BAHAN DAN METODE. Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan. Penelitian ini dimulai pada bulan

Transkripsi

1 BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian ini akan dilakukan di Laboratorium Kultur Jaringan Fakultas Pertanian, Medan. Penelitian ini dimulai pada bulan Maret 2010 sampai dengan Juni Bahan dan Alat Penelitian Bahan eksplan yang digunakan dalam penelitian ini adalah kalus Sansevieria cylindrica yang dipelihara dalam media MS + 1,5 mg/l 2,4-D yang berumur 9 minggu, bahan penyusun media MS, BAP, NAA, agar-agar, akuades steril, KOH, NaCl, alkohol 96% dan spritus. Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Laminar Air Flow, autoclave, timbangan analitik, rak kultur, hot plate dengan magnetik stirer, erlenmeyer, gelas ukur, petridish, pipet ukur, pinset, scapel, handsprayer, thermometer, lampu bunsen, ph meter, kertas saring, kertas sampul, aluminium foil, tisu, label, botol kultur dan kertas milimeter. Metode Penelitian Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) faktorial yang terdiri dari dua faktor: Faktor I: Tingkat Konsentrasi pemberian BAP dengan 4 taraf A 0 = 0 mg/l A 1 = 1 mg/l A 2 = 2 mg/l A 3 = 3 mg/l 14

2 Faktor II: Tingkat konsentrasi pemberian NAA dengan 3 taraf N 0 = 0 mg/l N 1 = 0,2 mg/l N 2 = 0,4 mg/l Sehingga diperoleh 12 kombinasi perlakuan yaitu: A 0 N 0 A 0 N 1 A 0 N 2 A 1 N 0 A 1 N 1 A 1 N 2 A 2 N 0 A 2 N 1 A 2 N 2 A 3 N 0 A 3 N 1 A 3 N 2 Jumlah perlakuan : 12 Jumlah ulangan : 6 Jumlah kalus tiap botol : 1 Jumlah seluruh kalus : 72 Adapun model linier yang digunakan untuk RAK adalah: Y ijk = µ + ρi + αj + βk + (αβ)jk + ε ijk i = 1,2,3,4,5,6 j = 1,2,3,4 k = 1,2,3 Dimana: Y ijk = Hasil pengamatan dari faktor ZPT BAP ke-j dan faktor ZPT NAA ke-k pada ulangan ke-i µ = Nilai tengah ρi α j β k = Efek ulangan ke-i = Efek konsentrasi BAP pada taraf ke-j = Efek konsentrasi NAA pada taraf ke-k

3 (αβ) jk = Interaksi antara konsentrasi BAP pada taraf ke-j dengan konsentrasi NAA pada taraf ke-k ε ijk = Efek galat dari ulangan ke-i, konsentrasi BAP pada taraf ke-j dan konsentrasi NAA pada taraf ke-k. Jika perlakuan (konsentrasi BAP, konsentrasi NAA dan interaksi) berbeda nyata dalam sidik ragam maka dilanjutkan dengan Uji Jarak Berganda Duncan (DMRT) pada α = 5% (Steel and Torrie, 1995). Pengamatan Parameter Persentase pertumbuhan eksplan (%) Kultur dikatakan tumbuh adalah berwarna hijau, secara visual ukuran bertambah, berat bertambah dan perubahan embriogenesis maupun morfogenesis. Persentase tumbuh dihitung tiap minggu dengan rumus: Persentase tumbuh = Jumlah eksplan yang tumbuh x 100% Jumlah eksplan per perlakuan Jumlah tunas (tunas) Dihitung jumlah tunas yang terbentuk dari setiap planlet yang dilakukan pada akhir penelitian. Panjang tunas (cm) Tinggi planlet diukur dengan menggunakan kertas milimeter yang diukur dari tempat munculnya tunas (pangkal) sampai ujung tunas tertinggi dilakukan pada akhir penelitian.

