Lampiran 1 Pewarnaan Gram dan Uji Katalase a. Pewarnaan Gram (Fardiaz, 199a) Siapkan gelas objek yang terlebih dahulu dibersihkan dengan alcohol dan dikeringkan. Sebarkan satu ose kultur pada gelas objek kemudian difiksasi dengan nyala api. Apabila berasal dari media padat, seperti agar atau bahan pangan, maka sebarkan terlebih dahulu satu ose air steril. Gelas objek yang telah difiksasi diteteskan pewarna violet Kristal dan didiamkan selama satu menit. Bilas menggunakan air dengan posisi miring sebelum diteteskan dengan lugol (larutan iodium gram) selama satu menit. Bilas kembali dengan air sebelum diteteskan alkohol 95% selama 10 detik. Bilas gelas objek dengan air sebelum diteteskan larutan safranin berwarna merah selama 0 detik. Gelas objek dibilas dengan air dan dikeringkan dengan kertas serap. Gelas objek dilihat pada mikroskop cahaya. Penampakan bakteri dilihat pada perbesaran 1000x dengan bantuan minyak imersi. Hasil warna ungu menunjukkan gram positif dan warna merah menunjukkan gram negatif. Bentuk dasar sel dan pengelompokannya dapat terlihat pada penampakan di bawah mikroskop cahaya. b. Uji Katalase (Fardiaz, 1990) Sampel diteteskan pada gelas objek terlebih dahulu. Kemudian teteskan 3 tetes H O dengan konsentrasi %. Lakukan pengamatan adanya gelembung gas. Hasil positif katalase ditunjukkan dengan adanya gelembung gas dan hasil negative ditunjukkan dengan tidak adanya gelembung gas.
Lampiran Pembuatan kurva pertumbuhan E. faecium IS-75 (modifikasi Ariella, 009) 1 ose Kultur E.faecium IS-75 pada MRS Agar miring 10 ml Inkubasi penyegaran Kultursegar jam 37 Inokulasi o C % (v/v) Pengujian dalam interval jam selama 4 jam dengan melakukan pengukuran: - Absorbansi - Hitungan Cawan Inkubasi 37 o C 4 jam
Lampiran 3 Pengukuran pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap probiotik a. Pengukuran Absorbansi Alat spektrofotometer yang akan digunakan terlebih dahulu dipanaskan selama 15 menit dengan mengatur filter pada 00 900 nm dan posisi panjang gelombang pada 00 nm. Mode pembacaan diatur pada nilai absorbansi. Masukkan blanko akuades terlebih dahulu untuk mengatur nilai absorbansi tepat di angka nol, kemudian pengukuran absorbansi siap dilakukan. Media cair dituang ke dalam tabung kuvet spektrofotometer untuk dibaca nilai absorbansinya. Pengukuran absorbansi dilakukan secara duplo dalam dua kali ulangan. b. Pengukuran ph (AOAC, 194) Pengukuran ph dilakukan dengan phmeter yang terlebih dahulu dikalibrasi dengan buffer ph 7.00 dan kemudian dilanjutkan dengan buffer ph 4.00. Elektrode phmeter terlebih dahulu dibilas, dikeringkan dengan tisu pengering, kemudian elektrode dicelupkan seluruhnya ke dalam media cair untuk diukur ph nya. Pembacaan ph dilakukan duplo dan dua kali ulangan.
