UJI AKTIVITAS ANTIFUNGI FRAKSI ETANOL HASIL MASERASI DAUN SIRIH HIJAU

Transkripsi

1 UJI AKTIVITAS ANTIFUNGI FRAKSI ETANOL HASIL MASERASI DAUN SIRIH HIJAU (Piper betle L.) DARI BEBERAPA DAERAH ZONA IKLIM PANAS (0-700 MDPL) DI BALI TERHADAP FUNGI Candida albicans ATCC DENGAN MENGGUNAKAN METODE DIFUSI DISK SKRIPSI NI MADE PUTRI DWIJAYANTI JURUSAN FARMASI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS UDAYANA 2016 i

2 Lembar Pengesahan UJI AKTIVITAS ANTIFUNGI FRAKSI ETANOL HASIL MASERASI DAUN SIRIH HIJAU (Piper betle L.) DARI BEBERAPA DAERAH ZONA IKLIM PANAS (0-700 MDPL) DI BALI TERHADAP FUNGI Candida albicans ATCC DENGAN MENGGUNAKAN METODE DIFUSI DISK Skripsi Skripsi ini diajukan sebagai syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm.) di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana Pembimbing I Oleh NI MADE PUTRI DWIJAYANTI NIM Menyetujui: Pembimbing II Ni Luh Putu Vidya Paramita, S. Farm., M.Sc., Apt. A. A. Gede Rai Yadnya Putra, S.Farm., M.Si., Apt. NIP NIP. Mengesahkan: Ketua Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. NIP ii

3 KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yng Maha Esa, Ida Sang Hyang Widhi Wasa, karena berkat rahmat-nya penulis dapat menyelesaikan Skripsi yang berjudul Uji Aktivitas Antifungi Fraksi Etanol Hasil Maserasi Daun Sirih Hijau (Piper Betle L.) dari Beberapa Daerah Zona Iklim Panas (0-700 MDPL) di Bali Terhadap Fungi Candida Albicans dengan Metode Difusi Disk. Skripsi ini diajukan sebagai syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm.) di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana. Penulisan Skripsi ini tentunya tidak terlepas dari dukungan dan bantuan oleh berbagai pihak, secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, penulis ingin menyampaikan rasa terima kasih yang sebesar-besarnya kepada : 1. Tuhan Yang Maha Esa atas selaku kekuatan yang diberikan sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan Skripsi ini. 2. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana. 3. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana. 4. Ni Luh Putu Vidya Paramita, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing I yang telah membantu dan membimbing serta tak hentinya memberikan semangat dan dukungan hingga akhir penyusunan Skripsi ini. iii

4 5. A.A. Gede Rai Yadnya Putra, S.Farm., M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing II yang juga telah banyak membimbing demi kelancaran penyusunan Skripsi ini. 6. Seluruh dosen pengajar serta staf/pegawai di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana yang telah banyak membantu penulis, terutama para staf yang telah banyak membantu dalam hal pengurusan surat dan kelengkapan administrative lainnya. 7. Keluarga terdekat penulis kakek dan nenek I Wayan Puja Astwa dan Ni Made Ranis, I Nyoman Sudiana dan Ni Luh Putu Anggreni selaku orang tua penulis, dr. I Gede Supriadhiana dan Ni Komang Ayu Tri Lestari Dewi selaku saudara/i penulis yang tak pernah hentinya memberikan dukungan semangat dan doa. 8. Teman-teman seperjuangan Dioscuri Hygeia 2012 serta teman dan sahabat diluar lingkungan farmasi yang telah memberikan dukungan dan semangat selama penulisan Skripsi ini. 9. Kepada semua pihak yang namanya tidak bisa penulis sebutkan satu per satu. Penulis menyadari bahwa Skripsi ini masih jauh dari sempurna, untuk itu kritik dan saran yang bermanfaat demi kelancaran Skripsi ini sangat penulis harapkan. Penulis berharap semoga Skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca dan perkembangan ilmu pengetahuan. Bukit Jimbaran, Mei 2016 Penulis iv

5 DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... i LEMBAR PENGESAHAN... ii KATA PENGANTAR... iii DAFTAR ISI... v DAFTAR SINGKATAN... vii DAFTAR ISTILAH... ix DAFTAR TABEL... xi DAFTAR GAMBAR... xii DAFTAR LAMPIRAN... xiii ABSTRAK... xiv ABSTRACT... xv BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Rumusan Masalah Tujuan Penelitian Manfaat Penelitian... 6 BAB II TINJAUAN PUSTAKA Sirih Hijau Deskripsi tanaman Klasifikasi tanaman Kandungan kimia Khasiat Kandidiasis Candida albicans Deskripsi candida albicans Klasifikasi candida albicans Patogensis dan patologi candida albicans v