4 Jumlah daun (helai) Jumlah daun dihitung dari daun yang terbentuk yang telah terbuka sempurna dari setiap planlet yang dilakukan pada akhir penelitian. Jumlah akar (helai) Jumlah akar dihitung dari jumlah akar yang terbentuk dari leher akar pada setiap planlet yang dilakukan pada akhir penelitian. Bentuk daun Bentuk daun dilihat daun membulat atau melebar pada setiap planlet yang dilakukan pada akhir penelitian. Warna daun Warna daun dilihat berwarna hijau, kuning atau perpaduan kuning dan hijau pada setiap planlet yang dilakukan pada akhir penelitian. Pelaksanaan Penelitian Sterilisasi Alat-Alat Sebelum semua alat-alat seperti botol kultur, petridish, gelas ukur, erlenmeyer, pinset, scapel, dan alat-alat gelas lainnya terlebih dahulu direndam dalam detergen dan dicuci bersih dengan air, selanjutnya dikeringkan. Kemudian alat seperti scapel, pipet ukur, pinset dan petridish dibungkus dengan kertas sampul sedangkan erlenmeyer dan gelas ukur permukaannya ditutup dengan aluminium foil. Setelah itu, semua botol kultur dan alat-alat disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 C dengan tekanan 17,5 psi selama 60 menit. Kemudian alat-alat tersebut dimasukkan ke dalam oven kecuali botol kultur.

5 Pembuatan Media Media yang digunakan dalam penelitian ini adalah media MS padat. Tahap pertama dalam pembuatan media adalah membuat larutan stok bahan kimia hara makro dengan pembesaran 10x, hara mikro dengan pembesaran 100x, larutan iron dengan pembesaran 100x, larutan vitamin dengan pembesaran 50x, sukrosa 90 g, myo-inositol 0,3 g dan agar 1,8 g masing-masing dalam 12 tempat. Tahap berikutnya, sukrosa dimasukkan ke dalam beaker glass yang telah berisi akuades 500 ml, lalu diaduk dengan menggunakan magnetic stirrer sebagai pengaduk. Kemudian ditambahkan myo-inositol diaduk hingga larut. Dimasukkan unsur hara makro 150 ml, larutan stok hara mikro 15 ml, iron 15 ml dan vitamin 30 ml. Kemudian larutan ditempatkan menjadi 900 ml. Larutan sebanyak 180 ml dikeluarkan dan digunakan 720 ml. Larutan dibagi dalam tiga erlenmeyer sehingga masing-masing berisi 240 ml. Tiap erlenmeyer diberi perlakuan NAA. Ketiga erlenmeyer dibagi empat sehingga diperoleh dua belas erlenmeyer, masing-masing berisi 60 ml. Tiap erlenmeyer diberi perlakuan BAP. Kemudian ditambah 140 ml akuades pada tiap erlenmeyer sehingga tiap erlenmeyer berisi 200 ml. Keasaman diukur dengan ph meter. ph yang dikehendaki adalah 5,8. untuk mengatur ph yaitu menaikkan atau menurunkan ph dapat digunakan larutan NaOH dan HCl 0,1 N. Agar ditambahkan ke dalam erlenmeyer setiap perlakuan, lalu dipanaskan diatas hot plate dengan pengaduk magnetic stirer sampai larutan menjadi bening (semua agar telah larut). Media siap dipindahkan ke dalam botol kultur steril sebanyak 20 botol. Kemudian botol kultur tersebut ditutup dengan aluminium foil dan diberi label sesuai dengan perlakuan. Media dalam botol tersebut

