TRIMER RESVERATROL DARI KULIT BATANG SHOREA RUGOSA DAN SHOREA BRUNNESCENS (DIPTEROCARPACEAE)

Transkripsi

1 J. Sains MIPA, April 200, Vol. 14, No. 1, al.: - 12 ISSN TRIMER RESVERATRL DARI KULIT BATANG SREA RUGSA DAN SREA BRUNNESCENS (DIPTERCARPACEAE) aryoto 1,2, *, Euis.akim 1, Yana M. Syah 1, Sjamsul A. Achmad 1, Lia D. Juliawaty 1, Laily Bin Din 3, Jalifah Latip 3 1 Kelompok Penelitian Kimia rganik Bahan Alam, Departemen Kimia, Institut Teknologi Bandung, Bandung 40132, Jawa Barat 2 Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta, Jalan Achmad Yani Pabelan Tromol Pos 1, Kartasura, Surakarta 5102, Jawa Tengah 3 School of Chemical Sciences and Food Technology, Faculty of Science and Technology, Universiti Kebangsaan Malaysia, UKM Bangi, Selangor D.E. Malaysia *Alamat korespondensi ABSTRACT Diterima 5 Januari 200, perbaikan 1 Maret 200, disetujui untuk diterbitkan 19 March 200 Four resveratrol trimers i.e: (-)-davidiol A (1), (-)-vaticanol A (2), (+)-α-viniferin (3) and (-)-ampelopsin E (4). Resveratrol trimer (1), (2), (3) and (4) were isolated from acetone extracts of the tree bark of Shorea rugosa eim and Shorea brunnescens Ashton (Dipterocapaceae). The structures of the isolates were established based on spectroscopic evidences, UV, IR, 1 NMR, and by comparison with those reported data. Cytotoxic determination on these compounds against murine leukemia P-3 cells showed their IC50 6,1; 39,; 25,; and 15,4. µm, respectively. Keywords: resveratrol trimer, Murine leukemia P-3 cells, S. rugosa, S. brunnescens, Dipterocarpaceae 1. PENDAULUAN Dipterocarpaceae merupakan salah satu famili dari keanekaragaman hayati hutan tropika Indonesia yang sangat berpotensi untuk dikembangkan, karena selain memiliki nilai ekonomi yang tinggi, tumbuhan ini juga menghasilkan berbagai jenis senyawa kimia kelompok oligomer resveratrol 1). Klasifikasi berdasarkan pilogeni molekuler (molecular phylogeny) famili Dipterocarpaceae terdiri dari Dipterocarpoide (13 genus), Monotoideae (2 genus) dan Pokaraimoideae (1 genus). Dipterocarpoide dibagi lagi menjadi 2 golongan yaitu Dipterocarpaceae dan Shoreae Dipterocarpaceae terdiri dari Anisoptera, Cotylolebium, Dipterocarpus, Stemonoporus, Upuna, Vateria, Vateriopsis dan Vatica. Sedangkan Shoreae terdiri dari Dryobalanops, opea, Neobalanocarpus, Parashorea dan Shorea 2). Shorea atau meranti mempunyai 163 spesies dan merupakan genus terbesar dari 16 genus tumbuhan famili Dipterocarpaceae, serta terdiri dari 10 subgenus. Kesepuluh subgenus tersebut yakni Shorea, Pentaeme, Neohopea, Richetioides, Anthoshorea, Rubella, Brachypterae, Pachycarpae, Mutica, dan valis. S. rugosa dikelompokkan ke dalam subgenus Mutica, dan S. brunnescens termasuk subgenus Shorea 3, 4). Dua spesies Shorea yaitu S. rugosa dan S. brunnescens adalah endemik di Kalimantan, Sumatera, Semenanjung Malaysia