LMPIRN 35
36 Lampiran 1. Data dan perhitungan analisis proksimat Padina australis a. Kadar air Ulangan (gram) B (gram) C (gram) Kadar air (%) Rata-rata 1 5,03 7,09 7,57 90,46 90,57 5,37 4,69 5,19 90,69 = bobot sampel awal (gram) B = bobot cawan kosong (gram) C = bobot cawan + sampel setelah dioven (gram) % kadar air ulangan 1 = 0 - (C-B) x 0 % = 0 - (0,36-19,95) x 0 % 5,03 = 90,46 % % kadar air ulangan = 0 - (C-B) x 0 % = 0 - (5,19 4,69) x 0 % 5,37 = 90,69 % % kadar air rata-rata = 90,46 % + 90,69 % = 90,57 % b. Kadar abu Ulangan (gram) B (gram) C (gram) Kadar abu (%) 1 5,03 7,09 7,19 1,99 5,37 4,69 4,81,3 = bobot sampel (gram) B = bobot cawan kosong (gram) C = bobot sampel + cawan setelah ditanur (gram) % kadar abu ulangan 1 = C-B x 0 % = 7,19 7,09 x 0 % 5,03 = 1,99 % Rata-rata,11
37 % kadar abu ulangan = C-B x 0 % = 4,81-4,69 x 0 % 5,37 =,3 % % kadar abu rata-rata = 1,99 % +,3 % =,11 % c. Kadar protein Ulangan Bobot sampel Kadar protein V HCl (ml) % N (g) (%) 1 1,15 0,13 0,16 0,99 1,17 0,14 0,17 1,05 V blanko = 0 ml FP = Mr HCl = 14.007 N HCl = 0.0 FK = 6.5 % N ulangan 1 = (V HCl - V blanko) x N HCl x FP x Mr HCl x 0% mg contoh = (0,13-0) x 0,0 x 0 x 14,007 x 0% 1,15 x 3 = 0,16 % % Kadar protein = % N x FK = 0,99 % % N ulangan = (V HCl - V blanko) x N HCl x FP x Mr HCl x 0% mg contoh = (0,14-0) x 0,0 x 0 x 14,007 x 0% 1,17 x 3 = 0,17 % % Kadar protein = % N x FK = 1,05 % % kadar abu rata-rata = 0,99 % + 1,05 % = 1,0 % ratarata 1,0
38 d. Kadar lemak Ulangan Wo (g) W 1 (g) W (g) Kadar lemak (%) 1 5,03 1,48 1,46 0,40 5,1 74,55 74,53 0,38 Wo = bobot sampel (gram) W 1 = bobot sampel + labu setelah dioven (gram) W = bobot labu lemak kosong (gram) % Kadar lemak ulangan 1 = W 1 - W x 0% W 0 Rata-rata 0,39 = 1,4 8-1,46 x 0% 5,03 = 0,40 % % Kadar lemak ulangan = W 1 - W x 0% W 0 = 74,55-74,53 x 0% 5,1 = 0,38 % % kadar abu rata-rata = 0,40 % + 0,38 % = 0,39 % e. Kadar karbohidrat (by difference) % Kadar karbohidrat = 0 % - (kadar air + kadar abu + protein + lemak) = 0 % - (90,57 % +,11 % + 1,0 % + 0,39 %) = 5,91 % f. Kadar abu tidak larut asam Ulangan (g) B (g) C (g) Kadar abu TL (%) Rata-rata 1 5,03 19,87 19,88 0,0 0,0 5,37 3,74 3,75 0,19 = bobot sampel (gram) B = bobot cawan kosong (gram) C = bobot sampel + cawan setelah ditanur (gram)