c. Pengukuran Total Asam Tertitrasi dalam % Asam Laktat (AOAC, 1995) Pengukuran TAT dilakukan dengan menggunakan titran NaOH 0.1 N yang telah distandardisasi dengan indikator phenolftalein (PP) untuk membantu mempertajam titik akhir titrasi. Standardisasi dilakukan dengan melarutkan 0. gram asam potasium phtalate atau KHP (BM 04. g/mol) dalam erlenmeyer dengan 50 ml akuades. Lakukan titrasi setelah terlebih dahulu meneteskan 3 tetes indikator PP. Volume NaOH yang dibutuhkan dimasukkan ke dalam rumus untuk mengetahui normalitas NaOH sesungguhnya. N NaOH = W KHP BM KHP x Volume NaOH Media cair dipipet sebanyak 4 ml ke dalam labu takar 100 ml untuk ditepatkan dengan akuades. Kemudian diukur 50 ml untuk dimasukkan ke dalam erlenmeyer. Teteskan 3 tetes indikator PP sebelum melakukan titrasi. Volume NaOH yang dibutuhkan untuk mengubah warna menjadi tepat berwarna merah muda dicatat untuk dimasukkan ke dalam rumus % asam laktat. Pengukuran ini dilakukan duplo dalam dua kali ulangan. % asam laktat = V1 x N x BE X FP x 100% V x 1000 Keterangan: % asam laktat = Total asam laktat (% v/v) V1 = Volume NaOH sebagai titran (ml) N = Normalitas NaOH sebagai titran (N) BE = Bobot ekuivalen asam laktat (90.0 g / ekuivalen) FP = Faktor pengenceran V = Jumlah contoh yang dititrasi (ml)
d. Metode Hitungan Cawan (BAM, 001) Jumlah probiotik awal jam ke-0 hingga jam ke-4 dicawankan setiap selang waktu 4 jam. Media cair yang telah berada di inkubator 37 o C selama interval waktu tertentu diambil 1 ml secara aseptis ke dalam pengenceran berseri hingga diperoleh dua pengenceran terbesar yang akan dicawankan secara duplo. Metode pencawanan yang digunakan adalah metode agar tuang (pour plate) dengan MRSA sebanyak 10 15 ml. Cawan dengan agar yang sudah beku kemudian diinkubasi dalam suhu 37 o C dalam posisi cawan terbalik selama 4 jam untuk dilakukan penghitungan jumlah koloni. Koloni yang dihitung berada dalam kisaran 5 50 koloni. Jumlah koloni yang dicatat dan dihitung dengan rumusan sebagai berikut: Keterangan: N = Jumlah colony form unit (cfu) per ml atau gram produk ΣC n1 n d N = ΣC / [ (1 * n1) (0.1 * n) ] * (d) = Total seluruh koloni pada cawan yang dapat dihitung = Jumlah cawan dari pengenceran pertama yang dihitung = Jumlah cawan dari pengenceran kedua yang dihitung = Nilai pengenceran dari penghitungan pertama yang digunakan
