Lampiran 1. Ethical clearance 45
Lampiran 2. Hasil identifikasi tumbuhan 46
Lampiran 3. Gambartumbuhan rimpang temu putih Tumbuhan rimpang temu putih Rimpang temu putih Rimpang temu putih segar Simplisia rimpang temu putih Serbuk simplisia rimpang temu putih 47
Lampiran 4.Mikroskopik serbuk simplisia rimpang temu putih Keterangan: perbesaran 10 x 40, 1 = jaringan gabus, 2 = butir pati, 3 = berkas pembuluh, 4 = parenkim. 48
Lampiran 5. Bagan alur penelitian Rimpang Temu Putih 6,2 kg Simplisia Dicuci dari pengotor sampai bersih Ditiriskan Ditimbang berat basahnya Pemeriksaan makroskopik Dirajang dan dikeringkan pada suhu ± 40-50 o C dalam lemari pengering Ditimbang Dihaluskan dengan blender Disimpan dalam wadah yang tertutup rapat sebelum digunakan Karakterisasi Skrining Fitokimia 400 g Serbuk Simplisia Dimaserasi dengan etanol 96% Pemeriksaan Dibiarkan selama 5 hari makroskopik terlindung dari cahaya, Pemeriksaan sambil sese sambil sesekali diaduk mikroskopik Pk air Disaring Pk sari larut air Pk sari larut etanol Ampas Pk abu total Maserat I Pk abu tidak larut dalam asam Dimaserasi kembali Ampas dipisahkan Senyawa golongan: Alkaloid Glikosida Flavonoid Steroid/Triterpenoid Saponin Tanin Maserat II Diuapkan dengan rotary evaporator Ekstrak Kental (56 g) Uji efek penurunan kadarasam urat Kadar Asam Urat (mg/dl) 49
Lampiran 6.Bagan pengerjaan uji efek antihiperurisemia ekstrak etanol rimpang temu putih 25 ekor tikus dibagi 5 kelompok masing-masing 5 ekor Kel I: Kontrol CMC 0,5% Kel II: EERTP 400 mg Kel III: EERTP 600 mg Kel IV: EERTP 800 mg Kel V: Allopurinol 10 mg/kg BB Dipuasakan semua tikus selama 24 jam Diukur kadar asam urat puasatikus (1,6-3,2mg/dl) Diinduksi dengan kafein 135 mg/kg BBdan jus hati ayam 2 ml selama 6 hari Diberikan suspensi CMC 0,5%, sediaan uji dansuspensi Allopurinol selama 9 hari Diukur kadar asam urat darah pada hari ke 9,12, dan 15 Hasil 50
Lampiran 7.Perhitungan hasil karakterisasi simplisia rimpang temu putih 1. Perhitungan penetapan kadar air simplisia No Berat Sampel (g) Volume awal (ml) Volume akhir (ml) 1 2 3 5.002 5.005 5,003 2,1 2,5 2,9 2,5 2,9 3,25 % Kadar Air = x 100 % 1. %Kadar Air 2,5 2,1 = x100% 5,002 2. %Kadar Air 2,9 2,5 = x100% 5,002 3. %Kadar Air 3,25 2,9 = x100% 5,003 %Kadar air rata-rata 7,99% + 7,99% + 6,99% = 3 = 7,99% = 7,99% = 6,99% = 7,65% 51
2. Perhitungan penetapan kadar sari larut dalam air No Berat Sampel (g) Berat Sari (g) 1 2 3 5,012 5,019 5,011 0,184 0,189 0,182 Berat Sari Air 100 %Kadar Sari larut dalam air = x x 100% Berat Sampel 20 0,184g 100 1. %Kadar Sari larut air = 100% 5,012g 20 =18,36 % 0,189g 100 2. %Kadar Sari larut air = 100% 5,019g 20 =18,82 % 0,182g 100 3. %Kadar Sari larut air = 100% 5,011g 20 = 18,16 % 18,36% + 18,82% + 18,16% %Kadar Sari larut air rata-rata = = 18,44% 3 52
3. Kadar sari larut dalam etanol No Berat Sampel (g) Berat Sari (g) 1 2 3 5,015 5,020 5,012 0,077 0,082 0,086 Berat Sari Etanol 100 %Kadar Sari larut dalam etanol = x x100% Berat Sampel 20 0,077g 100 1. %Kadar Sari larut etanol = 100% 5,015g 20 = 7,67 % 0,082g 100 2. %Kadar Sari larut etanol = 100% 5,020g 20 =8,16 % 0,086g 100 3. %Kadar Sari larut etanol = 100% 5,012g 20 =8,57 % 7,67% + 8,16% + 8,57% %Kadar Sari larut etanol rata-rata = = 8,13% 3 53
4. Perhitungan penetapan kadar abu total No Berat Sampel (g) Berat Abu (g) 1 2 3 2,0004 2,0002 2,0005 0,0747 0,0745 0,0765 %Kadar Abu Total Berat Abu = x100% Berat Sampel 1. %Kadar Abu Total 0,0747g = 100% = 3,73 % 2,0004g 2. %Kadar Abu Total 0,0745g = 100% =3,72 % 2,0002g 3. %Kadar Abu Total 0,0765g = 100% = 3,82 % 2,0005g % Kadar abu rata-rata 3,73% + 3,72% + 3,82% = = 3,76% 3 54
