MODIFIKASI PORI HIDROKSIAPATIT DARI TULANG IKAN ALU-ALU (Sphyraena barracuda) MUHAMMAD WAHYU HIDAYAT

Transkripsi

1 MODIFIKASI PORI HIDROKSIAPATIT DARI TULANG IKAN ALU-ALU (Sphyraena barracuda) MUHAMMAD WAHYU HIDAYAT DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2012

2 ABSTRAK MUHAMMAD WAHYU HIDAYAT. Modifikasi Pori Hidroksiapatit dari Tulang Ikan Alu-alu (Sphyraena barracuda). Dibimbing oleh IRMA HERAWATI SUPARTO dan SARYATI. Hidroksiapatit (HAp) ialah biomaterial penting yang digunakan dalam implantasi biomedis. Penelitian HAp berpori saat ini banyak dikembangkan terutama membuat luas permukaan pori yang besar agar sifat osteokonduktivitas dan kekuatan adsorbsinya menjadi sangat baik. Sumber HAp dapat berasal dari tulang ikan karena mempunyai kadar kalsium dan fosforus yang cukup tinggi dalam bentuk mineral apatit. Oleh karena itu, tujuan penelitian ini ialah memodifikasi HAp berpori dari tulang ikan alu-alu (Sphyraena barracuda) dengan menambahkan porogen pati. HAp dibentuk dengan pemanasan pada suhu 500, 750, 1000, 1250, 1300, dan 1350 ºC. Konsentrasi pati yang digunakan sebagai porogen ialah 5, 10, 20, 40, dan 60% b/b. Hasil pola difraksi sinar-x menunjukkan sudah terdapat fase HAp pada tepung tulang ikan, namun kristalinitasnya masih rendah dan masih terdapat fase-fase lain selain HAp. Fase HAp dengan kristalinitas yang baik terbentuk pada suhu ºC. Berdasarkan analisis fotoelektron mikroskop, pori dengan keseragaman yang baik ( µm) dihasilkan dari modifikasi menggunakan material tulang ikan dengan konsentrasi pati 10%. Kata kunci : hidroksiapatit (HAp), tulang ikan, modifikasi pori, pati ABSTRACT MUHAMMAD WAHYU HIDAYAT. Modification of Hidroxyapatite Pores by Using Alu-alu (Sphyraena barracuda) Fish Bone. Supervised by IRMA HERAWATI SUPARTO and SARYATI. Hydroxyapatite (HAp) is an important material used in biomedical implants. Currently, porous HAp is widely explored. Large pores surface improve osteoconductivity and adsorption strength. Fish bone can be used as source of HAp since it has high level of calcium and phosphorus in the form of mineral apatite. Therefore, the objective of this study was to modify porous Hap from alualu (Sphyraena barracuda) fish bone with starch as the porogen. HAp was formed at temperature of 500, 750, 1000, 1250, 1300, and 1350 ºC. cconcentrations of starch used for porogen were 5, 10, 20, 40, and 60% w/w. X-ray diffraction pattern indicated that HAp was formed in the initial powder fish bone but it had low crystalinity and some impurities. HAp phases with good crystallinity were formed at temperatures of ºC. Electron microscope photographs showed pores with good uniformity was exhibited in the modification using fish bone material with starch concentration of 10%; the sizes were μm. Keyword: hydroxyapatite (HAp), fishbone, pore modification, starch

3 MODIFIKASI PORI HIDROKSIAPATIT DARI TULANG IKAN ALU-ALU (Sphyraena barracuda) MUHAMMAD WAHYU HIDAYAT Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains pada Departemen Kimia DEPARTEMEN KIMIA FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2012

4 Judul : Modifikasi pori Hidroksiapatit dari Tulang Ikan Alu-alu (Sphyraena barracuda) Nama : Muhammad Wahyu Hidayat NIM : G Menyetujui Pembimbing I, Pembimbing II, Dr dr Irma Herawati Suparto, M S Dra Saryati NIP NIP Mengetahui Ketua Departemen Kimia Prof Dr Ir Tun Tedja Irawadi, M S NIP Tanggal lulus :

5 PRAKATA Puji dan syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat dan karunia-nya yang berlimpah sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmiah ini. Penelitian ini dilaksanakan dari bulan Februari sampai Juni 2012 yang bertempat di Laboratorium Kimia Anorganik, Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA), Institut Pertanian Bogor (IPB) serta Laboratorium Pusat Teknologi Bahan Industri Nuklir (PTBIN-BATAN) Serpong. Penulis mengucapkan terima kasih kepada yang terhormat Ibu Dr dr Irma Herawati Suparto, MS selaku pembimbing satu, Ibu Dra Saryati selaku pembimbing kedua dan Bapak Sulistioso Giat Sukaryo, MT atas petunjuk dan bimbingan yang telah diberikan kepada penulis selama penelitian dan penyusunan karya ilmiah ini. Terima kasih kepada Bapak Syawal, Bapak Caca, Bapak Mul, dan Mba Nurul yang telah membantu penulis dalam pemakaian alat dan bahan di Laboratorium Kimia Anorganik Departemen Kimia FMIPA IPB. Ungkapan terima kasih kepada Ibu, Bapak, dan adikku dan seluruh keluarga atas dukungan dan kasih sayangnya. Ucapan terima kasih kepada Vanny, Siti Hapsah, dan teman-teman seperjuangan kimia angkatan 45 serta teman-teman kontrakan yang telah memberikan semangat, motivasi dan dorongan dalam menyusun karya ilmiah ini. Semoga tulisan ini dapat bermanfaat bagi penulis maupun bagi pembaca. Bogor, Juni 2012 Muhammad Wahyu Hidayat

6 RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Jakarta pada tanggal 28 Agustus 1990 dari ayah Slamet Effendi dan ibu Wahyuni Latifah. Penulis merupakan putra pertama dari tiga bersaudara. Tahun 1996, penulis menimba ilmu di Sekolah Dasar Negeri (SDN) 05 Pagi Jakarta Timur yang selanjutnya pada tahun 1998 berpindah tempat ke SDN Peneket Kebumen Jawa Tengah. Pendidikan SD selesai pada tahun 2002 dan pada tahun 2005 menyelesaikan sekolahnya di MTsN 20 Jakarta Timur. Tahun 2008, penulis lulus dari Sekolah Menengah Atas Negeri 89 Jakarta Timur dan pada tahun yang sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB. Penulis memilih Program Studi Kimia, Departemen Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam IPB. Penulis juga pernah mengikuti kegiatan Praktik Lapangan di PT Rajawali Hyoto Bandung yang bergerak dalam bidang industri cat pada bulan Juli sampai Agustus 2011.