Lampiran 4 Diagram alir pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan probiotik Enterococcus faecium IS-75 1 ose Kultur E.faecium IS-75 pada MRS Agar miring 10 ml Inkubasi penyegaran jam Kultur segar 37 o C Inokulasi % 10 ml Inkubasi jam 37 o C Kultur awal 1 ml Media pertumbuhan a. b. glukosa 1% (b/v) c. inulin 1% (b/v) d. FOS 1% (b/v) Pengujian dalam interval 4 jam selama 4 jam - Absorbansi - ph - TAT - Pencawanan Inkubasi 37 o C 4 jam
Lampiran 5 Diagram alir pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan probiotik L. plantarum IS-1050 dan L. casei strain Shirota Kultur L. plantarum IS- 1050 atau L. casei strain Shirota pada MRS agar miring 1 ose 10 ml Inkubasi penyegaran KulturSegar jam Inokulasi 37 o C % 10 ml Inkubasi ± - 10 jam Kultur 37 awal o C Media pertumbuhan a. 1 ml b. inulin 1% (b/v) c. FOS 1% (b/v) Pengecekan nilai absorbansi pada λ00 nm Inkubasi 37 o C 4 jam Pengujian dalam interval 4 jam selama 1 jam - ph - TAT (% asam laktat) Hitungan cawan pada jam ke-0,, dan 1
Lampiran Hasil pengukuran absorbansi dan hitungan cawan pada pembuatan kurva pertumbuhan E. faecium IS-75 Waktu Absorbansi Rataan Pengenceran Log CFU / ml Inkubasi (Jam) (U1/U) Absorbansi 10-3 10-4 10-5 10-10 -7 10-10 -9 CFU / ml 0 0.011 TBUD 15 3 4 - - - 0.010 0.009 TBUD 14 41 3 - - - 1.7 x 10.30 0.01 TBUD TBUD 15 19 - - - 0.00 0.0 TBUD TBUD 194 17 - - - 1. x 10 7 7.55 4 0.05 TBUD TBUD 19 7 - - - 0.04 0.04 TBUD TBUD 11 13 - - -. x 10 7 7.34 0.019 3 1-0.03 - - - 0.07 30 5 - - 3.3 x 10 7 7.51 0.10 11 19 3 3 0.10 - - - 0.103 9 7 1-1.1 x 10.041 10 0.4 TBUD 15 7 5 0.403 - - - 0.37 TBUD 1 9 5. x 10 9 9.447 1 1. TBUD TBUD 13 5 1.19 - - - 1.1 TBUD TBUD 1 17 1. x 10 10 10.55 14 1.59 TBUD TBUD 3 39 1. - - - 1.5 TBUD TBUD 195 4.4 x 10 10 10.30 1 1.79 TBUD TBUD 3 1.79 - - - 1.79 TBUD TBUD 315 71 7.0 x 10 10 10.45 1 1.97 TBUD TBUD TBUD 53 1.97 - - - 1.97 TBUD TBUD TBUD 7.4 x 10 10 10.0 0 1.97 TBUD TBUD TBUD 1.97 - - - 1.97 TBUD TBUD TBUD 5. x 10 10 10.79 1.97 TBUD TBUD TBUD 55 1.97 - - - 1.97 TBUD TBUD TBUD 57 5. x 10 10 10.74 4 1.97 TBUD TBUD TBUD 59 1.97 - - - 1.97 TBUD TBUD TBUD 4 5.4 x 10 10 10.73
Jam 0 4 1 1 0 4 Lampiran 7 Hasil pengukuran absorbansi pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan E. faecium IS-75 1 Rataan Glukosa 1 Glukosa Rataan Glukosa Glukosa Inulin 1 Inulin Rataan Inulin Inulin FOS 1 FOS Rataan FOS 0.045 0.043 0.04 0.05 0.031 0.04 0.033 0.037 0.033 0.04 0.041 0.05 0.045 0.0 0.035 0.047 0.043 0.043 0.03 0.03 0.03 0.033 0.03 0.03 0.05 0.041 0.041 0.197 0.7 0.19 0.94 0.917 0.94 0.7 0.31 0.31 0.35 0.379 0.35 0.13 0.93 0.311 0.199 0.9 0. 0.94 0.97 0.9 0.35 0.371 0.301 0.35 0.371 0.375 0.343 0.31 0.343 1.57 1.57 1.57 0.49 0.407 0.47 0.47 0.501 0.45 0.35 1.55 0.41 0.343 0.359 0.30 1.57 1.47 1.5 0.45 0.403 0.405 0.43 0.503 0.50 0.343 0.359 0.341 1.7 1.77 1.7 0.41 0.391 0.40 0.377 0.399 0.37 0.349 1.5 0.407 0.33 0.357 0.35 1.7 1.7 1. 