DAFTAR ISI Halaman ABSTRAK... KATA PENGANTAR... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... i ii iv viii ix xi BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang... 1 B. Rumusan Masalah... 4 C. Batasan Masalah... 4 D. Tujuan... 5 E. Manfaat... 5 BAB II BAKTERI RESISTEN LOGAM KROM DARI LIMBAH CAIR INDUSTRI PENYAMAKAN KULIT A. Resistensi Bakteri terhadap Krom... 6 1. Bakteri Pereduksi Krom (Cr 6+ )... 6 2. Mekanisme Reduksi Krom (Cr 6+ )... 8 B. Industri Penyamakan Kulit... 10 1. Pra Penyamakan (beam house)... 11 2. Penyamakan (tanning)... 12 3. Pasca Penyamakan (finishing)... 14 C. Pencemaran Air oleh Logam Berat Krom... 14 D. Aktivitas Biokimia Mikroorganisme... 17 i
BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Penelitian... 19 B. Populasi dan Sampel... 19 C. Waktu dan Lokasi Penelitian... 19 D. Alat dan Bahan Penelitian... 20 E. Langkah Kerja... 22 1. Tahap Persiapan... 22 a. Sterilisasi... 22 2. Tahap Penelitian... 23 a. Pengambilan sampel... 23 b. Pengukuran Faktor Lingkungan dan Konsentrasi Logam Krom... 23 c. Pembiakan Isolat Bakteri... 23 d. Pengamatan Morfologi dan Isolasi Biakan Murni Bakteri... 24 e. Pewarnaan Gram Bakteri... 25 f. Pewarnaan Endospora... 25 g. Uji Biokimiawi... 26 1) Uji Fermentasi Karbohidrat... 26 2) Uji Hidrolisis Pati, Lipid, Gelatin & Kasein... 26 a) Hidrolisis Pati... 26 b) Hidrolisis Lipid... 27 c) Hidrolisis Gelatin... 27 d) Hidrolisis Kasein... 28 3) Uji Katalase... 28 4) Uji Motilitas... 29 5) Uji Produksi H 2 S... 29 6) Uji Reduksi Nitrat... 29 7) Uji Urease... 30 8) Uji IMViC... 30 a) Uji Indol... 31 ii
b) Uji Methyl Red (MR)... 31 c) Uji Voges-Proskauer (VP)... 32 d) Uji Simmon s sitrat... 32 F. Analisis Data... 33 G. Alur Penelitian... 34 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Karakterisasi Morfologi Bakteri Resisten Logam Krom.. 35 B. Karakterisasi Bakteri Resisten Logam Krom Berdasarkan Pewarnaan Gram dan Keberadaan Endospora... 39 1. Pewarnaan Gram... 39 2. Pewarnaan Endospora... 43 C. Uji Biokimia... 44 1. Uji Hidrolisis (Pati, Kasein, Lipid & Gelatin)... 44 a. Hidrolisis Pati... 44 b. Hidrolisis Kasein... 45 c. Hidrolisis Lipid... 46 d. Hidrolisis Gelatin... 48 2. Uji Motilitas... 49 3. Uji Produksi H 2 S... 50 4. Uji Reduksi Nitrat... 51 5. Uji Katalase... 52 6. Uji Urease... 53 7. Uji IMVIC (Indol, Methyl Red, Voges Proskauer & Sitrat)... 55 a. Uji Indol... 55 b. Uji Methyl Red (MR)... 56 c. Uji Uji Voges-Proskauer (VP)... 57 d. Uji Sitrat... 58 8. Fermentasi Karbohidrat (Dekstrosa, Sukrosa dan Laktosa... 60 iii
D. Identifikasi Bakteri... 63 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan... 69 B. Saran... 69 DAFTAR PUSTAKA... 71 LAMPIRAN... 78 RIWAYAT HIDUP... 108 iv
DAFTAR TABEL Tabel Halaman 3.1 Alat alat Penelitian... 20 3.2 Bahan-bahan Penelitian... 21 4.1 Hasil Pengamatan Morfologi Bakteri Resisten Logam Krom... 37 4.2 Hasil Uji Aktivitas Biokimiawi dan Identifikasi 12 Bakteri Resisten Logam Krom... 67 v
DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 2.1 Toksisitas dan Mutagenesis Cr 6+... 8 2.2 Mekanisme Reduksi Krom Cr 6+ secara Enzimatik pada Kondisis Aerob dan Anaerob... 10 2.3 Proses Penyamakan Kulit... 15 2.4 Aktivitas Biokimia Mikroorganisme... 18 3.1 Alur Penelitian... 34 4.1 Persentase Warna Koloni, Bentuk Koloni, Tepian Koloni, Elevasi Koloni, Kepekatan Koloni, Kenampakan Koloni... 38 4.2 Keragaman Bentuk, Warna, Tepian, Kenampakan dan Kepekatan 12 Koloni Bakteri Resisten Logam Krom... 39 4.3 Hasil Pewarnaan Gram 12 Isolat Bakteri Resisten Logam Krom... 40 4.4 Persentase Bentuk Sel dan Jenis Gram... 41 4.5 Hasil Pewarnaan Endospora dan Letak Endospora pada Tiga Isolat Bakteri Resisten Logam Krom... 43 4.6 Hasil Uji Hidrolisis Pati pada Medium Agar Pati... 45 4.7 Hasil Uji Hidrolisis Kasein pada Medium Susu Skim Agar.. 46 4.8 Hasil Uji Hidrolisis Lipid pada Medium Agar Lipid... 47 4.9 Hasil Uji Hidrolisis Gelatin pada Medium Gelatin... 48 vi
4.10 Hasil Uji Motilitas pada Medium SIM Agar... 49 4.11 Hasil Uji Produksi H 2 S dalam Medium SIM Agar... 50 4.12 Hasil Uji Reduksi Nitrat dalam Medium Kaldu Nitrat... 51 4.13 Hasil Positif Uji Katalase pada Medium Nutrient Agar... 52 4.14 Hasil Uji Urease dalam Medium Urea Broth... 54 4.15 Hasil Negatif Uji Indol dalam Medium Tryptone Broth... 55 4.16 Hasil Uji Methyl Red dalam Medium MR-VP Broth... 56 4.17 Hasil Uji Voges-Proskauer dalam Medium MR-VP Broth... 57 4.18 Hasil Uji Sitrat dalam Medium Simmon s Sitrat... 59 4.19 Hasil Uji Fermentasi Dekstrosa pada Medium Kaldu Dextrosa..... 4.20 Hasil Uji Fermentasi Sukrosa pada Medium Kaldu Sukrosa... 60 61 4.21 Hasil Negatif Uji Fermentasi Laktosa pada Medium Kaldu Laktosa... 61 vii
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Pengambilan Sampel... A. Lokasi Pengambilan Sampel... Halaman 78 78 B. Pengukuran Faktor Abiotik Limbah Penyamakan Kulit Sukaregang Kabupaten Garut... 79 2 Hasil Pengukuran Atomic Absorption Spectrofotometri (AAS)... 80 3 Keputusan Menteri Negara Lingkungan Hidup tentang Baku Mutu Limbah Cair Bagi Kesehatan Industri... 81 4 Pengukuran Koloni Isolat Bakteri Resisten Logam Krom... 82 5 Protokol Pembuatan Reagen dan Larutan yang Digunakan dalam Penelitian... 83 6 Dokumentasi Hasil Uji Biokimiawi Bakteri Resisten Krom... 91 viii