BAB III DASAR TEORI. Menurut Peraturan Menteri Kesehatan Nomor : 416/MEN.KES/PER/IX/1990

Transkripsi

1 BAB III DASAR TEORI 2.1 Standar Kualitas Air Bersih/Air Minum Kualitas air secara umum menunjukkan mutu atau kondisi air yang dikaitkan dengan suatu kegiatan atau keperluan tertentu. Sedangkan kuantitas yang menyangkut jumlah air yang dibutuhkan manusia dalam kegiatan tertentu. Menurut Peraturan Menteri Kesehatan Nomor : 416/MEN.KES/PER/IX/1990 Tentang Syarat-syarat Dan Pengawasan Kualitas Air yaitu pada pasal 1 menyatan bahwa: a. Air adalah air minum, air bersih, air kolam renang dan air pemandian umum. b. Air minum adalah air yang kualitasnya memenuhi syarat kesehatan dan dapat langsung diminum. c. Air bersih adalah air yang digunakan untuk keperluan sehari-hari yang kualitasnya memenuhi syarat kesehatan dan dapat diminum apabila dimasak. d. Air kolam renang adalah air didalam kolam renang yang digunkan untuk olahraga renang dan kualitasnya memenuhi syarat kesehatan. e. Air pemandian umum adalah air yang digunakan pada tempat pemandian umum tidak termasuk pemandian untuk penobatan tradisional dan kolam renang, yang kualitasnya memenuhi syarat kesehatan. 11

2 12 f. Kakandep adalah kepala kantor departemen kesehatan kabupaten/kotamadya. g. Kakanwil adalah kepala kantor wilayah departemen kesehatan propinsi. h. Direktur jenderal adalah direktur jenderal pemberantasan penyakit menular dan penyehatan lingkungan pemukiman departemen kesehatan. Adapun syarat-syarat dari kualitas air terdapat pada pasal 2 yaitu: a. Kualitas air harus memenuhi syarat kesehatan yang meliputi persyaratan mikrobiologi, fisika, kimia, dan radioaktif. b. Pengawasan kualitas air sebagaimana dimaksud ayat (1) tercantum dalam lampiran I, II, III, IV peraturan ini Kebutuhan air yang paling penting bagi manusia adalah air minum. Menurut ilmu kesehatan setiap orang memerlukan air minum hidup dua sampai tiga minggu tanpa makan tetapi hanya dapat bertahan dua sampai tiga hari tanpa air minum (Suripin, 2002). Ditinjau Dari Segi Kualitas (Mutu) Air Secara langsung atau tidak langsung pencemaran akan berpengaruh terhadap kualitas air. Sesuai dengan dasar pertimbangan penetapan kualitas air minum, usaha pengelolaan terhadap air yang digunakan oleh manusia sebagai air minum berpedoman pada standar kualitas air terutama dalam penilaian terhadap produk air minum yang dihasilkannya, maupun dalam merencanakan sistem dan proses yang akan dilakukan terhadap sumber daya air.

3 Sistem Pengolahan Air Bersih Dalam mengatasi masalah pemenuhan kebutuhan air bersih diperlukan penerapan teknologi pengolahan air yang sesuai dengan kondisi sumber air baku, kondisi sosial budaya, ekonomi, dan SDM masyarakat setempat. Metode Oksidasi, Metode Adsorpsi, Metode Koagulasi Flokulasi dan Metode Elektrokoagulasi. Berikut ini penjelasan dari metode metode tersebut: a. Metode oksidasi Proses menggunakan Ozon ini pertama kali diperkenalkan oleh Nies dari Perancis sebagai metode sterilisasi air minum pada tahun Aplikasi sistem ozonisasi sering dikombinasikan dengan lampu ultraviolet atau hidrogen peroksida. Dengan melakukan kombinasi ini akan didapatkan dengan mudah hidroksil radikal dalam air yang sangat dibutuhkan dalam proses oksidasi senyawa organik. b. Metode flokulasi Flokulasi adalah penggabungan dari partikel partikel hasil koagulasi menjadi partikel yang lebih besar dan mempunyai kecepatan mengendap yang lebih besar, dengan cara pengadukan lambat. Dalam hal ini proses koagulasi harus diikuti flokulasi yaitu pengumpulan koloid terkoagulasi sehingga membentuk flok yang mudah terendapkan atau transportasi partikel tidak stabil, sehingga kontak antar partikel dapat terjadi.