6 2.4. Uji Aktivitas Antifungi Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) Ekstraksi Maserasi Ekstraksi Maserasi Media Sabouraud Dextrose Agar (SDA) Metode Difusi Disk BAB III METODE PENELITIAN Rancangan Penelitian Lokasi Dan Waktu Penelitian Obyek Penelitian Bahan Penelitian Bahan tanaman Bahan kimia untuk ekstraksi Bahan skrining fitokimia Bahan uji antifungi Alat Penelitian Variabel penelitian Variabel bebas Variabel terikat Variabel terkendali Batasan Operasional Penelitian Prosedur Penelitian Determinasi tanaman Pengambilan dan preparasi sampel Penetapan susut pengeringan serbuk daun sirih hijau (Piper betle L.) Pembuatan fraksi etanol daun sirih hijau (Piper betle L.) Penetapan susut pengeringan fraksi etanol daun sirih hijau (Piper betle L.) vi

7 Skrining fitokimia fraksi etanol daun sirih hijau (Piper betle L.) Sterilisasi alat dan bahan Pembuatan kontrol positif flukonazol 1024 µg/ml Uji aktivitas antifungi fraksi etanol daun sirih hijau (Piper betle L.) Analisis Data Skema Penelitian BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN Determinasi Tanaman Preparasi Sampel Penetapan Susut Pengeringan Pembuatan Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) Skrining Fitokimia Uji Aktivitas Antifungi Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) Hasil Maserasi BAB V KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran DAFTAR PUSTAKA vii

8 DAFTAR SINGKATAN SDA SDB CFU ATCC NaCl : Sabouraud Dextrose Agar : Sabouraud Dextrose Broth : Colony Forming Unit : American Type Culture Collection : Natrium Clorida viii

9 DAFTAR ISTILAH Immunocompromised : Kondisi abnormal dimana kemampuan seseorang untuk melawan infeksi menurun Dimorfik : Sifat dari fungi yang memiliki dua bentuk yaitu kapang dan yeast Aerob Anaerob : Suatu proses biologi yang memerlukan oksigen : Suatu proses biologi yang tidak memerlukan oksigen Koloni : Kumpulan mikroorganisme atau sel hidup Magnetic strirer : Perangkat laboratorium yang menggunakan putaran medan magnet untuk memutar stir bars (juga disebut flea ) yang direndam dalam cairan juga berputar sehingga dapat mengaduk cairan Autoklaf : Alat pemanas tertutup yang digunakan untuk mensterilisasi suatu benda menggunakan uap bersuhu dan bertekanan tinggi (121ºC, 15 lbs) selama kurang lebih 15 menit Resistant : Kategori yang menyatakan bahwa isolat mikroorganisme tidak dapat dihambat oleh agen antimikroba dengan konsentrasi tertentu. Konsentrasi senyawa yang memiliki daya hambat belum dapat digunakan sebagai agen terapi ix

10 Intermediate : Kategori yang menyatakan bahwa isolat mikroorganisme dapat dihambat oleh agen antimikroba dengan konsentrasi tertentu secara minimal. Konsentrasi senyawa yang memiliki daya hambatan sesuai dengan rentang pada kategori intermediate biasanya membutuhkan dosis yang lebih tinggi dari dosis obat yang digunakan sebagai terapi Susceptible : Kategori yang menyatakan bahwa isolat mikroorganisme dapat dihambat oleh agen antimikroba dengan konsentrasi tertentu secara maksimal. Konsentrasi senyawa yang memiliki daya hambat sesuai dengan rentang pada kategori susceptible biasanya dapat direkomendasikan sebagai agen terapi Inokulasi : Kegiatan pemindahan koloni dari sumber asalnya ke media baru dengan ketelitian yang sangat tinggi dan aseptis x

11 DAFTAR TABEL Halaman Tabel 2.1 Klasifikasi Respon Hambatan Tabel 4.1 Data Hasil Penetapan Susut Pengeringan Serbuk Simplisia Daun Sirih Hijau Tabel 4.2 Data Hasil Penetapan Susut Pengeringan Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau Tabel 4.3 Data Hasil Perhitungan Rendemen Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau. 37 Tabel 4.4 Hasil Skrining Fitokimia Tabel 4.5 Nilai Diameter Zona Hambat Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau Tabel 4.6 Hasil Uji Lsd Zona Hambat Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau.. 45 xi

12 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Sirih Hijau (Piper betle L.)... 7 Gambar 2.2 Morfologi Candida albicans Gambar 4.1 Hasil Opitimasi Konsentrasi Larutan Uji Gambar 4.2 Hasil Uji Aktivitas Antifungi Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau xii

