iii
iv
ABSTRAK Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar logam seng plasma alkohol dehidrogenase pada tikus yang diberi etanol 40 % dengan volume 2 ml dan 3 ml. Rancangan penelitian ini menggunakan Randomized Posttest Only Control Group Desain dengan dua kelompok perlakuan dan satu kelompok kontrol. Rata-rata kadar logam seng plasma pada tikus kontrol (K) dan tikus yang diberi etanol 40 % dengan volume 2 ml (P1) dan 3 ml (P2) adalah 445,83 ± 27,76 mg/l; 928,38 ± 183,13 mg/l; dan 1228,75 ± 80,00 mg/l. Perhitungan rata-rata aktivitas alkohol dehidrogenasepada tikus kontrol dan tikus yang diberi etanol 40 % dengan volume 2 ml dan 3 ml adalah 21,00 ± 0,34 ng/ml; 18,69 ± 0,31 ng/ml dan 17,05 ± 0,33 ng/ml. Hasil ANOVA menunjukan p < 0,05 sehingga terdapat perbedaan bermakna kadar logam seng plasma dan aktivitas alkohol dehidrogenase pada tikus kontrol dan tikus yang diberi etanol 40 % dengan volume 2 ml dan 3 ml. Hasil analisis Tukey/HSD untuk kadar rata-rata logam seng plasma tikus kontrol dan tikus yang diberi etanol 40 % dengan volume 2 ml dan 3 ml memiliki perbedaan signifikan yaitu terjadinya peningkatan kadar logam seng plasma dan pada aktivitas alkohol dehidrogenase terjadi penurunan pada kelompok tikus yang diberi etanol 40 % dengan volume 2 ml dan 3 ml terhadap tikus kontrol. Kata kunci: Etanol, Plasma darah tikus, Alkohol dehidrogenase, Kadar total logam seng, Aktivitas Alkohol dehidrogenase dan ICPE v
ABSTRACT This study aims to determine plasma levels of zinc metal and alcohol dehydrogenase activity in mice fed of ethanol 40% by volume of 2 ml and 3 ml. The design of this study using Randomized Posttest Only Control Group Design with two treatment groups and one control group. The average plasma levels of zinc metal in control mice (K) and mice fed of ethanol 40% by volume 2 ml (P1) and 3 ml (P2) was 445.83 ± 27.76 mg / L; 928.38 ± 183.13 mg / L; and 1228.75 ± 80.00 mg / L. The calculation of average alcohol dehydrogenase activity in control mice and mice fed of ethanol 40% by volume of 2 ml and 3 ml was 21.00 ± 0.34 ng / ml; 18.69 ± 0.31 ng/ml and 17.05 ± 0.33 ng/ml. ANOVA results indicate p <0.05 so that there are significant differences in the plasma levels of zinc metal and alcohol dehydrogenase activity in control mice and mice fed of ethanol 40% by volume of 2 ml and 3 ml. The results of the analysis Tukey / HSD to the average levels plasma of zinc metal in control mice and mice fed of ethanol 40% by volume of 2 ml and 3 ml had a significant difference with the increase in plasma levels of zinc metal and alcohol dehydrogenase activity decreased in groups of mice fed of ethanol 40% by volume of 2 ml and 3 ml of the control mice. Keywords: Ethanol, Rat blood plasma, alcohol dehydrogenase, total levels of metal zinc, Alcohol dehydrogenase activity and ICPE vi
