Wiryowidagdo, S. (2008). Kimia dan Farmakologi Bahan Alam. Edisi II. Jakarta: Penerbit buku Kedokteran EGC. Lampiran 1. Hasil identifikasi landak laut Diadema setosum 37
Lampiran 2. Gambar bagan penelitian Landak laut Diadema setosum Simplisia dibelah dan dipisahkan dari organ dalam dicuci disortir ditiriskan lalu ditimbang dikeringkan Dihaluskan Serbuk simplisia landak laut Diadema setosum dikarakterisasi diskrining golongan senyawa kimia diekstraksi secara perkolasi menggunakan pelarut n-heksana Ekstrak n-heksana Isolat diisolasi secara kromatografi preparatif dengan fase gerak landaian serta di KLT KLT 2 arah diidentifikasi secara spektrofotometri UV dan IR Spektrum 38
Lampiran 3. Gambar landak laut Diadema setosum segar 39
Lampiran 4. Gambar simplisia landak laut Diadema setosum 40
Lampiran 5. Gambar serbuk simplisia landak laut Diadema setosum 41
Lampiran 6. Gambar mikroskopik serbuk simplisia cangkang dan duri landak laut Diadema setosum a b c d Keterangan : a. spikula bentuk meja semu b. spikula bentuk piring c. spikula bentuk kancing semu d. spikula bentuk akar 42
Lampiran 7. Gambar bagan pengolahan, skrining fitokimia dan karakterisasi simplisia Cangkang dan duri landak laut Diadema setosum dicuci ditiriskan dikeringkan Simplisia dihaluskan Serbuk simplisia Skrining fitokimia Karakterisasi simplisia Perkolasi Ekstrak - Alkaloida - Flavonoida - Saponin - Tanin - Glikosida - Steroida/Triterpenoida - Antrakuinon - Pemeriksaan Mikroskopik - Pemeriksaan Makroskopik - Penetapan kadar air - Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol - Penetapan kadar sari yang larut dalam air - Penetapan kadar abu total - Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam 43
Lampiran 8. Gambar bagan pembuatan ekstrak n-heksana landak laut Diadema setosum 450 g Serbuk simplisia dimaserasi selama 3 jam dimasukkan ke dalam alat perkolator dituangkan cairan penyari n-heksana secukupnya sampai semua simplisia terendam ditutup mulut tabung perkolator dengan aluminium foil dibiarkan selama 24 jam dibuka kran dan dibiarkan tetes ekstrak mengalir Ampas Perkolat 4,0501 gr ekstrak kental n-heksana disaring dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu yang tidak lebih dari 50 0 C 44
Lampiran 9. Gambar kromatogram senyawa steroid/triterpenoid dari ekstrak n- heksana cangkang dan duri landak laut bp bp bp bp bp mu mu mu hj hj a mu tp b mu br tp c hj br tp d br tp e br tp Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etilasetat dengan perbandingan a. (90:10), b. (80:20), c. (70:30), d. (60:40), e. (50:50). Tp: titik penotolan, bp: batas pengembang, mu: merah ungu, hj: hijau, br: biru. 45
Lampiran 10. Gambar kromatogram hasil KLT preparatif bp A mu hj br A tp Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etilasetat (60:40), penampak bercak Liebermannn-Burchard, tp = titik penotolan, bp=batas pengembangan, mu: merah ungu, hj: hijau, br: biru. 46
Lampiran 11. Gambar kromatogram hasil KLT dua arah dari isolat a hasil isolasi dari ekstrak n-heksana cangkang dan duri landak laut a2 bp a1 tp Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak I = n-heksana-etilasetat (60:40), fase gerak II = benzen-etil asetat (70:30), penampak bercak Liebermann Burchard, tp= titik pentotolan, bp= batas pengembangan, a1= arah pengembangan pertama, a2= arah pengembangan kedua. harga Rf = 0,625 47
Lampiran 12. Gambar kromatogram hasil KLT dua arah dari isolat b hasil isolasi dari ekstrak n-heksana cangkang dan duri landak laut a2 bp a1 tp Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak I = n-heksana-etilasetat (60:40), fase gerak II = benzen-etil asetat (70:30), penampak bercak Liebermannn Burchard, tp = titik pentotolan, bp= batas pengembangan, a1= arah pengembangan pertama, a2= arah pengembangan kedua. Harga Rf = 0,225 48
