IDENTIFIKASI SENYAWA FLAVONOID DALAM FASE n-butanol DARI EKSTRAK METANOL DAUN BINAHONG (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis)

Transkripsi

1 IDENTIFIKSI SENYW FLVNID DLM FSE n-utnl DRI EKSTRK METNL DUN INNG (nredera cordifolia (Ten.) Steenis) Ratna Djamil, Wiwi Winarti, Ernie Fakultas Farmasi Universitas Pancasila STRK erdasarkan literatur dan penelitian yang telah dilakukan diketahui beberapa spesies tanaman familia asellaceae yaitu nredera scandens (L.) Moq, asella rubra Linn. atau asella alba Linn atau asella cordifolia Lamk, nredera cordifolia (Ten.) Steenis diketahui mengandung senyawa flavonoid. Namun belum ada data mengenai golongan dan jenis senyawa flavonoid yang terkandung dalam spesies tanaman tersebut. al ini mungkin disebabkan masih terbatasnya penelitian mengenai tanaman tersebut. erdasarkan hal tersebut, maka dilakukan penelitian terhadap salah satu spesies dari asellaceae yaitu nredera cordifolia (Ten.) Steenis. Penelitian yang dilakukan bertujuan untuk mengetahui golongan dan jenis senyawa flavonoid yang terkandung dalam salah satu spesies asellaceae yaitu tanaman anredera cordifolia (Ten.) Steenis. Tahapan penelitian yang dilakukan meliputi pengumpulan dan penyediaan bahan, penapisan fitokimia, pemeriksaan pendahuluan senyawa flavonoid, isolasi golongan senyawa flavonoid dan identifikasi isolat menggunakan metode spektrofotometri ultraviolet-cahaya tampak. asil penapisan fitokimia diketahui dalam fase n-butanol dari ekstrak metanol daun binahong terkandung senyawa flavonoid, saponin, triterpenoid, kumarin dan kuinon. asil penelitian identifikasi senyawa flavonoid diduga golongan dan jenis senyawa flavonoidnya adalah sebagai berikut isolat N-VII diduga adalah senyawa flavonol dengan gugus pada posisi,,, dan terdapat -di pada cincin (,) atau (,) serta terdapat oksigenasi pada atau. Isolat N-VIII diduga adalah senyawa flavon dengan gugus pada,, dengan gugus prenil pada posisi serta terdapat gugus -di pada cincin (,) atau (,) sedangkan Isolat N-IX diduga adalah senyawa flavonol (- tersubstitusi) dengan gugus pada posisi,, serta adanya gugus prenil pada posisi. Keywords: Identifikasi, flavonoid, daun binahong, nredera cordifolia (Ten.) Steenis). PENDULUN Memasuki era globalisasi, teknologi pengobatan berkembang seiring dengan penyakit yang melanda masyarakat. Keanekaragaman penyakit yang ada, menuntut adanya cara pengobatan yang beragam dengan tujuan untuk menyembuhkan berbagai penyakit dengan tepat dan aman. Tetapi, tujuan tersebut seringkali menimbulkan efek samping yang cukup membahayakan bagi penderita terhadap pengobatan penyakit yang dilakukan misalnya: penggunaan obat modern seperti aspirin dalam jangka panjang dapat menyebabkan kerusakan fungsi ginjal, penggunaan antibiotik dalam mengobati penyakit dewasa ini dapat menimbulkan resistensi, penggunaan sinar radiasi untuk terapi kanker seringkali menghambat pertumbuhan sel-sel normal dalam tubuh dan sebagainya (,2). leh karena itu, saat ini pengobatan penyakit menggunakan tanaman obat menjadi pilihan utama. Salah satu tanaman obat yang saat ini menjadi pilihan dan sering digunakan adalah tanaman dari familia asellaceae. Salah satu Spesies dari familia asellaceae yang saat ini sering digunakan sebagai tanaman obat adalah nredera cordifolia (Ten.) Steenis (,,). kan tetapi data mengenai spesies dari tanaman asellaceae yakni nredera cordifolia (Ten.) Steenis masih terbatas. Informasi yang diketahui yaitu bahwa batang, daun dan akar dari nredera cordifolia (Ten.) Steenis dapat digunakan untuk menyembuhkan penyakit seperti: pegal linu, kanker serta diduga memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi