EKSTRAK AKAR TANAMAN KELOR SEBAGAI ANTIFERTILITAS PADA MENCIT BETINA

Transkripsi

1 EKSTRAK AKAR TANAMAN KELOR SEBAGAI ANTIFERTILITAS PADA MENCIT BETINA Sylvie Ponomban 1, Phembriah S. Kereh 2, Ana B. Montol 3 1),2)3) Jurusan Gizi Poltekkes Kemenkes Manado Jl. Parigi Tujuh No. 22 Malalayang Abstract: This study aims to investigate the effect of the Moringa oleifera root extract as an antifertilization of the female Mus musculus. The research use Randomized Pretest Posttest Control Group Design involving one control group and two experimental groups. The treatment was given orally once a day with the amount of 0.5 cc for 24 days and the treatment was given to the vaginal smear and stained Papanicolaou and methylen blue 0.1% and a qualitative examination was performed. After that, the female and the male Mus musculus married, than observation the signs of pregnancy. The result show that there is a significant difference in the treatment of Moringa oleifera root extract with the dosage of 750 mg/bodyweight and 1500 mg/bodyweight, there is a significant differences in the test result of the cycle period and the signs of pregnancy after the treatment (p<0.05). It can be concluded that the treatment of the Moringa oleifera root extract as an antifertilization of the female Mus musculus after 24 days. Kata Kunci : Ekstrak Akar Kelor, Ovulasi, Antifertilitas. Kesuburan manusia berbeda dari orang ke orang dan dari negara ke negara kesuburan yang kurang atau infertilitas menimbulkan kesengsaraan, begitu pula kesuburan yang berlebihan. Itu sebabnya perlu adanya perawatan kesuburan: yang kurang ditanggulangi, kesuburan yang berlebihan dikendalikan untuk kebahagiaan dan kesejahteraan manusia. Salah satu tujuan dari perawatan kesuburan adalah mencegah kehamilan dan persalinan yang tidak diinginkan. Program keluarga berencana merupakan usaha menciptakan kesejahteraan keluarga melalui pembatasan kelahiran. Pembatasan kelahiran dengan menggunakan obat tradisional sudah lama di kenal di Indonesia, tetapi belum digunakan secara luas disebabkan karena penggunaan obat tradisional masih didasarkan pada dugaan dugaan dan hasil pengalaman turun temurun. Usaha dalam meningkatkan peranan obat tradisional, perlu dilakukan penelitian untuk membuktikan secara ilmiah khasiat dan keamanan dalam penggunaannya. Tumbuhan yang bersifat estrogenik dapat menyebabkan infertilitas (Suherman, 2003) dan pemberian senyawa estrogenik dengan dosis tertentu dapat mencegah terjadinya ovulasi karena produksi FSH dan LH terhambat (Ganong, 1992). Salah satu dari sekian banyak obat tradisional yang digunakan sebagai obat untuk mencegah kehamilan adalah kelor (Moringa oleifera Lamk) yang banyak tumbuh di negara beriklim tropis dan subtropis, termasuk Indonesia (Anonim, 2004). Diduga ekstrak akar kelor (Moringa oleifera Lamk) mengandung senyawa kontraseptif dan mempunyai efek mencegah implantasi (Anonim, 2005a) sehingga dapat menyebabkan keguguran (abortivum) pada wanita hamil (Shukla S. et all,1988; Anonim, 2004). Dilaporkan bahwa pemberian ekstrak akar kelor 200 mg/kg bb per oral menyebabkan terganggunya siklus normal estrus pada tikus (Anonim, 2005a), dan penelitian oleh Shukla (1988), tentang ekstrak akar kelor menghambat spermatogenesis pada tikus secara in vivo. Berdasarkan hal tersebut di atas, kemungkinan ekstrak akar kelor mempunyai efek dapat memperpanjang siklus ovulasi pada mencit betina dan mamalia betina lain. Tujuan penelitian ini secara umum adalah untuk mengetahui apakah ekstrak akar kelor memiliki efek sebagai antifertilitas pada mencit. Dan secara khusus adalah untuk mengetahui efek antifertilitas pada mencit 117

2 118 JIK Volume 5 No. 2 April 2011 Ponomban, S, dkk. Ekstrak Akar Tanaman betina serta untuk membandingkan pada dosis berapa ekstrak akar kelor efektif sebagai antifertilitas pada mencit. METODA Pada penelitian ini digunakan mencit (Mus musculus) betina yang tidak hamil, berumur 2-3 bulan dengan berat badan gram. Mencit berasal dari unit pengembangan hewan percobaan fakultas kedokteran Unsrat Manado sedangkan akar kelor (Moringa oleifera Lamk) yang digunakan berasal dari jalan 17 Agustus Bumi Beringin Manado. Penelitian ini menggunakan Randomized Pretest-Posttest Control Group Design yang terdiri dari satu kelompok kontrol (K) dan dua kelompok perakuan, P1= dengan ekstrak akar kelor 750 mg/kg