7 DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL... viii DAFTAR GAMBAR... viii DAFTAR LAMPIRAN... viii PENDAHULUAN... 1 METODE... 3 Bahan dan Alat... 3 Lingkup Kerja... 3 Preparasi dan Pemanasan Tulang Ikan... 3 Uji Kadar Kalsium dan Fosfor... 3 Modifikasi Pori HAp Menggunakan Pati sebagai Porogen... 3 Analisis Perubahan Fase dengan Differential Thermal Analysis... 3 HASIL DAN PEMBAHASAN... 3 Tulang Ikan... 3 Pembentukan Hidroksiapatit... 5 Modifikasi Pori... 7 SIMPULAN DAN SARAN... 5 Simpulan... 5 Saran... 5 DAFTAR PUSTAKA... 9 LAMPIRAN... 11

8 DAFTAR TABEL Halaman 1 Rendemen tulang ikan setelah pemanasan pada berbagai suhu Ukuran pori yang dihasilkan setelah modifikasi menggunakan pati DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Ikan alu-alu (Sphyraena barracuda) ( 3 2 Kurva differential thermal analysis tulang ikan alu-alu Pola difraksi sinar-x tulang ikan alu-alu awal Pola difraksi sinar-x tulang ikan pada berbagai suhu Pola difraksi sinar-x HAp tulang ikan alu-alu dengan HAp komersil Pola difraksi sinar-x tulang ikan suhu 750ºC 3 jam dan 6 jam Foto SEM HAp tulang ikan alu-alu Perbandingan foto SEM HAp komersil dan HAp hasil modifikasi pori Pola difraksi sinar-x HAp hasil modifikasi pori menggunakan tulang ikan dengan pati 10% DAFTAR LAMPIRAN Halaman 1 Bagan alir penelitian Data JCPDS Data analisis hasil XRD Perhitungan kadar kalsium dan fosfor Foto SEM HAp hasil modifikasi pori Contoh perhitungan ukuran pori Gambar tulang ikan alu-alu... 28

9 PENDAHULUAN Hidroksiapatit (HAp) dengan rumus kimia Ca 10 (PO 4 ) 6 (OH) 2 adalah salah satu komponen anorganik yang merupakan jaringan keras pada jaringan hidup seperti tulang dan gigi (Afshar et al. 2003). HAp ialah material penting yang banyak digunakan dalam implantasi biomedis untuk jaringan tulang karena memiliki sifat biokompatibilitas yang tinggi. HAp ini dapat berikatan kuat dengan tulang, membentuk lapisan pada permukaan jaringan tulang, dan mempercepat pembentukan tulang pada permukaan yang diimplantasi (Pang & Zhitomirsky 2005, Maachou et al. 2008). Saat ini telah banyak dilakukan penelitian sintesis HAp berpori yang digunakan dalam aplikasi biomedis, yaitu untuk regenerasi jaringan tulang, proliferasi sel, dan penyalut obat. HAp berpori digunakan dalam rekayasa jaringan tulang sebagai bahan pengisi untuk cacat tulang dan augmentasi, materi graft tulang buatan, dan operasi revisi prostesis. Luas permukaan yang besar pada HAp berpori menyebabkan sifat osteokonduktivitas dan kekuatan adsorbsinya menjadi sangat baik sehingga pertumbuhan jaringan tulang baru menjadi semakin cepat (Sopyan et al. 2007). Banyak sekali manfaat dari HAp berpori, yaitu diantaranya dapat digunakan untuk melapisi logam pen. Material ini memiliki sifat biokompatibilitas yang tinggi pada jaringan manusia karena komposisinya mirip dengan material tulang (Sopyan et al. 2007). Jaringan tulang akan tumbuh dalam pori HAp secara perlahan setelah proses implantasi (Khosino et al. 2001). Pori minimum yang dibutuhkan untuk pertumbuhan pada jaringan tulang sekitar µm pada makropori (Sopyan et al. 2007). Osteokonduksi masih bisa terjadi pada pori kecil, yaitu 50 µm (Chang et al. 2000). Faktor suhu juga sangat berpengaruh terhadap kemurnian HAp dan pori yang dihasilkan (Juraida et al. 2001). Porogen yang akan digunakan untuk memodifikasi pori Hap adalah pati. Al- Sokanee et al (2009) telah berhasil menggunakan pati sebagai porogen. HAp berpori dengan pati berhasil dilakukan pada HAp yang berasal dari tulang sapi untuk pembuatan pori scaffold pada aplikasi biomedis. Penggunaan pati sebagai porogen diharapkan dapat memodifikasi pori HAp menjadi ukuran yang diharapkan. Pembentukan struktur pori dengan porogen partikel volatil yang akan hilang dengan pemanasan pada proses sintering. Proses penghilangan porogen volatil ini terjadi secara fisik seperti vaporasi dan sublimasi. Pori yang terbentuk biasanya mendekati makropori dengan variasi ukuran pori 0, µm (Aoki et al. 2004). Lyckfeldt & Ferreira (1998) menyebutkan bahwa pori yang terbentuk dari pati kentang sebagai porogen HAp sekitar µm. Beberapa penelitian menyebutkan bahwa pada pori µm, osteoblas berkolonisasi pada pori, fibrovaskular mulai tumbuh dan akhirnya membentuk tulang yang baru (Schuth et al. 2002). Penelitian sebelumnya mengenai HAp berpori telah dilakukan oleh Romawarni (2011) menggunakan bahan dasar cangkang telur. Akan tetapi, pori yang dihasilkan masih terlalu kecil, yaitu sekitar 1 µm. Sintesis HAp juga bisa dilakukan menggunakan bahan dasar lain, yaitu tulang sapi (Bahrololoom et al. 2009), cangkang kerang (Zhang &Vecchio 2005), dan tulang ikan (Prabakaran & Rajeswari 2006). Sumber HAp yang akan dilakukan dalam penelitian ini berasal dari tulang ikan. Tulang ikan merupakan bahan dasar keramik murah yang potensial di masa depan karena bersumber dari sampah pengolahan ikan (Suzuki & Ozawa 2002), mengingat makin maraknya restoran-restoran Jepang di Indonesia. Menurut Kartono dan Soekatri (2004), ikan dan makanan sumber laut mengandung kalsium lebih banyak dibanding daging sapi maupun ayam. Beberapa literatur menyebutkan tulang ikan sejenis lele mengandung 36.17% kalsium dan 18.30% fosfor, sedangkan tulang ayam mengandung 35.6% kalsium dan tulang sapi mengandung 35.38% (Orban & Roland 1992). Tulang ikan juga sudah merupakan mineral apatit dan kandungan fosfor di dalamnya diharapkan menghasilkan HAp lebih murni. Hal ini menguntungkan karena tidak diperlukan penambahan fosfor dari luar sehingga menjadi lebih ekonomis. Tulang ikan yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu tulang ikan alu-alu (Sphyraena barracuda) yang merupakan jenis ikan laut. Proses pembuatan HAp dari tulang ikan sejenis lele pada pemanasan suhu tinggi, yaitu 1100 ºC menghasilkan HAp dengan sifat yang baik dan sedikit pengotor (Juraida et al. 2001). Pemanasan yang dilakukan pada penelitian ini dilakukan pada berbagai suhu berkisar antara ºC. Pemanasan ini dilakukan untuk mencari suhu optimum untuk memperoleh HAp dengan kristalinitas yang baik. Pemanasan juga dilanjutkan hingga suhu 1350 ºC untuk membuktikan munculnya

