LAMPIRAN Lampiran 1 Skema Penelitian Persiapan alat dan bahan Sterilisasi alat Pembuatan media Inisiasi kalus Pengamatan Penimbangan dan subkultur Hasil 80
81 Lampiran 2 Skema Kerja Sterilisasi Alat Direndam alat (botol kultur, glassware, alat diseksi) dengan teepol selam 24 jam Dicuci dengan menggunakan deterjen, dibilas dengan air mengalir dan aquades steril dan dikeringkan di dalam oven Ditutup botol dengan plastik dan dibungkus cawan petri dengan kertas kemudian dimasukkan ke dalam autoklaf dan disterilisasi selama 60 menit dengan suhu 121 0 C Dibungkus alat-alat diseksi dengan alumunium foil dan disterilisasi dalam oven selama 3 jam pada suhu 125 0 C Disimpan dalam ruang steril
82 Lampiran 3 Perhitungan Pembuatan Media 1. Media MS a. Media MS untuk 1 L dari Universitas Muhammadiyah Malang diencerkan sampai 600 ml. b. Media MS 600 ml dibagi untuk media, masing-masing 150 ml. c. Selanjutnya media MS 150 ml ditambahkan ZPT 2,4-D dan air kelapa sampai 250 ml. d. Pembagian media ini untuk pembuatan 4 macam media. 2. ZPT 2,4-D a. Larutan stok 2,4-D 100 ppm 2,4-D = 10 mg 2,4-D + 100 ml aquades b. Pengambilan larutan stok 2,4-D 1) 1 mg/l V 1 M 1 = V 2 M 2 V 1 (100) = (250)(1) V 1 = 2,5 ml 2) 2 mg/l V 1 M 1 = V 2 M 2 V 1 (100) = (250)(2) V 1 = 5 ml 3) 3 mg/l V 1 M 1 = V 2 M 2 V 1 (100) = (250)(3) V 1 = 7,5 ml 3. Air kelapa (AK) a. 10% 10% x 250 ml = 25 ml b. 15% 15% x 250 ml = 37 ml c. 20% 20% x 250 ml = 50 ml 4. Media a. Media 1 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 0 + 25 + 75 = 250 ml b. Media 2 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 0 + 37 + 63 = 250 ml c. Media 3 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 0 + 50 + 50 = 250 ml
d. Media 4 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 2,5 + 25 + 72,5 = 250 ml e. Media 5 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 2,5 + 37 + 60,5 = 250 ml f. Media 6 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 2,5 + 25 + 47,5 = 250 ml g. Media 7 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 5 + 25 + 70 = 250 ml h. Media 8 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 5 + 37 + 58 = 250 ml i. Media 9 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 5 + 50 + 45 = 250 ml j. Media 10 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 7,5 + 25 + 67,5 = 250 ml k. Media 11 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 7,5 + 37 + 55,5 = 250 ml l. Media 12 MS + ZPT+ AK+ Aquades = 150 + 7,5 + 50 + 42,5 = 250 ml 83
84 Lampiran 4 Hasil Penelitian 1. Munculnya eksplan berkalus Media 2,4-D (mg/l) Ulangan (Hari) + Air Kelapa (%) I II III Total Rata-Rata Keterangan 0 + 10 13 0 0 13 4,33 Hidup 0 + 15 13 18 0 31 10,33 Hidup 0 + 20 11 11 0 22 7,33 Hidup 1 + 10 9 9 9 27 9,00 Hidup 1 + 15 11 13 14 38 12,67 Hidup 1 + 20 11 17 0 28 9,33 Hidup 2 + 10 0 0 0 0 0,00 Tidak tumbuh kalus 2 + 15 0 0 0 0 0,00 Tidak tumbuh kalus 2 + 20 9 10 0 19 6,33 Hidup 3 + 10 8 8 8 24 8,00 Hidup 3 + 15 9 10 9 28 9,33 Hidup 3 + 20 7 8 7 22 7,33 Hidup Total 101 104 47 252 2. Persentase kalus Media 2,4-D (mg/l) Ulangan (%) + Air Kelapa (%) I II III Total Rata-Rata 0 + 10 33,33 0,00 0,00 33,33 11,11 0 + 15 100,00 66,67 0,00 166,67 55,56 0 + 20 33,33 66,67 0,00 100,00 33,33 1 + 10 66,67 100,00 100,00 266,67 88,89 1 + 15 66,67 100,00 100,00 266,67 88,89 1 + 20 33,33 33,33 0,00 66,67 22,22 2 + 10 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 2 + 15 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 2 + 20 66,67 100,00 0,00 166,67 55,56 3 + 10 100,00 100,00 100,00 300,00 100,00 3 + 15 33,33 33,33 33,33 100,00 33,33 3 + 20 33,33 66,67 66,67 166,67 55,56 Total 566,67 666,67 400,00 1633,33