dan berfungsi sebagai antivirus (). Kemudian diketahui bahwa dalam ekstrak metanol daun binahong mengandung senyawa flavonoid, saponin, steroid-triterpenoid dan kumarin (9).Flavonoid merupakan salah satu metabolit sekunder dalam tanaman yang tersebar terutama pada tumbuhan tingkat tinggi ngiospermae. Flavonoid memiliki berbagai macam efek farmakologi seperti antioksidan, antihipertensi, antivirus, antikanker dan lain-lain. Sehingga data mengenai golongan dan jenis kandungan senyawa flavonoid dalam suatu tanaman merupakan informasi yang berharga. Namun demikian, belum ada data yang jelas mengenai golongan dan jenis senyawa flavonoid yang terkandung dalam spesies tersebut. al ini mungkin disebabkan masih terbatasnya penelitian yang dilakukan terhadap tanaman obat tersebut. leh karena itu, penulis tertarik untuk melakukan penelitian terhadap tanaman binahong atau nredera cordifolia (Ten.) Steenis Dalam penelitian ini penulis bermaksud ingin mengetahui jenis dan golongan senyawa flavonoid yang terkandung dalam ekstrak n-butanol dari ekstrak metanol daun nredera cordifolia (Ten.) Steenis. Penelitian yang dilakukan meliputi pengumpulan dan penyediaan bahan. Selanjutnya dilakukan penapisan fitokimia, pemeriksaan pendahuluan senyawa flavonoid, isolasi golongan senyawa flavonoid secara kromatografi kertas dan identifikasi isolat menggunakan metode spektrofotometri ultraviolet-cahaya tampak. N DN METDE N ahan yang digunakan adalah fase n-butanol dari ekstrak metanol daun binahong (nredera cordifolia (Ten.) Steenis) yang diperoleh dari penelitian sebelumnya. METDE. Penapisan fitokimia Penapisan fitokimia senyawa alkaloid, flavonoid, Saponin, tannin, kuinon. steroid dan triterpenoid, kumarin 2. Pemeriksaan Pendahuluan Senyawa Flavonoid Reaksi warna. Reaksi Warna dilakukan terhadap fase n-butanol untuk memastikan ada atau tidaknya senyawa flavonoid dalam fase tersebut. Disampaikan pada Kongres Ilmiah XVII ISFI, -9 Desember 2009

2 Reaksi Pew. Sejumlah ml larutan dari fase n- butanol diuapkan sampai kering ditambahkan -2 ml etanol 9%, 00 mg serbuk zink dan 2 ml asam klorida 2N, lalu didiamkan selama menit, kemudian ditambahkan 0, ml asam klorida p. adanya flavonoid ditunjukkan dengan terbentuknya warna merah intensif 2- menit. Reaksi Shinoda. Sejumlah ml larutan dari fase n- butanol diuapkan sampai kering. Sisa ditambahkan ml etanol 9 %, 00 mg serbuk magnesium dan 0, ml asam klorida. ila terbentuk warna merah jingga sampai warna merah ungu menunjukkan adanya senyawa golongan flavonoid. ila berwarna kuning jingga menunjukkan adanya senyawa flavonoid golongan flavon, auron atau khalkon. Reaksi Wilson-Taubock. Sejumlah ml larutan fase n-butanol diuapkan sampai kering, lalu ditambahkan aseton, asam borat dan asam oksalat. Diuapkan hatihati diatas tangas air. Sisa ditambahkan 0 ml eter, kemudian diamati dibawah sinar UV dengan panjang nm. Jika terlihat pendaran warna kuning intensif menunjukkan adanya senyawa golongan flavonoid. Kromatografi kertas. pemeriksaan senyawa flavonoid dalam fase n-butanol dilakukan secara kromatografi kertas Whatman No. dengan fase gerag yang sesuai. diamati perubahan warna sebelum dan sesudah diuapi dengan ammonia.. Isolasi Senyawa Flavonoid Isolasi senyawa flavonoid dilakukan secara kromatografi kertas preparatif. Pertama-tama fase n- butanol yang berupa ekstrak kental ditambahkan dengan metanol secukupnya. Kemudian ekstrak tersebut ditotolkan dengan arah memanjang seperti pita pada batas awal eluasi pada kertas Whatman No. sampai jenuh. Selanjutnya kertas preparatif dieluasi menggunakan fase gerak pertama yaitu (n-butanol-asam asetat glasial-air dengan perbandingan ::), setelah batas eluasi kertas preparatif diangkat dan dikeringkan. Kemudian masing-masing pita yang terbentuk digunting menjadi potongan-potongan kecil dan diekstraksi dengan metanol. Sebelum diidentifikasi dengan spektrofotometer ultraviolet-cahaya tampak senyawa yang diidentifikasi haruslah berupa senyawa murni. Untuk memastikan bahwa pita-pita yang diperoleh sudah merupakan pita tunggal, maka pita-pita yang sudah dilarutkan dalam metanol kemudian ditotolkan kembali pada kertas whatman No. dan dieluasi dengan fase gerak kedua. jika pita sudah tunggal pita tersebut diambil, digunting kecil-kecil dan diekstraksi dengan metanol dan selanjutnya diidentifikasi secara spektrofotometri uv-ahaya tampak.. Identifikasi Identifikasi golongan dan jenis senyawa flavonoid dilakukanmenggunakan spektrofotometer ultravioletcahaya tampak. Mula-mula isolat murni yang mengandung senyawa flavonoid dilarutkan dalam metanol pa kemudian dilihat spektrumnya menggunakan spektrofotometer ultraviolet-cahaya tampak. Jika spektrumnya terlihat pada rentang 20-2 nm (pita II) dan 00-0 nm (pita I) maka isolat positif merupakan senyawa flavonoid dan selanjutnya dilakukan penambahan pereaksi geser seperti aluminium klorida, asam klorida, natrium hidroksida, natrium asetat dan asam borat lalu diamati pergeseran panjang maksimum sesudah dilakukan penambahan pereaksi geser. SIL DN DISKUSI. Penapisan Fitokimia asil penapisan fitokimiamenunjukkan bahwa dalam fase n-butanol daun binahong (nredera cordifolia (Ten.) Steenis) mengandung flavonoid, saponin, kumarin,triterpenoid dan kuinon. 2. Reaksi Warna asil identifikasi senyawa flavonoid dengan reaksi warna menunjukkan hasil positif pada ketiga reaksi yakni reaksi Pew, Shinoda dan Wilson-Taobock.. Isolasi dengan Kromatografii Kertas Fase n-butanol yang sudah dilarutkan dengan metanol ditotolkan bentuk pita pada kertas Whatman No. kemudian dieluasi dalam bejana yang telah dijenuhkan dengan n-butanol-asam asetat glasial-air () dengan perbandingan :: diperoleh 9 pita selanjutnya kromatogram diberi uap amoniadan diamati warna yang timbul sebelum dan sesudah diuapi ammonia menghasilkan Sembilan pita. Kesembilan pita yang diperoleh dipotong kecilkecil, lalu diekstraksi dengan metanol, kemudian kesembilan isolat dieluasi kembali dengan fase gerak kedua yaitu asam asetat % memberikan hasil 9 pita yang telah tunggal.. Identifikasi Isolat Isolat yang diperoleh dari hasil isolasi kemudian diidentifikasi menggunakan spektrofotometer ultraviolet-cahaya tampak. Dari hasil spektrum ternyata yang memberikan panjang serapan maksimum untuk flavonoid hanya pita yakni pita yang berfluoresensi warna ungu muda (N VII), pita yang berflouresensi warna ungu tua (N VIII) dan pita yang berflouresensi warna kuning jingga (N IX). Kemudian diamati pergeseran panjang sesudah penambahan pereaksi geser seperti natrium hidroksida, aluminium klorida, asam klorida, natrium asetat dan asam borat. erikut adalah hasil identifikasi ketiga isolat. Gambar. Spektrum Isolat N-VII fase n-butanol 220,0 nm (0 0,0 nm : Na

3 Tabel 2. No : Na ` : ll : ll /l : Na setat : Na setat + panjang maksimum isolat N-VII Pereaksi Geser maksimum Pita Pita II Pita I Pita II Metanol 2, 2, Metanol+ Na 9, 29, Metanol+ Na 9, 0, Metanol+ll 2 29,, Metanol+lL / l 2 2,, Metanol+Nac 22,, Metanol+Nac/ 20, 29, asil pemeriksaan pendahuluan terhadap isolat N VII mengarah dugaan pada - flavon atau flavonol (tersulih pada - dan mempunyai -) atau - flavanon dan - khalkon tanpa pada cincin, hal ini didasarkan pada warna bercak lembayung lembayung gelap sebelum diberi uap amonia dan berwarna hijau setelah diberi uap amonia. tampak dalam pelarut metanol isolat