Lampiran 13. Gambar spektrum UV dari senyawa isolat a hasil isolasi dari ekstrak n-heksana cangkang dan duri landak laut Panjang gelombang (nm) 49
Lampiran 14. Gambar spektrum inframerah (IR) dari senyawa isolat a ekstrak n- heksana cangkang dan duri landak laut Bilangan gelombang (1/cm) 50
Lampiran 15. Perhitungan hasil penetapan kadar a. Perhitungan penetapan kadar air Kadar air = volume air (ml) berat sampel (g) x100% 1. Sampel 1 Berat sampel Volume air = 5,00 g = 0,4 ml Kadar air = 0,4 5,00 x100% = 8 % 2. Sampel Berat sampel Volume air = 5,01 g = 0,4 ml Kadar air = 0,4 5,01 x100% = 7,98 % 3. Sampel 3 Berat sampel Volume air = 5,01 g = 0,4 ml Kadar air = 0,4 5,01 x100% = 7,98% Kadar air rata rata = 8%+7,98%+7,98% 3 = 7,99% 51
Lampiran 15. (Lanjutan) b. Perhitungan penetapan kadar sari yang larut dalam air Kadar sari larut dalam air = berat sari berat simplisia x 100 20 x 100% 1. Kadar sari larut dalam air I Berat cawan = 49,701g Berat cawan + berat sari Berat sampel Berat sari = 49,750 g = 5,015 g = 0,049 g Kadar sari larut dalam air = 0,049 5,015 x 100 20 x 100% = 4,88 % 2. Kadar sari larut dalam air II Berat cawan Berat cawan + berat sari Berat sampel = 48,050 g = 48,100 g = 5,015 g Berat sari = 0,0502g Kadar sari larut dalam air = 0,0502 5,015 x 100 20 x 100% = 5 % 3. Kadar sari larut dalam air III Berat cawan Berat cawan + berat sari Berat sampel Berat sari = 49,700 g = 47,750 g = 5,015 g = 0,05 g 52
Lampiran 15. (Lanjutan) Kadar sari larut dalam air = 0,05 5,015 x 100 20 x 100% = 4,98 % Kadar sari larut dalam air rata rata = 4,88%+5%+4,98% 3 = 4,95 % c. Perhitungan penetapan kadar sari yang larut dalam etanol Kadar sari larut dalam etanol 100% 1. Kadar sari larut dalam etanol I Berat Cawan Berat Cawan + Berat Sari Berat Sampel Berat sari = 49,700 g = 49,740 g = 5,100 g = 0,04 g Kadar sari larut dalam etanol = 0,04 5,100 x 100 20 x 100% 1. Kadar sari larut dalam etanol II Berat Cawan Berat Cawan + Berat Sari Berat Sampel Berat sari = 3,92 % = 48,050 g = 48,130 g = 5,010 g = 0,080 g Kadar sari larut dalam etanol = 0.080 5,01 x 100 20 x 100% 2. Kadar sari larut dalam etanol III = 7,98 % Berat Cawan = 48,050g Berat Cawan + Berat Sari = 48,132g Berat Sampel = 5,01 g 53
Lampiran 15. (Lanjutan) Berat sari = 0.082 g Kadar sari larut dalam etanol = 0,082 5,010 x 100 20 x 100% = 8,184% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata = 3,92%+7,98%+8,184% 3 d. Perhitungan penetapan kadar abu total = 6,69 % Kadar abu total 100% 1. Sampel I Berat simplisia = 2,080 g 2. Sampel II Berat abu = 0,46 g Kadar abu total = 0,46 2,080 x 100% = 22,115% Berat simplisia = 2,001 g 3. Sampel III Berat abu = 0,43g Kadar abu total = 0,36 2,001 x 100% = 21,489% Berat simplisia = 2,001 g Berat abu = 0,41g Kadar abu total = 0,41 2,001 x 100% = 20,489% 54
Lampiran 15. (Lanjutan) Kadar abu total rata-rata = 22,115%+21,489%+20,489% 3 = 21,364% e. Perhitungan penetapan kadar abu tidak larut dalam asam Kadar abu tidak larut dalam asam 100% 1. Sampel I Berat simplisia = 2,080 g 2. Sampel II Berat abu = 0,26 g Kadar abu tidak larut asam = 0,26 2,080 x 100% = 12,5% Berat simplisia = 2,001 g 3. Sampel III Berat abu = 0,23g Kadar abu tidak larut asam = 0,23 2,001 x 100% = 11,49% Berat simplisia = 2,001 g Berat abu = 0,22g Kadar abu tidak larut asam = 0,22 2,001 x 100% = 10,99% Kadar abu tidak larut asam rata-rata = 12,5%+11,49%+10,99% 3 = 11,66% 55