10 trikalsium fosfat (TCP) yang merupakan fase lain dari HAp pada pemanasan tulang ikan pada suhu 1300 ºC (Ozawa & Suzuki 2002). Penelitian ini bertujuan untuk memodifikasi pori HAp dari ikan alu-alu (Sphyraena barracuda) dengan menggunakan variasi suhu dan variasi konsentrasi porogen pati. Hasil penggunaan tulang ikan sebagai bahan dasar biomaterial HAp diharapkan memberi manfaat tambahan untuk bidang biomedis dan dapat meningkatkan nilai ekonominya. METODE Bahan dan Alat Alat-alat yang digunakan adalah peralatan kaca, mortar, kikir, sonikator, tanur, alat kompaksi, plat penangas, vorteks, spektroftometer UV-Vis, x-ray diffraction (XRD), scanning electron microscope (SEM), mikroskop optik, differential thermal analyzer (DTA), dan spektroskopi serapan atom (SSA). Bahan-bahan yang digunakan adalah tulang ikan alu-alu (Sphyraena barracuda), HAp komersial dari MERCK dan Taihe, pati singkong, aseton, HCl 25%, LaCl 3, amonium molibdat 0.1%, dan amonium vanadat 0.5%, dan air bebas ion. Lingkup Kerja Penelitian ini terdiri dari tiga tahapan. Tahap pertama preparasi dan pemanasan tulang ikan, serta uji kadar kalsium dan fosfor. Tahap kedua adalah modifikasi pori HAp menggunakan pati sebagai porogen. Tahap ketiga adalah analisis perubahan fase dengan differential thermal analysis (DTA). Diagram alir penelitian pada Lampiran 1. Preparasi dan Pemanasan Tulang Ikan Tulang ikan alu alu diperoleh dari Jalan Pasar Ikan Jakarta Utara. Tulang ikan dibersihkan dan direbus sampai bersih dari daging yang masih tersisa, kemudian tulang ikan dipotong per ruas. Tulang ikan yang telah bersih direndam menggunakan aseton dengan disonikasi selama 1 jam dan dikeringkan pada suhu ruang. Tulang ikan yang telah kering diberi perlakuan terhadap suhu yang berbeda, yaitu suhu ruang (tanpa pemanasan) dan dipanaskan pada suhu 500 C, 750 C, 1000 C, 1250 C, 1300 C, dan 1350 C selama 3 jam sehingga diperoleh serbuk tulang ikan yang berwarna putih. Serbuk tulang ikan selanjutnya dilakukan analisis pencirian menggunakan XRD dan SEM untuk analisis HAp yang terbentuk dan kristalinitas. Hasil yang diperoleh dibandingkan dengan HAp komersil dan data standar HAp pada Joint Committee on Powder Diffraction Standards (JCPDS). Uji Kadar Kalsium dan Fosfor (BPT 2005) Sebanyak g contoh yang telah dihaluskan ke dalam labu takar volume 100 ml, kemudian ditambahkan 10 ml HCl 25 % dengan pipet volume 10 ml. Sampel dipanaskan pada plat penangas sampai larut sempurna dan dididihkan selama 15 menit. Larutan tersebut diencerkan dengan air bebas ion dan setelah dingin volume ditepatkan sampai tanda tera 100 ml, kemudian dikocok bolak balik dengan tangan sampai homogen dan disaring untuk mendapatkan ekstrak jernih. Kadar Ca diukur menggunakan metode SSA, yaitu sebanyak 1 ml ekstrak total dipipet ke dalam tabung dan ditambahkan 9 ml air bebas ion. Sebanyak 1 ml larutan LaCl ppm ditambahkan masingmasing ke dalam 10 ml ekstrak encer dan deret standar Ca (0, 2.5, 5, 10, 15, 20, dan 25 ppm), dikocok sampai homogen dengan vorteks. Selanjutnya diukur dengan SSA. Kadar fosfor ditentukan sebagai fosfat diukur secara spektrometri dari senyawa kompleks (berwarna kuning) yang terbentuk hasil reaksi dari ortofosfat dengan amonium molibdat dan vanadat. Sebanyak 1 ml ekstrak jernih atau filtrat diambil dan dibuat deret standar P ( 0, 50, 100, 200, 300, 400, dan 500 ppm) masing-masing ke dalam tabung reaksi. Selanjutnya ditambahkan masing-masing 9 ml pereaksi campuran (amonium molibdat 0.1% dan amonium vanadat 0.5%), kocok hingga homogen dengan vorteks. Pengukuran spektrofotometer pada panjang gelombang 466 nm dengan deret standar P sebagai pembanding. Modifikasi Pori HAp dengan Porogen Pati (modifikasi Al-Sokanee et al. 2009) Serbuk pati digunakan sebagai porogen dengan mencampurkan HAp yang telah dibentuk pada suhu terendah. Pati ditambahkan dengan perbandingan jumlah pati 5%, 10%, 20%, 40%, dan 60% b/b terhadap 1.5 g HAp. Campuran serbuk tersebut selanjutnya dibuat pelet menggunakan mesin kompaksi dengan tekanan 4000 psi, dan dipanaskan pada suhu 600 ºC selama 2 jam untuk menghilangkan

