SKRINING AKTIVITAS ANTIBAKTERI DARI EKSTRAK ETANOL BIJI DAN EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH ANGGUR HITAM (Vitis vinifera L.) TERHADAP BAKTERI Propionibacterium acne Skripsi I GUSTI AYU AGUNG RATIH CARDIANI PUTRI 1108505056 JURUSAN FARMASI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS UDAYANA 2016 i
Lembar Pengesahan SKRINING AKTIVITAS ANTIBAKTERI DARI EKSTRAK ETANOL BIJI DAN EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH ANGGUR HITAM (Vitis vinifera L.) TERHADAP BAKTERI Propionibacterium acne Skripsi Skripsi ini diajukan sebagai syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm.) di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana Oleh I GUSTI AYU AGUNG RATIH CARDIANI PUTRI 1108505056 ii
KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat dan rahmat-nya lah penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul Skrining Aktivitas Antibakteri Dari Ektrak Etanol Biji dan Ekstrak Etanol Kulit Buah Anggur Hitam (Vitis vinifera, L.) terhadap bakteri Propionibacterium acne tepat pada waktunya. Penyusunan skripsi ini tentunya tidak terlepas dari dukungan, bimbingan dan bantuan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, pada kesempatan ini dengan segala kerendahan hati penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada semua pihak yang telah memberikan bantuan baik secara langsung maupun tidak langsung, yaitu kepada: 1. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M. Si. selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana. 2. Dr.rer.nat I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua Jurusan di Jurusan Farmasi F.MIPA Universitas Udayana. Terima kasih atas bimbingan dan bantuannya. 3. Ni Luh Putu Vidya Paramita, S.Farm., M. Si., Apt. selaku dosen pembimbing I yang telah bersedia meluangkan waktunya untuk membimbing, mengarahkan, serta memberikan motivasi dan perhatian kepada penulis dalam penyusunan skripsi ini. iii
4. Putu Sanna Yustiantara, S.Farm., M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing II yang telah bersedia meluangkan waktunya membimbing, mengarahkan, serta memberikan motivasi dan perhatian kepada penulis dalam penyusunan skripsi ini. 5. Luh Putu Febryana Larasanty, S.Farm., M.Sc., Apt selaku dosen Pembimbing Akademik. Terimakasih atas bimbingan, dukungan, saran serta motivasi yang telah diberikan kepada penulis. 6. Seluruh dosen pengajar beserta staf/pegawai di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana yang telah banyak membantu penulis, terutama para staf yang telah banyak membantu dalam hal pengurusan surat dan kelengkapan administratif lainnya. 7. Keluarga khususnya Ni Luh Putu Sumarni selaku Ibu, I Komang Saji selaku ayah. Terimakasih atas dukungan, saran serta motivasi yang telah diberikan kepada penulis. 8. Teman terdekat, I Kadek Suardika yang dari awal telah memberikan motivasi, perhatian, semangat, pengertian, kesabaran dan doa dalam segala kondisi selama penyusunan ini. 9. Seluruh warga Lumiere Onze Vaquelin selaku mahasiswa Farmasi Udayana 2011 khususnya Sayu, Tria, Ratu, Tiara, Gung Sinta, Dayu Chandra, Dayu Dewi, Evi, Ari, Roni, serta sahabat-sahabat penulis. iv
Terimaksih atas dukungan, saran serta motivasi yang telah diberikan kepada penulis.. 10. Seluruh keluarga besar penulis. Terimakasih atas dukungan, semangat, saran serta motivasi yang telah diberikan kepada penulis. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih jauh dari sempurna. Untuk itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi perbaikan penyusunan skripsi ini selanjutnya. Harapan penulis, semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi yang membutuhkan. Bukit Jimbaran, Januari 2016 Penulis v