4 14 c. Metode adsorbsi Adsorbsi (penyerapan) adalah suatu proses pemisahan dimana komponen dari suatu fase fluida/cairan berpindah ke permukaan zat padat yang menjerap (adsorban). Biasanya partikel-partikel kecil zat penyerap dilepaskan pada adsorpsi kimia, terbentuk ikatan kuat antara penjerap dan zat yang dijerap sehingga tidak mungkin terjadi proses yang bolak-balik. d. Metode koagulasi Koagulasi merupakan suatu proses pengolahan air dengan menggunakan sistem pengadukan cepat sehingga dapat mereaksikan bahan kimia (koagulan) secara seragam ke seluruh bagian air di dalam suatu reactor sehingga dapat membentuk flok-flok yang berukuran lebih besar dan dapat diendapkan diproses sedimentasi (Holt, 2004). 2.2 Bakteri Klasifikasi Bakteri Berdasarkan bentuknya yang tetap, dindingnya yang kuat, dan adanya kemampuan untuk hidup ototrof, maka bakteri digolongkaan pada dunia Tumbuhan. Penggolongan ini dilakukan berdasarkan takson-takson seperti divisi, klas, ordo, family (genus), spesies, varietas, dan sebagainya. Banyak perubahan terhadap klasifikasi disesuaikan dengan perkembangan ilmu pengetahuan tentang mikroorganisme. Menurut Bergeys Manual of Determinative Bacteriology tahun 1994 terdapat empat kategori besar dalam klasifikasi bakteri pada masing-masing grup, yaitu:

5 15 1. kategori Besar I : Eubacteria gram positif dari GRUP 1 sampai dengan GRUP kategori Besar II : Eubacteria Gram Positif dengan dinding sel dari GRUP 17 sampai dengan GRUP kategori Besar III : Eubacteria tanpa dinding sel dari hanya terdiri dari 1 GRUP, yakni MYCOPLASMA (GRUP 30) 4. kategori Besar IV : Archeobacteria yang terdiri dari GRUP 31 sampai dengan GRUP Morofologi Bakteri 1. Ukuran Bakteri Pengukuran besar kecilnya bakteri perlu didasarkan pada standar yang sama. Pada umumnya ukuran tubuh bakteri sangat kecil, umumnya bentuk tubuh bakteri baru dapat dilihat dengan menggunakan mikroskop perbesaran 1000 kali atau lebih. Satuan ukuran tubuh bakteri adalah micrometer atau micron. Bakteri berbentuk kokus ada yang berdiameter 0,5 mikron, ada pula berdiameter sampai 2,5 mikron. Bakteri yang berumur 2 sampai 6 jam lebih besar daripada bakteri yang umurnya lebih daripada 24 jam. 2. Bentuk Bakteri Secara garis besar tubuh (morfologi) bakteri dapat dikelompokkan kedalam 3 golongan, yaitu: a. Basil (bacillus)

6 16 Merupakan bakteri yang mempunyai bentuk tongkat pendek/batang kecil dan slindris, dan berdasarkan koloni nya dibagi menjadi beberapa kelompok lagi. b. Kokus (coccus) Bakteri yang mempunyai bentuk bulat seperti boal-bola kecil. Kelompok ini membentuk bergerombol dan bergandeng membentuk koloni. c. Spiril (spirillium) Bakteri yang berbentuk bengkok atau berbengkok-bengkok seperti spiral dan jenis serta jumlahnya sangat sedikit. Gambar 2. Bentuk umum sel dan rangkaian sel bakteri ( Salton, 2001)