39 % kadar abu tidak larut asam (TL) = C-B x 0 % % kadar abu TL ulangan 1 = 19,88 19,87 x 0 % 5,03 = 0,0 % % kadar abu TL ulangan = 3,75-3,74 x 0 % 5,37 = 0,19 % % kadar abu TL rata-rata = 0,0 % + 0,19 % = 0,0 % Lampiran. Perhitungan kadar serat pangan P. australis a. Kadar serat pangan tak larut B C D E IDF (%) Rata-rata (%) 0,367 0,31 Blanko 0,801 0,8455 16,15 16,1466 5,31 0,7914 0,834 18,8891 18,9089 5,4641 0,6954 0,701 15,11 15,153 0,0035 0,736 0,7301 16,9415 16,9443 0,0037 5,397 0,0036 = Berat sampel (gram) B = Berat kertas saring kosong (gram) C = Berat kertas saring + residu setelah dioven (gram) D = Berat cawan porselen kosong (gram) E = Berat cawan porselen + abu setelah ditanur (gram) Kadar IDF 1 (%) = ( (C - B ) - (E - D)) - Blanko x 0% = ((0,8455-0,801)- (16,1466-16,15)) - 0,0036 x 0% 0,367 = 5,31 % Kadar IDF (%) = ( (C - B ) - (E - D)) - Blanko x 0% = ((0,834-0,7914) - (18,9089-18,8891)) - 0,0036 x 0% 0,31 = 5,4641%
40 Rata-rata IDF (%) = 5,31% + 5,4641 % = 5,397 % b. Kadar serat pangan larut F G H I SDF (%) Rata-rata (%) 0,367 0,7689 0,817 15,9851 15,9956 8,364 8,3855 0,31 0,781 0,813 18,3415 18,3513 8,4446 0,6968 0,7011 16,9565 16,9581 0,007 Blanko 0,0031 0,701 0,7066 18,1144 18,1163 0,0035 = Berat sampel (gram) F = Berat kertas saring kosong (gram) G = Berat kertas saring + residu setelah dioven (gram) H = Berat cawan porselen kosong (gram) I = Berat cawan porselen + abu setelah ditanur (gram) Kadar SDF 1 (% = (G - F) - (I - H) - Blanko x 0% = (0,817-0,7689) - (15,9956 15,9851) - 0,0031 x 0% 0,367 = 8,364 % Kadar SDF (%) = (G - F) - (I - H) - Blanko x 0% = (0,813-0,781) - (18,3513 18,3415) - 0,0031x 0% 0,31 = 8,4446 % Rata-rata SDF (%) = 8,364% + 8,4446% = 8,3855 % c. Kadar serat makanan total Kadar serat makanan total = kadar IDF rata-rata + kadar SDF rata-rata = 5,397 % + 8,3855 % = 13,778 %
41 Lampiran 3. Data dan perhitungan rendemen ekstrak kasar Padina australis Pelarut Ulangan (g) B (g) C (g) Rendemen (%) Rata-rata 1 37,96 38,48 5,0 Metanol 38,40 38,8 4,0 1 37,64 37,71 0,70 Etil setat 37,87 37,94 0,70 1 39,79 39,8 0,30 n-heksana 119,37 119,40 0,30 = bobot awal sampel (gram) B = bobot botol kosong (gram) C = bobot sampel+botol setelah ekstraksi (gram) a. Metanol % rendemen ekstrak kasar = C-B x 0 % (ulangan 1) = 38,48-37,96 x 0 % = 5,0 % 4,66 0,70 0,30 % rendemen ekstrak kasar = C-B x 0 % (ulangan ) = 38,8-38,40 x 0 % = 4,0 % % rendemen rata-rata = 5,0 % + 4,0 % = 4,70% b. Etil setat % rendemen ekstrak kasar = C-B x 0 % (ulangan 1) = 37,71-37,64 x 0 % = 0,70 %
