AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG SIRSAK (Annona muricata Linn.) TERHADAP SEL T47D SERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS

Transkripsi

1 AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG SIRSAK (Annona muricata Linn.) TERHADAP SEL T47D SERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS SKRIPSI Oleh: MEICELLA AZNI K FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012 i

2 AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG SIRSAK (Annona muricata Linn.) TERHADAP SEL T47D SERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta Oleh: MEICELLA AZNI K FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012 i

3 ii

4 DEKLARASI Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surakarta, 25 Mei 2012 Peneliti MEICELLA AZNI iii

5 KATA PENGANTAR Assalamu alaikum wr wb. Alhamdulillah, penulis panjatkan puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat, taufiq, dan hidayahnya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi dengan judul Aktivitas Sitotoksik Fraksi Polar Ekstrak Etanol Kulit Batang Sirsak (Annona muricata L.) terhadap Sel T47D Serta Profil Kromatografi Lapis Tipis. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar sarjana Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, semoga segala yang tersaji dalam skripsi ini dapat memberikan manfaat dan pengetahuan bagi pembaca dan untuk perkembangan ilmu pengetahuan. Penulis ucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu jalannya penelitian, baik langsung maupun tidak langsung, antara lain: 1. Dr. Muhammad Da i, M.Si, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta dan penguji. 2. Rosita Melannisa, M.Si., Apt selaku penguji. 3. Dr. Haryoto, M.Sc, selaku pembimbing utama dan Peni Indrayudha, M.Biotech., Apt., selaku pembimbing pendamping. 4. Prof. Dr. Supargiono, DTM&H., SU., PhD., SpPark dan Rumbiwati, ST, selaku pembimbing di laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada. 5. Azis Saifudin, SF, Apt dan Arifah Sri Wahyuni, S.Si., M.Sc., Apt selaku pembimbing akademik. 6. Keluargaku, khususnya Mama yang selalu mendukungku, dan juga almarhum adikku tercinta Ferdian Azni, kamulah inspirasi terbesarku. 7. Teman seperjuanganku Firstca, Aulia, dan Lutfiani. Semoga Allah SWT membalas kebaikan dan kemurahan hati mereka, penulis mengharapkan saran dan kritik yang bersifat membangun dan menyempurnakan tulisan ini. Wassalamu alaikum wr wb. Surakarta, Mei 2012 Penulis iv

6 DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... i HALAMAN PENGESAHAN... ii HALAMAN DEKLARASI... iii KATA PENGANTAR... iv DAFTAR ISI v DAFTAR GAMBAR... vii DAFTAR TABEL viii DAFTAR LAMPIRAN... ix DAFTAR SINGKATAN... x INTISARI xi BAB I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang Masalah... 1 B. Perumusan Masalah C. Tujuan Penelitian... 2 D. Tinjauan Pustaka Tanaman Sirsak (Annona muricata Linn.)... 3 a. Sistematika Tanaman... 3 b. Nama Daerah... 3 c. Morfologi... 3 d. Kandungan Kimia... 4 e. Manfaat Tanaman Kanker... 5 a. Sifat Sel Kanker... 5 b. Siklus Sel... 6 c. Kanker Payudara... 7 d. Sel T47D Uji Sitotoksik... 8 E. Landasan Teori... 8 F. Hipotesis... 9 v

7 BAB II. METODE PENELITIAN A. Kategori Penelitian B. Bahan dan Alat Bahan-bahan Alat C. Tempat Penelitian D. Jalannya Penelitian Determinasi Tanaman Pengumpulan Bahan Ekstraksi dan Fraksinasi Sterilisasi Alat Preparasi Sel T47D a. Pembuatan Media Kultur Sel b. Preparasi Sel c. Panen Sel d. Pembuatan Larutan Uji e. Uji Sitotoksik Menggunakan Metode MTT Uji Kandungan Senyawa Dengan KLT E. Analisis Data BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Ekstraksi dan Fraksinasi B. Aktivitas Sitotoksik C. Uji Kandungan Senyawa BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan B. Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN vi