dan Filipina 3). Secara fitokimia, kelompok tumbuhan ini dikenal sebagai penghasil senyawa turunan fenol dari golongan oligomer resveratrol. asil-hasil penelitian terdahulu Dipterocarpaceae menghasilkan senyawa-senyawa dimer, trimer, tetramer, pentamer, heksamer, heptamer dan oktamer resveratrol. Beberapa senyawa oligomer resveratrol yang berhasil diisolasi memperlihatkan aktivitas biologi seperti anti jamur 5, 6), anti IV ), anti oksidan ), anti bakteri 9), anti hepatotoksik 10) dan anti inflamasi 11). Dalam makalah ini akan disampaikan penemuan davidiol A, vatikanol A, α viniferin dan ampelopsin E dari ekstrak aseton kulit batang kedua tumbuhan tersebut dan sifat sitotoksiknya. Struktur molekul keempat senyawa tersebut ditetapkan berdasarkan data spektroskopi UV, IR, 1 NMR, dan perbandingan dengan data sejenis yang telah dilaporkan. Sifat sitotoksiknya ditentukan dengan menggunakan sel murin leukemia P-3. Selain itu, makna penemuan keempat senyawa tersebut terhadap kemotaksonomi Shorea akan dibahas dalam makalah ini. 2. METDE PENELITIAN Umum. Titik leleh ditentukan dengan micro melting point apparatus. Putaran optik diukur dengan polarimeter Perkin-Elmer 341 dalam Me. Spektrum UV dan IR ditetapkan dengan Cary Varian 100 Conc. dan Perkin-Elmer Spectrum ne FT-IR spectrophotometers. Spektrum 1 NMR ditentukan dengan spektrofotometer JEL ECP400, yang beroperasi pada 500 Mz ( 1 ). Kromatografi cair vakum 200 FMIPA Universitas Lampung

2 J. Sains MIPA, April 200, Vol. 14, No. 1 menggunakan Si-gel 60 GF254 (Merck), kromatografi kolom tekan menggunakan Si-gel 60 ( mesh) (Merck), kromatografi radial menggunakan Si-gel 60 PF254 (Merck), dan analisis KLT menggunakan plat KLT Kieselgel 60 F254 0,25 mm (Merck). Pelarut yang digunakan semuanya berkualitas teknis yang didestilasi terlebih dahulu. Bahan Tumbuhan. Bahan tumbuhan yang digunakan adalah kulit batang Shorea rugosa eim, diperoleh dari utan Setinggal, Desa Sibubus, Kecamatan Paloh, Kabupaten Sambas, Provinsi Kalimantan Barat pada bulan September Sedangkan Shorea brunnescens Ashton yang dikumpulkan dari wilayah P PT Aya Yayang Indonesia Camp 63, Tanjung, Tabalong, Provinsi Kalimantan Selatan pada bulan Juli Selanjutnya, kedua tumbuhan tersebut diidentifikasi oleh staf erbarium Bogoriense, Bogor. Ekstraksi dan Isolasi S.rugosa eim. Serbuk kulit batang S. rugosa sebanyak 4 kg diekstraksi dengan aseton 3 x 10L, menghasilkan 19 g ekstrak aseton. Ekstrak aseton tersebut, selanjutnya dilarutkan kembali dalam campuran Me-dietileter untuk mengendapkan tannin, sehingga menghasilkan fraksi terlarut Medietileter, yang juga berupa gum berwarna coklat gelap (1 g). Sebanyak 1 gram kemudian difraksinasi dengan kromatografi cair vakum (KCV) sampai 3 kali, [adsorben Si-gel, eluen campuran heksan-etilasetat (6:4-etilasetat 100%, Me 100%)] menghasilkan 5 fraksi utama C1-C5 