6 disterilisasikan di dalam autoklaf dengan tekanan 17,5 psi, suhu 121 C selama 30 menit. Selanjutnya dapat disimpan dalam ruang kultur sebelum digunakan. Persiapan Eksplan Eksplan berupa kalus diambil dari botol yang berisi media MS + 2,4-D yang berumur 9 minggu. Kegiatan ini dilakukan di Laminar Air Flow (LAF), dimana terlebih dahulu LAF dibersihkan dengan kertas tisu dan disemprot dengan alkohol 96%. Eksplan yang sudah terbentuk kalus dikeluarkan dari botol kultur dengan cara mendekatkan botol di atas api bunsen dengan menggunakan pinset, lalu dimasukkan ke dalam petridish yang sudah steril dan dipotong dengan menggunakan scapel dan pinset menjadi 2 bagian. Scapel dan pinset yang digunakan harus dalam keadaan steril, caranya dengan mencelupkan kedalam alkohol lalu disterilisasikan diatas api bunsen setiap kali akan digunakan. Penanaman Eksplan Eksplan yang akan dikulturkan ke dalam media tanam diletakkan di petridish. Kemudian eksplan segera ditanam pada media sesuai perlakuan dengan menggunakan pinset setiap botol diisi satu potong kalus, kemudian botol ditutup dengan aluminium foil. Pemeliharaan Eksplan Botol-botol berisi kalus diletakkan pada rak kultur di dalam ruang kultur. Ruangan ini diusahakan bebas dari bakteri dan cendawan, dimana setiap hari disemprot dengan alkohol 96%. Jika media sudah mulai habis maka dilakukan subkultur.

7 HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Penelitian Persentase Pertumbuhan Eksplan (%) Data pengamatan persentase pertumbuhan eksplan dapat dilihat pada Lampiran 1. Dari tabel diketahui bahwa persentase pertumbuhan tertinggi pada perlakuan BAP yaitu pada konsentrasi 3 mg/l sedangkan pada perlakuan NAA pada konsentrasi 0,4 mg/l. Data pengamatan persentase pertumbuhan eksplan dari perlakuan konsentrasi BAP dan NAA dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel 1. Pengaruh konsentrasi BAP dan NAA terhadap persentase pertumbuhan eksplan Perlakuan Minggu BAP: A 0 = 0 mg/l 94,44 83,33 77,77 77,77 61,11 61,11 BAP: A 1 = 1 mg/l ,44 83,33 83,33 83,33 72,22 BAP: A 2 = 2 mg/l ,88 77,77 77,77 72,22 66,66 BAP: A 3 = 3 mg/l 94,44 88,88 88,88 83,33 83,33 77,77 NAA: N 0 = 0 mg/l 95,83 83,33 70,83 70,83 66,66 62,50 NAA: N 1 = 0,2 mg/l ,83 87,50 83,33 75,00 70,83 NAA: N 2 = 0,4 mg/l 95,83 87,50 87,50 87,50 83,33 75,00 Dari Tabel 1. dapat dilihat bahwa secara umum, semua perlakuan mengalami penurunan persentase pertumbuhan eksplan. Pada perlakuan tanpa BAP mengalami penurunan yang paling cepat dibanding konsentrasi 1, 2 dan 3 mg/l. Persentase pertumbuhan eksplan tertinggi terdapat pada konsentrasi 3 mg/l sebesar 77,77 % sedangkan pada konsentrasi 2, 1 dan 0 mg/l masing-masing sebesar 66,66%, 72,22% dan 61,11%. Dari perlakuan NAA, perlakuan tanpa NAA mengalami penurunan yang paling cepat dibanding konsentrasi 0,2 dan 0,4 mg/l. Persentase pertumbuhan eksplan tertinggi terdapat pada konsentrasi 0,4 mg/l yaitu sebesar 75,00 % 21

8 sedangkan pada konsentrasi 0,2 mg/l dan tanpa NAA masing-masing sebesar 70,83% dan 62,50 %. Pengamatan persentase pertumbuhan eksplan dari perlakuan konsentrasi BAP dapat dilihat pada Gambar 1. Persentase Pertumbuhan Eksplan (%) A0 = 0 mg/l A1 = 1 mg/l A2 = 2 mg/l A3 = 3 mg/l Minggu ke- Gambar 1. Diagram konsentrasi BAP terhadap persentase pertumbuhan eksplan yang mengalami penurunan dengan persentase pertumbuhan tertinggi pada konsentrasi 3 mg/l sedangkan terendah pada perlakuan tanpa BAP. Pengamatan persentase pertumbuhan eksplan dari perlakuan konsentrasi NAA dapat dilihat pada Gambar 2. Persentase Pertumbuhan Eksplan (%) N0 = 0 mg/l N1 = 0.2 mg/l N2 = 0.4 mg/l Minggu ke- Gambar 2. Diagram konsentrasi NAA terhadap persentase pertumbuhan eksplan yang mengalami penurunan dengan persentase pertumbuhan tertinggi pada konsentrasi 0,4 mg/l dan terendah pada perlakuan tanpa NAA.

