KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI SENYAWA FLAVONOID DARI FRAKSI ETILASETAT DAUN GAHARU (Aquilaria malaccencis Lamk.

Transkripsi

1 KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI SENYAWA FLAVONOID DARI FRAKSI ETILASETAT DAUN GAHARU (Aquilaria malaccencis Lamk.) SKRIPSI Diajukan untuk muniversitas Sumatera Uta OLEH: AITY NIM PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2014

2 KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI SENYAWA FLAVONOID DARI FRAKSI ETILASETAT DAUN GAHARU (Aquilaria malaccencis Lamk.) SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi iajukan untuk muniversitas Sumatera Uta OLEH: AITY NIM PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2014

3 PENGESAHAN SKRIPSI KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI SENYAWA FLAVONOID DARI FRAKSI ETILASETAT DAUN GAHARU (Aquilaria malaccencis Lamk.) OLEH: AITY NIM Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Pada Tanggal : Oktober 2014 Pembimbing I, Panitia Penguji, Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt. Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. NIP NIP Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt. Pembimbing II, NIP Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt. Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt. NIP NIP Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP Medan, Oktober 2014 Fakultas Farmasi Dekan, Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt. NIP

4 KATA PENGANTAR Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat dan kasihnya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Isolasi Senyawa Flavonoid dari Fraksi Etilasetat Daun Gaharu (Aquilaria malaccencis Lamk.). Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi. Pada kesempatan ini penulis juga mengucapkan terima kasih yang tulus dan ilkhas kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan dan sebagai penasehat akademik yang telah memberikan bimbingan kepada penulis selama masa perkuliahan. Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., dan Bapak Dr. M. Pandapotan Nasution, MPS., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan dan nasehat selama penulisan hingga selesainya penyusunan skripsi ini. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan. Bapak dan Ibu Kepala Laboratorium Penulisan dan Farmakognosi yang telah memberikan fasilitas, petunjuk dan membantu selama penulisan. Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., Bapak Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt. dan Bapak Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Ayahanda dan Ibunda tercinta, Adi Dharma dan Yenni yang tiada hentinya memberi semangat dan doa dengan tulus ikhlas bagi kesuksesan penulis, juga kepada Adikku

5 tersayang, Aily, Kuandi Dharma dan Evandi Dharma yang selalu memberi doa, dorongan dan semangat. Sahabat-sahabatku Erawaty, S.E., Daimin Japar, B.Arch. dan dari stambuk 2010 Cinta Suci, S.Farm., Felicia Christine, S.Farm., Novita Sari, S.Farm., Stephanie, S.Farm., Mita Joselin, S.Farm., Maya Octavia, S.Farm., Anddora Michi, S.Farm., Freddy, S.Farm., Hendrik, S.Farm. dan Jimmy Angga, S.Farm. yang telah memberi bantuan, dukungan dan motivasi. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya, penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua. Medan, Oktober 2014 Penulis, Aity NIM

6 KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA ISOLASI SENYAWA FLAVONOID DARI FRAKSI ETILASETAT DAUN GAHARU (Aquilaria malaccencis Lamk.) ABSTRAK Tanaman gaharu termasuk ke dalam suku Thymelaeaceae, daunnya memiliki aktivitas antioksidan karena mengandung senyawa flavonoid. Tujuan penulisan ini adalah untuk mengisolasi senyawa flavonoid dan diidentifikasi dengan spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser (shift reagent) dan spektrofotometri IR. Penelitian ini meliputi karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, pembuatan ekstrak dan isolasi flavonoid. Ekstraksi dilakukan secara perkolasi dan fraksinasi, sehingga diperoleh fraksi etilasetat. Fraksi etilasetat kemudian diisolasi dengan kromatografi kolom, kromatografi lapis tipis dan kromatografi preparatif sehingga diperoleh flavonoid. Uji kemurnian dengan kromatografi lapis tipis dengan fase gerak yaitu etilasetat, etilasetat:metanol (90:10 v / v ), toluen:etilasetat (70:30 v / v ) dan n-heksana:etilasetat (80:20 v / v ). Isolat yang diperoleh dikarakterisasi dengan spektrofotometri UV menggunakan pereaksi geser (shift reagent) dan spektrofotometri IR. Hasil karakterisasi simplisia diperoleh kadar air sebesar 3,53%, kadar sari larut air 12,09%, kadar sari larut etanol 9,56%, kadar abu total 7,04% dan kadar abu tidak larut asam 0,62%. Hasil skrining fitokimia terhadap daun gaharu mengandung senyawa steroid/triterpenoid, glikosida, flavonoid, tanin dan saponin. Analisis isolat menunjukkan bahwa isolat yang diperoleh adalah senyawa golongan flavonoid berfluoresensi lembayung biru dengan sinar UV 366 nm dan isolat yang diperoleh dianalisis secara spektrofotometri UV dengan pereaksi geser diduga merupakan senyawa golongan flavon dengan gugus hidroksi pada posisi 3, 4 dan 7. Hasil spektrofotometri IR menunjukkan adanya gugus C-O, C-H aromatis, C=C, C-H, C-H alifatis dan OH. Kata kunci: Aquilaria malaccencis, karakterisasi, skrining fitokimia, isolasi, flavonoid.