4 % rendemen ekstrak kasar = C-B x 0 % (ulangan ) = 37,94-37,87x 0 % = 0,70 % % rendemen rata-rata = 0,70 % + 0,70 % = 0,70 % c. N-heksana % rendemen ekstrak kasar = C-B x 0 % (ulangan 1) = 39,8-39,79 x 0 % = 0,30 % % rendemen ekstrak kasar = C-B x 0 % (ulangan ) = 119,40-119,37 x 0 % = 0,30 % % rendemen rata-rata = 0,30 % + 0,30 % = 0,30% Lampiran 4. Data dan contoh perhitungan total fenol P. australis a. Data standar asam galat konsentrasi (ppm) bsorban 0 0,000 0,083 0 0,185 30 0,87 40 0,40 50 0,498 60 0,584 70 0,686
43 b. Kurva standar asam galat c. Data hasil analisis total fenol Pelarut Ulangan B C bsorban x(ppm) total fenol (ppm) Ratarata (ppm) Methanol 1 0,5138 0,01 0,7 8,0038 61,61 46,09 0,5138 0,0136 0,960 30,5154 30,57 1 0,0758 0,0053 0,3050 31,4195 89,87 etil asetat 90,89 0,0758 0,0051 0,3000 30,917 91,90 n- 1 0,0314 0,0031 0,0800 8,8156 17,86 17,3 heksana 0,0314 0,0030 0,070 8,0119 16,77 = bobot awal sebelum ekstrak (g) B = bobot setelah ekstraksi (g) C = bobot ekstrak yang digunakan (g) - Perhitungan mencari x (ppm) ekstrak metanol ulangan 1 y = a + bx 0,71 = - 0,0078 + 0,01 x x = -0,0078-0,71 0,01 x = 8,0038 ppm - Perhitungan total fenol ekstrak metanol ulangan 1 Total fenol = 8,0038 mg x ml x 0,5138 g x 1 00 ml x 0,01 mg x g = 0,616 mg/g = 61,6066 mg/kg = 61,61 ppm
44 - Perhitungan total fenol ekstrak metanol ulangan Total fenol = 30,5154 mg x ml x 0,5138 g x 1 00 ml x 0.0136 mg x g = 0,306 mg/g = 30,57 mg/kg = 30,57 ppm - Rata-rata total fenol ekstrak metanol Rata-rata = 61,61+ 30,57 = 46,09 ppm Lampiran 5. Perhitungan Pengenceran DPPH, BHT dan Ekstrak P. australis a) DPPH 0,00013 M sebanyak 5 ml (Mr = 394 g/mol) Konsentrasi = m x 00 Mr V 0.00013 M = m x 00 394 g/mol 5 ml M = 1,3 gram DPPH sebanyak 1, 3 gram ditambahkan etanol sampai 5 ml b) BHT 00 ppm sebanyak 1 ml 00 ppm = m. 1 ml M = 1 mg BHT sebanyak 1 mg ditambahkan etanol sampai 1 ml c) Larutan ekstrak 00 ppm = m. 1 ml m = 1 mg Ekstrak sebanyak 1 mg ditambahkan etanol sampai 1 ml Pelarut Jumlah Ditambahkan Konsentrasi 1 µl ekstrak 00 ppm - 00 ppm 1 µl ekstrak 00 ppm 1 µl etanol 500 ppm 1 µl ekstrak 500 ppm 1 µl etanol 50 ppm Metanol 1 µl ekstrak 50 ppm 1 µl etanol 15 ppm 1 µl ekstrak 15 ppm 1 µl etanol 6,5 ppm 1 µl ekstrak 6,5 ppm 1 µl etanol 31,5 ppm 1 µl ekstrak 31,5 ppm 1 µl etanol 15,65 ppm 1 µl ekstrak 15,65 ppm 1 µl etanol 7,815 ppm
45 Pelarut Jumlah Ditambahkan Konsentrasi 1 µl ekstrak 00 ppm - 00 ppm 1 µl ekstrak 00 ppm 1 µl etanol 500 ppm 1 µl ekstrak 500 ppm 1 µl etanol 50 ppm Etil 1 µl ekstrak 50 ppm 1 µl etanol 15 ppm setat 1 µl ekstrak 15 ppm 1 µl etanol 6,5 ppm 1 µl ekstrak 6,5 ppm 1 µl etanol 31,5 ppm 1 µl ekstrak 31,5 ppm 1 µl etanol 15,65 ppm 1 µl ekstrak 15,65 ppm 1 µl etanol 7,815 ppm Pelarut Jumlah