9 Jumlah Tunas (tunas) Data pengamatan dan sidik ragam dari jumlah tunas dapat dilihat pada Lampiran 2-4. Dari sidik ragam diketahui bahwa perlakuan konsentrasi BAP berpengaruh nyata terhadap jumlah tunas sedangkan konsentrasi NAA dan interaksi BAP dengan NAA belum berbeda nyata. Rataan jumlah tunas dari perlakuan konsentrasi BAP dan NAA dapat dilihat pada Tabel 2. Tabel 2. Pengaruh konsentrasi BAP dan NAA terhadap jumlah tunas (tunas) NAA (mg/l) BAP (mg/l) Rataan 0 0,17 0,17 0,33 0,00 0,17 0,2 0,67 0,33 0,17 0,00 0,29 0,4 0,83 0,17 0,17 0,00 0,29 Rataan 0,56 a 0,22 ab 0,22 ab 0,00 b Keterangan: Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada setiap kolom menunjukkan pengaruh tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Duncan pada taraf 5% Dari Tabel 2. dapat dilihat bahwa jumlah tunas tertinggi dari perlakuan BAP terdapat pada perlakuan tanpa pemberian BAP yaitu sebesar 0,56 tunas, berpengaruh nyata terhadap konsentrasi 3 mg/l tetapi belum berbeda nyata terhadap konsentrasi 1 dan 2 mg/l. Semakin tinggi pemberian BAP, jumlah tunas yang terbentuk menurun. Pada perlakuan NAA, jumlah tunas tertinggi terdapat pada konsentrasi 0,2 dan 0,4 mg/l yaitu sebesar 0,29 tunas dan terendah pada perlakuan tanpa pemberian NAA yaitu sebesar 0,17 tunas. Pengaruh konsentrasi BAP pada ketiga taraf NAA terhadap jumlah tunas dapat dilihat pada gambar 3.

10 Jumlah Tunas (tunas) A0 = 0 mg/l A1 = 1 mg/l A2 = 2 mg/l A3 = 3 mg/l N0 = 0 mg/l N1 = 0.2 mg/l N2 = 0.4 mg/l Konsentrasi BAP Gambar 3. Jumlah tunas yang terbentuk dengan pemberian berbagai konsentrasi BAP yang berbeda pada ketiga taraf NAA, terhadap jumlah tunas yang mengalami penurunan pada konsentrasi 3 mg/l. Panjang Tunas (cm) Data pengamatan dan sidik ragam dari panjang tunas dapat dilihat pada Lampiran 5-7. Dari sidik ragam diketahui bahwa perlakuan konsentrasi BAP berpengaruh nyata terhadap panjang tunas sedangkan konsentrasi NAA dan interaksi BAP dengan NAA belum berbeda nyata. Rataan panjang tunas dari perlakuan konsentrasi BAP dan NAA dapat dilihat pada Tabel 3. Tabel 3. Pengaruh konsentrasi BAP dan NAA terhadap panjang tunas (cm) NAA (mg/l) BAP (mg/l) Rataan 0 0,08 0,07 0,23 0,00 0,10 0,2 0,20 0,25 0,10 0,00 0,14 0,4 0,42 0,07 0,05 0,00 0,14 Rataan 0,23 a 0,13 ab 0,13 ab 0,00 b Keterangan: Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada setiap kolom menunjukkan pengaruh tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Duncan pada taraf 5% Dari Tabel 3. dapat dilihat bahwa panjang tunas tertinggi dari perlakuan BAP terdapat pada perlakuan tanpa pemberian BAP yaitu sebesar 0,23 cm, berpengaruh nyata terhadap konsentrasi 3 mg/l tetapi belum berbeda nyata

