LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA FARMASI ANALISIS II

Transkripsi

1 LAPORAN PRAKTIKUM KIMIA FARMASI ANALISIS II TURUNAN ASAM HIDROKSI BENZOAT (ASAM BENZOAT) Oleh : Farmasi 3B Damas Anjar Purnama ( ) Ihsan Nurihsan ( ) PRODI S1 FARMASI Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Bakti Tunas Husada Tasikmalaya 2014

2 A. Tujuan Praktikum Praktikum ini dilakukan untuk menganalisa panjang gelombang, absorban, dan kadar asam benzoat dalam sampel menggunakan spektrofotometri UV-Vis. B. Dasar Teori Asam monohidroksi benzoat bisa terdapat sebagai isomer orto, meta dan para. Isomer orto adalah asam salisilat dan turunan-turunannya misalnya natrium salisilat, ester dari gugus karboksilnya seperti metil salisilat, dan ester dari gugus hidroksinya seperti asetosal. Sebagai contoh turunan isomer para adalah nipasol dan nipagin. Sedangkan isomer meta dan turunannya hampir tidak digunakan dalam farmasi. Analisis asam hidroksi benzoat dapat menggunakan metode : 1. Metode asidi alkalimetri : a. Titrasi langsung terhadap asam bebas. b. Titrasi langsung terhadap garam asam hidroksi benzoat pada sistem dua fase. c. Penetapan ester asam hidroksi benzoat dengan hidrolisis dan titrasi kembali. 2. Metode bromometri. 3. Metode iodometri. 4. Metode titrasi bebas air. 5. Metode spektrofotometri : a. Spektrofotometri uv. b. Spektrofotometri sinar tampak. 6. Metode spektrofotometri derivatif. 7. Metode kromatografi : a. Kromatografi cair kinerja tinggi. b. Kromatografi gas. Asam benzoat, C 7 H 6 O 2 (atau C 6 H 5 COOH), adalah padatan kristal berwarna putih dan merupakan asam karboksilat aromatik yang paling sederhana. Senyawa ini larut dalam air panas, etanol dan methanol. Nama

3 asam ini berasal dari gum benzoin (getah kemenyan), yang dahulu merupakan satu-satunya sumber asam benzoat. Asam lemah ini beserta garam turunannya digunakan sebagai pengawet makanan. Asam benzoat adalah prekursor yang penting dalam sintesis banyak bahan-bahan kimia lainnya. Struktur kimia asam benzoat: Asam benzoat diproduksi secara komersial dengan oksidasi parsial toluena dengan oksigen. Proses ini dikatalisis oleh kobalt ataupun mangan naftenat. Proses ini menggunakan bahan-bahan baku yang murah, menghasilkan rendemen yang tinggi, dan dianggap sebagai ramah lingkungan. Asam benzoat adalah zat pengawet yang sering dipergunakan dalam saos dan sambal. Asam benzoat disebut juga senyawa antimikroba karena tujuan penggunaan zat pengawet ini dalam kedua makanan tersebut untuk mencegah pertumbuhan khamir dan bakteri terutama untuk makanan yang telah dibuka dari kemasannya. Pembatasan penggunaan asam benzoat ini bertujuan agar tidak terjadi keracunan. Konsumsi yang berlebihan dari asam benzoat dalam suatu bahan makanan tidak dianjurkan karena jumlah zat pengawet yang masuk ke dalam tubuh akan bertambah dengan semakin banyak dan seringnya mengkonsumsi. Lebih-lebih lagi jika dibarengi dengan konsumsi makanan awetan lain yang mengandung asam benzoat. Spektrofotometer sesuai dengan namanya adalah alat yang terdiri dari spectrometer dan fotometer. Spektrometer menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer adalah alat pengukur intensitas cahaya yang di transmisikan atau yang di absorpsi.