Ditambahkan Konsentrasi 1 µl ekstrak 00 ppm 00 ppm 1 µl ekstrak 00 ppm 1 µl etanol 500 ppm 1 µl ekstrak 500 ppm 1 µl etanol 50 ppm n-heksana 1 µl ekstrak 50 ppm 1 µl etanol 15 ppm 1 µl ekstrak 15 ppm 1 µl etanol 6,5 ppm 1 µl ekstrak 6,5 ppm 1 µl etanol 31,5 ppm 1 µl ekstrak 31,5 ppm 1 µl etanol 15,65 ppm 1 µl ekstrak 15,65 ppm 1 µl etanol 7,815 ppm Lampiran 6. Data dan contoh perhitungan IC 50 Persen inhibisi BHT 15,650 ppm = 0,441-0,08 x 0% = 5,8344 % 0,441 a. BHT Konsentrasi (ppm) abs BHT abs blanko Inhibisi (%) 15,650 0,08 5,8344 7,815 0,60 41,0430 3,906 0,39 5,3968 1,9531 0,371 0,441 15,8730 0,9765 0,403 8,6167 0,4883 0,44 3,8548 0,441 0,433 1,8141 IC 50 y = 1,583 ln(x) + 1,94 50 = 1,583 ln(x) + 1,94 37,08 = 1,583 ln(x) ln (x) =,9465 x =19,0395 ppm Persamaan garis y = 1,583 ln(x) + 1,94 IC 50 (ppm) 19,0395
46 b. Ekstrak metanol P. australis (Ulangan 1) Persen inhibisi IC 50 00 ppm = 0,441-0,003 x 0% = 99,3197 % 0,441 Konsentrasi (ppm) abs sampel abs blanko Inhibisi (%) 00 0,003 99,3197 500 0,149 66,13 50 0,0 50,1134 0,441 15 0,75 37,6417 6,5 0,31 7,9 31,5 0,343, 15,65 0,37 16,0998 7,815 0,339 3,19 y =,9590 ln(x),6570 50 =,9590 ln(x),6570 ln (x) = 5,5349 x = 53,38 ppm Persamaan garis y =,9590 ln(x),6570 IC 50 (ppm) 53,38 Lampiran 7. nalisa ragam dan uji lanjut Duncan ekstrak P. australis a. nalisis ragam rendemen ekstrak Sumber Jumlah Derajat keragaman kuadrat bebas KT F hitung P-value Pelarut 3,3063 a 11,65 74,46 0,003 Galat 0,4695 3 b 0,16 Total 3,7758 5 c Keterangan: a = n-1 b = n (t-1) c = nt-1 n = perlakuan t = ulangan b. Uji Duncan Pelarut Nilai tengah Nilai Subset Metanol 4,66 Etil setat 0,69 B N-Heksana 0,9 B
47 Lampiran 8. nalisa ragam dan uji lanjut Duncan kandungan total fenol P. australis a. nalisis ragam kandungan total fenol Sumber Jumlah Derajat keragaman kuadrat bebas KT F hitung P-value Pelarut 54558,44 a 779, 168,99 0,0008 Galat 484,7 3 b 161,4 Total 5504,71 5 c Keterangan: a = n-1 b = n (t-1) c = nt-1 n = perlakuan t = ulangan b. Uji Duncan Pelarut Nilai tengah Nilai Subset Metanol 46,09 Etil setat 90,89 B N-Heksana 17,3 C Lampiran 9. nalisa ragam dan uji lanjut Duncan aktivitas antioksidan P. australis a. nalisis ragam aktivitas antioksidan Sumber Jumlah Derajat Keragaman kuadrat bebas KT F hitung P-value Pelarut 54558,44 a 779, 168,99 0,0008 Galat 484,7 3 b 161,4 Total 5504,71 5 c Keterangan: a = n-1 b = n (t-1) c = nt-1 n = perlakuan t = ulangan b.uji Duncan Pelarut Nilai tengah Nilai Subset Metanol 67,05 C Etil setat 1160,1 B N-Heksana 189,47