7 17 Beberapa bakteri memiliki bentuk yang berbeda dari bentuk umumnya bakteri seperti di atas, tetapi lebih mirip dengan struktur hifa dari jamur (fungi). Struktrur bakteri dalam kelompok ini dimasukkan dalam kelompok aktinomiset es yang tubuhnya serupa hifa atau filamen dan menghasilkan spora Metabolisme Mikroba Metabolisme dari mikroba terdiri dari anabolisme yang merupakan proses biosintesis, hal ini berbeda dengan nutrisi, karena didalam proses biosintesis diperlukan sumber energi. Bahan baku dari proses anabolisme adalah zat makanan. Selain anabolisme juga terdapat proses katabolisme yang merupakan reaksi kimiawi yang membebaskan energy melalui perombakan nutrient, disebut juga reaksi disimilasi atau reaksi peruraian, jadi merupakan reaksi katabolik sel, dalam proses ini terjadi pembongkaran suatu zat makanan sehingga menghasilkan energi yang diperlukan oleh organisme tersebut. Jika oksigen yang diperlukan dalam proses ini berasal dari udara bebas, maka peristiwa ini dinamakan pernafasan aerob (Waluyo, 2004) Coliform dan E.Coli Bakteri Coliform adalah golongan bakteri intestinal, yaitu hidup didalam saluran pencernaan manusia. Bakteri Coliform adalah bakteri indikator keberadaan bakteri patogenik lain. Lebih tepatnya, bakteri Coliform Fekal adalah bakteri indikator adanya pencemaran bakteri patogen. Penentuan Coliform Fekal menjadi indikator pencemaran dikarenakan jumlah koloninya pasti berkorelasi positif dengan keberadaan bakteri patogen. Selain itu, mendeteksi Coliform jauh lebih murah, cepat, dan sederhana daripada mendeteksi bakteri patogenik lain.

8 18 Contoh bakteri Coliform adalah, Escherichia Coli dan Enterobacter Aerogenes. Jadi, Coliform adalah indikator kualitas air. Makin sedikit kandungan Coliform, artinya, kualitas air semakin baik. Bakteri kelompok Coliform meliputi semua bakteri berbentuk batang, gram negatif, tidak membentuk spora dan dapat memfermentasi laktosa dengan memproduksi gas dan asam pada suhu 37 0 C dalam waktu kurang dari 48 jam. Jenis Escherichia hanya memiliki satu spesies yaitu E. Coli, dan disebut Coliform Fecal karena ditemukan dalam saluran usus hewan dan manusia, sehingga sering terdapat dalam feses. Coliform Fecal (Coli Tinja) dapat hidup pada suhu 42 0 C 44 0 C. Bakteri ini sering digunakan sebagai indikator kontaminasi kotoran. Coliform fecal (Coli Tinja) dapat menyebabkan berbagai infeksi antara lain diare, infeksi pada saluran kencing, dan meningitis (Nugroho, 2006). Adapun bakteri E. Coli selain memiliki karakteristik seperti bakteri Coliform pada umumnya juga dapat menghasilkan senyawa indole didalam air pepton yang mengandung asam amino triptofan, serta tidak dapat menggunakan natrium sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon. E. Coli jika masuk ke dalam saluran pencernaan dalam jumlah banyak dapat membahayakan kesehatan. Walaupun E. Coli merupakan bagian dari mikroba normal saluran pencernaan, tapi saat ini telah terbukti bahwa galur-galur tertentu mampu menyebabkan gastroenteritis taraf sedang hingga parah pada manusia dan hewan. Sehingga, air yang akan digunakan untuk keperluan seharihari berbahaya dan dapat menimbulkan penyakit infeksius (Suriaman, 2008).