11 terhadap konsentrasi 1 dan 2 mg/l. Semakin tinggi pemberian BAP, panjang tunas yang terbentuk menurun. Pada perlakuan NAA, panjang tunas tertinggi terdapat pada konsentrasi 0,2 dan 0,4 mg/l yaitu sebesar 0,14 cm dan terendah pada perlakuan tanpa pemberian NAA yaitu sebesar 0,10 cm. Pengaruh konsentrasi BAP pada ketiga taraf NAA terhadap panjang tunas dapat dilihat pada gambar 4. Panjang Tunas (cm) A0 = 0 mg/l A1 = 1 mg/l A2 = 2 mg/l A3 = 3 mg/l N0 = 0 mg/l N1 = 0.2 mg/l N2 = 0.4 mg/l Konsentrasi BAP Gambar 4. Panjang tunas yang terbentuk dengan pemberian berbagai konsentrasi BAP yang berbeda pada ketiga taraf NAA, terhadap panjang tunas yang mengalami penurunan pada konsentrasi 3 mg/l. Jumlah Akar (helai) Data pengamatan dan sidik ragam dari jumlah akar dapat dilihat pada Lampiran Dari sidik ragam diketahui bahwa perlakuan konsentrasi BAP dan konsentrasi NAA berpengaruh nyata terhadap jumlah akar sedangkan interaksi BAP dengan NAA belum berbeda nyata. Rataan persentase jumlah akar dari perlakuan konsentrasi BAP dan NAA dapat dilihat pada Tabel 4.

12 Tabel 4. Pengaruh konsentrasi BAP dan NAA terhadap jumlah akar (helai) NAA (mg/l) BAP (mg/l) Rataan 0 0,33 1,17 2,67 3,67 1,96 b 0,2 1,00 0,83 3,83 6,67 3,08 ab 0,4 0,33 3,83 7,67 6,17 4,50 a Rataan 0,55 b 1,94 b 4,72 a 5,50 a Keterangan: Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada setiap kolom menunjukkan pengaruh tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Duncan pada taraf 5% Dari Tabel 4. dapat dilihat bahwa jumlah akar tertinggi dari perlakuan BAP terdapat pada konsentrasi 3 mg/l yaitu sebesar 5,50 helai, berpengaruh nyata terhadap konsentrasi 0 dan 1 mg/l tetapi belum berbeda nyata terhadap konsentrasi 2 mg/l. Semakin tinggi pemberian BAP, jumlah akar yang terbentuk meningkat. Pada perlakuan NAA, jumlah akar tertinggi terdapat pada konsentrasi 0,4 mg/l yaitu sebesar 4,50 helai, berpengaruh nyata terhadap tanpa pemberian NAA tetapi belum berbeda nyata terhadap konsentrasi 0,2 mg/l. Semakin tinggi pemberian NAA, jumlah akar yang terbentuk meningkat. Pengaruh konsentrasi BAP pada ketiga taraf NAA terhadap jumlah akar dapat dilihat pada gambar 5. Jumlah Akar (helai) A0 = 0 mg/l A1 = 1 mg/l A2 = 2 mg/l A3 = 3 mg/l N0 = 0 mg/l N1 = 0.2 mg/l N2 = 0.4 mg/l Konsentrasi BAP Gambar 5. Jumlah akar yang terbentuk dengan pemberian berbagai konsentrasi BAP yang berbeda pada ketiga taraf NAA, terhadap jumlah akar yang mengalami peningkatan pada konsentrasi 3 mg/l.

13 Jumlah Daun (helai) Data pengamatan dan sidik ragam dari jumlah daun dapat dilihat pada Lampiran Dari sidik ragam diketahui bahwa perlakuan konsentrasi BAP berpengaruh nyata terhadap jumlah daun sedangkan konsentrasi NAA dan interaksi BAP dengan NAA belum berbeda nyata. Rataan jumlah daun dari perlakuan konsentrasi BAP dan NAA dapat dilihat pada Tabel 5. Tabel 5. Pengaruh konsentrasi BAP dan NAA terhadap jumlah daun (helai) NAA (mg/l) BAP (mg/l) Rataan 0 0,67 0,67 1,33 0,00 0,67 0,2 1,50 0,67 0,33 0,00 0,63 0,4 1,17 1,00 0,33 0,00 0,63 Rataan 1,11 a 0,78 a 0,66 a 0,00 b Keterangan: Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada setiap kolom menunjukkan pengaruh tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Duncan pada taraf 5% Dari Tabel 5 dapat dilihat bahwa jumlah daun tertinggi pada perlakuan BAP terdapat pada perlakuan tanpa pemberian BAP yaitu sebesar 1,11 helai, berpengaruh nyata terhadap konsentrasi 3 mg/l. Semakin tinggi pemberian BAP, jumlah daun yang terbentuk menurun. Pada perlakuan NAA, jumlah daun tertinggi terdapat pada perlakuan tanpa pemberian NAA yaitu sebesar 0,67 helai dan terendah pada konsentrasi 0,2 dan 0,4 mg/l yaitu sebesar 0,63 helai. Pengaruh konsentrasi BAP pada ketiga taraf NAA terhadap jumlah daun dapat dilihat pada gambar 6.