masing-masing 15,31; 15,44; 15,22; 1,9 dan 3,6 g. Pemisahan dan pemurnian fraksi C2 dan C3 dengan kromatografi radial (Si-gel, kloroform:metanol = 9:1) menghasilkan senyawa 3 (250 mg). Sebagian dari C4 (30 mg) dilakukan fraksinasi dengan KCV [adsorben Si-gel, eluen campuran heksanetilasetat (:3 sampai etilasetat 100%, Me 100%)] menghasilkan 4 fraksi yaitu C41, C42, C43, C44. Fraksi C43 dimurnikan dengan menggunakan kromatografi radial (Si-gel, CCl3:Me=9:1) sehingga diperoleh senyawa 2 (230 mg). Pemurnian fraksi C5 dengan kromatografi radial (Si-gel, kloroform:metanol = 9:1) menghasilkan senyawa 1 (25 mg). Ekstraksi dan Isolasi S. brunnescens Ashton. Sebanyak 3,00 kg serbuk kulit batang S. brunnescens dimaserasi dengan aseton selama 24 jam sebanyak 3 kali. Ekstrak aseton (550 g) dipartisi dengan eter untuk mengendapkan tanin. Filtrat diuapkan hingga diperoleh ekstrak kering (325 g) yang relatif bebas tanin. Sebanyak 60 gr ekstrak kering difraksinasi dengan KCV menggunakan silika gel G60 GF254 dengan eluen yang ditingkatkan kepolarannya (n-heksana-etac, EtAc, EtAc-Me) menghasilkan 5 fraksi gabungan A (193 mg), B (59 mg), C (34, 26g), D (529 mg), dan E (440 mg). Fraksi C difraksinasi lebih lanjut menggunakan kromatografi radial ( CCl3-Me) dan KVC (nheksana-etac) diperoleh 5 fraksi gabungan. Fraksi gabungan C1 (30 mg), C2 (20mg), C3 (490mg), C4 (2, 60g) dan C5 (0mg). Fraksi gabungan C4(2, 60g) difraksinasi menggunakan kromatografi radial (CCl3- Me) diperoleh fraksi gabungan. Fraksi C4.2 difraksinasi lagi menggunakan kromatografi radial (CCl3-Me) menghasilkan 2 fraksi gabungan. Fraksi C (320 mg) difraksinasi dengan kromatografi radial menghasilkan 3 fraksi gabungan. Terhadap fraksi C (0 mg) kemudian difraksinasi lagi dengan kromatografi radial (CCl3-Me) menghasilkan senyawa 4 sebanyak 35 mg. Penentuan sifat sitotoksik. Aktivitas antitumor senyawa 1-4 dinyatakan sebagai IC50, yaitu konsentrasi sampel yang dibutuhkan untuk menginhibisi 50% sel tumor murin leukemia P-3 melalui pewarnaan pereaksi MTT. Uji dilakukan dengan cara menambahkan berbagai konsentrasi keempat senyawa tersebut ke dalam biakan sel tumor P-3. Setelah diinkubasi selama 4 jam, ke dalam sampel ditambahkan pereaksi warna MTT dan diinkubasikan kembali selama 4 jam. Jumlah sel tumor P-3 yang terinhibisi oleh sampel dapat diukur serapannya dengan menggunakan alat pembaca pelatmikro pada λ 540 nm setelah penambahan larutan pengehenti pertumbuhan. Nilai IC50 dapat dihitung melalui ekstrapolasi garis 50% serapan kontrol positif pada kurva serapan terhadap berbagai konsentrasi sampel menggunakan grafik semilogaritma. (-)-Davidiol A (1) diperoleh berupa padatan berwarna coklat dengan t.l o C dan [α]d o (c 0,1 Me). Spektrum UV (Me) λmaks (log ε) 229 (5,0), dan 24 nm (4,42). Spektrum IR (KBr) νmaks 3340 cm -1 (gugus -), 1613, 1513, dan 1455 cm -1 (C=C