11 pati. Selanjutnya, pemanasan dilanjutkan pada suhu 750 ºC untuk meningkatkan matriks pori yang telah termodifikasi. Struktur pori selanjutnya diamati menggunakan SEM. Perlakuan di atas dilakukan juga pada sampel yang masih berbentuk tulang ikan (belum dipanaskan). Setelah dipanaskan selama 2 jam pada suhu 600 ºC, maka pemanasan dilanjutkan pada suhu 750 ºC untuk meningkatkan matriks pori yang telah termodifikasi. Struktur pori selanjutnya diamati menggunakan SEM. Komposisi dengan hasil pori terbaik diuji fasenya menggunakan XRD. Analisis Perubahan Fase dengan Differential Thermal Analysis Serbuk tulang ikan sebelum perlakuan pemanasan ditimbang sebanyak 2 g dan dimasukkan ke dalam sample holder. Kemudian alat dijalankan dengan laju kenaikan suhu pemanas DTA pada 10 ºC per menit. Suhu pada saat awal mulai dari 0 ºC dan suhu akhir pada 800 ºC. Perbedaan suhu yang terjadi direkam selama proses pemanasan dan pendinginan. Lalu ditampilkan dalam bentuk kurva entalpi. Kurva DTA dapat menangkap transformasi saat penyerapan ataupun pelepasan panas. DTA membantu memahami hasil XRD, analisis kimia, dan mikroskopis. HASIL DAN PEMBAHASAN Tulang Ikan Tulang ikan merupakan bahan mineral alami yang bisa digunakan sebagai material pembentuk HAp. Hidroksiapatit dibentuk dari proses pemanasan pada material tulang ikan (Prabakan et al. 2006), hal ini merupakan suatu metode sederhana dan murah yang bisa dilakukan sehingga diharapkan meningkatkan nilai ekonomi dari tulang ikan. Selain unsur Ca dan P, tulang ikan juga mengandung unsur Na, Mg, K, Sr (Boutinguiza et al 2012, Ozawa & Suzuki 2002). Berdasarkan kandungan yang dimiliki tulang ikan maka HAp bisa terbentuk oleh proses pemanasan pada suhu tinggi agar menghasilkan kristal yang semakin baik. Penelitian ini menggunakan tulang ikan laut alu-alu untuk menghasilkan HAp. Klasifikasi ikan alu-alu adalah filum Pisces, kelas Actinopterygii, ordo Perciformes, subordo Scombroidei, family Sphyraenidae, genus Sphyraena, spesies Sphyraena barracuda (Luna & Susan 2010). Gambar 1 menunjukkan bentuk ikan alu alu. Gambar 1 Ikan alu-alu (Sphyraena barracuda) ( Ikan ini memiliki nama umum great barracuda, sedangkan nama lokalnya di Indonesia adalah alu-alu (Jawa). Ikan alu-alu termasuk dalam ikan pelagis besar yang memiliki dimensi panjang total cm dan panjang maksimum hingga cm (Mojeta 1992) dengan berat maksimum 48 kg (106 lbs) (Bailey et al. 2001). Kadar Ca pada tulang ikan ini ditentukan menggunakan SSA dan diperoleh dalam bentuk CaO, yaitu 59.11%. Kadar P ditentukan menggunakan spektometri dari senyawa komplek dan terukur sebagai P 2 O 5 sebesar 44.20%, sehingga kadar yang terukur pada tulang ikan alu-alu setelah konversi, yaitu Ca sebesar 42.22% dan kadar P sebesar 9.63% (Lampiran 4). Kadar Ca dan P yang didapatkan dari tulang ikan alu-alu ini lebih tinggi dari yang diperoleh Boutinguiza et al. (2012) menggunakan ikan tuna dengan kandungan Ca, yaitu % dan kadar P sebesar %, sedangkan tulang ikan sejenis lele mengandung 36.17% Ca dan 18.30% P (Orband & Roland 1992), dan 37.60% Ca, 18.70% P pada beberapa spesies ikan yang dikoleksi dari limbah seafood di Jepang (Ozawa & Suzuki 2002). Gambar 2 menunjukkan hasil dari DTA serbuk tulang ikan. DTA merupakan analisis termal yang mengukur perbedaan temperatur antara sampel yang akan diukur dan material inert sebagai referensi. Sampel dan material

12 4 Gambar 2 Kurva differential thermal analysis tulang ikan alu-alu. referensi dipanaskan dalam satu dapur yang berisi lingkungan gas yang telah distandarisasi. Perbedaan temperatur yang terjadi direkam selama proses pemanasan dan pendinginan. Lalu ditampilkan dalam bentuk kurva entalpi. Kurva DTA dapat menangkap transformasi saat penyerapan ataupun pelepasan panas. Kurva DTA merupakan kurva perbedaan temperatur antara sampel dengan referensi terhadap waktu (Klančnik 2010). Hasil tersebut menggambarkan bahwa pada proses pemanasan tulang ikan alu-alu dari suhu ºC, tulang ikan kehilangan bobot secara perlahan dari suhu ºC yang menggambarkan hilangnya air. Pada suhu ºC, kehilangan sedikit berat yang mungkin disebabkan karena hilangnya komponen gabungan antara air dan organik. Kehilangan bobot secara drastis pada suhu ºC, selanjutnya terus turun secara periodik sampai suhu 800 ºC. Hal ini mengambarkan bahwa banyaknya komponen organik pada tulang ikan seperti kolagen, jaringan lemak dan protein yang berasosiasi dengan tulang yang menghilang pada suhu pemanasan ºC. Hilangnya sedikit berat pada suhu ºC menggambarkan proses dekomposisi fase karbonat pada tulang yang berubah menjadi karbonat apatit (Al- Sokanee et al. 2009). Kurva DTA yang dihasilkan ini tidak bisa menggambarkan suhu titik leleh, suhu titik uap, dan suhu transisi gelas karena kurva yang terbentuk hanya merupakan garis yang bergerak linear terhadap suhu pemanasan. Hasil difraksi sinar-x terhadap tulang ikan sebelum pemanasan ditunjukan pada Gambar 3. Gambar 3 Pola difraksi sinar-x tulang ikan alu-alu awal. Terdapat empat fase yang terkandung pada tulang ikan awal, yaitu apatit karbonat tipe A (AKA) dengan rumus molekul (Ca 10 (PO 4 ) 6 (CO 3 ) 2 ), apatit karbonat tipe B (AKB) dengan rumus molekul (Ca 10 (PO 4 ) 3 (CO 3 ) 3 (OH) 2 ), dan okta kalsium fosfat (OKF) dengan rumus moleul (Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6.5H 2 O). Fase tersebut muncul karena kandungan tulang ikan awal sudah merupakan mineral apatit dengan kristalinitas yang rendah (Ozawa & Suzuki 2002).