85 3. Berat basah kalus Media 2,4-D (mg/l) Ulangan (gr) + Air Kelapa (%) I II III Total Rata-Rata 0 + 10 0,0234 0,0000 0,0000 0,0234 0,0078 0 + 15 0,0373 0,0077 0,0000 0,0450 0,0150 0 + 20 0,0347 0,0255 0,0000 0,0602 0,0201 1 + 10 0,1198 0,1707 0,1733 0,4638 0,1546 1 + 15 0,0158 0,0131 0,0103 0,0392 0,0131 1 + 20 0,0172 0,0209 0,0000 0,0381 0,0127 2 + 10 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 2 + 15 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 2 + 20 0,0235 0,0149 0,0000 0,0384 0,0128 3 + 10 0,0606 0,0725 0,0526 0,1857 0,0619 3 + 15 0,032 0,0068 0,008 0,0468 0,0156 3 + 20 0,0510 0,0326 0,0562 0,1398 0,0466 Total 0,4151 0,3646 0,3005 1,0802 4. Gambar morfologi kalus Media 2,4-D (mg/l) + Air Kelapa (%) Ulangan I II III Keterangan 0 + 10 Hijau kecokelatan, kompak 0 + 15 Putih kekuningan, kompak 0 + 20 Hijau kecokelatan, kompak
86 1 + 10 Kekuningan, kompak 1 + 15 Putih kehijauan, kompak 1 + 20 Kuning kehijauan, kompak 2 + 10 Tidak tumbuh kalus 2 + 15 Tidak tumbuh kalus 2 + 20 Putih kekuningan, kompak 3 + 10 Putih kekuningan, intermediet
87 3 + 15 Hijau kecokelatan, kompak 3 + 20 Putih kekuningan, remah
88 Lampiran 5 ANAVA 1. Munculnya eksplan berkalus
2. Persentase kalus 89
3. Berat basah kalus 90
91
92
93 Lampiran 6 Komposisi Media MS 1000 ml Garam Mineral Kebutuhan Stok Yang Diambil Makro KNO 3 1900 19000 mg/100 ml 10 ml MgSO 4. 7H 2 O 370 3700 mg/100 ml 10 ml CaCl 2. 2H 2 O 440 4400 mg/100 ml 10 ml KH 2 PO 4 170 1700 mg/100 ml 10 ml NH 4 NO 3 1650 16500 mg/100 ml 10 ml Mikro FeSO 4. 7H 2 O 27,8 2780 mg/100 ml 1 ml Na 2 EDTA 37,3 3730 mg/100 ml 1 ml ZnSO 4. 7H 2 O 8,6 860 mg/100 ml 1 ml H 3 BO 3 6,2 62 mg/50 ml 5 ml Kl 0,83 83 mg/50 ml 0,5 ml Na 2 MoO 4. 2H 2 O 0,25 25 mg/50 ml 0,5 ml CoCl 2. 6H 2 O 0,025 25 mg/100 ml 0,1 ml CuSO 4. 5H 2 O 0,025 25 mg/100 ml 0,1 ml MnSO 4. 4H 2 O 22,3 2230 mg/100 ml 1 ml Vitamin Myo-inositol 100 2500 mg/50 ml 2 ml Niasin 0,5 50 mg/50 ml 0,5 ml Piridoksin-HCl 0,5 50 mg/50 ml 0,5 ml Tiamin 0,1 50 mg/100 ml 0,2 ml
94 Lampiran 7 Alat, Bahan dan Kegiatan Penelitian 1. Alat Alat-Alat Gelas Hot Plate Autoklaf Oven LAF Timbangan Analitik Cawan Petri Dan Alat Diseksi Steril Ruang Inkubator Freezer Timbangan Analitik ph Meter 2. Bahan Media Karet, Plastik dan Label Bahan-Bahan Sterilisasi Eksplan
95 Media Sterilisasi Ruang dan Alat-Alat Bahan Untuk Inisiasi Spiritus dan Formalin Pegagan 3. Kegiatan penelitian Sterilisasi Kering Alat Pembuatan Media Inisiasi Sterilisasi Eksplan Penimbangan Bahan Pencucian Alat-Alat Perendaman Alat dengan Tipol Sterilisasi Media Mengukur ph Pengamatan
96
97
98 Lampiran 10 Daftar Riwayat Hidup DAFTAR RIWAYAT HIDUP Nama Tempat, Tanggal Lahir Jenis Kelamin Kewarganegaraan Agama / Status Yusria Nazza Malang, 15 Juni 1991 Perempuan Indonesia Islam / Belum Menikah No. Identitas SIM 910615260767 Alamat Jalan Tirto RT. 04 RW. 05 Desa Pagedangan Kecamatan Turen Kabupaten Malang No. HP +6285851217887 RIWAYAT PENDIDIKAN Tingkat Tahun Lembaga Lokasi Keterangan Sekolah Dasar 1997-2003 MI. Hidayatul Falah Jl. Suko 03 Pagedangan Turen Lulus Sekolah Mengah Pertama 2003-2006 MTs.Negeri Turen Jl. Kenongosari 16 Turen Lulus Sekolah Menengah Akhir 2006-2009 MAN Malang I Jl. Baiduri Bulan 40 Malang Lulus Malang, 07 September 2013 Yusria Nazza