14 Jumlah Daun (helai) A0 = 0 mg/l A1 = 1 mg/l A2 = 2 mg/l A3 = 3 mg/l N0 = 0 mg/l N1 = 0.2 mg/l N2 = 0.4 mg/l Konsentrasi BAP Gambar 6. Jumlah daun yang terbentuk dengan pemberian berbagai konsentrasi BAP yang berbeda pada ketiga taraf NAA terhadap jumlah daun yang mengalami penurunan pada konsentrasi 3 mg/l. Warna Daun Data pengamatan warna daun dapat diketahui bahwa semua tunas yang tumbuh berwarna hijau (Lampiran 17). Bentuk Daun Data pengamatan bentuk daun dapat diketahui bahwa semua tunas yang tumbuh memiliki daun yang melebar (Lampiran 17).

15 Pembahasan Pengaruh BAP Terhadap Pembentukan Tunas Sansevieria Dari hasil penelitian yang dilakukan dapat diketahui bahwa pada perlakuan pemberian konsentrasi BAP secara umum, semua perlakuan mengalami penurunan persentase pertumbuhan eksplan. Hal ini dapat terjadi karena tingkat kontaminasi dalam perbanyakan secara kultur jaringan yang cukup tinggi karena penyebaran bakteri atau jamur dapat terjadi di udara dan pertumbuhannya yang sangat cepat. Hal ini sesuai dengan pernyataan Yuwono (2006) yang menyatakan bahwa salah satu prasyarat utama dalam teknik kultur in vitro adalah kebersihan dan sterilitas alat serta tempat yang digunakan. Hal ini diperlukan untuk mencegah terjadinya kontaminasi oleh bakteri atau jamur yang pertumbuhannya jauh lebih cepat dibanding dengan pertumbuhan kultur sel atau jaringan tanaman. Dari hasil analisis data secara statistik diperoleh bahwa pemberian konsentrasi BAP yang berbeda menunjukkan pengaruh yang nyata terhadap semua pengamatan parameter. Pada peubah amatan jumlah tunas, panjang tunas dan jumlah daun rataan tertinggi terdapat pada perlakuan tanpa pemberian BAP masing-masing sebesar sebesar 0,56 tunas; 0,23 cm dan 1,11 helai dan yang paling rendah terdapat pada konsentrasi 3 mg/l yaitu sebesar 0 tunas (tidak ada tunas yang muncul). Hal ini menunjukkan bahwa tanpa pemberian BAP, eksplan tetap dapat tumbuh karena media MS yang digunakan telah mengandung unsur yang dibutuhkan tanaman. Yusnita (2003) menyatakan kebutuhan nutrisi mineral untuk tanaman yang dikulturkan secara invitro pada dasarnya sama dengan kebutuhan hara tanaman yang ditumbuhkan di tanah, meliputi hara-hara makro dan mikro. Diduga hormon

