Pengolahan komponen darah

Transkripsi

1 Target dari panitia seminar dr. Auda S. Aziz Pengolahan komponen darah Peserta pelatihan mendapat pengetahuan tentang perkembangan teknologi pengolahan komponen darah untuk transfusi, termasuk apheresis dan automasi pengolahan komponen darah 2 Topik Pengambilan dan penanganan darah sebelum pengolahan Perkembangan pemilahan komponen darah Apheresis Komponen darah Automasi pengolahan komponen darah Pemilahan komponen darah Penting pengambilan darah donor dan teknik pemilahan komponen darah untuk menjamin hasil yang optimal baik bagi resipien maupun bagi donor Metoda pemilahan yang klasik yang banyak langkah manual sedang mengalami perubahan Pengembangan automasi, mulai dari ekspresi plasma sampai proses keseluruhan Perbedaan metoda produksi Trombosit Pekat melalui Buffy Coat dan PRP Berbagai metoda secondary processing : leukoreduction, irradiasi Bertambah luasnya penggunaan komponen darah apheresis 3 4

2 Pengambilan Darah Lengkap (WB) Penting diperhatikan Meminimalisasi kontaminasi Meminimalisasi komplikasi lokal Kantung darah memenuhi syarat, dengan sample pouch untuk produksi Trombosit Pekat Memberi label kantung utama, kantung satelit, tabung sampel darah Volume darah memadai untuk produksi komponen Pengambilan Darah Lengkap (WB) Penting diperhatikan Ratio antikoagulan memadai, pencampuran baik Lama pengambilan DL kurang dari 10 menit ( menit tak bisa untuk produksi Trombosit / FFP ) (USA) Waktu pengambilan darah hingga 12 menit dapat dibuat semua komponen, menit tidak untuk TC dan FFP, lebih 15 menit tidak bisa produksi komponen (Ina) 5 6 Penanganan DL sebelum dipilah Untuk produksi Trombosit Pekat Beberapa center : Trombosit harus dipisahkan dalam waktu 8 jam setelah pengambilan DL Beberapa area: membolehkan atau mempertimbangkan sampai 24 jam DL berada di suhu C (Ina) Semua proses produksi Trombosit dari Buffy Coat (BC) memperpanjang DL pada suhu C sampai 2 24 jam setelah pengambilan DL Penanganan DL sebelum dipilah Untuk produksi Trombosit Pekat Pooled BC didiamkan 2 18 jam pada suhu C sebelum Trombosit dipisahkan. Waktunya disesuaikan untuk memudahkan operasional logistik di UTD Bila pengambilan darah pagi sampai sore, dipilah Plasma & BC, BC didiamkan 1 malam (single / pooled), Trombosit dipilah pagi hari berikutnya Atau bila pengambilan darah sore hari, didiamkan 1 malam, pagi hari berikutnya dipilah BC, sore hari dipilah Trombosit 8 7

3 Penanganan DL sebelum dipilah Untuk produksi FFP USA FFP diproduksi dlm waktu 8 jam setelah pengambilan DL Apabila Plasma dibekukan dalam 8 24 jam setelah pengambilan DL, diberi label: Plasma frozen within 24 hours after collection Penanganan DL sebelum dipilah Untuk produksi FFP Europe Bila DL segera dimasukkan refrigerator, Plasma dapat dipisahkan dalam waktu 18 jam setelah pengambilan Bila DL disimpan C untuk produksi Trombosit Pekat, Plasma dapat dipisahkan dalam waktu 24 jam setelah pengambilan DL, dibekukan dan diberi label FFP Juga standar Indonesia (Ina) 9 10 Pemilahan komponen darah Dengan sentrifugasi Refrigerated centrifuge (klasik) Mesin apheresis Automated Refrigerated centrifuge Prinsip dasar pemilahan komponen darah Trombosit 3.6 ± 0.7 µm Lbr µm Tbl Plasma Leukosit 8 15 µm Eritrosit 7.8 ± 0.6 µm Lbr 2.5 ± 0.2 µm Tbl 11 12