aromatik), dan 31 cm -1 (p-disubstitusibenzena). Spektrum 1 NMR pada Tabel 1. (-)-Vatikanol A (2) diperoleh berupa padatan berwarna coklat dengan t.l o C dan [α]d o (c 0,1 Me). Spektrum UV (Me) λmaks (log ε) 229 (5,0), dan 24 nm (4,42). Spektrum IR (KBr) νmaks3365 cm -1 (gugus -), 1613, 1513, dan 1455 cm -1 (C=C benzena), dan 32 cm -1 (p-disubstitusibenzena). Spektrum 1 NMR pada Tabel 1. (+)-α-viniferin (3) diperoleh berupa padatan berwarna putih-coklat dengan t.l o C dan [α]d o (c 0,1 Me). Spektrum UV (Me) λmaks (log ε) 22 (4,5), dan 25 nm (4,14). Spektrum IR (KBr) νmaks 330 cm -1 (gugus-), 1615, 1515, dan 146 cm -1 (C=C benzena), dan 31 cm -1 (p-disubstitusibenzena). Spektrum 1 NMR pada Tabel 1. (-)-Ampelopsin E (4) berupa serbuk putih kehijauan, t.l o C (terurai), [α] 20 D -33 o (c=0,1 dalam Me). UV (Me) λmaks 204, 22 (bh), 25 nm. UV (Me+Na) λmaks 20, 250 (bh), 311 nm IR (KBr) νmaks 3343 cm -1 (gugus-), 1604, 1513, dan 144 cm FMIPA Universitas Lampung 9

3 aryoto dkk Trimer Resveratrol dari Kulit Batang Shorea (C=C benzena), dan 33 cm -1 (p-disubstitusibenzena). Spektrum 1 NMR (aseton-d6) pada Tabel ASIL DAN PEMBAASAN 3.1. Struktur Molekul Senyawa (1) (Gambar 1) diperoleh berupa serbuk coklat memperlihatkan serapan maksimum pada λmaks 229, dan 24 nm, yang mengalami pergeseran batokromik pada penambahan pereaksi geser Na. Sementara itu spektrum IR senyawa ini menunjukkan adanya gugus hidroksil (νmaks 3340 cm -1 ), aromatik (1613, 1511, dan 1455cm -1 ) dan 1,4-disubstitusibenzena (31cm -1 ) yang merupakan ciri khas oligostilbenoid yang telah memodifikasi kerangka stilben. Spektrum 1 NMR (Tabel 1) memperlihatkan sejumlah sinyal aromatik yang sesuai dengan adanya tiga unit p-hidroksifenil (δ,1 ; 6,9; 6,6; 6,5; 6,1 dan 6,5 ppm), satu unit 3,5-dihidroksifenil (δ 6,42 dan 6,15), satu pasang proton kopling-meta dari unit 1,2,3,5- tetrasubstitusibenzen (δ,16 dan 6,0), dan satu proton aromatik untuk unit pentasubstitusibenzen (δ 6,01). Selain itu, spektrum 1 NMR juga menunjukkan adanya enam sinyal proton alifatik, dua diantaranya khas untuk 2,3-disubstitusi-2,3-dihidrobenzofuran (δ 6,0 dan 4,40). Unit-unit struktur tersebut mempunyai derajat kesesuaian yang tinggi dengan struktur davidiol A. Konfirmasi lebih lanjut terhadap struktur davidiol A diperoleh dari hasil pembanding parameter NMR dengan yang dilaporkan oleh Tanaka et al. ) untuk senyawa ini sebagaimana dinyatakan pada Tabel 1. A1 A2 B1 B2 C1 C2 Senyawa 2 (Gambar 1) diperoleh berupa padatan berwarna coklat dengan t.l o C dan [α]d o (c 0,1 Me). Senyawa 2 adalah oligomer resveratrol berdasarkan data spektrum UV dan spektrum IR. Spektrum UV senyawa 2 memperlihatkan serapan maksimum pada λmaks 22, dan 24 nm, yang mengalami pergeseran batokromik pada penambahan pereaksi geser Na. Sementara itu spektrum IR senyawa 2 menunjukkan adanya gugus hidroksil (νmaks 