16 sitokinin dalam jaringan sudah mencukupi untuk pertumbuhan dan penambahan sitokinin eksogen mengakibatkan konsentrasi sitokinin dalam jaringan menjadi berlebih sehingga menghambat pertumbuhan tunas. Salisbury dan Ross (2002) menyatakan sitokinin eksogen akan menghambat pertumbuhan in vitro jika konsentrasi zpt dalam jaringan menjadi berlebihan. Disamping itu, Santoso dan Nursandi (2001) menyatakan bahwa pengaturan proses tumbuh dan berkembangnya eksplan dapat dilakukan dengan mengatur macam dan konsentrasi hormon atau zpt tertentu sehingga menghasilkan kombinasi yang tepat sesuai dengan harapan. Untuk peubah amatan jumlah akar, rataan tertinggi terdapat pada konsentrasi 3 mg/l yaitu sebesar 5,50 helai dan paling rendah terdapat pada perlakuan tanpa pemberian BAP yaitu sebesar 0,56 helai. Hal ini disebabkan karena konsentrasi BAP yang digunakan terlalu tinggi sehingga pengaruh sitokinin sebagai penghambat pertumbuhan akar tidak berpengaruh terhadap eksplan. Hal ini sesuai dengan Wattimena (1992) yang menyatakan bahwa pada sitokinin dengan konsentrasi tinggi yang mendorong proliferasi tunas sebaliknya menghambat penghambat akar. Dari penelitian yang dilakukan, ditemukan planlet yang hanya memiliki akar saja tanpa adanya tunas. Hal ini juga disebabkan karena pemakaian konsentrasi BAP yang terlalu tinggi sehingga menghambat pertumbuhan tunas. Skinner dan Shive, 1955; Fries, 1960 dalam Wilkins (1989) menyatakan bahwa jika pemakaian zpt sitokinin eksogen menghasilkan tingkat yang supra optimal, dalam beberapa kasus sitokinin akan merangsang pembentukan akar dan menghambat pertumbuhan tunas.

17 Dari penelitian yang dilakukan, juga ditemukan planlet yang hanya memiliki tunas saja tanpa adanya akar. Jaringan yang digunakan yaitu daun sansevieria yang masih muda, diduga jaringan tersebut mengandung sitokinin endogen yang sudah mencukupi untuk pembentukan tunas. Hal ini sesuai dengan Salisbury dan Ross (2002) yang menyatakan umumnya sitokinin paling banyak terdapat di organ muda (biji, buah, daun) dan di ujung akar. Daun, buah dan biji muda, tidak mudah memindahkan sitokininnya ke tempat lain, baik melalui xilem maupun floem. Hal ini juga diduga akibat pemberian tiamin pada vitamin yang mampu meningkatkan konsentrasi sitokinin dalam jaringan. Zulkarnain (2009) menyatakan perlunya kehadiran tiamin pada kultur invitro terutama pada kondisi kandungan sitokinin yang rendah didalam medium. Fenomena ini dapat terjadi dalam teknik kultur jaringan yang dikenal dengan sebutan habituasi sitokinin. Zulkarnain (2009) menyatakan bahwa tunas dapat mengalami habituasi terhadap sitokinin akibat konsentrasi sitokinin yang tinggi. Hal ini dapat disebabkan oleh pertumbuhan tunas yang berlebihan dan mengakibatkan penghambatan pembentukan akar. Pengaruh NAA Terhadap Pembentukan Tunas Sansevieria Dari data yang dianalisis secara statistik diketahui bahwa perlakuan konsentrasi NAA berpangaruh tidak nyata terhadap jumlah tunas, panjang tunas, dan jumlah daun tetapi berpengaruh nyata terhadap jumlah akar. Pada peubah amatan jumlah tunas dan panjang tunas, rataan tertinggi terdapat pada konsentrasi 0,2 dan 0,4 mg/l masing-masing sebesar 0,29 tunas dan 0,14 cm sedangkan yang paling rendah terdapat pada perlakuan tanpa pemberian NAA masing-masing sebesar 0,17 tunas dan 0,10 cm. Sama halnya dijumpai pada