bb, P2= dengan ekstrak akar kelor 1500 mg/kg bb. Masing masing kelompok terdiri dari 10 ekor mencit betina yang ditempatkan dalam kandang berbeda. Pembuatan ekstrak akar kelor dilakukan dengan menggunakan pelarut methanol. Sebelum pemberian ekstrak akar kelor secara oral, pada mencit dilakukan pemeriksaan apus vagina selama 24 hari dengan tujuan untuk mendapatkan siklus estrus yang teratur dan untuk menghitung indeks kariopinotik sebelum. Pemberian secara oral ekstrak akar kelor dengan dosis 0,5 cc/ 30 gram bb /hari selama 24 hari berturut-turut untuk masing masing kelompok sedangkan untuk kelompok kontrol diberikan aquadest. Sesudah 24 hari pemberian ekstrak akar kelor secara oral, dilakukan pengambilan apus vagina dan dilakukan pulasan dengan metilen biru 0,1 %. Pembuatan sediaan apus vagina ditujukan untuk mengetahui ada tidaknya ovulasi dengan menghitung indeks kariopiknotik dan untuk mengetahui lamanya siklus ovulasi. Indeks kariopiknotik adalah jumlah persentase sel epitel superficial dengan inti piknotik dibandingkan terhadap jumlah seluruh sel pada sediaan. Sesudah 24 hari dilakukan observasi lamanya siklus ovulasi, pada hari ke- 25 mencit dikawinkan dengan jalan memasukkan 3 ekor mencit jantan pada masing-masing kelompok, lalu dilakukan observasi tanda-tanda kebuntingan. HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Lama siklus ovulasi sebelum Lama siklus ovulasi sebelum pada kelompok kontrol, kelompok 1 (P1), kelompok 2 (P2) disajikan pada tabel dibawah ini. Tabel 1. Lama Siklus ovulasi sebelum Lama Siklus Kontrol (K) 1 (P1) 2 (P2) 4 hari hari hari Lama siklus sesudah 24 hari Lama siklus sesudah pada kelompok kontrol, kelompok 1 (P1), kelompok 2 (P2) disajikan pada tabel dibawah ini. Tabel 2. Lama Siklus Ovulasi Sesudah 24 Hari Lama Siklus Kontrol (K) 1 (P1) 2 (P2) 4 hari hari hari hari hari Pengujian perbedaan lama siklus ovulasi sesudah kelompok kontrol dan kelompok dosis 750 mg/kg bb Pengujian menggunakan uji Z dengan hasil R1 R2 10, 40 > Z tabel = 9,17 maka dapat disimpulkan median lama siklus ovulasi sesudah kelompok kontrol lebih

3 119 JIK Volume 5 No. 2 April 2011 Ponomban, S, dkk. Ekstrak Akar Tanaman rendah daripada median lama siklus ovulasi sesudah kelompok Dosis 750 mg/kgbb per oral. Pengujian perbedaan lama siklus ovulasi sesudah kelompok kontrol dan kelompok dosis 150 mg/kg bb Hasil uji Z menunjukan = 18,10 > Z tabel = 9,17 maka dapat disimpulkan median lama siklus ovulasi sesudah kelompok kontrol lebih rendah daripada median lama siklus ovulasi sesudah kelompok Dosis 1500 mg/kgbb per oral. Pengujian lama siklus ovulasi sebelum dan sesudah Dari uji normalitas data pada sebelum dan sesudah dengan Kolmogorov Smirnov pada ketiga kelompok didapatkan data berdistribusi tidak normal p < 0,05 ( p = 0,003 ). Oleh sebab itu, perbedaan ketiga kelompok dianalisis dengan uji Friedman dan hasil ujinya disajikan dibawah ini. Tabel 3. Pengujian lama siklus sebelum K 1,45 P1 2,20 5,812 0,055 P2 2,35 Hasil uji Friedman menunjukkan bahwa lama siklus ovulasi sesudah 24 hari berbeda secara signifikan p<0,05 (p=0,000), hal ini menunjukkan bahwa antara ketiga kelompok memiliki kondisi akhir yang berbeda. Tabel 4. Pengujian lama ovulasi siklus sesudah 24 hari K 1,10 P1 2,00 18,000 0,000 P2 2,90 Tanda-tanda kebuntingan sesudah 24 hari Tanda-tanda hamil sesudah 24 hari pada kelompok kontrol, kelompok 1 (P1), kelompok 2 (P2) disajikan pada tabel 5 Tabel 5. Tanda-tanda kebuntingan sesudah Hamil Tidak hamil Total K P P Pengujian tanda-tanda kebuntingan sesudah Hasil uji Friedman menunjukkan bahwa tandatanda kebuntingan sesudah pada ketiga kelompok berbeda secara signifikan p< 0,05 (p =0,000) hal ini menujukkan terdapat perbedaan yang bermakna. Tabel 6. Pengujian tanda-tanda kebuntingan sesudah K 1,10 P1 2,30 16,800 0,000 P2 2,60 Pembahasan Dari hasil pengamatan pada pemberian ekstrak akar kelor (Moringa oleifera Lamk) dan pemeriksaan siklus ovulasi pada mencit betina (Mus musculus) pengujian lama siklus ovulasi sesudah 24 hari, ditemukan terjadi perpanjangan waktu sikus ovulasi pada fase sekresi lanjut di mana dengan pengujian lama siklus ovulasi ditemukan adanya perbedaan antara sebelum dan sesudah. Hal ini menunjukan bahwa efek pemberian ekstrak akar kelor terhadap siklus ovulasi mencit tergantung pada jangka waktu atau lamanya pemberian (Shukla, 1988; Anonim, 2005a).