memberikan serapan maksimum pada panjang 2, nm untuk pita I dan 2, untuk pita II. asil tersebut mengarahkan dugaan bahwa isolat adalah golongan flavon atau isoflavon serta isoflavon dengan -deoksi-,-dioksigenasi. pita I 9, berarti terjadi pergeseran batokromik sebesar nm dan terjadi kenaikan kekuatan setelah menit. erdasar data ini kemungkinan terdapat gugus - pada golongan flavon. Pada penambahan aluminium (III) klorida serapan maksimum pita I menjadi 2 nm dan berarti terjadi pergeseran batokromik sebesar, nm, hal ini menunjukkan adanya gugus - (dengan atau tanpa -). al ini menunjukkan dugaan bahwa isolat adalah golongan flavonol. II 22 nm atau terjadi pergeseran batokromik sebesar, nm, berdasar data ini diduga terdapat - dengan oksigenasi pada atau pada golongan flavon atau flavonol. 20, nm atau terjadi pergeseran hipsokromik sebesar nm bedasarkan data terdapat -di pada cincin (,) atau (,), sehingga memperkuat dugaan bahwa isolat adalah golongan flavonol. 0 ` ` Gambar 2. Struktur senyawa flavonol dengan gugus pada posisi,,, serta -di pada cincin (,) atau (, ) erdasarkan data diatas diduga bahwa isolat N-VII adalah senyawa flavonol (denganatau tanpa gugus pada posisi ) gugus posisi,, dan terdapat - di pada cincin (,) atau (,) serta terdapat oksigenasi pada atau. Gambar. Spektrum Isolat N-VIII fase n-butanol 200,0 nm (0 0,0 nm : Na : Na ` : ll : ll /l : Na setat : Na setat + Tabel. panjang maksimum isolat N-VIII No Pereaksi Geser maksimum Pita Pita II Pita I Pita II Metanol 29, 29, Metanol+ Na 9, 29, 0 Metanol+ Na 9,0 29,, 0 Metanol+ll, 29, 2 Metanol+lL / l 0, 2,0, Metanol+Nac 0,0 2, 0, 9 Metanol+Nac 0, 2, 0, 9 Metanol+Nac/ 22, 29,, asil pemeriksaan pendahuluan terhadap isolat N VIII megarah dugaan pada flavon atau flavonol (tersulih pada - dan mempunyai - tetapi tanpa - bebas), beberapa - atau - flavon dan flavonol tersulih pada - serta mengandung -; isoflavon, dihidroflavonol, biflavonil dan beberapa flavanon yang mengandung - ; Khalkon yang mengandung 2 atau - tetapi tidak mengandung 2- atau - bebas hal ini didasarkan atas perubahan warna bercak lembayung gelap sebelum diuapi amonia dan menjadi lembayung gelap setelah diuapi amonia. tampak dalam pelarut metanol isolat memberikan serapan maksimum pada panjang 29, nm dan 29, nm untuk pita II. al tersebut mengarahkan dugaan bahwa isolat adalah golongan flavon, Isoflavon dan bukan golongan flavonol maupun khalkon.

4 pita I 9, berarti terjadi pergeseran batokromik sebesar nm dan terjadi kenaikan kekuatan setelah menit. erdasar data ini diduga terdapat - pada golongan flavon. Pada penambahan aluminium (III) klorida dan asam klorida serapan maksimum pita I menjadi, nm dan setelah penambahan l serapan maksimum pita I menjadi 0, nm berarti tidak terjadi pergeseran, hal ini menunjukkan kemungkinan adanya gugus pada posisi dengan gugus prenil pada posisi. II 2, nm atau terjadi pergeseran batokromik sebesar 9 nm, berdasar data ini menunjukkan adanya gugus - sehingga memperkuat dugaan bahwa isolat adalah senyawa flavon. 22, nm atau terjadi hipsokromik sebesar nm, berdasar data ini kemungkinan terdapat gugus -di pada cincin (,) tau (,). ()2= -2 Gambar. Struktur flavon dengan gugus pada,, dan gugus prenil pada posisi serta gugus -di pada cincin (,) atau (, ) erdasarkan data diatas diduga bahwa isolat N-VIII adalah senyawa flavon dengan gugus pada,, dengan gugus prenil pada posisi serta terdapat gugus -di pada cincin (,) atau (,). 