9 19 E. Coli merupakan kuman oportunis yang banyak terdapat di usus besar (colon) manusia dan sebagai flora normal colon, sifat E. Coli dapat menyebabkan infeksi primer pada usus besar sehingga dapat menyebabkan penyakit diare (Gillespie dan Bamford, 2000). Gambar 3. Bentuk bakteri E. Coli pada mikroskop elektron (Steven, 2009) Organisme ini dapat menjadi patogen apabila mencapai jaringan diluar saluran pencernaan khususnya saluran air kemih, saluran empedu, paru-paru dan pada selaput otak dapat menyebabkan peradangan. Hal ini dapat terjadi bila daya tahan atau kekebalan tubuh lemah pada tempat tersebut. 2.3 Elektrodesinfeksi Desinfeksi adalah memusnahkan mikroorganisme yang dapat menimbulkan penyakit. Desinfeksi sendiri dipercaya sebagai benteng manusia terhadap paparan mikroorganisme patogen penyebab penyakit, termasuk didalamnya virus, bakteri, dan protozoa parasit (Bitton, 1994).

10 20 Elektrodesinfeksi merupakan salah satu metode elektrolisis yang bertujuan untuk membuang semua mikroorganisme patogen pada objek yang tidak hidup dengan menggunakan elektroda sebagai sumbernya dan memanfaatkan arus listrik. Adapun prinsip kerja dari sistem ini adalah dengan menggunakan dua buah lempeng elektroda yang dimasukkan kedalam bejana yang telah diisi dengan air yang akan dielektrolisis. Selanjutnya kedua elektroda dialiri arus listrik searah sehingga terjadilah proses elektrokimia yang menyebabkan kation bergerak menuju katoda dan anion bergerak menuju anoda. Pada dasarnya sebuah elektroda logam akan teroksidasi dari logam M menjadi kation (M n+ ). Selanjutnya air akan menjadi gas hidrogen dan juga ion hidroksil (OH - ). 2.4 Material Elektroda Penggunaan medan listrik pada logam dapat menyebabkan seluruh electron bebas bergerak dalam metal, sejajar, dan berlawanan arah dengan arah medan listrik. Ukuran dari kemampuan suatu bahan untuk menghantarkan arus listrik. Jika suatu beda potensial listrik ditempatkan pada ujung-ujung sebuah konduktor, muatan-muatan bergeraknya akan berpindah, menghasilkan arus listrik. Konduktivitas listrik didefinisikan sebagai ratio rapat arus terhadap kuat medan listrik. Konduktifitas listrik dapat dilihat pada deret volta seperti, Li K Ba Sr Ca Na Mg Al Mn Zn Cr Fe Cd Co Ni Sn Pb H Sb Bi Cu Hg Ag Pt Au. Semakin ke kanan maka semakin besar massa jenisnya.

11 21 Material elektroda yang digunakan adalah platina (Pt), sifatnya yang inert diharapkan dapat menjadi logam yang efektif untuk proses elektrodesinfeksi. Sifatnya yang tidak mudah korosi dan mudah didapat dapat dijadikan sebagai alternatif untuk digunakan sebagai elektroda dalam pengolahan air. 2.5 Metode MPN (Most Probable Number) Metode MPN (Most Probable Number) umumnya digunakan untuk menghitung jumlah bakteri khususnya untuk mendeteksi adanya bakteri Coliform yang merupakan kontaminan. Ciri-ciri utamanya yaitu bakteri gram negatif, batang pendek, tidak membentuk spora, memfermentasi laktosa menjadi asam dan gas yang dideteksi dalam waktu 24 jam inkubasi pada 37º C. Penentuan Coliform Fecal menjadi indikator pencemaran dikarenakan jumlah koloninya pasti berkorelasi positif dengan keberadaan bakteri patogen. Contoh bakteri Coliform Fecal adalah, Esherichia Coli (Arthur, 2010). MPN adalah suatu metode enumerasi mikroorganisme yang menggunakan data dari hasil pertumbuhan mikroorganisme pada medium cair spesifik dalam seri tabung yang ditanam dari sampel padat atau cair yang ditanam berdasarkan jumlah sampel atau diencerkan menurut tingkat seri tabungnya sehingga dihasilkan kisaran jumlah mikroorganisme yang diuji dalam nilai MPN/satuan volume atau massa sampel. Prinsip utama metode ini adalah mengencerkan sampel sampai tingkat tertentu sehingga didapatkan konsentrasi mikroorganisme yang sesuai dan jika ditanam dalam tabung menghasilkaan frekuensi pertumbuhan tabung positif. Semakin besar jumlah sampel yang dimasukkan