4 Perkembangan pemilahan komponen I Plasma + TC Pemilahan komponen darah (klasik) Adalah pemutaran unit darah lengkap donor awal (PRC & PRP / Plasma) dan atau ke dua (TC & Plasma), sedangkan langkah selanjutnya (pemisahan komponen, seal, dll) dilakukan secara manual II PRP PRC Automasi pengolahan darah Adalah pemisahan unit darah donor dengan mengkombinasikan proses pemisahan darah lengkap awal dan ke dua, sehingga secara bersamaan diperoleh komponen PRC, Plasma, Trombosit Apheresis komponen darah Adalah prosedur mengeluarkan darah dari tubuh seseorang (1), mengambil komponen darah tertentu yang diinginkan (2) dan mengembalikan komponen darah lainnya ke tubuh orang tersebut (3). 1 Unit darah donor Reveos

5 Mesin apheresis MCS+ intermitten flow centrifugation Mengisi Bowl MCS Mesin apheresis Mesin apheresis Trima Spectra Optia continuos flow centrifugation Com.tec Amycus 19 20

6 Pemilahan komponen dengan sentrifugasi Variabel utama yang mempengaruhi hasil Ukuran rotor Kecepatan putaran Lama putaran Accelerasi / decelerasi Centrifuge : cek, validasi, dirawat, kalibrasi Komponen PRC Suhu simpan 1-6 C (USA) (2-6 C Ina) Lama simpan : 21 hari dalam CPD, Ht 65 % - 85 % (USA) (65%-75% Ina) 35 hari dalam CPD-A1, Ht < 80 % hari dalam Additive solution, Ht 55 % - 65 % Hemolisis di akhir masa simpan harus < 1 % (USA), < 0.8 % (EU, Ina) Komponen PRC Hb bervariasi tergantung donor & metoda Tidak diatur di USA Batas minimal 45 g / unit; 40 g / unit untuk leucoreduced PRC ( EU, Ina); ada juga yang menginginkan 5o g / unit Hb hilang lebih banyak pada produksi Trombosit via BC Komponen Trombosit Pekat (TC) Dalam plasma, volume ml (mutu baik dalam ml plasma) (USA), ml (Ina) Suhu simpan C Lama simpan 5 hari (USA, Ina), 7 hari (EU), 3 hari di Jepang ph < 6.2, suhu simpan 22 C, buruk pemulihan invivo (USA) ; harus > 6.4 (Ina) 23 24

7 Komponen Trombosit Pekat Apheresis Random 1 donor I unit TC 1 resipien 6 unit TC 6 unit WB 6 donor Komponen FFP USA Simpan dalam freezer 8 jam setelah pengambilan DL ( 6 jam bila DL dalam ACD) Suhu simpan - 18 C, lama simpan 1 tahun Suhu pencairan C, kantung FFP dimasukkan kantung plastik FFP cair dipakai segera atau simpan pada 1-6 C maksimal 24 jam 3 x / unit (USA) 5 x / unit minimal 2x / unit (Ina) 6 x /unit (Ina) Komponen FFP USA Intervensi meminimalkan pembuatan komponen dengan volume plasma yang tinggi dari donor yang mempunyai risiko pembentukan antibodi HLA. Jadi dari donor laki-laki, tidak dari wanita yang telah pernah hamil Karantina FFP 6 bulan Komponen FFP Council of Europe: Dibekukan dalam 6 jam setelah pengambilan DL Atau dalam 18 jam bila DL disimpan pada suhu 1-6 C Atau dalam 24 jam bila DL disimpan pada suhu C Pembekuan selesai dalam 1 jam pada suhu < - 30 C Lama simpan 3 bulan pada suhu -18 sampai - 25 C 36 bulan pada suhu - 25 C Juga standar Ina 27 28

