Hopeaphenol, suatu Tetramer Dihidroresveratrol daritumbuhan Shorea multiflora Burck

Transkripsi

1 opeaphenol, suatu Tetramer Dihidroresveratrol daritumbuhan Shorea multiflora Burck Noviany Jurusan Kimia FMIPA, Universitas Lampung Jl. Sumantri BrojonegoroNo. 1 Bandar Lampung Abstract A dihydroresveratrol tetramer, named (-)-hopeaphenol, were isolated from stem bark of Shorea multiflora Burck (Dipterocarpaceae), locally known as Meranti. Their structures were determined by physical data, UV analysis, and IR spectroscopy. Keywords: Dihydroresveratrol tetramer, Dipterocarpaceae, (-)-hopeaphenol, Meranti, Shorea multiflora Burck. Pendahuluan Famili Dipterocarpaceae merupakan salah satu keanekaragaman hayati hutan tropika Indonesia yang sangat berpotensi untuk dikembangkan, karena selain memiliki nilai ekonomi yang tinggi, tumbuhan ini juga memiliki kandungan senyawa kimia yang beraneka ragam yang memperlihatkan berbagai aktivitas biologis yang menarik. Salah satu genus terbesar dalam famili Dipterocarpaceae adalah genus Shorea yang juga dikenal sebagai tumbuhan jenis meranti 1. Sejak dasawarsa terakhir ini, banyak penelitian dilakukan untuk memperoleh senyawa-senyawa polifenal khususnya senyawa golongan stilbenoid, karena senyawa-senyawa tersebut memperlihatkan berbagai bioaktivitas dan efek farmakologi yang menarik, seperti antibakteri 2, anti-leukimia 3, anti-inflamasi 4, fitoaleksin, dan anti-fungal 3,5. Beberapa senyawa turunan fenol telah ditemukan sebelumnya pada tumbuhan Shorea multiflora Burck, diantaranya leukosinidin (1), kaemferol (2), dan asam elagat (3) 6, namun belum pernah dilaporkan mengenai senyawa-senyawa turunan fenol golongan stilbenoid dari spesies ini. Berkaitan dengan penelitian kami mengenai senyawa-senyawa turunan fenol golongan stilbenoid, maka pada kesempatan ini akan diuraikan salah satu hasil penelitian yang berhubungan dengan suatu tetramer stilbenoid, yaitu hopeafenol (4) dari ekstrak aseton kulit kayu tumbuhan Shorea multiflora Burck, Struktur senyawa (4) telah ditetapkan berdasarkan data fisika, seperti titik leleh, putaran optik, dan perbandingan TLC dengan senyawa standar menggunakan beberapa sistem eluen, serta data spektroskopi UV dan IR. (1) (2) 2004 FMIPA Universitas Lampung 91

2 Noviany, opeaphenol, suatu Tetramer (3) (4) Umum Metode Penelitian Pada percobaan ini, titik leleh ditentukan dengan menggunakan alat penetapan titik leleh mikro. Spektrum UV dan IR diukur masing-masing dengan spektrofotometer Varian Cary 100 Conc. dan NE Perkin Elmer. Spektrum 1 dan 13 C NMR diukur menggunakan spek-trometer Bruker AM 300 yang bekerja pada 500, 13 Mz ( 1 ) dan 125,8 Mz ( 13 C), menggunakan TMS sebagai standar internal. Kromatografi vakum cair (KVC) dilakukan menggunakan Si gel Merck 60 GF 254, kromatografi tekan dnegan Si gel merck 60 ( mesh), dan analisis kromatografi lapis tipis (KLT) pada plat aluminium berlapis Si gel Merck Kieselgel 60 F 254, 0,25 mm. Pengumpulan Bahan Tumbuhan Bahan tumbuhan berupa kulit batang Shorea multiflora Burck, dikumpulkan pada bulan Juni 2001 dari Kebun Percobaan Darmaga, Bogor. Bahan tumbuhan ini diidentifikasi oleh erbarium Bogoriense, Lembaga Penelitian dan Pengembangan Biologi, LIPI, Bogor, dan spesimennya tesimpan di herbarium tersebut. Ekstraksi dan Isolasi Kulit batang yang telah dikeringkan dan digiling (7 kg), dimaserasi dengan aseton. Setelah pela-rut diuapkan pada tekanan rendah, diper-oleh ekstrak aseton berupa residu ber-warna coklat (180 g). Ekstrak aseton di-larutkan dalam metanol kemudian dipar-tisi dengan n-heksana. Setelah pelarut diuapkan pada tekanan rendah diperoleh ekstrak metanol berupa residu berwarna coklat (60 g). Ekstrak metanol dilarutkan kembali dalam aseton kemudian difrak-sinasi tiga kali berturutturut dengan kromatografi vakum cair (200 g, 7 cm x 10 cm) menggunakan eluen n-heksana, campuran n-heksana-etil asetat, etil ase-tat, dan metanol dengan kepolaran yang terus ditingkatkan, menghasilkan 28 fraksi. Penggabungan fraksi-fraksi terse-but berdasarkan analisis KLT mengha-silkan tujuh fraksi utama. Salah satu fraksi utama pertama yang merupakan ga-bungan fraksi (300 mg) difrak-sinasi berulang kali menggunakan kroma-tografi radial dengan eluen n-heksana-aseton (55:46) diperoleh dua fraksi utama. Selanjutnya dari fraksi utama kedua yang merupakan gabungan fraksi 25-32, diperoleh padatan berwarna kuning pucat (45 mg) yang pada kristalisasi dari campuran kloroform-metanol menghasilkan serbuk berwarna kuning muda (20 mg). Pada uji FMIPA Universitas Lampung