12 22 (semakin rendah pengenceran yang dilakukan) maka semakin sering tabung positif yang muncul. Semakin kecil jumlah sampel yang dimasukkan (semakin tinggi pengenceran yang dilakukan) maka semakin jarang tabung positif yang muncul. Jumlah sampel/pengenceran yang baik adalah yang menghasilkan tabung positif. Semua tabung positif yang dihasilkan sangat tergantung dengan probabilitas sel yang terambil oleh pipet saat memasukkannya ke dalam media. Oleh karena itu homogenisasi sangat mempengaruhi metode ini. Frekuensi positif (ya) atau negatif (tidak) ini menggambarkan konsentrasi mikroorganisme pada sampel sebelum diencerkan. Uji Coliform Fecal secara lengkap meliputi uji penduga, uji penguat, dan uji lengkap. Ada dua cara yang dapat digunakan untuk menghitung MPN (Most Probable Number) Coliform secara sensitif didalam minuman yaitu metode 7 tabung dan 15 tabung (Imam, 1999). Dalam uji Coliform Fecal menggunakan media LBDS (Laktosa Broth Dauble Strecht), LBSS (Laktosa Broth Single Strecht) dan BGLB (Bile Green Laktosa Broth). Selain media tersebut juga sering digunakan media Nutrient Broth (NB) Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat zat makanan /nutrisi yang diperlukan untuk menumbuhkan suatu mikroorganisme dengan syarat-syarat tertentu (Sunardin, 2014). 2.6 Spektrofotometer UV-Vis Spektrofotometri UV-Vis merupakan salah satu teknik analisis spektroskopi yang memakai sumber radiasi eleltromagnetik ultraviolet dekat ( ) dan sinar tampak ( ) dengan memakai instrumen spektrofotometer

13 23 (Mulja dan Suharman, 1995:26). Spektrofotometri UV-Vis melibatkan energi elektronik yang cukup besar pada molekul yang dianalisis, sehingga spektrofotometri UV-Vis lebih banyak dipakai untuk analisis kuantitatif ketimbang kualitatif (Mulja dan Suharman, 1995). Spektrofotometer terdiri atas spektrometer dan fotometer. Spektrofotometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang ditranmisikan atau yang diabsorpsi. Spektrofotometer tersusun atas sumber spektrum yang kontinyu, monokromator, sel pengabsorpsi untuk larutan sampel atau blangko dan suatu alat untuk mengukur pebedaan absorpsi antara sampel dan blangko ataupun pembanding (Khopkar, 1990). Serapan cahaya oleh molekul dalam daerah spektrum ultraviolet dan visibel tergantung pada struktur elektronik dari molekul. Serapan ultraviolet dan visibel dari senyawa-senyawa organik berkaitan erat transisi-transisi diantara tingkatan-tingkatan tenaga elektronik. Disebabkan karena hal ini, maka serapan radiasi ultraviolet atau terlihat sering dikenal sebagai spektroskopi elektronik. Transisi-transisi tersebut biasanya antara orbital ikatan antara orbital ikatan atau orbital pasangan bebas dan orbital non ikatan tak jenuh atau orbital anti ikatan. Panjang gelombang serapan merupakan ukuran dari pemisahan tingkatantingkatan tenaga dari orbital yang bersangkutan. Spektrum ultraviolet adalah gambar antara panjang gelombang atau frekuensi serapan lawan intensitas serapan (transmitasi atau absorbansi). Sering juga data ditunjukkan sebagai gambar grafik atau tabel yang menyatakan panjang