0.419 0.397 0.394 0.379 0.401 0.400 0.497 0.35 0.49 1.07 1.197 1.07 0.49 0.403 0.4 0.310 0.3 0.309 0.430 1.0 0.41 0.499 0.359 0.3 1.07 1.197 1.197 0.47 0.405 0.404 0.30 0.37 0.37 0.379 0.379 0.37 1.177 1.17 1.177 0.47 0.405 0.4 0.7 0.95 0.73 0.37 1.10 0.41 0.377 0.377 0.37 1.177 1.177 1.1 0.49 0.403 0.404 0.73 0.7 0.91 0.373 0.373 0.37 1.117 1.17 1.1 0.435 0.401 0.434 0.53 0.71 0.53 0.37 1.15 0.41 0.371 0.371 0.37 1.17 1.17 1.17 0.433 0.403 0.40 0.53 0.73 0.7 FOS 0.033 0.370 0.494 0.39 0.31 0. 0.3
Jam 0 4 1 1 0 4 Lampiran Hasil pengukuran ph pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan E. faecium IS-75 1 Rataan Glukosa 1 Glukosa Rataan Glukosa Glukosa Inulin 1 Inulin Rataan Inulin Inulin FOS 1 FOS Rataan FOS 7.31 7.3 7.3 7.9 7.30 7.9 7.35 7.35 7.34 7.9 7.3 7.5 7.33 7.30 7.34 7.33 7.34 7.33 7.9 7.31 7.31 7.3 7.3 7.34 7.0 7.33 7.33 7.35 7.39 7.3 5. 5.30 5. 7.0 7.1 7..39.3.41 7.37 5.9 7.1 7.3 7.39 7.39 5. 5.30 5.30 7.3 7.1 7.1.4.4.40 7.45 7.47 7.4 4.7 4.7 4.73 7.34 7.34 7.35 5.53 5.53 5.54 7.4 4.74 7.35 7.4 7.47 7.47 4.73 4.75 4.7 7.3 7.34 7.34 5.54 5.53 5.53 7.4 7.49 7.49 4. 4.70 4.9 7.3 7.3 7.37 5. 5.3 5.3 7.49 4.9 7.34 7.49 7.49 7.49 4.9 4.70 4.70 7.37 7.3 7.3 5.3 5.4 5.4 7.33 7.57 7.33 4. 4.9 4.3 7.47 7.45 7.4 5.7 5.59 5.71 7.44 4. 7.47 7.3 7.55 7.5 4.4 4.9 4.9 7.49 7.4 7.4 5.70 5.70 5.5 7.07 7.5 7.07 4.55 4.55 4.55 7.47 7.40 7.4 5.1 5.1 5.1 7.30 4.55 7.44 7.07 7.54 7.53 4.54 4.5 4.5 7.49 7.40 7.40 5.1 5.3 5. 7.50 7.35 7.54 4.45 4.4 4.45 7.4 7.44 7.45 5.4 5.7 5.5 7.4 4.47 7.45 7.57 7.43 7.39 4.44 4.51 4.49 7.47 7.45 7.45 5.5 5. 5. FOS 7.9.40 5.53 5.3 5. 5. 5.
Lampiran 9 Hasil pengukuran TAT (% asam laktat) pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan E. faecium IS-75 Jam 0 4 1 1 0 4 Glukosa Inulin FOS U1 U Rataan U1 U Rataan U1 U Rataan U1 U Rataan 0.1954 0.1737 0.1737 0.1737 0.1303 0.171 0.150 0.1737 0.1791 0.1791 0.1791 0.150 0.1954 0.1954 0.1737 0.1954 0.1737 0.1737 0.1737 0.13 0.171 0.1737 0.450 0.450 0.1954 0.1954 0.3 0.3 0.00 0.4451 0.00 0.171 0.1954 0.415 0.450 0.1954 0.171 0.3 0.3040 0.77 0.1954 0.1737 0.97 0.00 0.1303 0.1737 0.390 0.391 0.1954 0.351 0.19 0.1954 0.171 0.731 0.97 0.1737 0.1737 0.3474 0.357 0.353 0.1954 0.3 0.7599 0.731 0.1737 0.1737 0.3474 0.391 0.171 0.719 0.14 0.171 0.171 0.7599 0.94 0.1954 0.1954 0.3474 0.390 0.337 0.171 0.1954 0.7599 0.73 0.171 0.171 0.390 0.3474 0.117 0.73 0.1954 0.171 0.171 0.73 0.94 0.1737 0.1737 0.3474 0.390 0.391 0.3 0.1954 0.71 0.715 0.1737 0.1737 0.357 0.3474 0.171 0.73 0.1791 0.3 0.1954 0.7599 0.94 0.1737 0.1954 0.3474 0.3474 0.340 0.1737 0.0 0.034 0.034 0.1737 0.1954 0.3474 0.3474 0.39 0.795 0.14 0.0 0.0 0.71 0.71 0.1737 0.1954 0.3474 0.390 0.353