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... LEMBAR PENGESAHAN... KATA PENGANTAR... DAFTAR ISI... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... i ii iii vi x xi DAFTAR LAMPIRAN... xii DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH... xiii ABSTRAK... xiv ABSTRACT... xv BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Rumusan Masalah... 4 1.3 Tujuan Penelitian... 5 1.4 Manfaat Penelitian... 5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Buah Anggur Hitam... 7 2.1.1 Klasifikasi... 7 vi
2.1.2 Deskripsi Tanaman... 7 2.1.3 Kandungan Kimia... 8 2.1.4 Aktivitas Farmakologi Biji Anggur Hitam...... 9 2.1.5 Aktivitas Farmakologi Kulit Anggur Hitam... 9 2.2 Ekstraksi... 10 2.3 Propionibacterium acne... 11 2.3.1 Media Agar... 12 2.4 Antibiotika untuk Mengobati Infeksi Bakteri P. acnes... 12 2.5 Uji Aktivitas Antibakteri... 14 2.5.1 Metode Difusi disk... 14 BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Rancangan Penelitian... 16 3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian... 16 3.3 Obyek Penelitian... 16 3.4 Bahan Penelitian... 17 3.4.1 Bahan Ekstraksi... 17 3.4.2 Bahan Uji Antibakteri... 17 3.5 Alat Penelitian... 17 3.6 Variabel Penelitian... 18 3.6.1 Variabel Bebas... 18 3.6.2 Variabel Terikat... 18 vii
3.6.2 Variabel Terkendali... 18 3.7 Batasan Oprasional Penelitian... 18 3.8 Prosedur Penelitian... 19 3.8.1 Determinasi Tanaman... 19 3.8.2 Pengambilan dan Preparasi Sampel... 19 3.8.3 Pembuatan Ekstrak Etanol Biji dan Ekstrak Etanol Kulit Buah anggur Hitam... 20 3.8.4 Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol Biji dan Ekstrak Etanol Kulit Buah anggur Hitam... 20 3.8.5 Sterilisasi Alat dan Bahan... 21 3.8.6 Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Biji dan Kulit Anggur Hitam... 21 3.8.7 Pembuatan Media... 23 3.8.8 Uji Aktivitas Antibakteri... 24 3.9 Analisis Data... 26 3.8 Skema Penelitian... 28 BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Pengumpulan Sampel Anggur Hitam... 29 4.2 Pembuatan Ekstrak Etanol Biji Anggur Hitam dan Ekstrak Etanol Kulit Buah Anggur Hitam... 29 4.3 Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol Biji Anggur Hitam dan viii
Ekstrak Etanol Kulit Buah Anggur Hitam... 30 4.4 Uji Aktivitas Antibakteri... 31 4.5 Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Biji Anggur Hitam dan Ekstrak Etanol Kulit Buah Anggur Hitam... 35 BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan... 38 5.2 Saran... 38 DAFTAR PUSTAKA... 39 ix
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 3.1 Rancangan Percobaan Uji Aktivitas Antibakteri Biji dan Kulit Buah Anggur Hitam... 26 Tabel 3.2 Kriteria interpretasi data untuk agen antimicrobial menurut Nation Comitte for Clinical Laboratory Standard (NCCLS)... 27 Tabel 4.1 Hasil Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol Biji Anggur Hitam dengan Metode Gravimetri... 30 Tabel 4.2 Hasil Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol Kulit Buah Anggur Hitam dengan Metode Gravimetri... 31 Tabel 4.3 Nilai Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Biji Anggur Hitam terhadap Bakteri P. acnes... 32 Tabel 4.4 Nilai Diameter Zona Hambat Ekstrak Etanol Kulit Buah Anggur Hitam terhadap Bakteri P. acnes... 32 Tabel 4.5 Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Biji Anggur Hitam dan Ekstrak Etanol Kulit Buah Anggur Hitam... 36 x
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Vitis vinifera L...... 7 Gambar 2.2 Biji Vitis vinifera L... 7 Gambar 2.3 Struktur Senyawa Proantosianidin... 8 Gambar 2.4 Gambar Mikroskopik Propionibacterium acnes... 11 Gambar 3.1 Skema Umum Penelitian... 28 xi
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Surat Keterangan Hasil Determinasi... 47 Lampiran 2 Perhitungan Rendemen Ekstrak Biji Anggur Hitam... 49 Lampiran 3 Perhitungan Rendemen Ekstrak Kulit Buah Anggur Hitam... 49 Lampiran 4 Perhitungan Pembuatan Media Mueller Hinton Agar (MHA)... 49 Lampiran 5 Komposisi Media... 50 Lampiran 6 Perhitungan Konsentrasi Ekstrak Uji Biji Anggur Hitam... 50 Lampiran 7 Perhitungan Konsentrasi Ekstrak Uji Kulit Buah Anggur Hitam... 51 Lampiran 8 Ekstraksi Biji Anggur Hitam dan Ekstraksi Kulit Buah Anggur Hitam... 53 Lampiran 9 Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Biji Anggur Hitam dan Ekstrak Etanol Kulit Buah Anggur Hitam... 54 Lampiran 10 Uji Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Biji Anggur Hitam dan Ekstrak Etanol Kulit Buah Anggur Hitam... 58 xii