13 5 Pembentukan Hidroksiapatit Hidroksiapatit (HAp) dalam penelitian ini dibentuk dengan memanaskan tulang ikan pada variasi suhu 500, 750, 1000, 1250, 1300, dan 1350 ºC selama 3 jam. Variasi suhu ini dilakukan untuk mengkarakterisasi suhu pembentukan HAp murni dan sedikit pengotor. Hasil rendemen tulang ikan setelah proses pemanasan pada berbagai suhu dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1 Rendemen tulang ikan setelah pemanasan pada berbagai suhu. menimbulkan fase trikalsium fosfat (TCP) yang muncul pada sudut 2θ º; º, dan º, serta muncul fase AKB pada sudut º (Lampiran 3f). Suhu 1350 ºC juga muncul fase TCP pada sudut 2θ º dan º, fase AKB juga masih terlihat pada sudut 2θ º (Lampiran 3g). Hal ini sesuai dengan pernyataan Ozawa & Suzuki (2002) yang mengungkapkan bahwa fase TCP akan muncul pada pemanasan suhu 1300 ºC. Hasil analisis XRD dari tulang ikan dengan berbagai suhu dapat dilihat pada Gambar 4. Suhu (ºC) Rendemen (%) Tabel 1 menunjukkan rendemen tulang ikan pada berbagai suhu. Rendemen tulang ini menunjukkan bobot relatif tulang ikan setelah dipanaskan terhadap bobot tulang ikan sebelum pemanasan. Nilai rendemen ini cukup tinggi sehingga tulang ikan bisa digunakan untuk memproduksi HAp dalam jumlah banyak dengan jumlah tulang ikan yang tersedia. Pemanasan suhu 500 ºC menghasilkan serbuk tulang ikan yang masih berwarna abuabu, warna tersebut menunjukkan bahwa masih terdapat komponen-komponen organik yang belum hilang selama proses pemanasan pada suhu 500 ºC. Pola difraksi sinar-x pada suhu 500 ºC menunjukkan puncak tertinggi HAp dengan masih terdapat fase lainya, yaitu OKF dan AKA (Lampiran 3b). HAp murni mulai terbentuk pada suhu 750 ºC terlihat dari serbuk yang sudah berwarna putih dan dari pola difraksi sinar-x yang dihasilkan hanya terdapat satu puncak yang menandakan AKA pada sudut 2θ º (Lampiran 3c). Pemanasan pada suhu 1000 ºC menghasilkan pola difraksi sinar-x yang menunjukkan fase HAp pada tiga puncak tertinggi dan fase OKF (Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6.5H 2 O) pada sudut 2θ º (Lampiran 3d). Hasil HAp dengan sifat kristalinitas yang tinggi dibentuk pada suhu 1250 ºC dilihat dari intensitas puncak yang tertinggi, yaitu 154. Namun, HAp yang terbentuk ini juga masih terdapat fase AKB pada sudut 2θ (Lampiran 3e). Pemanasan suhu tinggi hingga 1300 ºC Gambar 4 Pola difraksi sinar-x tulang ikan pada berbagai suhu. HAp yang terbentuk melalui variasi suhu dikarakterisasi dan didapatkan suhu pembentukan optimum yang menghasilkan HAp dengan kristalinitas yang tinggi, yaitu pada 1250 ºC. Suhu 750 ºC dan 1000 ºC juga sudah merupakan fase HAp namun kristalinitasnya lebih rendah dari HAp yang terbentuk pada suhu 1250 ºC. Industri menginginkan suhu yang serendah mungkin dalam membentuk HAp, sehingga diharapkan suhu 750 ºC bisa diterapkan dalam industri untuk menghasilkan HAp yang baik. HAp yang terbentuk pada suhu 1300 ºC dan 1350 ºC tidak semurni HAp yang dihasilkan pada suhu ºC karena muncul fase TCP yang tidak diharapkan. HAp yang terbentuk pada suhu 1250 ºC dibandingkan dengan dua jenis HAp komersil yang ada di pasaran yaitu HAp Taihe Jepang (HAp komersil 1) dan HAp MERCK (HAp komersil 2). Perbandingan pola difraksi sinar- X HAp tulang ikan dan HAp komersil disampaikan pada Gambar 5.

14 6 HAp dari tulang ikan ini ditentukan oleh suhu pemanasan, bukan terhadap lamanya waktu pemanasan. Hasil analisis SEM HAp yang terbentuk dari tulang ikan alu-alu pada pemanasan 750, 1000, 1250, 1300, dan 1350 ºC ditunjukkan pada Gambar 7. (a) Gambar 5 Pola difraksi sinar-x HAp tulang ikan alu-alu dengan HAp komersil. Hasil tersebut menunjukkan bahwa pola difraksi sinar-x HAp hasil pemanasan tulang ikan mendekati HAp komersil 1 (TAIHE) dan memiliki kristalinitas yang lebih baik daripada HAp komersil 2 (MERCK). Hal ini juga membuktikan bahwa HAp dengan kristaliniatas yang baik bisa dihasilkan dari bahan dasar tulang ikan dengan sifat HAp yang tidak kalah jika dibandingkan dengan HAP komersil yang sudah beredar di pasaran Pemanasan terhadap tulang ikan pada suhu 750 ºC juga dilakukan selama 6 jam untuk membuktikan pengaruh lamanya waktu pemanasan terhadap pembentukan fase HAp. Pola difraksi yang dihasilkan dibandingkan dengan pola difraksi sinar-x pada suhu 750 ºC selama 3 jam. Perbandingan pola difraksi sinar-x pada pemanasan suhu 750 ºC selama 3 jam dan 6 jam disampaikan pada Gambar 6. (b) (c) 3.1 µm Tulang ikan 1250ºC 1.3 µm 2.9 µm 1.5 µm (d) 2.9 µm 1.7 µm Gambar 6 Pola difraksi sinar-x tulang ikan suhu 750 ºC 3 jam dan 6 jam. Hasil perbandingan pola difraksi sinar-x pemanasan tulang ikan pada suhu 750ºC selama 3 dan 6 jam menunjukkan hasil yang tidak terlampau berbeda. Hasil pola difraksi sinar-x pemanasan tulang ikan pada suhu 750ºC selama 6 jam (Lampiran 3) menunjukkan fase HAp dengan intensitas yang tidak terlalu tinggi seperti pola difraksi pada waktu pemanasan 3 jam. Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa pembentukan fase (e) 2.1 µm 2.6 µm Gambar 7 Foto SEM HAp tulang ikan alu-alu pada (a) pemanasan suhu 750 ºC, (b) 1000 ºC, (c) 1250 ºC, (d) 1300 ºC, dan (e) 1350 ºC.