Lampiran 10 Pertumbuhan (log cfu/ml) E. faecium IS-75 dengan metode hitungan cawan pada pengujian pengaruh prebiotik Waktu Inkubasi (jam) 0 4 1 Jenis media Glukosa Inulin FOS Glukosa Inulin FOS Glukosa Inulin FOS Glukosa Inulin FOS Pengenceran 10-4 10-5 10-10 - 7 10-153/154 153/154 135/179 110/99 159/190 19/15 100/130 195/194 7/300 35/5 40/47 1/14 94/3 1/9 1/110 14/143 43/153 9/199 3/ 340/1 13/151 97/9 4/4 70/5 11/03 14/13 1/3 49/70 / 10/1 177/151 01/190 117/117 143/1 73/7 5/4 17/ 1/1 35/34 41/3 CFU / ml Log CFU/ml 1.5 x 10 7 1.5 x 10 7 1.5 x 10 7 7.17 1. x 10 7 1.0 x 10 7 1.3 x 10 7 7.114 1.7 x 10 7 1.9 x 10 7 1. x 10 7 7.55 1. x 10 7 1.9 x 10 7 1. x 10 7 7.04.3 x 10. x 10.4 x 10.30 1.4 x 10 9 9. x 10 1. x 10 9 9.079.4 x 10 1.4 x 10 1.9 x 10.79. x 10. x 10 4. x 10.1 1. x 10 1.4 x 10 1.3 x 10.114 1. x 10 9 1.4 x 10 9 1.5 x 10 9 9.17.0 x 10 1.4 x 10 1.7 x 10.30 7. x 10.0 x 10. x 10.0 7.4 x 10 1.3 x 10 9 1.0 x 10 9 9.000 1. x 10 9.1 x 10 9.0 x 10 9 9.301 1. x 10 9 1.5 x 10 9 1.4 x 10 9 9.14 3. x 10. x 10.9 x 10.4
Waktu Inkubasi (jam) 1 0 4 Jenis media Pengenceran CFU / ml Log CFU/ml Glukosa Inulin FOS Glukosa Inulin FOS Glukosa Inulin FOS 330/TBUD 377/4 33/1 301/0 10/00 09/ 100/35 105/30 300/40 /17 300/30 0/ 1/155 155/1 90/79 7/70 77/15 11/91 5/93 40/1 47/5 95/94 7/70 119/5 77/15 105/109 1/ 4/34 47/35 74/73 5/109 1/3 115/9 77/73 70/41 40/ 135/153 1/14 / 74/53 19/9.4 x 10 7.4 x 10 7.9 X 10.9 1. x 10 9 1.4 x10 10 1. X 10 9 9.55 1.1 x 10 9.9 x 10 1.0 X 10 9 9.000.3 x 10 5.0 x 10 3. X 10.55 9.4 x 10 7.4 x 10.4 x 10.94 1.0 x 10 9 1. x 10 9 1.3 x 10 9 9.114 1.0 x 10 9 1.9 x 10.0 x 10.77 1.9 x 10 1.9 x 10 1.9 x 10.79 3. x 10.5 x 10. x 10.447.5 x 10 9 1.3 x 10 9 1.9 x 10 9 9.79 3. x 10. x 10 3.3 x 10.51 1. x 10 1. x 10 1. x 10.04
Lampiran 11 Hasil pengukuran ph pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan L. plantarum IS-1050 Jam 0 4 1 1 Rataan Inulin 1 Inulin Rataan Inulin Inulin FOS 1 FOS Rataan FOS 7.0 7.10 7.15 7.10 7.0 7.15 7.30 7.0 7.30 7.15 7.15 7.10 7.0 7.15 7.0 7.10 7.15 7.30 7.30 7.5.770.00.75 5.570 5.0 5.570 5.550 5.50 5.545.790 5.0.00.790.795 5.570 5.30 5.45 5.540 5.550 5.555.50.30.575 4.40 4.40 4.5 4.50 4.0 4.50.0 4.35.590.50.40 4.10 4.50 4.45 4.50 4.0 4.0 7.40 7.330 7.55 4.950 4.950 4.935 4.0 4.90 4.0 7.95 4.943 7.70 7.340 7.335 4.90 4.950 4.950 4.0 4.700 4.95 FOS 7. 5.550 4.55 4.