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH Agen Inflammatory Flora normal : Agen yang menyebabkan adanya inflamasi : Merupakan mikroorganisme yang dapat ditemukan pada tubuh manusia tanpa menyebabkan penyakit IC 50 : Inhibition Concentration 50%, merupakan ukuran kuantitatif yang menunjukkan berapa banyak obat tertentu atau substansi (penghambat) yang diperlukan untuk menghambat suatu proses biologis (atau komponen dari sebuah proses, yaitu enzim, sel, sel reseptor atau mikroorganisme) sebanyak 50%. Stress oksidatif : Keadaan dimana jumlah radikal bebas di dalam tubuh melebihi kapasitas tubuh untuk menetralkannya. Antioksidan endogen : Antioksidan alami yang berasal dari dalam tubuh. Antioksidan eksogen MHA MHB CFU NCCLS WHO : Antioksidan sintesis yang berasal dari luar tubuh : Mueller Hinton Agar. : Mueller Hinton Broth. : Collony Forming Unit. : Nation Comitte for Clinical Laboratory Standards. : World Health Organization. xiii
ABSTRAK Acne vulgaris (jerawat) merupakan suatu penyakit kulit yang paling umum terjadi pada remaja, dimana salah satu bakteri penyebab jerawat adalah bakteri gram positif Propionibacterium acne yang bersifat anaerob. Anggur hitam (Vitis vinifera L.) yang berasal dari famili Vitaceae telah terbukti secara ilmiah memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri gram positif Staphylococcus aureus. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol biji anggur hitam dan ekstrak etanol kulit buah anggur hitam (Vitis vinifera L.) terhadap bakteri P. acnes. Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi cakram. Sampel yang digunakan adalah 5 variasi konsentrasi dari ekstrak etanol biji anggur hitam dan ekstrak etanol kulit buah anggur hitam masing-masing dalam CMC-Na 0,5% b/v (12,5 mg/ml; 25 mg/ml; 50 mg/ml; 100 mg/ml dan 200 mg/ml) dengan kontrol positif Doksisiklin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa 5 variasi konsentrasi ekstrak etanol biji anggur hitam dan ekstrak etanol kulit buah anggur hitam tidak mampu menghambat pertumbuhan bakteri P. acnes. Hal ini diduga karena ketidastabilan senyawa aktif antibakteri proantosianidin dan ketahanan dari bakteri P. acnes itu sendiri. Kata kunci: Jerawat, Propionibacterium acnes, Vitis vinifera (L), Antibakteri xiv
ABSTRACT Acne Vulgaris (Acne) is a common skin disease of adolescence, Propionibacterium acne is the one of gram positive anaerob bacteria that can cause acne. Black grape (Vitis vinifera, L.) from family Vitaceae has been reported as an antibacterial against the gram positive bacteria Staphylococcus aureus. The aim of this research is to determine the antibacterial activity of ethanol extract of black grape seed and ethanol extract of black grape skin (Vitis vinifera, L.) against P. acnes. The disk diffusion method was used for the antibacterial activity s test. The samples are 5 variations concentration of ethanol extract of black grape seed and ethanol extract of black grape skin respectively in CMC-Na 0,5 % w/v (12,5 mg/ml; 25 mg/ml; 50 mg/ml; 100 mg/ml and 200 mg/ml) and Doxycyclin as the positive control. The test s result showed that the 5 concentrations of ethanol extract of black grape seed and skin respectively can t inhibit the growth of P. acnes. That can be caused by the instability of proanthocyanidin as the active antibacterial compound and the endurance of Propionibacterium acnes. Keyword : Acne vulgaris, Propionibacterium acnes, Vitis vinifera (L), Antibaccterial xv