8 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Skema Jalannya Penelitian Gambar 2. Profil kromatografi hasil 2x fraksinasi ekstrak etanol kulit batang sirsak dengan metode KCV menggunakan fase diam Silika GF 254 dan fase gerak etil asetat : n-heksana 2: Gambar 3. Pengaruh fraksi polar ekstrak etanol kulit batang sirsak terhadap morfologi sel T47D dan pembentukan kristal formazan Gambar 4. Grafik hubungan antara konsentrasi vs persentase sel hidup Gambar 5. Profil Kromatografi Lapis Tipis fraksi polar ekstrak etanol kulit batang sirsak dengan fase diam Silika GF 254 dan fase gerak etil asetat : n-heksana 2:8. Hasil identifikasi golongan senyawa menunjukkan fraksi polar ekstrak etanol kulit batang sirsak mengandung polifenol, alkaloid, saponin, dan flavonoid vii

9 DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1. Kandungan Gizi Daun Sirsak dalam 100 gram... 4 Tabel 2. Penggunaan Eluen pada KCV Tabel 3. Pengelompokan Fraksi KCV 1 dan KCV Tabel 4. Identifikasi Golongan Senyawa Fraksi Polar Ekstrak Etanolik Kulit Batang Sirsak dengan Beberapa Pereaksi Semprot viii

10 DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Surat keterangan determinasi Lampiran 2. Gambar pohon dan kulit batang sirsak Lampiran 3. Perhitungan larutan sampel dan perhitungan sel Lampiran 4. Pembuatan larutan MTT Lampiran 5. Perhitungan Persentase Sel Hidup Sel T47D Lampiran 6.Data hasil uji sitotoksik fraksi polar ekstrak etanolik kulit batang sirsak terhadap sel T47D ix

11 DAFTAR SINGKATAN DMSO = Dimetil Sulfoksida ELISA = Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay FBS = Fetal Bovine Serum IC 50 = Inhibitory Concentration 50% KLT = Kromatografi Lapis Tipis KCV = Kromatografi Cair Vakum LAF = Laminar Air Flow MTT = 3-(4,5-Dimetilltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromide p.a = Pro analisis PBS = Phosphate Buffered Saline Penstrep = Penicillin Streptomycin R f UV RPMI WHO SDS GF 254 = Retardation Factor = Ultraviolet = Roswell Park Memorial Institute = World Health Organization = Sodium Dodecyl Sulfate = Gel Fluoresense at UV-254 x

12 INTISARI Tanaman sirsak (Annona muricata L.) merupakan salah satu tanaman yang berkhasiat sebagai antikanker. Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa ekstrak heksana dari kulit batang sirsak (Annona muricata L.) mempunyai efek sitotoksik terhadap sel CEM-SS dengan nilai IC 50 sebesar 0,8 µg/ml dan ekstrak etil asetat mempunyai efek sitotoksik terhadap sel HL dengan nilai IC 50 0,5 µg/ml. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efek sitotoksik terhadap sel T47D serta mengetahui kandungan senyawa kimia yang terdapat pada fraksi polar ekstrak etanol kulit batang sirsak dengan analisis KLT. Ekstraksi kulit batang sirsak dilakukan dengan maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Ekstrak kental yang didapat difraksinasi menggunakan KCV dengan pelarut bertingkat yaitu etil asetat : n-heksana (1:9), (2:8), (3:7), (4:6), dan etanol 96%. Metode yang digunakan dalam penelitan ini adalah metode MTT assay dengan seri konsentrasi yang digunakan 500, 250, 125, 62,5, 31,25, 15,625, dan 7,8125 µg/ml, sedangkan untuk identifikasi golongan senyawa kimia menggunakan metode KLT dengan beberapa pereaksi semprot, fase diam Silika GF 254 dan fase gerak etil asetat : n-heksana 2:8. Hasil identifikasi golongan senyawa kimia menggunakan beberapa pereaksi semprot menunjukkan bahwa fraksi polar ekstrak etanol kulit batang sirsak (Annona muricata L.) mengandung golongan senyawa polifenol, alkaloid, saponin, dan flavonoid, tetapi tidak berefek sitotoksik terhadap sel kanker payudara T47D. Kata kunci: Annona muricata L., fraksi polar, T47D, sitotoksik, kromatografi lapis tipis xi