LMPIRN
Lmpn 1. Pedu nl kd ml mdfk metde IRRI (OC1995) Senyk 1 mg mpel dlutkn dlm 1 ml etnl 95% dn 9 ml NOH 1N. Kemudn lutn dpnkn pd uhu 8-1 C elm ± 1 ment mp tegeltn. Lutn ddngnkn llu dte pd lu tk 1 ml dengn kude eg lutn nduk. Selnjutny dml 1 ml mpel yng telh dencekn d lutn nduk. Smpel teeut dtmhkn dengn ml d %, ml m ett 1N, dn 3 ml kude. Setelh ddmkn elm 2 ment llu duku nl n pd pektftmete dengn pnjng gelmng 62 nm. Untuk kuv tnd dut dengn c yng m dengn penentun kd ml pd mpel. Senyk 4 mg ml tnd dtmhkn dengn 1 ml etnl 95% dn 9 ml NOH 1N llu dpnkn pd uhu 8-1 C elm ± 1 ment mp tegeltn. Kemudn lutn ddngnkn llu dmukkn ke dlm lu tk 1 ml dn dte dengn kude. Selnjutny d lu tk teeut dut eep knent mul d 5, 1, 15, mp 2 ppm. Smpel dml enyk 1ml d mng-mng knent llu dtmhkn ml d %, ml m ett 1N, dn 3 ml kude. Setelh ddmkn elm 2 ment, duku nl n pd pektftmete dengn pnjng gelmng 62 nm. Kuv Stnd Kd ml n 1,9 y =,4x +,19 R² =,998 5 1 15 2 25 Knent (ppm) Pemn kuv tnd : y =,46x +,196 Ketengn : x = knent pt y = nl n C menentukn kd ml : 1.) Dt hl pemcn pektftmete dlh nl y 2.) Tentukn nl x dengn menggunkn pemn lne kuv tnd ml 3.) Pehtungn dengn umu: % knent pt x fkt pengencen t mpel x1% 44
Lmpn 2. Pedu pengukun ttl gul dengn metde fenl-ulft (Du et l. 1956) dn kuv tnd gluk untuk ttl gul Pedu Pengukun Ttl Gul Smpel enyk 1 ml (mengndung 1 µg khdt) dtmhkn dengn ml lutn fenl 5% kemudn dkck-kck dengn vtex g hmgen. Dlkukn penmhn 2,5 ml H 2 SO 4 ec lngung pd gn pemukn (tnp menyentuh dndng tung ek). Rek pencmpun ddmkn tnp gnggun elm 1 ment. Pemcn nl n dlkukn mnml 3 ment etelh pengckn pd pnjng gelmng 49 nm. Pemcn pd pektftmete memekn nl dlm tun n ehngg untuk mengethu jumlh ttl gul dlm mple teeut, teleh dhulu dut kuv tnd gluk. Untuk pemutn kuv tnd gluk dgunkn gluk tnd (, 1, 3, dn 4 ppm). Mng-mng dml 1 ml eu dengn pedu pengukun ttl gul. Hl pemcn pd pektftmete dkumpulkn dn dc pemnny, d pemn nlh dpt dkethu jumlh ttl gul yng tedpt d dlm mpel. Kuv Stnd Gluk Untuk Ttl Gul Knent(ppm) 1 45 1 42 1 36 2 43 2 35 2 42 3 39 3 46 3 42 4 33 4 31 4 35 n,9 y =,19x +,44 R² =,999 1 2 3 4 5 Knent gul (ppm) Pemn kuv tnd : y =.198x +.445 Ketengn : x = nl knent ttl gul y = nl n 45
Lmpn 3. Tt c nl gul peeduk metde Pk-Jhnn yng dmdfk (Hzuku et l. 1981) Pnp : Teedukny fend menjd fend leh enyw gul peeduk. Jumlh fend yng teentuk ekvclen dengn jumlh gul peeduk dlm mpel. Pedu : Smpel enyk 1 ml (mengndung 1µg gul peeduk) dtmhkn ml lutn uffe dum knt dum hdgen knt (4,8 g N 2 CO 3, 9,2 g NHCO 3, dn 5 g KCN yng dlutkn dlm qude mp 1L) dn dtmhkn ml lutn ptum fend % (/v). Cmpun lutn teeut dpnkn dlm penng elm 15 ment dn dngnkn dlm mengl elm 1 ment. Lutn teeut dtmhkn 2,5 ml lutn fec mnum ulft (3g (NH 4 ) Fe (SO 3 ) 4. 