KATA PENGANTAR Puji dan syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat, rahmat, hikmat dan karunia-nya sehingga penulis dapat menyelesaikan proposal usulan penelitian dengan judul Kadar Logam Seng Plasma dan Aktivitas Alkohol Dehidrogenase Pada Tikus yang Diberi Etanol. Penyusunan skripsi ini dibuat untuk mengetahui kadar logam seng plasma dan aktivitas alkohol dehidrogenase pada tikus wistar jantan yang diberi etanol. Penyusunan skripsi ini tidak lepas atas bantuan, arahan, dan bimbingan dari beberapa pihak yang terlibat. Dalam penulisan skripsi ini tidak lupa penulis ucapkan terima kasih kepada yang terhormat: 1. Prof. Dr. Ir. Ida Bagus Putra Manuaba, M.Phil selaku pembimbing I yang telah memberikan banyak bimbingan baik waktu, ilmu, ide, arahan dan motivasi dalam proses penelitian dan penyusunan skripsi ini. 2. Anak Agung Bawa Putra, S.Si., M.Si selaku pembimbing II yang telah membimbing, memberikan ilmu, ide, gagasan, kritik, saran dan motivasi dalam penelitian dan penulisan skripsi ini 3. Dr. I Nengah Wirajana, S.Si., M.Si selaku Ketua Jurusan Kimia Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah membantu dalam proses penulisan skripsi ini. 4. Ir. Wahyu Dwijani Sulihingtyas, M.Kes; Dr. Dra. Ni Wayan Bogoriani, M.Si dan Sri Rahayu Santi, S.Si., M.Si selaku penguji yang telah memberikan kritik, saran dan arahan dalam proses penulisan skripsi ini. vii
5. Bapak Sudirman Manurung dan ibu Eni Sitohang, Dien Gipta Mariska, Patricya Maya Sari, Renhard Ferdinandus, Hiras Iring Tua, Stevanus Marasi dan Lia Marta Uli yang memberi motivasi, semangat, doa dan dukungan baik moril dan materil selama proses penyusunan skripsi ini 6. Dosen dan Staf di lingkungan Jurusan Kimia Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah membimbing dan membantu dalam penulisan skripsi ini 7. Segenap Staf di Laboratorium UPT analitik Universitas Udayana atas bantuan dan bimbingannya selama penelitian dan penyusunan skripsi ini 8. Alling Andini, S.Si., Hasib Habibie dan Febby Hartesa Widya Sari yang telah banyak membantu dalam penelitian dan penyusunan skripsi, doa, masukan dan kerja samanya dalam penulisan skripsi ini 9. Purwa, Fatur, Minanti, Gusha dan Ayu Dwi Jayanti yang memberikan ide, masukan dan kritik selama pengerjaan penelitian dan penyusunan skripsi ini 10. Teman - teman Kimia 2012 dan KKN Padangan 2015 yang membantu memberikan masukan dan kritik selama pengerjaan penyusunan skripsi ini 11. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu atas segala bantun, motivasi dan semangat yang telah diberikan selama yang telah diberikan. Penulis menyadari skripsi ini masih sangat jauh dari kesempurnaan, maka saran, kritikan dan masukan dari semua pihak sangat diharapkan guna penyempurnaan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat digunakan mestinya Bukit Jimbaran, Juni 2016 Penulis viii
DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL... HALAMAN PENGESAHAN... i ii TEAM PENGUJI SIDANG SKRIPSI... iii ABSTRAK... ABSTRACT... KATA PENGANTAR... DAFTAR ISI... iv v vi v DAFTAR TABEL... xi DAFTAR GAMBAR... xii DAFTAR LAMPIRAN... xiii BAB I. PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Rumusan Masalah... 5 1.3 Tujuan... 5 1.4 Manfaat Penelitian... 5 BAB II. TINJAUAN PUSTAKA... 6 2.1 Minuman Beralkohol... 6 2.2 Alkohol... 7 2.2.1 Farmakokinetika alkohol... 7 2.3 Etanol... 8 2.3.1 Biotransformasi etanol... 9 2.4 Logam Seng... 13 2.4.1 Sifat fisik logam seng... 14 2.4.2 Sifat kimia logam seng... 15 ix
2.4.3 Toksisitas logam seng... 15 2.4.4 Manfaat logam seng... 16 2.5 Alkohol Dehidrogenase... 17 2.5.1 Pengertian alkohol dehidrogenase... 17 2.5.2 Sifat kimia alkohol dehidrogenase... 18 2.5.3 Manfaat alkohol dehidrogenase... 18 2.6 Tikus Wistar... 19 2.7 Spektrofotometer UV-Vis... 20 2.7.1 Instrumen spektrofotometer UV-Vis... 20 2.7.2 Prinsip kerja spektrofotometer UV-Vis... 21 2.8 Inductivity Coupled Plasma Atomic Emission Spectrometry (ICPE)... 22 BAB III METODE PENELITIAN... 24 3.1 Bahan dan Alat Penelitian... 24 3.1.1 Bahan penelitian... 24 3.1.2 Alat penelitian... 24 3.2 Tempat Penelitian... 24 3.3 Pembuatan Larutan... 25 3.3.1 Pembuatan Larutan Nitrat 0,1 M... 25 3.3.2 Pembuatan Larutan Sulfat 0,1 M... 25 3.3.3 Pembuatan Larutan Standar Seng... 25 3.4 Prosedur Penelitian... 26 3.4.1 Penyiapan hewan uji... 26 3.4.2 Penyiapan bahan... 26 3.5 Rancangan Penelitian... 27 x
3.6 Variabel Penelitian... 28 3.7 Perlakuan Hewan Uji... 28 3.8 Penentuan Kadar Logam Seng Plasma Tikus Wistar... 29 3.8.1 Pengambilan sampel darah hewan uji... 29 3.8.2 Penentuan kurva kalibrasi pada larutan standar ZnSO4.7H2O... 30 3.8.3 Penentuan kadar logam seng plasma tikus wistar... 30 3.8.4 Penentuan kadar total logam seng (Zn) dengan ICPE... 30 3.9 Penentuan Aktivitas Alkohol Dehidrogenase Plasma Tikus... 31 3.10 Analisis Hasil... 32 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 33 4.1 Subyek Penelitian... 33 4.1.1 Pengambilan sampel darah tikus wistar jantan... 33 4.2 Penentuan Kadar Logam Seng Larutan Standar... 35 4.3 Penentuan Kadar Logam Seng Plasma Tikus Wistar... 34 4.3.1 Penentuan kurva kalibrasi kadar logam seng plasma tikus... 35 4.3.2 Penentuan kadar logam seng plasma tikus yang diberi etanol... 35 4.4 Analisis Hasil Kadar Logam Seng Plasma Tikus Wistar... 40 4.5 Penentuan Aktivitas Alkohol Dehidrogenase Plasma Tikus Wistar... 43 4.6 Analisis Hasil Aktivitas Alkohol Dehidrogenase Plasma Tikus Wistar... 45 BAB V SIMPULAN DAN SARAN... 48 5.1 Simpulan... 48 5.2 Saran... 49 DAFTAR PUSTAKA... 50 LAMPIRAN... 54 xi
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 2.1 Volume distribusi, rute eliminasi dari alkohol sebagai waktu paruh dari pemberian alkohol... 12 Tabel 4.1 Analisis Logam Seng Plasma Darah Tikus Kontrol dan Pemberian Etanol 40 % Sebanyak 2 ml dan 3 ml... 36 Tabel 4.2 Data Perhitungan Kadar Logam Seng Plasma Darah Tikus Kontrol Pemberian Etanol 40 % dengan volume 2 ml dan 3 ml... 37 Tabel 4.3 Analisis ANOVA dengan SPPS untuk Kadar Logam Seng Plasma Tikus Kontrol dan Tikus diberi Etanol 40 % dengan Volume 2 ml dan 3 ml... 40 Tabel 4.4 Data Hasil Analisis Aktivitas Alkohol Dehidrogenase Pada Tikus Kontrol dan Tikus yang Diberi Etanol... 44 Tabel 4.5 Data ANOVA dengan SPPS Untuk Aktivitas Alkohol Dehidrogenase Plasma Tikus Kontrol dan Tikus yang Diberi Etanol 40 % dengan Volume 2 ml dan 3 ml... 46 xii