18 peubah amatan jumlah akar, rataan tertinggi terdapat pada konsentrasi 0,4 mg/l yaitu 4,50 helai dan yang paling rendah terdapat pada perlakuan tanpa pemberian BAP yaitu 1,96 helai. Hal ini menunjukkan bahwa konsentrasi auksin yang digunakan dapat disintesis oleh jaringan yang dikulturkan. Hal ini sesuai dengan Wattimena (1992) yang menyatakan bahwa pemilihan konsentrasi dan jenis auksin ditentukan oleh kemampuan dari jaringan yang dikultur (eksplan) untuk mensintesis auksin secara alamiah. Salah satu fungsi auksin dalam kultur jaringan yaitu untuk memacu pertumbuhan akar. Hal ini sesuai dengan Widyastuti dan Tjokrokusumo (2007) yang menyatakan bahwa peranan auksin dalam kultur in vitro terutama untuk pertumbuhan kalus, suspensi sel, dan pertumbuhan akar. Pada peubah amatan jumlah daun, rataan tertinggi terdapat pada perlakuan tanpa pemberian NAA yaitu sebesar 0,67 helai dan yang paling rendah terdapat pada konsentrasi 0,2 dan 0,4 mg/l yaitu sebesar 0,63 helai. Eksplan yang digunakan yaitu daun muda yang telah mengandung auksin endogen sehingga tidak diperlukan penambahan auksin eksogen. Hal ini sesuai Gardner, dkk (2008) yang menyatakan bahwa kadar auksin endogen dan aktivitasnya dalam jaringan berhubungan dengan keseimbangan antara sintesis dengan hilangnya auksin karena transpor dan metabolisme. Auksin diproduksi dalam jaringan meristematik yang aktif yaitu tunas, daun muda dan buah. Pengaruh Interaksi Konsentrasi BAP dan NAA Terhadap Pembentukan Tunas Sansevieria Dari data yang dianalisis secara statistik, diketahui bahwa interaksi BAP dan NAA belum berbeda nyata terhadap semua parameter pengamatan. Hal ini diduga karena interaksi konsentrasi BAP dan NAA yang diberikan belum

19 mencapai keseimbangan. Hal ini sesuai dengan Dewi (2008) yang menyatakan pada umumnya keseimbangan konsentrasi dari beberapa ZPT-lah yang akan mengontrol pertumbuhan dan perkembangan tumbuhan. Wattimena (1992) juga menyatakan konsentrasi yang diperlukan dari masing-masing ZPT auksin dan sitokinin tergantung dari jenis eksplan, genotip, kondisi kultur serta jenis auksin dan sitokinin yang dipergunakan. Dari hasil penelitian yang dilakukan dapat diketahui bahwa warna daun planlet Sansevieria cylindrica berwarna hijau. Hal ini menunjukkan bahwa planlet tanaman sansevieria yang diperbanyak secara kultur jaringan memiliki warna daun yang sama dengan induknya. Hal ini sesuai dengan Trubus (2008) yang menyatakan bahwa warna daun sansevieria cylindrica adalah hijau. Ciri khas daun bulat dan ada garis memanjang. Dari hasil penelitian pada pengamatan bentuk daun dapat diketahui bahwa bentuk daun planlet sansevieria yaitu melebar. Hal ini dapat terjadi karena tanaman sansevieria mudah mengalami mutasi, bahkan saat dilakukan pengembangbiakan secara vegetatif, yang seharusnya anakan akan seperti induknya namun pada sansevieria akan sering terjadi mutasi sehingga anaknya berbeda dengan induknya. Hal ini sesuai dengan Pramono (2008) yang menyatakan bahwa sansevieria sangat mudah mengalami mutasi. Tanaman ini memiliki gen yang tidak stabil. Perubahan yang terjadi menyangkut warna daun, corak warna daun atau bentuk daun. Anakan tanaman yang mengalami mutasi, sama halnya dengan hibrida, bisa menjadi kultivar atau spesies baru.

20 KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan 1. Perlakuan BAP mempengaruhi pembentukan morfologi dari kalus sansevieria dengan meningkatkan jumlah akar. 2. Perlakuan NAA mempengaruhi pembentukan morfologi dari kalus sansevieria terhadap jumlah akar. 3. Interaksi antara konsentrasi BAP dan NAA tidak mempengaruhi pembentukan morfologi dari kalus sansevieria. Saran Perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan menggunakan perlakuan zat pengatur tumbuh dengan konsentrasi yang berbeda untuk mendapatkan pengaruh yang paling baik dalam pembentukan morfologi sansevieria. 34