4 120 JIK Volume 5 No. 2 April 2011 Ponomban, S, dkk. Ekstrak Akar Tanaman Salah satu cara untuk mengetahui ada tidaknya ovulasi yaitu dengan pemeriksaan sitologi apus vagina yang dapat mencerminkan keadaan hormonal. Usap vagina yang diambil berturut-turut dapat ditentukan terjadinya ovulasi dengan menentukan indeks kariopiknotik.tipe epitel yang mendominasi pada sediaan apus vagina memberikan petunjuk apakah epitel vagina sedang atau tidak distimulasi oleh estrogen. Evaluasi hormonal dari sediaan apus vagina yaitu berdasarkan sensitivitas epitel vagina terhadap hormon steroid terutama hormon estrogen dan progesteron. Hormonhormon ini akan menyebabkan pertumbuhan maturasi sel epitel skuamosa vagina, pembentukan glikogen dan sekresi mukus. Hormon estrogen pada sediaan apus vagina akan menyebabkan deskuamasi sel epitel superfisial dan sel epitel intermedier yang tersendiri, tidak melipat dan terletak rata dengan inti bulat kecil dan piknotik (Lestadi, 1994). Indeks kariopiknotik adalah jumlah persentase sel epitel superfisial dengan inti piknotik dibandingkan terhadap jumlah seluruh sel pada sediaan. Indeks kariopiknotik dapat ditentukan dengan cara pemeriksaan sitologi apus vagina. Pada penelitian ini melalui pemeriksaan sediaan apus vagina ditemukan adanya deskuamasi sel epitel superfisial dan sel epitel intermedier berkelompok, sel radang polimorfonuklear (PMN) yang banyak disertai sel degeneratif sehingga sediaan tampak kotor dengan indeks kariopiknotik 15-25%. Hal ini menunjukkan bahwa epitel vagina tidak sedang distimulasi oleh estrogen. Dengan melakukan pengujian perbedaan lama siklus ovulasi menggunakan uji Friedman pada ketiga kelompok berbeda sangat signifikan p < 0,05 (p = 0,000), di mana perbedaan ini terjadi antara kelompok kontrol dan kelompok 1 dosis 750 mg/kg bb, serta antara kelompok kontrol dan kelompok 2 dosis 1500 mg/kg bb. Mekanisme kerja bahan aktif yang terkandung dalam ekstrak akar kelor pada penelitian ini belum diketahui secara pasti, diduga ekstrak akar kelor mengandung glikosida steroid yang bersifat estrogenik dan mengandung bahan yang bersifat sitotoksik sehingga menurunkan FSH dan estrogen. Pengaruh FSH dan LH merangsang sel-sel ovarium berikatan dengan reseptor membran sel yang spesifik selanjutnya mengaktifkan adenil siklase. Adenil siklase berhubungan dengan sitoplasma menyebabkan ATP sitoplasma menjadi siklik AMP, peningkatan siklik AMP dalam sel menyebabkan pertumbuhan dan sekresi oleh sel-sel ovarium spesifik (Guyton, 1992). Terhambatnya pematangan folikel pada penelitian ini kemungkinan disebabkan karena terjadi penurunan kadar FSH sehingga proliferasi dan biosintesa sel granulosa folikel terganggu, menyebabkan folikel tidak menjadi matang. Sel granulosa pada folikel preantral tidak dapat memproduksi estrogen karena aromatisasi terhambat oleh kadar FSH rendah sehingga reseptor FSH pada membran plasma sel granulosa folikel tidak berfungsi. Akibat kadar estrogen yang rendah tidak dapat merangsang produksi LH. Pemberian senyawa estrogenik dengan dosis tertentu dapat mencegah ovulasi karena produksi FSH dan LH terhambat (Ganong, 1992). Hal ini terbukti pada penelitian ini dimana sesudah 24 hari pada mencit betina dan dikawinkan, diperoleh hasil uji Friedman menunjukkan bahwa tanda-tanda kebuntingan sesudah 24 hari dan dikawinkan pada ketiga kelompok berbeda secara signifikan p<0,05 (p=0,000) hal ini menunjukkan terdapat perbedaan yang bermakna Taubert dan Kuhl berpendapat bahwa terjadinya ovulasi diawali dengan meningkatnya LH serum yang mencapai puncaknya jam sebelum ovulasi disebabkan karena adanya kadar estradiol (E 2 ) yang tinggi (Speroff et al, 1999). Pada fase preovulasi ditandai dengan peningkatan kontraksi otot polos perifolikuler ovarium yang distimulasi oleh prostaglandin. Prostaglandin berperan sebagai enzim lisosom bebas yang merenggangkan dinding folikel dan mungkin berperan pada kontraksi otot polos