15 7 Terdapat pori pada semua foto SEM HAp. Pori dengan ukuran besar 3.1 µm terdapat pada hasil SEM suhu 750 ºC, namun pori yang dihasilkan belum homogen. Suhu 1000 ºC menghasilkan pori yang homogen, namun ukurannya relatif kecil kurang lebih 1.3 µm. Pori dengan ukuran µm dihasilkan dari pemanasan suhu 1250 ºC. Pori seragam dihasilkan dari pemanasan suhu 1300 ºC dengan ukuran µm. Terdapat pori dengan ukuran µm pada pemanasan suhu 1350 ºC. Hasil ini menunjukkan bahwa pemanasan tulang ikan dalam membentuk HAp menghasilkan material berpori seperti yang dilakukan Ozawa & Suzuki (2002) menghasilkan HAp berpori dari limbah tulang ikan dengan ukuran diameter pori lebih besar yaitu µm. Tahap selanjutnya HAp yang didapat pada suhu 750 ºC dimodifikasi porinya menggunakan porogen pati. HAp dengan suhu 750 ºC dipilih untuk dimodifikasi porinya karena pori yang dihasilkan belum homogen serta suhu pembentukan HAp yang rendah sehingga diharapkan bisa diterapkan pada dunia industri. Modifikasi Pori HAp dimodifikasi menggunakan porogen pati. Menurut Kumar (2009) campuran antara HAp dengan pati merupakan suatu metode yang digunakan untuk membentuk material keramik berpori. Pati telah berhasil digunakan sebagai porogen pembentuk pori pada scaffold HAp dengan metode kering (Al-Sokanee et al 2009), dan metode basah (Lei 2005). Pati yang digunakan pada penelitian ini adalah pati singkong. Pati singkong memiliki ukuran granul sekitar 5 µm 35 µm dengan rata-rata ukuran di atas 17 µm. Pati singkong memiliki suhu gelatinasi yang lebih rendah dari pati jenis lain, yaitu berkisar antara ºC (Samsuri 2008). Granul pati singkong akan pecah bila dipanaskan pada suhu gelatinasinya. Granul yang kecil ini diharapkan mampu masuk ke dalam pori HAp dan memodifikasi pori yang terbentuk setelah pati dihilangkan dengan pemanasan di atas suhu gelatinasinya. Modifikasi pori dilakukan terhadap tulang ikan yang telah berubah fase menjadi HAp pada pemanasan 750 ºC dan tulang ikan awal (sebelum pemanasan). Menurut Ozawa & Suzuki (2002), tulang ikan awal sudah memiliki beberapa pori makro pada strukturnya sehingga beberapa organ bisa tumbuh melalui koneksi antara pori mikro dan pori makronya. Hal ini menjadi pertimbangan dalam memodifikasi pori dari bahan tulang ikan awal dengan harapan pori yang terdapat pada tulang ikan awal masih bersifat elastis sehingga pemberian pati akan lebih baik dalam memodifikasi pori HAp dan hasilnya dibandingkan dengan modifikasi pori menggunakan material yang sudah menjadi HAp. Tabel 2 menunjukkan hasil modifikasi pori menggunakan pati pada serbuk HAp yang diperoleh dari suhu 750 ºC dan modifikasi pori dari tulang ikan menggunakan pati. Tabel 2 Ukuran pori yang dihasilkan setelah modifikasi menggunakan pati. Ukuran pori (µm) Pati HAp 750 Tulang ikan (%) + pati + pati 5 < < < 0.5 < < < Ukuran pori yang terbentuk setelah dimodifikasi menggunakan pati menunjukkan bahwa pori yang lebih besar dihasilkan dari modifikasi menggunakan komposisi antara tulang ikan awal dengan pati yang menghasilkan pori paling besar 5 µm. Besarnya ukuran pori yang dihasilkan dari modifikasi menggunakan tulang ikan ini akan menyebabkan semakin luasnya luas permukaan HAp, sehingga interaksi antara HAp dengan tulang akan semakin baik (Prihantoko 2011). Pori yang dihasilkan ini masih lebih kecil dari pori HAp yang dihasilkan dari penelitian Lyckfeldt and Ferreira (1998) yang menghasilkan pori sebesar µm pada material keramik menggunakan metode konsolidasi dengan pati kentang, namun pori pada penelitian ini masih lebih besar dari penelitian Romawarni (2011) yang menghasilkan HAp berpori dengan ukuran ±1 µm. Foto SEM (Lampiran 5) menunjukkan bahwa pori dengan jumlah dan keseragaman yang baik dihasilkan pada konsentrasi 10% pati dengan tulang ikan. Perbandingan foto SEM HAp komersil (perbesaran 2500 ) dan HAp hasil modifikasi pori menggunakan HAp (perbesaran ) dan menggunakan tulang ikan (perbesaran 2500 ) dengan konsentrasi pati 10% dapat dilihat pada Gambar 8.