7 SIMPLEX CHARACTERIZATION AND PHYTOCHEMICAL SCREENING AND ISOLATION OF FLAVONOID COMPOUND FROM ETHYLACETATE FRACTION OF AGARWOOD LEAVES (Aquilaria malaccencis Lamk.) ABSTRACT Agarwood plant belong to the Thymelaeaceae family contain antioxidant activity because of the chemical compound called flavonoids. The purpose of this research was to isolate the flavonoid compound and determined it using UV spectrophotometry with shift reagent and IR spectrophotometry. This research covered simplex characterization, phytochemical screening, extraction and flavonoid isolation. Extraction was done through percolation and fractionation which produced ethylacetate fraction. The ethylacetate fraction was then isolated further using column chromatography, thin layer chromatography, and preparative thin layer chromatography until flavonoid was produced. The purity test was performed with thin layer chromatography using ethylacetate, ethylacetate:methanol (90:10 v / v ), toluen:ethylacetate (70:30 v / v ) and n- hexane:ethylacetate (80:20 v / v ) as the mobile phase, and the resulting isolate was identified by UV spectrophotometry and IR spectrophotometry. The result of simplex characterization produced 3.53% of water content, 12.09% of water-soluble extract content, 9.56% of ethanol-soluble extract content, 7.04% of total ash content and 0.62% of acid-insoluble ash content. The result of phytochemical screening of agarwood leaves contained steroid/triterpenoid, glycoside, flavonoid, tannin and saponin. The result of isolate analysis indicated that the isolate was flavonoid compound that showed violet blue fluorescence with 366 nm of UV light. The resulting isolate was then analyzed using UV spectrophotometry with shift reagent and it was indicated as flavones type with 3, 4, and 7 trihydroxy group. The result of IR spectrophotometry indicated the presence of C-O, CH aromatics, C=C, C-H, aliphatic C-H and OH functional groups. Key words: Aquilaria malaccencis, characterization, phytochemical screening, isolation, flavonoid.

8 DAFTAR ISI Halaman JUDUL... LEMBAR PENGESAHAN... KATA PENGANTAR... ABSTRAK... ABSTRACT... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR LAMPIRAN... i iii iv vi vii viii xiii xiv BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Perumusan Masalah Hipotesis Tujuan Penulisan Manfaat Penulisan... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA Uraian Tumbuhan Daerah tumbuh Nama daerah Nama asing Sistematika tumbuhan Morfologi tumbuhan Kegunaan... 7

9 2.2 Uraian Kandungan Kimia Tumbuhan Alkaloid Flavonoid Saponin Tanin Glikosida Glikosida antrakuinon Steroid/ triterpenoid Ekstraksi Fraksinasi Isolasi Senyawa Kimia Kromatografi lapis tipis Kromatografi kolom Kromatografi lapis tipis preparatif Spektrofotometri Spektrofotometri UV Penggunaan pereaksi geser (shift reagen) dalam spektrofotometri UV Spektrofotometri IR BAB III METODE PENULISAN Alat-alat Bahan-bahan Pembuatan Pereaksi Pereaksi Bouchardat... 20

10 3.3.2 Pereaksi Meyer Larutan Dragendorff Larutan Molisch Pereaksi asam klorida 2 N Larutan asam sulfat 2 N Larutan asam nitrat 0,5 N Larutan timbal (II) asetat 0,4 M Larutan besi (III) klorida 1% b/v Larutan pereaksi kloralhidrat Larutan Pereaksi Liebermann-Burchard Pengumpulan dan Pengolahan Tumbuhan Pengumpulan bahan tumbuhan Identifikasi tumbuhan Pembuatan simplisia Pemeriksaan Karakteristik Simplisia Pemeriksaan makroskopik Pemeriksaan mikroskopik Penetapan kadar air Penetapan kadar sari yang larut air Penetapan kadar sari yang larut etanol Penetapan kadar abu total Penetapan kadar abu yang tidak larut asam Skrining Fitokimia Pemeriksaan alkaloid... 25

11 3.6.2 Pemeriksaan glikosida Pemeriksaan saponin Pemeriksaan flavonoid Pemeriksaan antrakinon Pemeriksaan tanin Pemeriksaan steroid/triterpenoid Pembuatan Ekstrak Fraksinasi Cair-cair Analisis Fraksi etilasetat secara KLT Pemisahan Fraksi etilasetat dengan Kromatografi Kolom Isolasi Senyawa Flavonoid Hasil Kromatografi Kolom Uji Kemurnian terhadap Isolat Karakterisasi Isolat Karakterisasi isolat secara spektrofotometri UV Karakterisasi isolat secara spektrofotometri IR BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Identifikasi Tumbuhan Hasil Karakterisasi Bahan Tumbuhan dan Serbuk Simplisia Hasil Skrinning Fitokimia Hasil Ekstraksi Simplisia Daun Gaharu Hasil Isolasi Kromatografi Kolom Hasil Penafsiran Spektrum UV dengan Pereaksi Geser Hasil Penafsiran Spektrum IR BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN... 46

12 5.1 Kesimpulan Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN... 49

13 DAFTAR TABEL Tabel Halaman 4.1 Hasil Karakteristik Simplisia dari Daun Gaharu Hasil Skrining Fitokimia dari simplisia Daun Gaharu Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah NaOH Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah NaOH setelah 5 menit Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah AlCl Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah AlCl 3 /HCl Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah natrium asetat Hasil Spektrofotometri UV dalam metanol ditambah natrium asetat/ asam borat Hasil Spektrofotometri IR

14 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman 1 Identifikasi Tumbuhan Bagan pembuatan serbuk simplisia Bagan pembuatan ekstrak Bagan kromatografi kolom Bagan KLT preparatif Bagian makroskopik daun gaharu Bagian mikroskopik daun gaharu Kromatogram dan harga Rf dari fraksi etilasetat daun gaharu 59 9 Kromatogram hasil Kromatografi Kolom Kromatogram hasil KLT Preparatif dari E3 (vial ) Kromatogram KLT uji kemurnian isolat Perhitungan hasil penetapan kadar... 74