5 121 JIK Volume 5 No. 2 April 2011 Ponomban, S, dkk. Ekstrak Akar Tanaman perifolikuler ovarium sehingga menyebabkan pelepasan oosit (Speroff et al, 1999). Proses pecahnya folikel dan terjadinya ovulasi, protease sangat berperan pada proses penghancuran dinding folikel secara enzimatik. Pembentukkan enzim ini dipengaruhi oleh progesteron. Progesteron menyebabkan dinding folikel menjadi tipis, renggang dan meningkatkan aktifitas enzim proteolitik (kolagenase dan protease) serta plasmin dalam cairan folikel sehingga dinding folikel menjadi renggang (Speroff et al, 1999). Penurunan kadar LH akan menyebabkan sintesa prostaglandin terganggu dan kadar progesteron dalam folikel rendah, tidak menghasilkan aktivator plasminogen sehingga konsentrasi plasmin intrafolikuler menurun akibatnya aktifitas kolagenase pada dinding folikel terganggu sampai tidak terjadi ruptur sehingga tidak terjadi ovulasi. Dapat disimpulkan bahwa teori tentang ekstrak akar kelor (Moringa oleifera Lamk) yang mengandung senyawa kontrasepsi mempunyai efek di samping memperpanjang siklus ovulasi, juga dapat mencegah kebuntingan pada mencit betina (Mus musculus). KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan 1). Pengujian ovulasi berdasarkan lama siklus pada ketiga kelompok sesudah 24 hari berbeda sangat signifikan, di mana nilai p<0,05 (p=0,000). Perbedaan ini terjadi antara kelompok kontrol dan kelompok 1 dosis 750 mg / kg bb serta antara kelompok kontrol dan kelompok 2 dosis 1500 mg /kg bb; 2). Pengujian tandatanda kebuntingan sesudah 24 hari pada ketiga kelompok berbeda secara signifikan p<0,05 (p=0,000) hal ini menujukkan terdapat perbedaan yang bermakna. Dengan demikian maka disimpulkan bahwa pemberian ekstrak akar kelor pada mencit betina (Mus musculus) selain dapat memperpanjang siklus ovulasi, juga dapat mencegah kebuntingan. Saran Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui efek samping terhadap organ, demikian juga dosis yang lebih variatif untuk menentukan dosis yang tepat. DAFTAR PUSTAKA Anonim. (2004). Moringa oleifera. (online)( diakses 30 Maret 2004). Anonim. (2005a). Herbal Monograph. (online) ( herbfinder/h moring.htm, diakses 15 Agustus 2005). Ganong, W.F. (1992). Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, edisi 14, Alih Bahasa: Petrus Adrianto, editor Jonatan Oswari. Jakarta EGC ; Guyton, A.C. (1992). Buku ajar fisiologi kedokteran, edisi 5 bagian 2, alih bahasa: Adji Dharma, P. Lukmanto, penerbit buku kedokteran AGC, Jakarta; Lestadi, J. (1994). Penuntun Diagnostik Praktis Sitologi Hormonal Apusan Pap. Bagian sitologi departemen patologi anatomi Rumah Sakit Angkatan Darat Gatot Soebroto Jakarta. Ponomban, S.S. (2005). Ekstrak Akar Kelor (Moringa Oleifera Lamk) Memperpanjang Siklus Ovulasi Pada Mencit (Mus Musculus). Penelitian pendahuluan. Disampaikan pada Seminar UPP. Universitas Udayana. Speroff, L. et al. (1999). Clinical Gynecologic Endocrinology And Infertility. Sixth edition Shukla, S. et al.(1988). Antiferitility profile of aqueous extract of Moringa oleifera root. (online)( rez/query.fcgi?cmd=retrieve&db=pubm ed&listuids= &dopt=abstract, diakses 14 Agustus 2005).