4 Prinsip Spektrofotometri uv-vis mengacu pada hukum Lambert-Beer. Apabila cahaya monokromatik melalui suatu media (larutan), maka sebagian cahaya tersebut akan diserap, sebagian dipantulkan dan sebagian lagi akan dipancarkan.. Panjang gelombang maksimalnya dapat berubah sesuai dengan pelarut yang digunakan. Auksokrom adalah gugus fungsional yang mempunyai elekron bebas, seperti hidroksil, metoksi dan amina. Terikatnya gugus auksokrom pada gugus kromofor akan mengakibatkan pergeseran pita absorpsi menuju ke panjang gelombang yang lebih besar (bathokromik) yang disertai dengan peningkatan intensitas (hyperkromik). Bagian-bagian Spektrofotometer UV-Vis 1. Sumber cahaya Sumber cahaya pada spektrofotometer harus memiliki panacaran radiasi yang stabil dan intensitasnya tinggi. Sumber cahaya pada spektrofotometer UV-Vis ada dua macam : a. Lampu Tungsten (Wolfram) Lampu ini digunakan untuk mengukur sampel pada daerah tampak. Bentuk lampu ini mirip dengna bola lampu pijar biasa. Memiliki panjang gelombang antara nm. Spektrum radiasianya berupa garis lengkung. b. Lampu Deuterium Lampu ini dipakai pada panjang gelombang nm. Spektrum energy radiasinya lurus, dan digunakan untuk mengukur sampel yang terletak pada daerah uv. Memiliki waktu 500 jam pemakaian. 2. Monokromator Monokromator adalah alat yang akan memecah cahaya polikromatis menjadi cahaya tunggal (monokromatis) dengan komponen panjang gelombang tertentu. Bagian-bagian monokromator, yaitu : a. Prisma Prisma akan mendispersikan radiasi elektromagnetik sebesar mungkin supaya di dapatkan resolusi yang baik dari radiasi polikromatis.

5 b. Grating (kisi difraksi) Kisi difraksi memberi keuntungan lebih bagi proses spektroskopi. Dispersi sinar akan disebarkan merata, dengan pendispersi yang sama, hasil dispersi akan lebih baik. Selain itu kisi difraksi dapat digunakan dalam seluruh jangkauan spektrum. c. Celah optis Celah ini digunakan untuk mengarahkan sinar monokromatis yang diharapkan dari sumber radiasi. Apabila celah berada pada posisi yang tepat, maka radiasi akan dirotasikan melalui prisma, sehingga diperoleh panjang gelombang yang diharapkan. d. Filter Berfungsi untuk menyerap warna komplementer sehingga cahaya yang diteruskan merupakan cahaya berwarna yang sesuai dengan panjang gelombang yang dipilih. 3. Kompartemen sampel Kompartemen ini digunakan sebagai tempat diletakkannya kuvet. kuvet merupakan wadah yang digunakan untuk menaruh sampel yang akan dianalisis. Pada spektrofotometer double beam, terdapat dua tempat kuvet. Satu kuvet digunakan sebagai tempat untuk menaruh sampel, sementara kuvet lain digunakan untuk menaruh blanko. Sementara pada spektrofotometer single beam, hanya terdapat satu kuvet. Kuvet yang baik harus memenuhi beberapa syarat sebagai berikut : a. Permukaannya harus sejajar secara optis b. Tidak berwarna sehingga semua cahaya dapat di transmisikan c. Tidak ikut bereaksi terhadap bahan-bahan kimia d. Tidak rapuh e. Bentuknya sederhana Terdapat berbagai jenis dan bentuk kuvet pada spektrofotometer. Umumnya pada pengukuran di daerah UV, digunakan kuvet yang terbuat dari bahan kuarsa atau plexiglass. Kuvet kaca tidak dapat mengabsorbsi sinar uv, sehingga tidak digunakan pada saat pengukuran di daerah UV. Oleh karena itu, bahan kuvet dipilih berdasarkan daerah