3 KLT dengan menggunakan tiga sistem eluen menghasilkan noda yang homogen. opeafenol (4): diperoleh sebagai serbuk berwarna kuning muda, titik leleh 274 o C (terurai); [α] D 20 : -313 o (c.0,1 Me); IR (KBr) ν maks 3335 cm -1 (), 2910 (Califatik), 1615, 1600, 1516, 1456 cm -1 (aromatik); UV (Me) λ maks (log ε); 203 (1,17), 231 (0,49), 280 (0,23) nm; (Me + Na) 205 (2,12), 251 (0,49), 281 (0,36) nm. asil dan Pembahasan opeafenol (4) : diperoleh sebagai serbuk berwarna kuning muda, dengan titik leleh 274 o C (terurai), dan putaran optik: -313 o (c.0,1 Me). Spektrum UV senyawa 4 memperlihatkan λ maks (Me) pada 203 (1,17), 231 (0,49), 280 (0,23) nm, yang mengindikasikan adanya kromofor fenolik yang tidak mengalami pergeseran batokromik pada penambahan Na. Sedangkan spektrum IR memperlihatkan adanya pita-pita serapan untuk gugus hidroksil pada ν maks 3335 cm -1, adanya pita serapan untuk C-alifatik pada 2910 cm -1, dan cincin benzena tersubstitusi para pada 1615, 1600, 1516, 1456 cm -1. Data UV dan IR di atas memperlihatkan pola serapan yang khas dan karakteristik untuk suatu senyawa turunan fenol khususnya oligomer stlbenoid. Senyawa hasil isolasi kedua ini sudah dikenal sebelumnya, dan ditemukan pada sebagaian besar genus Shorea, sehingga penetapan strukturnya dilakukan dengan pembandingan data spektrum UV dan IR serta perbandingan data fisika dan KLT dengan menggunakan tiga sistem eluen antara senyawa hasil isolasi dengan hopeafenol standar yang berhasil diisolasi dari Shorea selanica Blume, dan telah berhasil ditetapkan strukturnya dengan bantuan spektroskopi massa, 1 -NMR, 13 C-NMR, dan NMR dua dimensi (2D) 7. Gambar 1. Perbandingan spectrum UV antara senyawa hasil isolasi (1A) dengan hopeafenol standard (1B) 2004 FMIPA Universitas Lampung 93

4 Noviany, opeaphenol, suatu Tetramer Pada perbandingan KLT antara senyawa hasil isolasi dengan hopeafenol standar dengan menggunakan eluen n-heksana : aseton (1:1, Rf: 0,3), kloroform : metanol (75:25, Rf: 0,4), dan metilen klorida : aseton (1:1, Rf: 0,5) memberikan nilai Rf yang sama dan noda yang homogen. Demikian pula dengan perbandingan data spektrum UV (Gambar 1) dan IR (Gambar 2) antara senyawa hasil isolasi dengan hopeafenol standar, memperlihatkan pola-pola serapan yang sama dan identik dengan derajat kesesuaian sebesar 98%. Berdasarkan uraian diatas, dapat disimpulkan bahwa senyawa hasil isolasi adalah senyawa hopeafenol. Uji aktivitas biologis senyawa hopeafenol, sudah pernah dilakukan oleh peneliti sebelumnya terhadap Artemia salina dengan menggunakan metode brine shrimp lethality test 8, uji tersebut memperlihatkan aktivitas sitotoksik dengan harga LC 50 = 191,6 µg/ml untuk hopeafenol, sedangkan bioassay menggunakan sel tumor P-388 menunjukkan sifat sitotoksik dengan harga IC 50= 2,91 µg/ml 7. Gambar 2. Perbandingan spectrum IR antara senyawa hasil isolasi (2A) dengan hopeafenol standard (2B) Kesimpulan Pada penelitian terhadap tumbuhan S. multiflora Burck telah berhasil ditemukan tetramer stilbenoid, yaitu hopeafenol (4). Senyawa 4 sebelumnya telah ditemukan pula pada S. selanica Blume 7, S. seminis 9, S. leprosula Miq. 10, S. pinanga, 11 S. balangeran, dan S. hemsleyana 12. Ditemukannya hopeafenol (4) pada spesies ini juga memperkuat pendapat Madhav, dkk. yang menyatakan bahwa senyawa hopeafenol merupakan chemical marker dalam famili Dipterocarpaceae FMIPA Universitas Lampung