220,0 nm (0 0,0 nm Gambar. Spektrum Isolat N-IX fase n-butanol 0 : Na : ll : ll /l : Na setat : Na setat + ` ` Tabel. panjang maksimum isolat N-IX No Pereaksi Geser maksimum Pita Pita II Pita I Pita II Metanol 0, 2, Metanol+ Na 9, 29, Metanol+ Na 9, 29, Metanol+ll, 2,, 2, Metanol+lL / l,0 2, Metanol+Nac - 29,0 -, Metanol+Nac/ - 2,0-0, asil pemeriksaan pendahuluan terhadap isolat N IX mengarah dugaan pada flavonol yang mengandung - bebas mempunyai atau tak mempunyai - bebas kadang-kadang berasal dari dihidroflavonol. al ini didasarkan pada warna bercak flouresensi kuning jingga sebelum diberi uap amonia dan menjadi floresensi jingga setelah diberi uap amonia. tampakdalam pelarut metanol isolat memberikan serapan maksimum pada panjang 2, nmuntuk pita I dan 2, untuk pita II. asil tersebut mengarahkan dugaan bahwa isolat adalah golongan flavonol (- tersubstitusi), isoflavon, flavon dan bukan golongan dihidroflavonol. pita I 9, berarti terjadi pergeseran batokromik sebesar nm dan tanpa kenaikan kekuatan setelah menit. erdasar data menunjukkan kemungkinan adanya gugus - pada flavonol (- tersubstitusi). Pada penambahan aluminium (III) klorida dan asam klorida serapan maksimum pita I menjadi, nm dan setelah penambahan l serapan maksimum pita I menjadi nm berarti tidak terjadi pergeseran, hal ini menunjukkan kemungkinan adanya gugus pada posisi dengan gugus prenil pada posisi pada flavonol (- tersubstitusi). II 29,0 nm atau terjadi pergeseran batokromik sebesar, nm, berdasar data ini kemungkinan terdapat gugus -. tidak terdeteksi berdasarkan hal ini tidak terdapat data kemungkinan adanya gugus yang bersifat asam seperti -di. ()2= -2 0 Gambar. Struktur senyawa flavonol (- tersubstitusi) dengan gugus pada posisi,, serta gugus prenil pada posisi ` `

5 erdasarkan data diatas diduga bahwa isolat N-IX adalah senyawa flavonol (- tersubstitusi) dengan gugus pada posisi,, serta adanya gugus prenil pada posisi. KESIMPULN. Pada pemerikssan penapisan fitokimia dalam fase n- butanol dari ekstrak metanol daun binahong menunjukkan adanya senyawa flavonoid, saponin, kuinon, triterpenoid dan kumarin. 2. erdasarkan hasil identifikasi senyawa flavonoid menggunakan spektrofotometer ultraviolet-cahaya tampak dalam fase n-butanol dari ekstrak metanol daun binahong bahwa isolat N-VII diduga adalah senyawa flavonol (dengan atau tanpa gugus pada posisi ) serta gugus pada posisi,,, dan terdapat -di pada cincin (,) atau (,) serta terdapat oksigenasi pada atau. Isolat N-VIII diduga adalah senyawa flavon dengan gugus pada,, dengan gugus prenil pada posisi serta terdapat gugus -di pada cincin (,) atau (,) sedangkan Isolat N-IX diduga adalah senyawa flavonol (- tersubstitusi) dengan gugus pada posisi,, serta adanya gugus prenil pada posisi. DFTR PUSTK asellaceae. Diambil dari china/mss/volume0/asllaceae.pdf. Diakses tanggal ktober, 2009; jam. wib. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Materia Medika Indonesia. Edisi VI. 90. hal. Farnsworth NR. iological and phytochemical screening of plant. Journal of Pharmaceutical, No.. Vol arborne J. Metode fitokimia. Penuntun cara modern menganalisis tumbuhan. Edisi II. Diterjemahkan oleh Padmawinata K. andung: IT; 9. hal 2-29 Kegunaan binahong. Diambil dari http//darfaherba.blogspot.com / :s.0 Diakses tanggal ktober, 200; jam 20. wib. Lemmens RMJ, unyapraphastara N. Plant Resources of South-East sia. ogor: PRSE; 200. hal. 2- Markham KR. ara mengidentifikasi flavonoid. Diterjemahkan oleh Padmawinata. andung: IT; 9. hal -,2-,-. Paramita PD. Karakterisasi Farmakognosi dan Uji SLT (rine Shrimp Lethality Test) dari Ekstrak Daun inahong (nredera cordifolia (Ten.) Steenis) [skripsi]. Jakarta: Fakultas Farmasi Universitas Pancasila; 200. hal.-. Penelitian pola resistensi bakteri enteropatogen (penyebab diare) terhadap antibiotik aktual/diare/ resistensi.pdf. Diakses tanggal ktober, 2009; jam.0 wib.