16 (a) tulang ikan ini selanjutnya dikarakterisasi lagi fasenya menggunakan XRD untuk membuktikan HAp yang telah termodifikasi masih merupakan HAp. Pola difraksi hasil modifikasi pori menggunakan pati 10% pada material tulang ikan bisa dilihat pada Gambar 9. (b) (c) Gambar 9 Pola difraksi sinar-x HAp hasil modifikasi pori menggunakan tulang ikan dengan pati 10%. Hasil pola difraksi ini menunjukkan bahwa fase setelah modifikasi masih merupakan HAp, namun terdapat dua puncak fase OKF pada sudut 2θ 31,239 dan 34,544. Gambar 8 Perbandingan foto SEM (a) HAp komersil dan HAp hasil modifikasi pori menggunakan pati 10% (b) HAp + pati, (c) Tulang ikan + pati. Hidroksiapatit komersil pada foto SEM perbesaran 2500 menunjukan granul bulat namun tidak berpori (Gambar 8a). HAp yang dihasilkan dari tulang ikan sebelum dilakukan modifikasi pori (Gambar 7a) menunjukkan HAp yang sudah merupakan material berpori, namun pori yang dihasilkan belum sesuai yang diharapkan. Pori terbaik yang dihasilkan dari pati 10% dan tulang ikan (Gambar 8c) menghasilkan ukuran pori pada kisaran , jauh lebih besar dari modifikasi menggunakan pati 10% dengan HAp (Gambar 8b) yang hanya menghasilkan pori <5 µm. Pori terbentuk karena pati yang telah dihomogenkan pada bentuk kompaksi HAppati akan hilang selama proses pemanasan dalam membentuk HAp sehingga akan meninggalkan pori (Lyckfeldt & Ferreira 1998). Hasil modifikasi pori terbaik, yaitu dengan pati 10% menggunakan material SIMPULAN DAN SARAN Simpulan Hidroksiapatit dengan kristalinitas yang baik dihasilkan dari pemanasan tulang ikan alu-alu pada pemanasan ºC. Pemanasan yang lebih tinggi, yaitu 1300ºC dan 1350ºC akan membentuk fase lain yang muncul, yaitu trikalsium fosfat. Modifikasi pori yang terbaik dihasilkan pada komposisi tulang ikan yang ditambahkan dengan pati 10%, yaitu menghasilkan ukuran pori sekitar µm. Saran Perlu dilakukan analisis pelapisan HAp berpori hasil modifikasi pada logam dan laju korosinya. Analisis ukuran pori diteliti lebih lanjut menggunakan particle size analysis (PSA) agar hasil yang didapat lebih akurat. Perlu dilakukan uji in-vitro pada HAp yang telah berpori untuk menentukan sifat toksisitasnya.

17 DAFTAR PUSTAKA Afshar A, Ghorbani M, Ehsani N, Saeri MR, Sorrel CC Some important factors in the wet precipitation process of hydroxyapatite. Material and Design 24: Al-Sokanee ZN, Toabi AAH, Al-Assadi MJ, Al-Assadi EA The drug release study of ceftriaxone from porous hydroxyapatite scaffolds. AAPS Pharmacy Science Technology 10(5): Bahrololoom ME, Javidi M, Javadpour S, Ma J Characterisation of natural hydroxyapatite extracted from bovine cortical bone ash. Journal of ceramic Processing Research 10 (2): Bailey J, Gathercole P, Housby T, Moss D, Vaughan B, Williams P The New Encyclopedia of Fishing. The Complete Guide to the Fish, Tackle, Techniques of Fresh and Saltwater Angling. London: Design Revolution, Ltd. Hlm: Boutinguiza M et al Biological hydroxyapatite obtained from fish bones. Journal Materials Science and Engineering C 32: [BPT] Balai Penelitian Tanah Petunjuk Teknis, Analisis Kimia Tanah, Tanaman, Air, dan Pupuk. Bogor: Badan Penelitian dan Pengembangan Pertanian Departemen Pertanian. Chang BS, Lee CK, Hong KS, Youn HJ, Ryu HS, Chung SS, Park KW Osteoconduction at porous hydroxyapatite with various pore configurations. Biomaterials 21: Schuth F, Sing KSW, Weitkamp J. (Eds.) Handbook of Porous Solids, Weinheim: Wiley-VCH. Juraida J, Sontang M, Ghapur EA, Isa MIN Preparation and characterization of hydroxyapatite from fishbone [skripsi]. Department of Physical Sciences, Faculty of Science & Technology, University Malaysia Terengganu. Kartono D, Soekatri M Angka kecukupan mineral : besi, iodium, seng, mangan, selenium. Di dalam: Ketahanan Pangan dan Gizi di Era Otonomi Daerah dan Globalisasi. Widyakarya Nasional Pangan dan Gizi VIII; Jakarta, Mei Jakarta:Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia. Klančnik G Differential thermal analysis (DTA) and differential scanning calorimetry (DSC) as a method of material investigation. Materials and Geoenvironment 57(1): Koshino T, Murase T, Takagi T, Saito T New bone formation around porous hydroxyapatite wedge implanted In opening wedge high tibialosteotomy in patients with osteoarthritis. Biomaterials (22) : Kumar SS Processing of porous hidroxyapatite scaffold [thesis]. Department of Ceramic Engineering National Institute of Technology Rourkela. Lei Y, Xiao-san N, Ke-xin C, Qun-fang X, He-ping Z Preparation of porous hydroxyapatite ceramics with strach additives. Journal Transactions Nonferrous Metal Society of China (5): 2. Luna, Susan M Sphyraena barracuda [terhubung berkala]. mary.php?id=1235&at=barracuda. [17 Februari 2012]. Lyckfeldt O, Ferreira JMF Processing of porous ceramics by starch consolidation. Journal European Ceramics Society 18: Maachou H et al Characterization and in vitro bioactivity of chitosan/ hydroxyapatite composite membrane prepared by freeze-gelation method. Trends in Biomaterials and Artificial Organs 22(1): Mojeta A Simon and Schluster s Guide to Saltwater Fish and Fishing by Angelo Mojeta. New York: Fireside. Hlm 255. Orban JL, Roland DA The effect of varying bone meal sources on phosphorus utilization by 3-week old broiler. Journal Applied Poultry Research 1: Ozawa M, Suzuki S Microstructural development of natural hydroxyapatite originated from fish-bone waste through heat treatment. Journal of American Ceramic Society 85 (5): Pang X, Zhitomirsky I Electrodeposition of composite