6 panjang gelombang yang digunakan. Gunanya agar dapat melewatkan daerah panjang gelombang yang digunakan. UV : fused silika, kuarsa Visible : gelas biasa, silika atau plastik IR : KBr, NaCl, IRTRAN atau kristal dari senyawa ion 4. Detektor Detektor akan menangkap sinar yang diteruskan oleh larutan. Sinar kemudian diubah menjadi sinyal listrik oleh amplifier dan dalam rekorder dan ditampilkan dalam bentuk angka-angka pada reader (komputer). Syarat-syarat ideal sebuah detector adalah : Mempunyai kepekaan tinggi Respon konstan pada berbagai panjang gelombang Waktu respon cepat dan sinyal minimum tanpa radiasi Sinyal listrik ayng dihasilkan harus sebanding dengan tenaga radiasi 5. Visual display Merupakan system baca yang memperagakan besarnya isyarat listrik, menyatakan dalam bentuk % Transmitan maupun Absorbansi. C. Alat dan Bahan Alat : Spektrofotometer uv-vis Beaker glass Kaca arloji Pipet tetes Labu ukur Bahan : Pro analisis asam benzoate Sampel (asam benzoate) Methanol Dietil eter NaOH

7 D. Prosedur Isolasi Sampel Timbang sampel Catat berat sampel Bagi sampel menjadi 3 bagian sama besar Masukkan 1 bagian kedalam tabung sentrifugasi, lalu kocok dan bagian lain sebagai cadangan Lakukan Sentrifugasi selama 5 menit pada kecepatan 2000 RPM Setelah selesai, ambil beberapa tetes larutan, kemudial lakukan uji kualitatif dan sisa nya dipisahkan Bila masih memberikan hasil positif saat uji kualitatif lakukan kembali sentrifugasi dan uji kualitatif kembali Setelah beberapa kali sentrifugasi dan kemudian di uji kualitatif memberikan hasil negatif pisahkan Kemudian satukan dengan hasil sentrifugasi yang sebelum nya dan di ad 100 ml pelarut

8 Spektrofotometri UV-Vis Siapkan bahan dan pembanding Lakukan pengenceran pada sampel dan pembanding karena terlalu pekat sehingga akan mempengaruhi panjang gelombang dan nilai absorbans Operasikan spektrofotometer sesuai dengan petunjuk alat Netralkan alat spektrofotometer dengan larutan blanko menjadi nol dan tentukan panjang gelombang maksimum Ambil larutan standar kemudian masukan kedalam kuvet Ukur absorbans dari larutan pembanding Ukur absorbans dari sampel Buat grafik hubungan panjang gelombang dan absorbans Hitung kadar sampel

9 E. Data Hasil Praktikum a. Grafik Spektrum dan Tabel Absorbansi Larutan Standar b. Tabel Data Absorbansi

10 c. Kurva Kalibrasi No. Konsentrasi (ppm) Absorban y = x R² = Series1 Linear (Series1) d. Regresi Linier absorbansi sampel = 2,422 2,422 = 0,006x + 0,034 x = 398,5 ppm e. Perhitungan Berat sampel seluruhnya 3,3 gram. Sampel dibagi 3 bagian, yang digunakan sebanyak 1,1 gram

