PENGEMBANGAN SENYAWA 9 METOKSIKANTIN 6 ONE SEBAGAI MARKER EKSTRAK AIR AKAR PASAK BUMI TERSTANDAR PADA PENELITIAN FARMAKOKINETIK HERBAL

Transkripsi

1 PENGEMBANGAN SENYAWA 9 METOKSIKANTIN 6 ONE SEBAGAI MARKER EKSTRAK AIR AKAR PASAK BUMI TERSTANDAR PADA PENELITIAN FARMAKOKINETIK HERBAL Farida Hayati *, Lukman Hakim **, Ngatidjan ***, Mustofa ***

2 Pengembangan obat tradisional di Indonesia FITOFARMAKA Bahan baku : ekstrak terstandar, didukung bukti kemanjuran dan keamanan secara kli OBAT HERBAL TERSTANDAR (OHT) Bahan baku : ekstrak terstandar, didukung bukti kemanjuran dan keamanan secara praklinis JAMU Bahan baku simplisia, kemanjuran didukung oleh bukti empiris penggunaan pada manusia, keamanan didukung bukti ilmiah

3 Riset pengembangan tanaman obat Budi daya tanaman Ekstraksi dan Standarisasi Farmakoki netik?? Khasiat Uji farmakologi pra Klinik Uji Klinik Uji toksikologi

4 Farmakokinetik herbal Jarang dilakukan penting untuk dapat membantu dalam memperhitungkan dosis suatu sediaan tanaman obat (Pal and Shukla, 2003) Perancangan dosis lebih rasional

5 Pustaka : Pasak Bumi Afrodisiak (Ang and Sim, 1997, 1998a 1998b; Ang and Ngai, 2001; Ang and Lee, 2002a; Ang and Lee, 2002b; Ang et al., 2000, 2001, 2003a, 2003b, 2004) Antimalaria (Ang et al., 1995; Kuo et al., 2004 Kardono et a.l, 1991) Antihiperglikemia (Husen et al., 2004) Khasiat Antitumor (Kardono et al., 1991; Itokawa et al., 2000) Anxiolitik (Ang and Cheang, 1999) Antiulcer (Tada et al., 1991)

6 eurikomanon dan 9 metoksikantin 6 one telah digunakan oleh beberapa peneliti sebagai marker untuk menentukan kualitas ekstrak pasak bumi sebagai bahan baku obat alami (Aziz et al., 2005). Gambar. Struktur senyawa 9 metoksikantin 6-one (Chan et al., 2004)

7 Penelitian farmakokinetik Akar pasak bumi Pra klinik Klinik Marker 1 (eurikomanon) (Low et al, 2005) Marker 2 (metoksikantin) (Tan et al., 2002) Belum ada riset

8 MARKER ALTERNATIF Eurycomanone Senyawa sangat polar Jumlah mayor Ada referensi, harga mahal 9 metoksikantin 6 one Senyawa semi polar Jumlah minor Ada referensi, harga lbh mahal

9 Penelitian farmakokinetik Validasi Metode Optimasi : dosis Waktu sampling Profil Kurva Cp vs t Parameter Farmakoki netik

10 TUJUAN Menemukan metode penetapan kadar 9 metoksikantin 6 one dalam serum tikus dan manusia yang tepat, teliti, sensitif, dan selektif

11 BAHAN 9 metoksikantin 6 one reference Ekstrak pasak bumi terstandar Darah Tikus jantan Serum manusia sehat Aquabides Metanol for HPLC Asetonitril for HPLC Etil asetat p.a. ALAT KCKT Shimadzu LC 6A Detektor spektrofluorometer Kolom ODS C 18, 15cm Waterbath Sentrifuse Alat gelas

12 Validasi Metode Penentuan panjang gelombang eksitasi dan emisi Penentuan kurva baku Penentuan batas deteksi (LOD dan LOQ) Penentuan stabilitas dalam darah Recovery dan kesalahan acak

13 (endogen) metoksikantin Volts Metoksikantin stock dengan fase gerak acetonitril : air (30:70) Minutes

14 250 µl darah+etil asetat 400 µl + spiking metoksi kadar 25 ng/ml sebanyak 5 µl Vortex 30 dan sentrifuse 20 kecepatan 2500rpm Ambil supernatan 250 µl Uapkan diatas pemanas dengan suhu 90ºCelcius dialiri gas N2 Larutan kering ditbh metanol 40µL, vortex 20 detik

15 Metoksikantin + darah dipreparasi (kadar 0,5 ng/ml) metoksikantin LOD = 0.18 ng/ml LLOQ = 0.58 ng/ml Minutes

16 Menentukan perolehan kembali dan kesalahan acak Kadar seharusnya Kadar Terukur Perolehan kembali (%) Kesalahan Acak (%) µg/ml µg/ml Mean ± SE ± ±

17 Kesimpulan Metode penetapan kadar 9 metoksikantin 6 one pada darah tikus selektif, sensitif, akurat, dan presisi dengan nilai α = 1,375, recovery %, HORRAT (1,28) <2 Dapat dikembangkan sebagai metode penetapan kadar pada darah manusia

18 500 µl darah+etil asetat 0,8ml + spiking metoksi kadar 25 ng/ml sebanyak 5 µl Vortex 30 dan sentrifuse 20 kecepatan 2500rpm Ambil supernatan 400 µl Uapkan diatas pemanas dengan suhu 90ºCelcius dialiri gas N2 Larutan kering ditbh metanol 40µL, vortex 20 detik Metoksikantin

19 Volts metoksikantin Metoksikantin + darah manusia dipreparasi (kadar 0,5 ng/ml) RF-10AXL (Ex:359nm, Em:491nm) metoksikantin H jam Name Retention Time Area Height LOD = 0.14 ng/ml LLOQ = 0.16 ng/ml Minutes

20 Menentukan perolehan kembali dan kesalahan acak Kadar seharusnya Kadar Terukur Perolehan kembali (%) Kesalahan Acak (%) ng/ml ng/ml Mean ± SE ± ± manusia

21 Kesimpulan Metode penetapan kadar 9 metoksikantin 6 one pada darah manusia selektif, sensitif, akurat, dan presisi dengan nilai α = 1,383, recovery 88-94,67%, HORRAT (0,75) <2 Dapat digunakansebagai metode penetapan kadar pada darah manusia pada farmakokinetik herbal