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Proses Metabolisme Alkohol Dalam Tubuh Manusia... 10 Gambar 2.2 Metabolisme Oksidatif Alkohol didalam Hati dan Lambung oleh Enzim Non Mikrosom yakni Alkohol Dehidrogenase maupun Enzim Mikrosom yakni Sitokrom P-450 2E1.... 11 Gambar 2.3 Metabolic Pathway dari etanol dan metanol... 12 Gambar 2.4 Logam Seng... 13 Gambar 2.5 Stuktur Alkohol Dehidrogenase (ADH)... 17 Gambar 2.6 Stuktur Alkohol Dehidrogenase Pada Ragi... 18 Gambar 2.7 Tikus Wistar (Rattus norvergius) Jantan... 20 Gambar 2.8 Alat Spektrofotometer UV-Vis... 21 Gambar 2.9 Analisis sampel dengan menggunakan Inductivity Caupled Plasma Atomic Emission Spectometry ( ICPE )... 23 Gambar 3.1 Bagan Rancangan Penelitian... 27 Gambar 4.1 Proses Pengambilan Sampel Darah Tikus Pada Aota Jantung Tikus Wistar Jantan Sebanyak 1 ml... 34 Gambar 4.2 Grafik dari Kurva Kalibrasi Larutan Standar Logam Seng... 35 Gambar 4.3 Rata rata Kadar Logam Seng Plasma tikus Kontrol dan Tikus pemberian Etanol 40 % dengan Volume 2 L dan 3 ml... 38 Gambar 4.4 Proses Metabolisme Etanol Di dalam Tubuh... 39 Gambar 4.5 Reaksi Metabolisme Etanol yang melibatkan sistem MEOS... 42 Gambar 4.6 Kompleks ZnNa2EDTA yang Terbentuk dari Proses Metabolisme Etanol didalam Tubuh... 43 xiii
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1 Perhitungan Pembuatan Larutan Standar ZnSO4.7H2O 100 ppm... 54 Lampiran 2 Pembuatan Larutan HNO3 1 M dan... 55 Lampiran 3 Pembuatan Larutan H2SO4 0,1 M... 56 Lampiran 4 Pembuatan Larutan Buffer Fosfat ph 7... 57 Lampiran 5 Bagan Alur Penelitian... 58 Lampiran 6 Skema Pengambilan Sampel Darah... 59 Lampiran 7 Penentuan Kadar Logam Seng (Zn) Larutan Standar... 60 Lampiran 8 Penentuan Kadar Total Logam Seng (Zn)... 61 Lampiran 9 Penentuan Aktivitas Alkohol Dehidrogenase Sampel Plasma Tikus Wistar Jantan... 62 Lampiran 10 Penentuan Persamaan Regresi dari Standar Logam Seng... 63 Lampiran 11 Analisis Logam Seng Plasma Alkohol Dehidrogenase Pada Tikus yang Diberi Etanol... 65 Lampiran 12 Hasil Perhitungan Kadar Logam Seng Plasma Alkohol Dehidrogenase Pada Tikus yang Diberi Etanol... 67 Lampiran 13 Penentuan Simpangan Rata-rata dan Standar Deviasi Tikus... 69 Lampiran 14 Hasil Analisis Penentuan Kadar Logam Seng dengan SPSS... 70 Lampiran 15 Hasil Analisis Data Penentuan Aktivitas alkohol Dehidrogenase Plasma Tikus dengan SPPS... 72 Lampiran 16 Penentuan Simpangan Rata - Rata dan Standar Deviasi Aktivitas Alkohol Dehidrogenase pada Plasma Tikus... 74 Lampiran 17 SNI Angka Kecukupan Logam Seng, Recommennded Daily Allowance (RDA), Komposisi Pakan Sederhana, Data ICPE Kadar Logam Seng dan Data Aktivitas Alkohol Dehidrogenase dari UPT Analitik Universitas Udayana... 75 xiv