11 F. Pembahasan Pada praktikum kali yaitu menetapkan kadar sampel yang berbentuk serbuk yang berisi analit dan matriks. Analit yang akan dianalisis kadarnya adalah asam benzoat. Sebelum dilakukan penentuan kadar terlebih dahulu dilakukan isolasi terhadap sampel tersebut, yang bertujuan untuk memsisahkan analit dari zat-zat pengganggu atau matriks. Metode ekstraksi yang dilakukan yaitu ekstraksi padat-cair. Ekstraksi padat-cair dilakuakn dengan cara sentrifugasi untuk menghilangkan partikulat. Sampel asam benzoat berupa serbuk putih ditimbang terlebih dahulu untuk mengetahui bobot awal, penimbangan ini sangat berpengaruh terhadap perhitungan kadar nanti setelah dilakukan nya proses penentuan absorbansi pada spektrofotometri, setelah itu sampel dibagi 3 bagian agar bila terjadi sesuatu yang tidak diinginkan dapat diulang kembali karena masih memiliki cadangan sampel. Sampel dimasukkan kedalam tabung sentrifugasi kemudian ditambahkan dengan methanol sebagai pelarut untuk asam benzoat tersebut. Dipilih pemisahan memakai alat sentrifugasi karena pada saat pemisahan dengan menggunakan alat ini dapat memberikan hasil yang lebih baik dari pada menggunakan alat lain. Dilakukan uji kualitatif pada saat selesai sentifugasi, hal ini dilakukan agar kita dapat mengetahui apakah setelah beberapa kali sentrifugasi apakah asam benzoat masih terdapat atau tidak. Setelah beberapa kali sentrifugasi, larutan hasil tiap-tiap sentrifugasi disatukan dan di add dengan methanol sebanyak 100 ml dalam labu ukur. Kemudian sampel siap untuk dianalisis kadarnya dengan alat spektrofotometri. Kadar asam benzoat dapat diketahui dengan menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Karena pada struktur asam benzoat terdapat ikatan rangkap terkonjugasi. Pembuatan stok baku pembanding asam benzoat sebanyak 500 ppm. Hal ini dilakukan untuk mengetahui absorban dari larutan stok tersebut, apabila lebih dari rentang 0,8 nm 0,2 nm harus di encerkan untuk mendapatkan absorbansi di rentang tersebut. Didapat konsentrasi untuk rentang tersebut sebanyak 50 ppm, 60 ppm, 70 ppm, 80 ppm, 90 ppm, dan 100 ppm, pada panjang gelombang nm. Panjang

12 gelombang analisis yang dipilih adalah 271 nm, karena pada panjang gelombang tersebut, asam benzoat memberi puncak yang baik. kemudian dilakukan analisis untuk membuat kurva kalibrasi dan untuk mengetahui absorban sampel, didapat absoban sampel sebesar 2,422. Dari kurva standar antara absorbansi terhadap konsentrasi diperoleh persamaan garis linier yang merupakan hubungan antara absorbansi (y) dengan konsentrasi (x) larutan standar sebagai berikut : y = 0.006x dengan nilai R sebesar Hal ini menyatakan bahwa kurva kalibrasi memiliki keakuratan dalam penentuan konsentrasi sebesar 99 %. Untuk penentuan kadar asam benzoat dalam sampel dilakukan pengukuran absorbansi larutan sampel. Konsentrasi (x) asam benzoat dalam sampel diperoleh dengan cara mensubstitusikan nilai absorbansi larutan sampel terhadap (y) yaitu 2,422 pada persamaan y = 0.006x Sehingga didapat nilai x sebesar 398,5 ppm dan persen analit yang didapat adalah 3,623%. G. Kesimpulan Kadar Asam benzoat pada sampel berbentuk sediaan serbuk yang diteliti adalah 3,623%. H. Daftar Pustaka Brittain, Harry G Analytical Profiles of Drug and Excipients Volume 26. Amerika : ACADEMIC PRESS Day, R.A., Jr, 1991, KIMIA ANALISIS KUANTITATIF. Penerbit : Englewood Cliffs, N.J. : Prentice-Hall International Eka Metode Analisa Kimia-Spektrofotometri. Gramedia: Jakarta. Khopkar, S.M Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta : UI Press. Nielsen, S. Suzanne Food analysis, Maryland. Penerbit : Aspen Publ. Prof. Clarke, E.G.C Clarke's Analysis of Drugs and Poisons Thitd Edition. Pharmaceuticals Press. Prof. DR.Ibnu Gholib Ganjar.2012.Analisa Obat secara Spektrofotometri dan Kromatografi.Pustaka pelajar;yogyakarta.