18 10 hydroxyapatite chitosan films. Elsevier 94: Prabakaran K, Rajeswari S Development of hydroxyapatite from natural fish bone through heat treatment. Trend Biomaterial Artificial Organ 20(1): Prihantoko DA. Karakterisasi paduan CoCrMo dengan pelapisan titanium nitrida dan hidrosi-apatit kitosan [skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Romawarni A Sintesis dan uji in vitro hidroksiapatit berporogen kitosan dengan metode sol gel [skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Samsuri B Penggunaan pragelatinasi pati singkong suksinat sebagai matriks dalam sediaan tablet mengapung verafamil HCl. [skripsi]. Depok: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Indonesia. Sopyan I, Mel M, Ramesh S, Khalid KA Porous hydroxyapatite for artificial bone applications. Science and Technology of Advanced Materials 8: US Food and Drug Administration Sphyraena barracuda [terhubung berkala]. fety/productspecificinformation/seafood/ RegulatoryFishEncyclopediaRFE/ucm htm.[17 Februari 2012]. Zhang X, Vecchio KS Creation of dense hydroxyapatite (synthetic bone) by hydrothermal conversion of seashells. Materials Science and Engineering C 26 :

19 LAMPIRAN

20 12 Lampiran 1 Bagan alir penelititan Tulang ikan bersih Analisis perubahan fase dengan DTA Kadar Ca & P Dipanaskan pada 500 ºC, 750 ºC, 1000 ºC,1250 ºC 1300 ºC, 1350 ºC XRD & SEM Hidroksiapatit 750 ºC Modifikasi pori menggunakan Pati 5, 10,20,40, dan 60 % SEM Pori terbaik XRD

21 13 Lampiran 2 Data JCPDS a. Data JCPDS Hidroksiapatit Ca 10 (PO 4 ) 6 (OH) 2 b. Data JCPDS Trikalsium Fosfat Ca 3 (PO 4 ) 2

22 14 Lanjutan Lampiran 2 c. JCPDS Apatit Karbonat Tipe A Ca 10 (PO 4 ) 6 (CO 3 ) 2 d. JCPDS Apatit Karbonat Tipe B Ca 10 (PO 4 ) 3 (CO 3 ) 3 (OH) 2

23 15 Lanjutan Lampiran 2 e. JCPDS Oktakalsium Fosfat Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6 5H 2 O

24 16 Lampiran 3 Data analisis hasil XRD a. Data analisis hasil XRD serbuk tulang ikan alu-alu tanpa pemanasan 2θ d(a) Intensitas Fase HAp Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6.5H 2 O Ca 10 (PO 4 ) 3 (CO 3 ) 3 (OH) Ca 10 (PO 4 ) 6 (CO 3 ) Ca 10 (PO 4 ) 6 (CO 3 ) Ca 10 (PO 4 ) 6 (CO 3 ) Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6.5H 2 O Ca 10 (PO 4 ) 3 (CO 3 ) 3 (OH) HAp HAp HAp HAp

25 17 Lanjutan Lampiran 3 b. Data analisis hasil XRD serbuk tulang ikan alu-alu 500ºC 3 jam 2θ d(a) Intensitas Fase Ca 10 (PO 4 ) 6 (CO 3 ) Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6.5H 2 O Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6.5H 2 O Ca 10 (PO 4 ) 6 (CO 3 ) HAp Ca 10 (PO 4 ) 6 (CO 3 ) HAp HAp HAp HAp

26 18 Lanjutan Lampiran 3 c. Data analisis hasil XRD serbuk tulang ikan alu-alu 750ºC 3 jam 2θ d(a) Intensitas Fase HAp Ca 10 (PO 4 ) 6 (CO 3 ) HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp

27 19 Lanjutan Lampiran 3 d. Data analisis hasil XRD serbuk tulang ikan alu-alu 1000ºC 3 jam 2θ d(a) Intensitas Fase HAp HAp HAp HAp HAp HAp Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6.5H 2 O HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp

28 20 Lanjutan Lampiran 3 e. Data analisis hasil XRD serbuk tulang ikan alu-alu 1250ºC 3 jam 2θ d(a) Intensitas Fase HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp Ca 10 (PO 4 ) 3 (CO 3 ) 3 (OH) HAp HAp HAp HAp

29 21 Lanjutan Lampiran 3 f. Data analisis hasil XRD serbuk tulang ikan alu-alu 1300ºC 3 jam 2θ d(a) Intensitas Fase HAp HAp Ca 3 (PO 4 ) HAp Ca 3 (PO 4 ) HAp HAp HAp Ca 3 (PO 4 ) HAp HAp HAp Ca 10 (PO 4 ) 3 (CO 3 ) 3 (OH) HAp HAp HAp HAp HAp

30 22 Lanjutan Lampiran 3 g. Data analisis hasil XRD serbuk tulang ikan alu-alu 1350ºC 3 jam 2θ d(a) Intensitas Fase Ca 3 (PO 4 ) HAp HAp Ca 3 (PO 4 ) HAp HAp HAp HAp HAp Ca 10 (PO 4 ) 3 (CO 3 ) 3 (OH) HAp HAp HAp

31 23 Lanjutan Lampiran 3 h. Data analisis hasil XRD serbuk tulang ikan alu-alu 750ºC 6 jam 2θ d(a) Intensitas Fase HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp Ca 3 (PO 4 ) HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp

32 24 Lanjutan Lampiran 3 i. Data analisis hasil XRD serbuk tulang ikan alu-alu modifikasi pati 10 % 2θ d(a) Intensitas Fase HAp HAp HAp HAp HAp Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6.5H 2 O HAp HAp HAp HAp Ca 8 H 2 (PO 4 ) 6.5H 2 O HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp HAp

33 25 Lampiran 4 Penghitungan kadar kalsium dan fosfor Perhitungan : Kadar Ca Kadar P

34 26 Lampiran 5 Foto SEM hasil modifikasi pori HAp 750 ºC menggunakan pati (a) 5%, (b) 10%, (c) 20%, (d) 40%, dan (e) 60% dengan perbesaran 10000, serta modifikasi pori dari tulang ikan menggunakan pati (f) 5%, (g) 10%, (h) 20%, (i) 40%, dan (j) 60% dengan perbesaran (a) (f) (b) (g) (c) (h) 5 <1 µm (d) (i) 0.5 µm 0.63µm 3.20 µm (e) (j) 1.02µm 1.38µm 1.04µm 2.95 µm 3.69 µm < 0.1 µm

35 27 Lampiran 6 Contoh perhitungan ukuran pori 3.28 µm B A C D Keterangan : A = diameter pori dalam cm B = diameter pori sesungguhnya (µm) C = diameter skala dalam cm D = diameter skala sesungguhnya (µm) Perhitungan: 1.22 B = B = 4 B = 4/1.22 = µm

36 Lampiran 7 Gambar tulang ikan alu-alu 28