13 DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1 Hasil Determinasi Tanaman Daun Sirih Hijau (Piper Betle L) Lampiran 2 Fraksi Etanol Duan Sirih Hijau (Piper Betle L) Lampiran 3 Penetapan Susut Pengeringan Serbuk dan Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) Lampiran 4 Pembuatan Media SDA Lampiran 5 Pembuatan Larutan Hcl 2 N Lampiran 6 Pembuatan Kontrol Positif 1024 µg/ml Lampiran 7 Hasil Skrining Fitokimia Lampiran 8 Data Statistik Hasil Uji Aktivitas Antifungi Fraksi Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) xiii

14 ABSTRAK Kandidiasis adalah penyakit jamur akut atau subakut yang disebabkan oleh Candida albicans. Salah satu tanaman yang memiliki aktivitas antifungi adalah daun sirih hijau (Piper betle L.). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antifungi fraksi etanol hasil maserasi Piper betle L. dari beberapa daerah zona iklim panas (0-700 MDPL) di Bali terhadap fungi Candida albicans ATCC serta mengetahui golongan senyawa kimia yang terkandung dalam fraksi etanol P.betle L.tersebut. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental. Sampel uji yang digunakan yaitu fraksi etanol hasil maserasi. Kontrol positif yang digunakan yaitu flukonazol 1024 µg/ml dan kontrol negatifnya yaitu etanol p.a. Pengujian aktivitas antifungi dilakukan dengan metode difusi disk. Data yang diperoleh dianalisis secara statistik menggunakan ANOVA One way dan secara deskriptif berdasarkan klasifikasi respon hambat dengan zona hambat resistant ( 14 mm), intermediate (15-19 mm) dan susceptible ( 20 mm). Hasil uji aktivitas antifungi fraksi etanol hasil maserasi P.betle L. pada beberapa daerah zona iklim panas (0-700 MDPL) di Bali terhadap fungi Candida albicans ATCC menunjukkan diameter zona hambat yang masuk kedalam kategori intermediate. Diameter zona hambat terbesar dimiliki oleh daerah A yaitu 19,46 ± 0,450 mm. Berdasarkan analisis statistik, diperoleh daerah G memiliki aktivitas yang berbeda signifikan dengan daerah lainnya (P<0,05). Hasil yang tidak berbeda signifikan (P>0,05) ditunjukkan oleh daerah A dengan H, B dengan E dan D, E dengan C, F dan D. Hasil skrining fitokimia menunjukkan seluruh fraksi etanol P.betle L. hasil maserasi positif mengandung flavonoid, tannin dan polifenol, glikosida dan steroid. Kesimpulannya perbedaan daerah mempengaruhi respon aktivitas antifungi yang dihasilkan, namun tidak mempengaruhi keberadaan jenis kandungan kimianya. Kata kunci : Piper betle L., kandidiasis, fraksi etanol daun sirih hijau, Candida albicans ATCC 10231, difusi disk xiv

15 ABSTRACT Candidiasis is a fungal disease of acute or subacute caused by Candida albicans. One of the plants that have antifungal activity is Piper betle leaf (Piper betle L.). The purpose in this research was to find out antifungal activity of ethanol fraction from maceration results of Piper betle leaf in some area with a high temperature climate zone (0-700 masl) in Bali from against fungi Candida albicans ATCC and to know the chemical compounds contained in the ethanol fraction of the Piper betle leaf. This study is an experimental research. The test samples used ethanol fraction. Positive control is fluconazole 1024 µg/ml and a negative control is ethanol p.a. The activity assay of antifungal using by disk diffusion method. Data were statistically analyzed by One way ANOVA and a descriptive based on the classification inhibitory response with inhibition zone resistant ( 14mm), intermediate (15-19mm) and susceptible ( 20mm). The result of antifungal activity of ethanol fraction from maceration results Piper betle leaf in some area with a high temperature climate zone (0-700 masl) in Bali against fungi Candida albicans ATCC showed inhibition zone with the intermediate category. Greatest diameter of inhibition zone is A with inhibition zone of 19,46 ± 0,450. Based on statistical analysis, G has a different activity significantly with other regions (P<0,05). The results were not significantly different (P>0,05) are showed by A with H, B with C and D, E with C, F and D. Results of phytochemical screening showed all the ethanol fraction Piper betle leaf maceration results positive contain flavonoids, tannins and polyphenols, glycosides and steroids. The conclusion is different areas affect the response resulting antifungal activity, but does not affect the presence of types chemical content. Keyword : Piper betle L., candidiasis, ethanol fraction Piper betle leaf, Candida albicans, disk diffusion xv