Lampiran 1 Hasil pengukuran TAT (% asam laktat) pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan L. plantarum IS-1050 Jam 0 4 1 Inulin FOS U1 U Rataan U1 U Rataan U1 U Rataan 0.150 0.1303 0.150 0.1303 0.1303 0.1303 0.141 0.141 0.150 0.1303 0.150 0.1303 0.1303 0.1303 0.1303 0.1954 0.1954 0.00 0.3040 0.3040 0.93 0.3474 0.3 0.1954 0.171 0.0 0.3040 0.357 0.3040 0.3149 0.1737 0.1737 0.1791 0.434 0.434 0.4 0.450 0.4777 0.1737 0.1954 0.415 0.434 0.4994 0.434 0.4 0.150 0.1737 0.511 0.4994 0.00 0.00 0.150 0.1303 0.150 0.4994 0.4777 0.4994 0.00 0.00 0.00
Lampiran 13 Pertumbuhan L. plantarum IS-1050 (log cfu/ml) dengan metode hitungan cawan pada pengujian pengaruh prebiotik Waktu Inkubasi (jam) 0 1 Jenis media Inulin FOS Inulin FOS Inulin FOS Pengenceran 10-5 10-10 - 7 10-10 - 9 97/77 1/9 1/5 14/ 115/11 1/ 11/115 0/1 17/145 1/ 14/15 3/5 9/91 1/ 59/45 14/4 3/4 3/4 0/3 7/9 94/107 51/40 4/4 1/30 /1 1/9 30/7 30/11 1/1 1/1 /1 9/1 CFU / ml Rata-rata CFU / ml Log CFU/ml 9.7 x 10 1.0 x 10 7 9. x 10.991 1. x 10 7 1. x 10 7 1. x 10 7 7.079 1.4 x 10 7 1. x 10 7 1.5 x 10 7 7.171.0 x 10 5. x 10. x 10.195 3. x 10 9 3. x 10 9 3. x 10 9 9.5051 9.0 x 10 1.1 x 10 9 1.0 x 10 9 9.0000 4. x 10 4.7 x 10 4. x 10..1 x 10 10.1 x 10 10.1 x 10 10 10.3 3.0 x 10 9 3.0 x 10 9 3.0 x 10 9 9.4771
Lampiran 14 Hasil pengukuran ph pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan L. casei strain Shirota Rataan Rataan Jam 1 Inulin 1 Inulin Inulin FOS 1 FOS Inulin 7.0 7.0 7.75 7.50 7.30 7.45 0 7.75 7.35 4 1 Rataan FOS 7.0 7.00 7.15 7.70 7.70 7.75 7.40 7.0 7.5 7.10 7.10 7.05.30.70.35.00.00.00.00.70.15.4.03.40.50.0.00.10.05.30.770.775.0.70.0 5.90 5.40 5.90 5.50 5.50 5.40.3 5.70.0.0.5 5.90 5.0 5.50 5.30 5.0 5.35 7.730 7.730 7.745 5.50 5.10 5.45 5.30 5.10 5.30 7.733 5.30 7.70 7.710 7.70 5.40 5.0 5.15 5.30 5.0 5.15 FOS 7.10.795 5.3 5.3
Lampiran 15 Hasil pengukuran TAT (% asam laktat) pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan L. casei strain Shirota Jam Inulin FOS U1 U Rataan U1 U Rataan U1 U Rataan 0 0.1737 0.171 0.1954 0.1303 0.1303 0.1303 0.1303 0.10 0.171 0.1737 0.1303 0.1303 0.1737 0.1303 0.1357 4 0.1737 0.150 0.1737 0.150 0.10 0.1737 0.19 0.150 0.1737 0.150 0.10 0.1737 0.1954 0.150 0.1574 0.171 0.1737 0.3 0.3040 0.3040 0.3 0.00 0.0 0.3 0.1737 0.0 0.0 0.0 0.3 0.0 1 0.1954 0.150 0.3 0.3 0.0 0.3 0.14 0.551 0.1303 0.10 0.0 0.3 0.3040 0.3 0.714