3395 cm -1 ), aromatik (1614, 1511, dan 1454 cm -1 ) dan p-disubstitusibenzena (30 cm -1 ) yang merupakan ciri khas oligostilbenoid yang telah memodifikasi kerangka stilben. Pembuktian lebih lanjut berkenaan dengan struktur 2 dilakukan melalui analisis data spektroskopi 1D ( 1 NMR). Selanjutnya spektrum 1 NMR senyawa 2 (Tabel 1) memperlihatkan sejumlah sinyal aromatik yang sesuai dengan adanya tiga unit p-hidroksifenil (δ,20 dan 6,60;,01 dan 6,5; 6,59 dan 6,5 ppm), satu unit 3,5-dihidroksifenil (δ 6,42 dan 6,1 (2), satu pasang proton kopling meta unit 1,2,3,5- tetrasubstitusibenzen (δ 6,60 dan 6,41) dan satu proton aromatik untuk unit pentasubstitusibenzen (δ 6,02). Selain itu, spektrum 1 NMR juga menunjukkan adanya enam sinyal proton alifatik, dua diantaranya khas untuk 2,3-disubstitusi-2,3-dihidrobenzofuran (δ 6,60 dan 6,40), sedangkan empat sinyal lainnya sesuai dengan unit 1,1,2,3,4,4-heksasubstitusibutana (δ 5,26 4,3, 2,95, dan 4,21). Spektrum 1 NMR senyawa 2 menunjukkan adanya delapan proton - fenolik (δ,62;,50 (2);,3;,26;,21 (3); dan,19). Berdasarkan unit-unit struktur tersebut, (1) (2) (3) (4) Gambar 1. Struktur senyawa hasil isolasi FMIPA Universitas Lampung

4 J. Sains MIPA, April 200, Vol. 14, No. 1 Tabel 1. Spektrum 1 NMR dari senyawa 1 4 atom 1 (mult, J dlm z) 1* (mult, J dlm z) 2 (mult, J dlm z) 2* (mult, J dlm z) 3 (mult, J dlm z) 3* (mult, J dlmz) 4 (mult, J dlm z) 4* (mult, J dlm z) 2a,20 (d,,),21 (d,,), 1 ( d,, 4), 21 (d,,),02 (d,,4),03 (d,,5),24 (d,,6),2 (d,,5) 3a 6,60 (d,,) 6,63 (d,,) 6, 6 (d,, ) 6, (d,,) 6, (d,,4) 6,2 (d,,5) 6,5 (d,,6) 6, (d,,5) 5a 6,60 (d,,) 6,63 (d,,) 6, 6 (d,, ) 6, (d,,) 6, (d,,4) 6,2 (d,,5) 6,5 (d,,6) 6, (d,,5) 6a,20 (d,,),21 (d,,), 1 ( d,, 4), 21 (d,,),02 (d,,4),03 (d,,5),24 (d,,6),2 (d,,5) a 6,5 (d, 3,0) 6, (d, 3,9) 6, 0 (d, 3,3) 6, 0 (d, 2,9) 6,06 (br s) 6,0 (br s) 5,45 (d, 5,1) 5,4 (d, 5,0) a 6,0 (d, 3,0) 6,0 (d, 3,9) 4, 40 (d, 9,9) 4, 40 (m ) 3,96 (br s) 3,9 (br s) 4,56 (d, 5,1) 4,5 (d, 5,0) 10a ,25 (d, 2,2) 6,2 (d, 2,0) 12a 6,41 (d, 2,2) 6,41 (d, 2,2) 6, 3 (d, 2,2) 6, 44 (brs) 5,99 (d, 1, ) 5,99 (d, 1,) 6,19 (t, 2,2) 6,21 (t, 2,0) 14a 6,60 (d, 2,2) 6,60 (d, 2,2) 6, 53 (d, 2,2) 6, 55 (brs) 6,21 (d, 1,) 6,22 (d, 1,) 6,25 (d, 2,2) 6,2 (d, 2,0) 2b,01 (d,,4),01 (d,,) 6, 9 (d,, 4), 04 (d,,),21 (d,,4),22 (d,,5) 6,94 (d,,) 6,96 (d,,5) 3b 6,3 (d,,4) 6,3 (d,,) 6, 5 (d,, ) 6, 60 (d,,) 6, (d,,4) 6, (d,,5) 6,61 (d,,,) 6,63 (d,,5) 5b 6,3 (d,,4) 6,3 (d,,) 6, 5 (d,, ) 6, 60 (d,,) 6, (d,,4) 6, (d,,5) 6,61 (d,,,) 6,63 (d,,5) 6b,01 (d,,4),01 (d,,) 6, 9 (d,, 4), 04 (d,,),21 (d,,4),22 (d,,5) 6,94 (d,,) 6,96 (d,,5) b 5,26 (br s) 5,2 (br s) 5, 24 (br s) 5, 2 (brs) 5,94 (d, 9,9) 5,95 (d, 9,) 6,66 (d,16,) 6,6 (d, 16,0) b 4,3 (d, 9.9) 4,3 (d,,3) 4, 14 (d, 11,) 4, 23 (d, 11,) 4,69 (d, 9,9) 4,1 (d, 9,) 6,56 (d,16,) 6,5 (d, 16,0) 12b 6,02 (br s) 6,02 (brs) 6, 01 ( s ) 6, 02 ( s ) 6,1 (d, 1,) 6,2 (d, 1,) 6,46 (s) 6,49 (s) 14b ,25 (d, 1,) 6,25 (d, 1,) 6,25 (d, 1,) 6,25 (d, 1,) 2c 6,59 (d,,) 6,59 (d,,) 6, 1 (d,, ) 6, 6 (d,, 3),04 (d,,),0 (d,,5),24 (d,,6),2 (d,,5) 3c 6,5 (d,,) 6,5 (d,,) 6, 5 (d,, ) 6, 61 (d,,3) 6,1 (d,,) 6,9 (d,,5) 6,5 (d,,6) 6, (d,,5) 5c 6,5 (d,,) 6,5 (d,,) 6, 5 (d,, ) 6, 61 (d,,3) 6,1 (d,,) 6,9 (d,,5) 6,5 (d,,6) 6, (d,,5) 6c 6,59 (d,,) 6,59 (d,,) 6, 1 (d,, ) 6, 6 (d,, 3),04 (d,,),0 (d,,5),24 (d,,6),2 (d,,5) c 2.95 (dd,9,) 2,95(dd, 9,) 4, 36 (d,,0) 4, 3 (d, 9,) 4,90 (d, 6,2) 4,90 (d, 6,4) 5,45 (d, 5,1) 5,4 (d, 5,0) c 4,21 (br s) 4,20 (br s) 2, 92 2, 9 (dd,11,;,,0) (dd,11,; 9, ) 4,60 (d, 6,2) 4,61(d, 6,4) 4,56 (d, 5,1) 4,5 (d, 5,0) 10c 6,42 (d, 2,2) 6,42 (d, 2,2) 6, 42 (d, 2,2) 6, 42(d, 2,9) - - 6,25 (d, 2,2) 6,2 (d, 2,0) 12c 6,1 (t, 2,2) 6,1 (d, 2,2) 6, 16 (t, 1, ) 6, 19 (t, 2,9) 6,59 (d, 2,2) 6,59 (d, 1,) 6,19 (t, 2,2) 6,21 (t, 2,0) 14c 6,42 (d, 2,2) 6,42 (d, 2,2) 6, 42 (d, 2,2) 6, 42 (d, 2,9) 6,23 (d, 2,2) 6,22 (d, 1,) 6,25 (d, 2,2) 6,2 (d, 2,0) 1 = senyawa hasil isolasi ; 1* = vatikanol A, senyawa standar ) 2 = senyawa hasil isolasi ; 2* = davidiol A, senyawa standar ) 3 = senyawa hasil isolasi ; 3* = -viniferin, senyawa standar 11) 4 = senyawa hasil isolasi ; 4* = ampelopsin E, senyawa standar 10) maka dapat dirumuskan struktur 2 untuk senyawa ini, dimana sesuai hasil penelusuran pustaka yang telah ditemukan sebelumnya adalah sebagai vatikanol A. Perbandingan data NMR (Tabel 1) senyawa 2 dengan vatikanol A memperlihatkan kesesuaian parameter NMR yang tinggi. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa senyawa 2 adalah vatikanol A. Senyawa (4) (Gambar 1) diperoleh berupa serbuk berwarna abu-abu, dengan titik leleh o C, [α] 20 D +31 (c=0,1 dalam Me). Spektrum UV senyawa 4 dalam metanol menunjukkan adanya serapan maksimum yang khas untuk kromofor stilben pada λmaks 22 (bahu), 25 (bahu), 311 nm dan mengalami pergeseran batokromik pada penambahan pereaksi geser Na. Spektrum IR senyawa 4 memperlihatkan adanya pita-pita serapan untuk gugus hidroksil (3343 cm -1 ), C=C aromatik (1604, 1513, 144 cm -1 ), serta adanya benzena 1,4 disubstitusi (33 cm -1 ). Berdasarkan data tersebut, dapat disarankan senyawa 4 sebagai suatu oligostilbenoid yang memiliki kerangka stilben. Spektrum 1 -NMR senyawa 4 memperlihatkan adanya proton-proton pada daerah alifatik dan aromatik. Adanya 3 gugus p-hidroksifenil ditunjukkan pada geseran kimia δ (ppm),24 (2, d, J=,6 z) dan 6,5 (2, d, J=,6 z);,24 (2, d, J=,6 z) dan 6,5 (2, d, J=,6 z) serta 6,94 (2, d, J=, z) dan 6,61 (2, d, J=, z). Empat sinyal proton aromatik dari 2 gugus 3,5-m-dihidroksifenil ditunjukkan pada geseran kimia δ 6,25 (4, d, J=2,2 z) dan 6,19(2, t,j=2,2 z). Geseran kimia δ 6,46(1, s) merupakan sinyal proton aromatik dari -12b. Karakteristik sinyal proton dalam bentuk gugus diaril benzofuran juga ditunjukkan pada