14 24 gelombang lawan serapan molar atau log dari serapan molar, Emax atau log Emax (Sastrohamidjojo, 2001). Prinsip dasar analisis kualitatif maupun kuantitatif dengan spektrofotometer adalah reaksi antara radiasi elektromaknetik dari sinar UV-VIS dengan elektron dari sampel. Pada umumnya terdapat dua tipe spektrofotometer UV-Vis yaitu: a. Single beam yaitu dapat digunakan untuk kuantitatif dengan mengukur absorbansi pada panjang gelombang tunggal. Single-beam instrument mempunyai beberapa keuntungan yaitu sederhana, harganya murah, dan mengurangi biaya yang ada merupakan keuntungan yang nyata. Beberapa instrumen menghasilkan single-beam instrument untuk pengukuran sinar ultra violet dan sinar tampak. Panjang gelombang paling rendah adalah 190 sampai 210 nm dan paling tinggi adalah 800 sampai 1000 nm. b. Double beam yaitu digunakan pada panjang gelombang 190 sampai 750 nm. Double-beam instrument dimana mempunyai dua sinar yang dibentuk oleh potongan cermin yang berbentuk V yang disebut pemecah sinar. Sinar pertama melewati larutan blangko dan sinar kedua secara serentak melewati sampel, mencocokkan fotodetektor yang keluar menjelaskan perbandingan yang ditetapkan secara elektronik dan ditunjukkan oleh alat pembaca (Skoog, DA, 1996).

15 25 Gambar 4. Spektrofotometer UV-Vis tipe single beam Gambar 5. Spektrofotometer UV-Vis tipe double beam Komponen-komponen pokok dari spektrofotometer meliputi: 1. Sumber tenaga radiasi yang stabil, sumber yang biasa digunakan adalah lampu wolfram. 2. Monokromator untuk memperoleh sumber sinar yang monokromatis. 3. Sel absorpsi, pada pengukuran di daerah visibel menggunakan kuvet kaca atau kuvet kaca corex, tetapi untuk pengukuran pada UV menggunakan sel

16 26 kuarsa karena gelas tidak tembus cahaya pada daerah ini.detektor radiasi yang dihubungkan dengan sistem meter atau pencatat. Peranan detektor penerima adalah memberikan respon terhadap cahaya pada berbagai panjang gelombang (Khopkar, 1990). 2.7 Hipotesis Berdasarkan uraian diatas dapat dibuat hipotesis, bahwa pengolahan air dapat dilakukan dengan proses elektrodisinfeksi yang ramah lingkungan, mudah dan murah dari segi finansial guna dalam memenuhi kebutuhan air bersih tanpa harus dengan menggunakan desinfektan yang berbahaya untuk lingkungan dan kesehatan.

17 BAB IV METODELOGI PENELITIAN 4.1 Alat Dan Bahan Penelitian Alat Penelitian 1. Elektroda Platina (Pt) 2. Power supply (DC) 3. Reaktor 4. Statif 5. Magnetic stirrer 6. stirrer 7. Botol sampel 8. Pipet ukur 1 ml 9. Pipet ukur 5 ml 10. Pipet volume 25 ml 11. Pipet tetes 12. Seperangkat alat gelas (pyrex) 13. Oven (Memmert, Germany) 14. Kompor listrik/mantel 15. Neraca analitik 16. Spektrofotometer UV-Vis Hitachi U ph meter Ohaus 27

18 Bahan Penelitian 1. Sampel air sumur 2. Alkohol teknis (Bratachem) 3. Akuades 4. Amilum 1 M (Merck) 5. HCl 4N (Merck) 6. Amonium Molibdat (Merck) 7. Larutan standar H 2 O 2 (Merck) 8. Kalium iodida 20 % (Merck) 4.2 Prosedur Penelitian Preparasi Sampel Air Sampel air diambil didaerah sekitaran Puskesmas Ngaglik II, Sleman, Yogyakarta. Sampel air yang diambil adalah air sumur warga yang telah diketahui mengandung E.Coli. Air dari sumur dialirkan melalui kran air yang sebelumnya disterilkan dengan menggunakan alat penyeteril ( kapas dan alcohol), didiamkan selama satu menit kemudian sampel ditampung dengan menggunakan botol sampel yang sudah disterilkan, lalu disimpan pada lemari es sebelum digunakan Proses Elektrolisis Sampel air sumur sebanyak 300 ml dimasukkan kedalam rangkaian reaktor elektrodisinfeksi yang sudah terhubung dengan sumber arus (power supply DC), kemudian sampel air sumur dielektrolisis dengan menggunakan sepasang elektroda platina (Pt) yang dimasukkan ke reaktor. Selanjutnya dilakukan variasi tegangan aplikasi sebesar 2,8 ; 5; 10; 15 dan 20 volt. Masing