Lampiran 1 Pertumbuhan L. casei strain Shirota (log cfu/ml) degan metode hitungan cawan pada pengujian pengaruh prebiotik Waktu Inkubasi (jam) 0 1 Jenis media Inulin FOS Inulin FOS Inulin FOS Pengenceran 10-5 10-10 - 7 10-10 - 9 40/47 4/7 54/50 4/ 59/101 3/9 3/31 9/74 9/ 70/7 /7 57/55 9/ 34/49 7/ 14/11 15/4 9/ 14/143 15/ TBUD/109 0/35 19/3 0/ 3/15 5/1 7/90 1/ /9 1/1 15/13 17/ 3/0 1/3 CFU / ml Rata-rata CFU / ml Log CFU/ml 4.4 x 10 5. x 10 4. x 10.1.0 x 10 3.4 x 10 7.1 x 10 7 7.3.5 x 10. x 10 7. x 10.0 5. x 10 4. x 10 4.9 x 10.90 1. x 10 9 7. x 10 9 4.5 x 10 9 9.53 1.4 x 10 9 1.3 x 10 9 1.4 x 10 9 9.141.1 x 10 9 1.9 x 10 9.0 x 10 9 9.3010 9. x 10 9 9. x 10 9 9. x 10 9 9.991 1.7 x 10 9 1.4 x 10 9 1. x 10 9 9.041
Lampiran 17 Hasil analisis statistik pertumbuhan E. faecium IS-75 (log cfu/ml) pada pengujian pengaruh prebiotik Between-Subjects Factors Value Label N Media 1 14 glukosa 14 3 Inulin 14 4 FOS 14 Waktu 0 4 1 1 0 4 Ulangan 1 Dependent Variable: E.faecium Source Corrected Model Intercept Media Waktu Media * Waktu Error Total Corrected Total Tests of Between-Subjects Effects Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. 30,199 a 7 1,11 31,107,000 4173,54 1 4173,54 11074,,000 4,704 3 1,5 43,1,000 3,10 3,53 107,17,000,375 1,13 3,70,001 1,007,03 404,790 5 31,0 55 a. R Squared =,9 (Adjusted R Squared =,937)
Between-Subjects Factors N Kode 0 A 0 B 0 C 0 D 1 A 1 B 1 C 1 D 1 A 1 B 1 C 1 D 0 A 0 B 0 C 0 D 4 A 4 B 4 C 4 D 4 A 4 B 4 C 4 D A B C D Dependent Variable: E.faecium Tests of Between-Subjects Effects Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Corrected Model 3,370(a) 7, 39,510,000 Intercept 151,3 4070,19 1 4070,19 3,000 Kode 3,370 7, 39,510,000 Error,13,0 Total 4094,0 5 Corrected Total 3,93 55 a R Squared =,974 (Adjusted R Squared =,950)
Homogeneous Subsets Tukey HSD E.faecium Kode N Subset 1 3 4 5 7 9 0 B 7,1000 0 A 7,1700 0 D 7,17900 0 C 7,5450 A,1150 4 D,0400,0400 C,350,350,350 4 C,300,300,300 4 A,350,350,350,350 4 A,45150,45150,45150,45150 1 D,4000,4000,4000,4000 4 C,4700,4700,4700,4700,4700 1 D,53050,53050,53050,53050,53050,53050 0 C,3950,3950,3950,3950,3950,3950,3950 4 D,3950,3950,3950,3950,3950,3950,3950 0 D,7900,7900,7900,7900,7900,7900,7900 D,1750,1750,1750,1750,1750,1750 1 A,950,950,950,950,950 0 A,9100,9100,9100,9100,9100 1 A,99150,99150,99150,99150,99150 1 C,99500,99500,99500,99500,99500 4 B 9,050 9,050 9,050 9,050 0 B 9,1000 9,1000 9,1000 1 C 9,1750 9,1750 9,1750 B 9,17500 9,17500 1 B 9,5500 4 B 9,500 1 B 9,50 Sig. 1,000,15,13,0,051,03,059,14,10 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,0. a Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. b Alpha =,05.