spektrum 1 -NMR yaitu pada δ 5,45 (2, d, J=5,1 z) dan 4,56 (2, d, J=5,1 z). Adanya pasangan multiplisitas doublet pada δ 6,66 (1, d, J=16, z) dan 6,56 (1, d, J=16, z) mengindikasi adanya vinil dengan konfigurasi trans. Unit-unit struktur yang diperoleh dari spektrum 1 -NMR tersebut sesuai dengan ampelopsin E (4). Konfirmasi senyawa 4 sebagai ampelopsin E selanjutnya diperoleh dari perbandingan data 1 -NMR dengan data yang sama yang telah dilaporkan (Tabel 1). Dengan metodologi penentuan struktur yang sama, dapat juga disimpulkan bahwa senyawa 3 (Gambar 1) adalah (+)-α-viniferin. Tabel 1 memperlihatkan data NMR senyawa 3 dan (+)-α-viniferin sebagaimana dilaporkan oleh Kitanaka, S., dkk. asil pengukuran sifat sitotoksik menunjukkan bahwa α viniferin dan ampelopsin E yang mempunyai nilai IC50 25, dan 15, 4 µm, lebih aktif dibanding dengan davidiol A dan vatikanol A yang memiliki IC50 6,1 dan 39, µm terhadap sel murin leukemia P Makna penemuan davidiol A, vatikanol Α, α- viniferin dan ampelopsin E terhadap aspek kemotaksonomi Shorea Shorea memiliki 10 subgenus yang mempunyai sekitar 163 spesies. Dari jumlah tersebut, baru 24 spesies yang telah dikaji kandungan oligomer resveratarolnya. α Viniferin (3) ditemukan pada 12 spesies dari jumlah 24 spesies Shorea. Selain itu, vatikanol A (2) juga telah ditemukan pada 3 spesies opea dari 10 spesies yang telah dipelajari secara fitokimia. Kedekatan hubungan kedua genus ini pada Dipterocarpaceae telah 200 FMIPA Universitas Lampung 11

5 aryoto dkk Trimer Resveratrol dari Kulit Batang Shorea digarisbawahi oleh peneliti taksonomi Biologi. Sampai sejauh ini vatikanol A belum ditemukan pada spesies genus lain. Dengan demikian, hal ini memberi petunjuk keberadaan vatikanol A memiliki arti yang penting pada hubungan Shorea dengan opea. Davidiol A (1) pernah ditemukan sebelumnya pada S. selanica, V. rassak dan V. pauciflora. Keberadaan senyawa ini, nampaknya lebih lebih berkaitan dengan hubungan Shorea-Vatica. Davidiol A telah ditemukan pada tumbuhan famili Leguminosae yaitu pada spesies Sophora davidi ). Selain itu juga ditemukan pada tumbuhan famili Dipterocarpaceae terutama genus Shorea; yaitu S. hemsleyana 12), S. guiso 13) dan S. parvifolia 14). Ampelopsin E (4) berdasarkan penelusuran literatur yang telah dilakukan, ditemukan pada famili Vitaceae dari kulit akar tumbuhan spesies Ampelopsis brevipenduculata var. hancei 10) juga pada tumbuhan famili Dipterocarpaceae dari S. pinanga 15), dan S. mecistopterix 16). 