sngt kut mempengruhi oot gh sh, sehingg semkin pnjng lesio HDB yng terentuk mk semkin renh oot gh sh, n kn mempengruhi jumlh pnen yng ihsilkn. Sm hlny jug terji p oot gh kering engn nili korelsi sngt kut seesr,8955, sehingg menjelskn hw 89,55% keterlitn pnjng lesio HDB terhp oot gh kering. Mk semkin tinggi pnjng lesio yng terentuk kren HDB sehingg memiliki keenerungn oot gh kering yng ihsilkn semkin renh. Ternyt ri hsil nlisis regresi pnjng lesio kurng mempengruhi jumlh mli yng terentuk, nmun memiliki keenerungn pt mempengruhi oot gh sh n oot gh kering p st pnen. Agen iokontrol pt menghmt perkemngn penykit mupun populsi ptogen mellui eerp r, yitu prouksi senyw ntiiosis, persingn rung tu nutrisi, kompetisi pemnftn unsur Fe mellui prouksi sierofor, inuksi meknisme resistensi, inktivsi fktor perkemhn ptogen, egrsi fktor ptogenits mislny toksin, prsitisme yng melitkn prouksi enzim ekstrseluler penegrsi ining sel mislny β-1,3 gluknse (Keel & Defgo 1997). Kemmpun kteri iokontrol lm menekn penykit yng isekn oleh fungsi 2,4-isetilfloroglusinol yng iprouksi oleh Pseuomons sp. pt menghmt pertumuhn Xoo yng menyekn penykit HDB (Velusmy et l. 26). P. eruginos menghsilkn ntiiotik fenzin memiliki spektrum lus terhp kteri n enwn. Senyw fenzin terlit lm trnsformsi oksisi-reuksi sehingg terjiny kumulsi rikl superoksi yng ersift run p sel trget, senyw ini jug pt menginuksi resistensi sistemik (Prie et l. 26). Menurut Neilns n Nkmur (1991) sierofor pioverin tu pseuoktin yng iprouksi oleh Pseuomons fluoresens WCS347, P. fluoresens ATCC13525, n P. fluoresens 174 termsuk
46 senyw kromoforpepti. Kromoforpepti sierofor ilh struktur seperti memrn yng mengnung pigmen n mengikt minerl esi. Kromoforpepti sierofor yng ihsilkn oleh Pseuomons spp. merupkn gungn ktekolt n hiroksmt yitu Tris N-metiltioformohiroksmt yng pt mengikt u molekul Fe 3+. Sengkn senyw Tris N-metiltioformohiroksmt pt memunuh kteri n enwn (Weiseek & Gerrits 2). Bikn B. ereus menghsilkn sm slisilt, sm jsmont, n etilen. Senyw terseut jug pt menginuksi resistensi sistemik (Niu et l. 211). Nmun meknisme terseut ukn menji stu-stuny meknisme penghmtn yng ilkukn oleh kteri lm menekn penykit yng isekn oleh ptogen. Diperlukn meknisme terpu yng iug pt menekn kejin penykit sehingg gen iokontrol mmpu ertink ser lngsung terhp ptogen engn r mensekresikn enzim ektrseluler kitinse, protese, n selulse yng pt melisis tu menegrsi ining sel ptogen sehingg perkemngn ptogen terhmt (Pl & Grener 26). Meknisme lin seperti ihsilknny senyw sierofor oleh Pseuomons sp. ikut erpern lm menghmt pertumuhn ptogen (Fernno et l. 26). Sierofor ilh senyw engn ert molekul renh yng memiliki kemmpun mengkelt unsur esi n memiliki finits tinggi terhp Fe 3+. Sehingg terji kompetisi ntr kteri engn kteri ptogen lm mengkelt esi yng keernny i tnh sngt terts. Konisi terseut memut kteri ptogen tik tumuh optiml kren tik menptkn zt esi yng iutuhkn. Pengmiln Fe 3+ oleh kteri tik mempengruhi keutuhn tnmn kn esi yng sngt seikit iningkn engn mikroorgnisme. Menurut Weiseek n Gerrits (2) pengiktn ion esi ijemtni oleh senyw ktekolt, hiroksmt, tu gungn ntr hiroksmt n sm hiroksi sprtik. Kekurngn ion esi mengurngi pertumuhn kteri sengkn keleihn zt esi kn meruni sel kteri. Sistem pengkeltn ion esi itur oleh kosentrsi ion esi. Pementukn senyw zt esi meningkt jik kteri itumuhkn p meium engn knungn ion Fe 3+ terts. Pengturn ion esi yng iutuhkn kteri ikenlikn oleh gen Fur yng terpt lm sitoplsm.
47 Meknisme tik lngsung jug kemungkinn pt terji lm menekn kejin penykit yng isekn oleh kteri. Pseuomons sp. n Billus sp. yng menghsilkn IAA pt memu pertumuhn tnmn. Meknisme tik lngsung linny mellui inue systemi resistne (ISR). Meknisme ISR terji segi kit peruhn fisiologis tnmn yng kemuin menstimulsi terentukny senyw kimi yng pt mengutkn sistem perthnn tnmn terhp serngn ptogen. Sistem perthnn yng terji pt erup moifiksi strukturl ining sel tu peruhn reksi iokimi p tnmn inng. Beerp fktor yng pt menyekn ny inuksi kethnn sistemik oleh kteri yitu ny sumngn lipopoliskri oleh kteri, prouksi sierofor oleh kteri, n prouksi sm slisilt (Rmmmoorthy et l. 21). Penelitin yng ilkukn ini menunjukkn seuh potensi pengemngn pliksi isolt-isolt kteri yng erfungsi segi gen iokontrol pt menghmt pertumuhn Xnthomons oryze pv. oryze sert pt meningktkn pertumuhn tnmn pi n prouksi pi.