8 Komponen Cryoprecipitate USA Dari FFP yang dicairkan dalam refrigerator 1-6 C selama 1 malam atau dalam circulating waterbath 1-6 C Simpan dalam freezer suhu < -18 C dalam 1 jam setelah keluar dari refrigerated centrifuge ; lama simpan 1 tahun EU Dicairkan pada suhu 2-6 C Disimpan 3 bulan pada suhu - 18 sampai - 25 C 36 bulan pada suhu - 25 C Juga standar Ina 29 Komponen Cryoprecipitate USA kandungan minimal F VIII 80 IU Fibrinogen 150 mg (ratarata 250 mg) vwf 170 unit F XIII 60 unit Anti-A, anti-b 1.15 % dari total EU kandungan minimal F VIII 70 IU Fibrinogen 140 mg ( biasanya 388 mg / unit) vwf 100 IU Juga standar Ina 30 USA Komponen Cryoprecipitate Cryoprecipitate cair digunakan segera, atau bisa disimpan pada suhu C maksimal 6 jam ( kantung single / pool menggunakan sterile connecting devices) atau 4 jam bila pool dengan open system Kandungan F VIII pada suhu C selama 2 jam berkurang 10 %, 4 jam berkurang 20 %, 6 jam turun 30 % Modifikasi Filtrasi leukosit pada DL sebelum disimpan (Prestorage leukocyte reduction by filtration) Pengurangan volume komponen (volume reduction) Irradiasi Cryopreservation 31 32

9 Karantina Semua komponen yang baru diproduksi di karantina sampai pengecekan tentang informasi & pencatatan donor selesai, termasuk informasi terbaru, pernah tidaknya ditolak dan hasil uji saring infeksi sudah lengkap Informasi produk The circular information for the use of human blood and blood components Untuk petugas yang terlibat dalam transfusi darah Automasi pengolahan darah Sistim beroperasi secara automatis, meliputi: Membuat keseimbangan Memutar Memisahkan komponen Menyegel Menentukan Volume dan isi komponen trombosit Mencatat prosedur dan data proses Beberapa unit darah lengkap pada satu saat. Automasi pengolahan darah Proses automasi yang konsisten menghasilkan: Presisi tinggi Sedikit kesalahan Sedikit produk gagal Sedikit produk terbuang Proses automasi yang akurat memungkinkan: Mengurangi variasi produk Meningkatkan konsistensi produk Mendapatkan volume komponen yang lebih tinggi 35 36

10 Automasi pengolahan darah Sistim automasi menghemat waktu & tenaga Prosedur berkesinambungan secara automatis Langkah manual sangat sedikit Mengurangi jumlah SPO / Instruksi kerja Memperpendek waktu pelatihan Lama prosedur lebih pendek Workflow optimal Automasi pengolahan darah Sistim automasi menghemat ruangan Jenis peralatan lebih sedikit Sistim sangat mendukung Good Manufacturing Practices (GM P) Kontrol proses yang tinggi Pencatatan data yang lengkap Manfaat automasi pengolahan darah Memperbaiki efisiensi laboratorium Memperbaiki kualitas komponen darah Memperbaiki kontrol proses Jenis alat pengolah darah automatis Reveos TACSI WB System TACSI PL System 39 40

11 The Reveos System Didisain bekerja automatis sepenuhnya dalam mengolah darah lengkap terstandar, terutama untuk lab yang menggunakan metoda PRP untuk memproduksi komponen sel darah merah, plasma dan trombosit The Reveos System Terdiri dari: The Reveos device Sistim automatis yang pada satu saat dapat mengolah sampai 4 unit Darah Lengkap Reveos System Manager Menangani sistim manajemen data C adence Data Collection System Aplikasi untuk perbaikan pelayanan pelanggan An integrated processing set Digunakan untuk koleksi & pengolahan The Reveos System The Reveos System Volume darah lengkap donor 450 ml / unit 43 44

12 The Reveos System Identifikasi kantung darah The Reveos System Kapasitas 4 unit Darah Lengkap Lama prosedur 18 menit The Reveos System The Reveos System Menggunakan 2 prosedur utama: Proses 2 komponen (2C) memproduksi 4 unit PRC, 4 unit Plasma dan 4 unit residu leukosit dari 4 unit Darah Lengkap dalam waktu 18 menit Proses 3 komponen (3C) memproduksi 4 unit PRC, 4 unit Plasma, 4 unit Trombosit dan 4 unit residu leukosit dari 4 unit Darah Lengkap dalam waktu 18 menit Produk (3C) : 4 unit Packed Red Cells 4 unit Plasma 4 unit Trombocyte Concentrate 4 unit residu leukosit 47 48