2H 2 d dlm 1 L lutn 5 mm H 2 SO 4 ), dkck-kck dengn vtex dn ddmkn elm 2 ment pd uhu ung eelum pemcn n pd 715 nm. Kuv Stnd Gul Peeduk Knent (ppm) 1 9 1 93 2 28 2 3 3 47 3 36 4 2 4 2 5 31 5 24 6 65 6 44,9 y = 34x +,58 R² =,996 1 2 3 4 5 6 7 Knent gul (ppm) Pemn kuv tnd : y = 34x +,584 Ketengn : x = nl knent gul peeduk y = nl n 46
Lmpn 4. Penentun ktvt α-mle (ctel) Ment n Gul Peeduk (μg/ml),66 14,179 Jumlh Gul Peeduk (μml) Unt/ ml Enzm Lutn Induk (fp=1x) 15 58 366,67 1,95493 21316 521,316 3 44 6812 1,746 6555 465,55 45 89 845,73,919 4525 245,25 6 65 1125,32 1,552 1382 413,82 75 75 1161,785 4,5445 54,45 9 2 1264,696 72 5246 152,46 15 4 1279,31,817 8,17 12 53 1817,84 3,42 1135 811,35 135 55 1827,28,51,1361 13,61 15 4 25,284,99 6482 264,82 165 22 269,63 57,95287 95,287 18 64 2225,86 68 31412 231,412 U = 811,35 U/ml n, 15 3 45 6 75 9 15 12 135 15 165 18 Wktu (ment) C Pehtungn : Ment Ke- : Pemn kuv tnd y = 34x+,584 gul peeduk (x) = (,66.584) / 34 =,56716 Fkt pengencen =,56716 *25 = 14,179 μg/ml Ment ke-15 : gul peeduk (x) = (58.584) / 34 =43284 Fkt pengencen = 43284 * 1,97*25 = 366,67 μg/ml Selh gul peeduk (ment ke- dn ke-15) = 366,67 14,179= 351,888 Σ ml gul peeduk = Gul peeduk / BM gluk = 351,888 μg/ml /18 μg/μml = 1,95493 μml/ml Enzm yng dtmhkn dlh 1 ml dn Ttl lutn cmpun 4 ml. Unt / ml enzm = (1,95493 μml/ml * (4/1 ) ) / 15 ment = 21316 U/ml Pengencen tehdp α-mle dlh 1 kl, mk ktvt enzm pd lutn nduk dlh = 21316* 1 = 521,316U/ml 47
Lmpn 5. Penentun ktvt α-mle (pnketn) Ment n Gul Peeduk (μg/ml) 57 146,418 jumlh gul peeduk (μml) Unt/ ml Enzm Lutn Induk (fp=1x) 15 658,358 2,844 5843 758,43 3 83 931,493 1,517 464 44,64 45 13 977,15 52,6744 67,44 6 23 991,194,78,211 21,1 75 42 1299 61,4312 43,12 9 66 156,119 99,537 53,7 15 16 113, 746 14 156 116 12 24 1141, 94,62,1658 16,58 135 26 1145, 672,2,553 5,53 15 34 1157,612,66,1769 17,69 165 48 1178,57 16,396 3,96 18 52 1183,731,29,774 7,74 U = 758,43 U/ml n,9 15 3 45 6 75 9 15 12 135 15 165 18 Wktu (ment) C Pehtungn: Ment Ke- : Pemn kuv tnd y = 34x+,584 gul peeduk (x) = (57.584) / 34 = 358 Fkt pengencen = 358*2 = 147,16 μg/ml Ment ke-15 : gul peeduk (x) = (.584) / 34 = 3,2955 Fkt pengencen = 3,2955*2 = 659,1μg/ml Selh gul peeduk (ment ke- dn ke-15) = 659,1 147,16 = 511,94 Σ ml gul peeduk = Gul peeduk / BM gluk = 511,94 μg/ml /18 μg/μml = 2,844 μml/ml Enzm yng dtmhkn dlh 1 ml dn Ttl lutn cmpun 4 ml. Unt / ml enzm = (2,844 μml/ml * (4/1 ) ) / 15 ment = 5843 U/ml Pengencen tehdp α-mle dlh 1 kl, mk ktvt enzm pd lutn nduk dlh = 5843 * 1 = 758,43 U/ml 48