4. KESIMPULAN Empat senyawa trimer resveratrol, yaitu (-)-davidiol A (1), (-)-vatikanol A (2), (+)- -viniferin (3) telah diisolasi untuk pertamakalinya dari kulit batang Shorea rugosa eim, dan (-)-ampelopsin E (4) telah berhasil diisolasi untuk pertamakalinya dari kulit batang Shorea brunnescens Ashton. Pada pengujian sifat sitotoksik senyawa 1-4 menggunakan sel murin leukemia P-3 memperlihatkan senyawa 4 dan 3 bersifat lebih sitotoksik dibandingkan dengan senyawa 2 dan 1. UCAPAN TERIMA KASI Kami mengucapkan terima kasih kepada staf erbarium Bogoriense - Pusat Penelitian Biologi LIPI, Bogor, Indonesia, yang telah mengidentifikasi spesimen tumbuhan. DAFTAR PUSTAKA 1. Sotheeswaran, S. & Pasupathy, V Distribution of resveratrol oligomers in plants, Phytochemistry, 32: Kajita, T., Kamiya, K., Nakamura, K., Tachida,., Wickneswari, R., Tsumura, Y., Yoshimaru,., Yamazaki, T Molecular phylogeny of Dipterocarpaceae in Southeast Asia based on nucleotide sequences of matk, trnl intron, and trnl-trnf intergenic spacer region in chloroplast DNA, Molecular Phylogenetics and Evolution., 10 (2) : Cronquist, A An Integrated System of Classification of Flowering Plants, Columbia University Press. New York., Ashton, P. S., 193. Flora Malesiana, Martinus Nijhoff, London 5. Pryce, R. J., Langcake, P. 19. α-viniferin: an antifungal resveratrol trimer from grapevines, Phytochemistry., 16: Bokel, M., Diyasena, M. N. C., Gunatilaka, A. A. L., Kraus, W., Sotheeswaran, S. 19. Canaliculatol, an antifungal resveratrol trimer from Stemonoporus canaliculatus, Phytochemistry., 2 (2): Dai, J-R., allock, Y.M., Cardellina, J.., & Boyd, M.R IV-inhibitory and cytotoxic oligostilbenes from the leaves of opea malibato, J. Nat. Prod., 61: Tanaka, T., Ito, T., Nakaya, K., Iinuma, M., Takahashi, Y., Naganawa,., and Riswan, S Six new heterocyclic stilbene oligomers from stem bark of Shorea hemsleyana, eterocycles., 55: Sultanbawa, M.U.S., Surendrakumar, S., Bladon, P., 19. Disthichol an Antibacterial Polyphenol from Shorea disticha, Phytochemistry., 26: shima, Y., Ueno, Y., Ampelopsins D, E, and cis-ampelopsin E, ligostilbenes from Ampelopsis brevipedunculata Var. ancei Roots, Phytochemistry., 33: Kitanaka, S., Takido, M., Mizoue, K., Kondo,., Nakaike, S ligomeric stilbenes from Caragana Chamlagu lamarck root, Chem. Pharm. Bull., 44: Ito, T., Tanaka, T., Ido, Y., Nakaya, K., Iinuma, M., & Riswan, S Four new stilbenoid C- glucosides isolated from the stem bark of Shorea hemsleyana, Chem. Pharm. Bull., 4: Muharini, R., akim, E.., Achmad, S.A., Aim, N., Makmur, L., Syah, Y.M., Juliawaty, L.D., Kitajima, M. and Takayama, Davidiol A, A Stilbenoid Derivative from the Tree Bark of Shorea guiso Blume, Bull. Soc. Nat. Prod. Chem., 2: Rosyidah, K. 2005, Senyawa oligomer resveratrol dari kulit batang Shorea parvifolia Dyer, Tesis S2, Sekolah Pasca sarjana ITB, Bandung., Jayuska, A Senyawa baru hasil degradasi ampelopsin E dan oligomer resveratrol lainnya dari kulit batang Shorea pinanga Scheff, Tesis S2, PPs ITB, Bandung., Fatatik, R Senyawa oligomer resveratrol dari ekstrak aseton kulit batang Shorea mecistopteryx Ridl. (Dipterocarpaceae), Tesis S2, Sekolah Pasca sarjana ITB, Bandung., FMIPA Universitas Lampung