19 29 masing tegangan dilakukan elektrolisis selama satu jam dengan dibantu magnetik stirrer dengan keadaan lingkungan serta daerah kerja yang dijaga steril. Hasil elektrolisis dilakukan analisis dengan metode MPN (Most Probable Number) untuk mengetahui pengurangan jumlah Coliform dan E.Coli yang terdegradasi ataupun yang terbunuh, dan diukur ph-nya, serta dilakukan uji peroksida untuk mengetahui peroksida yang terbentuk didalam sampel air selama proses elektrolisis berlangsung Uji Peroksida Standarisasi H 2 O 2 dengan Menggunakan Na 2 S 2 O 3 Standarisasi H 2 O 2 dilakukan dengan cara mengambil 0,6 ml H 2 O 2 teknis 50 % diencerkan kedalam labu ukur 10 ml dan diambil 1 ml kemudian ditambah 2,5 ml HCl 4N, 5 ml KI 20 %, 5 tetes ammonium molibdat, dan 6,3 ml akuades, lalu dikocok sampai homogen, lalu dititrasi dengan Na 2 S 2 O 3 sampai perubahan warna dari coklat menjadi kuning lalu ditambah amilum 0,5 ml, kemudia dititrasi kembali sampai perubahan warna daro coklat menjadi jernih. Titrasi diulangi 3 kali, kemudian akan diperoleh hasil dari standarisasi H 2 O Standarisasi Larutan Na 2 S 2 O 3 Standarisasi larutan Na 2 S 2 O 3 dilakukan dengan cara menimbang 0,1 gram K 2 Cr 2 O 7 dan dilarutkan dengan akuades lalu dimasukkan kedalam labu ukur 25 ml ditera hingga tanda batas. Larutan K 2 Cr 2 O 7 diambil 1 ml lalu ditambah dengan 0.03 g KI, 3 ml HCl 4N, 12,5 ml akuades. Dikocok kemudian dititrasi dengan menggunakan Na 2 S 2 O 3 sampai perubahan warna dari coklat menjadi kunign lalu ditambah dengan amilum 1 % 0,5 ml. larutan dititrasi kembali sampai terjadi

20 30 perubahan warna kebiruan, maka akan diperoleh hasil dari standarisasi larutan Na 2 S 2 O Pembuatan Larutan Standar H 2 O 2 0,1 ml H 2 O 2 teknis 50 % dimasukkan kedalam labu ukur 10 ml, ditera hingga tanda batas. Diambil 0,1 ml diencerkan pada labu ukur 10 ml, lalu diambil 0,25 ml dimasukkan kedalam labu ukur 25 ml dan ditera sampai tanda batas. Sebanyak 0, 1, 2, 3, 4, 5 ml dimasukkan kedalam labu ukur 25 ml, lalu ditambah 2 ml HCl 4N, 0,2 ml KI, 0,2 ml ammonium molibdat dalam H 2 SO 4, didiamkan selama 20 menit lalu ditambah dengan amilum 1 % 0,2 ml. diukur absorbansi dan panjang gelombang maksimum Pembuatan Larutan Sampel 1 ml sampel air dimasukkan kedalam labu ukur 10 ml kemudian ditambah 2 ml HCl 4N, 0,2 ml KI, 0,2 ml ammonium molibdat dalam H 2 SO 4, didiamkan selama 20 menit lalu ditambah dengan amilum 1 % 0,2 ml. diukur absorbansi dengan panjang gelombang maksimum 622 nm.