13 The Reveos System Produk (2C): 4 unit Packed Red Cells 4 unit Plasma 4 unit residu leukosit The Reveos System 49 Pooled Platelets 50 The Reveos System Dilengkapi dengan Reveos System Manager (RSM): manajemen data dan sistim informasi yang dirancang untuk operasional sehari-hari The Reveos System Seorang operator pada satu saat dapat menggunakan 4 mesin Reveos untuk mengolah 1 unit Darah Lengkap per menit 51 52

14 Kualitas produk automasi Konsisten Variasi lebih kecil Original Article Evaluation of the quality of blood components prepared using the Reveos automated blood processing system L. Johnson *, K. M. Winter, M. Kwok, S. Reid and D. C. Marks Applied and Developmental Research, Research and Development, Australian Red Cross Blood Service, Sydney, Australia Volume 105, 1ssue 3 Volume 105, 1ssue 3 Volume 105, 1ssue 3 Tujuan : Menentukan spesifikasi produk dan kualitas in vitro produk yang dipilah dengan sistim Reveos Material & metoda: Darah Lengkap donor diproses dengan sistim Reveos kemudian produknya dibandingkan dengan komponen yang dipilah dengan metoda semi-automatis yang digunakan sehari-hari 55 56

15 Volume 105, 1ssue 3 Volume 105, 1ssue 3 Material & metoda: Produk Reveos: PRC, leucoreduced, dalam SAGM, 4 C Plasma dibekukan pada suhu -30 C Faktor pembekuan diperiksa setelah dicairkan TC, leukoreduced, pool 4 unit interim-tc Material & metoda: Produk pembanding PRC, plasma dan buffy coat dipilah dengan metoda top & bottom TC, leukoreduced, dari pool 4 unit Buffy Coats Volume 105, 1ssue 3 Volume 105, 1ssue 3 Hasil: Pemilahan dengan sistim Reveos lebih cepat dibanding metoda semi-automatis (76 menit vs 92 menit) Kandungan (yield) sel darah merah dalam PRC dan trombosit dalam TC lebih tinggi pada komponen yang dipilah dengan sistim Reveos 59 Hasil: Parameter kualitas in vitro PRC dan Plasma Reveos dan pembanding sama Parameter kualitas in vitro TC Reveos dan pembanding sama: ph, metabolisme glukosa & laktat, respons shock hipotonik, ekspresi phosphatidylserine Marker aktivasi trombosit lebih tinggi pada produk TC Reveos 60

16 Volume 105, 1ssue 3 Volume 105, 1ssue 3 Kesimpulan : Sistim Reveos memperbaiki efisiensi komponen darah melalui pengurangan waktu pemilahan dengan tetap memelihara kualitas komponen yang sama 61 Reference Reveos QC Specifications Platelet Concentrate C volume (ml) ± ± 7.14 > 160 Platelet yield (x 10 9 / unit) ± ± > 240 Leucocytes (x 10 6 / unit) 0.33 ± ± 0.38 < 0.8 Plasma carryover (%) 27.6 ± ± 4.6 n/a RBCC volume (ml ) ± ± 4.26 > 220 Hb (g / unit) ± ± 1.68 > 40 Ht (l/l) 0.58 ± ± Leucocytes (x 10 6 / unit) asa Pengolahan 0.26 ± 0.01 komponen darah 0,24 ± 0.12 < Reference Reveos QC Specifications Plasma volume (ml) ± ± 7.14 > 160 Platelet yield (x 10 9 / unit) ± Volume 105, 1ssue ± > 240 Leucocytes (x 10 6 / unit) 0.33 ± ± 0.38 < 0.8 Lipaemia 27.6 ± ± 4.6 n/a 63 The TACSI WB system The TACSI WB system didisain untuk pengolahan DL secara automatis dan terstandar terutama untuk lab yang memproduksi PRC, Plasma dan Trombosit Pekat via Buffy Coat (BC) Satu operator pada satu saat dapat mengoperasikan 4 TACSI WB devices, memilah unit DL per jam 64

17 Kesimpulan Pemilahan komponen darah semakin berkembang ke arah automasi, meminimalkan tindakan manual, sehingga waktu pengolahan menjadi lebih pendek, hasil produk menjadi lebih konsisten dan tenaga lebih efektif; apheresis pun makin berkembang Standar pelayanan darah 2015 agar diperhatikan karena pergeseran dari standar USA yang selama ini banyak dianut ke ketetapan dalam standar Europa 65