5. Perhitungan kadar abu tidak larut dalam asam No Berat Sampel (g) Berat Abu (g) 1 2 3 2,0004 2,0002 2,0005 0,0024 0,0032 0,0031 %Kadar Abu Berat Abu = x100% Berat Sampel 1. %Kadar Abu 0,0024g = 100% = 0,12 % 2,0004g 2. %Kadar Abu 0,0032g = 100% = 0,15 % 2,0002g 3. %Kadar Abu 0,0031g = 100% = 0,15 % 2,0005g %Kadar abu rata-rata 0,12% + 0,15% + 0,15% = = 0,14% 3 55
56
Lampiran 8. Tabel konversi dosis Mencit 20g Tikus 200g Marmut 400 g Kelinci 1,2 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg Mencit 20 g Tikus 200 g Marmut 400 g Kelinci 1,2 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg 1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,2 387,9 0,14 1,0 1,74 3,9 9,2 17,8 56,0 0,08 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5 0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2 0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1 0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1 0,0026 0,018 0,031 0,07 0,16 0,32 1,0 (Laurence and Bacharach, 1964) 57
Lampiran 9.Contoh perhitungan dosis Contoh perhitungan volume larutan kafein yang diberikan secara oral pada hewan uji tikus -Dosis kafein untuk tikus = 135 mg/kgbb (p.o.) -Konsetrasi larutan induksi kafein yang dibuat= 135 mg / 10 ml Mis : BB Tikus = 200 g a. Jumlah obat yang diberikan = 135 mg/kg bb x BB Volume pemberian 1% dari berat badan tikus = 135 mg/kg bb x 200 g = 27 mg Maka untuk berat badan 200 g diberikan bahan uji 2 ml dan bahan yang ditimbang 27 mg dilarutkan dalam labu 10 ml dengan CMC 0,5%. 58
Lampiran 9.(Lanjutan) Contoh perhitungan dosis EERTP yang akan diberikan pada tikus. - Dosis EERTP yang akan dibuat adalah 400 mg/kg BB, 600 mg/kg BB, 800 mg/kg BB a.cara rimpang temu putih : Timbang 400 mg, 600 mg, dan 800 mg, masing-masing dilarutkan dalam 10 ml suspensi CMC b. Berapa volume ekstrakrimpangtemu putih yang akan diberikan pada tikus? - Mis : BB Tikus = 200 g Jumlah EERTP dosis 400 mg/kg bb 200 = x mg 1000g Volume larutan yang diberi 80 = x ml 400mg Jumlah EERTP dosis 600 mg/kg bb 200 = x mg 1000g Volume larutan yang diberi 120 = x ml 600mg Jumlah EERTP dosis 800 mg/kg bb 200 = x mg 1000g Volume larutan yang diberi 160 = x ml 800mg = 80 mg = 2 ml = 120 mg = 2 ml = 160 mg = 2 ml 59
Lampiran 10.Tabel hasil pengukuran kadar asam urat Perlakuan Berat Badan (g) Kadar asam urat puasa (mg/dl) Hari ke-0 Kadar asam urat setelah induksi (Hari ke- 6) Kadar asam urat (mg/dl) Hari ke- 9 Hari ke- 12 Hari ke- 15 Suspensi 192 2.4 4.8 5.3 5.7 6.4 CMC 197 2.3 4.6 5.2 5.6 6.2 (kontrol 190 2.5 4.7 5.2 5.6 6.0 negatif) 193 2.4 4.6 5.3 5.8 6.2 194 2.2 4.5 5.0 5.4 6.0 Rata-rata 193.2 2.36 4.64 5.20 5.62 6.16 Suspensi 193 2.1 4.0 3.3 2.3 1.9 Allopurinol 195 1.9 4.0 3.0 2.1 1.6 (kontrol 194 2.5 4.3 3.5 2.4 1.9 positif) 195 2.5 4.4 3.2 2.0 1.5 197 2.3 4.1 3.1 2.1 1.8 Rata-rata 194.8 2.26 4.16 3.22 2.18 1.74 Suspensi 192 2.5 4.7 4.2 3.4 2.4 EERTP 195 2.2 4.8 4.2 3.2 2.3 400 193 2.2 4.5 4.0 3.3 2.2 mg/kgbb 199 2.3 4.6 4.2 3.5 2.2 194 2.2 4.5 4.0 3.3 2.0 Rata-rata 194.6 2.28 4.62 4.12 3.34 2.22 Suspensi 195 2.2 4.5 3.4 2.3 1.8 EERTP 193 2.3 4.8 3.5 2.5 2.0 600 194 2.3 4.4 3.2 2.1 1.6 mg/kgbb 195 2.5 4.5 3.5 2.4 2.0 195 2.2 4.4 3.1 2.0 1.6 Rata-rata 194.4 2.3 4.52 3.34 2.26 1.80 Suspensi 198 2.5 4.4 3.5 2.8 1.9 EERTP 192 2.2 4.8 3.4 3.1 2.1 800 196 2.2 4.9 4.2 3.1 2.1 mg/kgbb 193 2.3 4.6 4.1 2.9 2.0 195 2.2 4.9 4.1 3.0 2.2 Rata-rata 194.8 2.28 4.72 3.86 2.98 2.06 60
Lampiran 11.Gambar hewan percobaan (Tikus putih jantan) 61
Lampiran 12.Gambar alat pengukur kadar asam urat 62
63
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73