5 Ucapan Terimakasih Terimakasih disampaikan kepada Ibu Dr.Euis olisotan akim, Bapak Prof. Dr. Sjamsul Arifin Achmad, dan rekanrekan kelompok peneliti Kimia rganik Bahan Alam, Departemen Kimia FMIPA, ITB, juga kepada Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi, Departemen Pendidikan Nasional, atas bantuan dana BPPS. Terimakasih disampaikan pula kepada Kebun Percobaan Darmaga Bogor dan erbarium Bogoriense, Bogor, yang telah membantu mengidentifikasi spesimen tumbuhan. Daftar Pustaka 1. eyne, K Tumbuhan Berguna Indonesia. Vol. II. Balai Kehutanan Indonesia Sultanbawa, M.U.S., Surendrakumar, S., Bladon, P., 1987 Distichol, An Antibacterial Polyphenol from Shorea disticha. Phytochemistry, 26(3), Dai, J.R., allock, Y.F., Cardellina, J..., Boyd, M.R IV- Inhibitory and Cytotoxicity ligostilbenes from the Leaves of opea malibato. J. Nat. Prod., 61, uang, K., Mao, L., dan Cheng, G.-F Anti-inflammatory Tetramers of Resveratrol from the Roots of Vitis amurensis and the Con-formations of the Seven Membered Ring in Some ligostilbenes. Phytochemistry, 58, Bokel, M., Diyasena, M.N.C., Leslie Gunatilaha, A.A. dan Sothees-waran. S Canaliculatol, An Antifungal Resveratrol Trimer from Stemonoporous canaliculatus. Phytochemistry, 27 (2), egnaeur, R Chemotaxonomic Der Planzen. Birkauser Band 4, Verlag Basel und Stuttgart Tukiran, Achmad, S.A., akim, E.., Syah, Y.M., Makmur, L., Mujahidin, D., Takeya, K opeaphenol, a Dehydroresveratrol Tetramer from Indonesian Shorea selanica Blume (Dipterocarpacaeae). Internasional Seminar on Natural Products Chemistry and Utilization of Natural Resources, Jakarta, Indonesia, Abstr., P12A, Meyer, B.N., Mc Laughlin, J.L dan Ferrigni, N.R Brine Shrimp: a Convenient General Bioassay for Active Natural Plant Compounds. Planta Medica, 45, Aminah, N.S., Achmad, S.A., Aimi, N., akim, E.., Syah, Y.M., Makmur, L., Juliawaty, L.D., Kitajima, M., Mujahidin, D., Takayama, ligomer Stilbenoids: α- Viniferin, opeaphenol, and Related Compounds from Shorea seminis V.Sl. (Dipterocarpaceae), Padang, Indonesia, Abstr. P A06, Adiwinata, I.N Senyawa ligomer Stilben dari Kulit Batang Shorea leprosula Miq. Tesis S-2, ITB, Bandung, Jayuska, A Senyawa Baru asil Degradasi Ampelopsin-E dan Resveratrol ligomer Lainnya dari Kulit Batang Shorea pinanga Scheff. Tesis S-2, ITB, Bandung, Ito, T., Tanaka, T., Ido, Y., Nakaya, K-I., Iinuma, M., Riswan, R Stilbenoids Isolated from Stem Bark of Shorea hemsleyana, Chem. Pharm. Bull., 48(7) Madhav, R., Seshdari, T.R., Subramanian, G.B.V Identity of Polyphenol of Shorea species with opeaphenol, Phytochemistry, 6, FMIPA Universitas Lampung 95