Lampiran 1. Hasil analisis statistik ph media pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan E. faecium IS-75 Between-Subjects Factors N media A 14 B 14 C 14 D 14 waktu 0 4 1 1 0 4 Dependent Variable: ph Source Corrected Model Intercept media waktu media * waktu Error Total Corrected Total Tests of Between-Subjects Effects Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. 70,370 a 7,0 34,515,000 309,403 1 309,403 3993,4,000 53,07 3 17,9 474,393,000 7,49 1,50 174,790,000 9,795 1,544 7,110,000,00,007 379,97 5 70,570 55 a. R Squared =,997 (Adjusted R Squared =,994)
Between-Subjects Factors kode 0 A 0 B 0 C 0 D 1 A 1 B 1 C 1 D 1 A 1 B 1 C 1 D 0 A 0 B 0 C 0 D 4 A 4 B 4 C 4 D 4 A 4 B 4 C 4 D A B C D N Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: ph Source Corrected Model Intercept kode Error Total Corrected Total Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. 70,370 a 7,0 34,515,000 309,403 1 309,403 3993,4,000 70,370 7,0 34,515,000,00,007 379,97 5 70,570 55 a. R Squared =,997 (Adjusted R Squared =,994) Homogeneous Subsets
Tukey HSD a,b kode 4 B 0 B 1 B 1 B B 4 B D 1 D 0 D 4 D 1 D 4 D 4 C 0 B 0 D 0 A 0 C 1 C 4 A 0 A C 1 A 1 A 1 C 0 C 4 A 4 C A Sig. ph N 1 3 4 5 4,400 4,550 4,00 4,50 4,700 5,50 Subset 5,500 5,500 5,00 5,00 5,00 5,50,400 7,00 7,50 7,50 7,50 7,300 7,300 7,300 7,310 7,350 7,400 7,400 7,400 7,400 7,400 7,400 7,400,1,437,95 1,000,04 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,007. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. b. Alpha =,05.
Lampiran 19. Hasil analisis statistik TAT (% asam laktat) media pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan E. faecium IS-75 Between-Subjects Factors media waktu A B C D 0 4 1 1 0 4 N 14 14 14 14 Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: TAT_asam_laktat Source Corrected Model Intercept media waktu media * waktu Error Total Corrected Total Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig.,30 a 7,03 19,510,000,105 1,105 147,9,000 1,57 3,5 155,443,000,9,049 11,951,000,371 1,01 49,541,000,01,000,347 5,4 55 a. R Squared =,995 (Adjusted R Squared =,990)
Between-Subjects Factors kode 0 A 0 B 0 C 0 D 1 A 1 B 1 C 1 D 1 A 1 B 1 C 1 D 0 A 0 B 0 C 0 D 4 A 4 B 4 C 4 D 4 A 4 B 4 C 4 D A B C D N Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: TAT_asam_laktat Source Corrected Model Intercept kode Error Total Corrected Total Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig.,30 a 7,03 19,510,000,105 1,105 147,9,000,30 7,03 19,510,000,01,000,347 5,4 55 a. R Squared =,995 (Adjusted R Squared =,990) Homogenous Subsets
Tukey HSD a,b kode C 0 D 0 A 0 B 0 C 0 C 1 C 4 C 1 C 4 A A 4 C 1 A 1 A 0 A 4 A 4 D 0 D 4 D D 1 D 1 D 4 B B 1 B 1 B 0 B 4 B Sig. TAT_asam_laktat t Subset N 1 3 4 5 7,100,150,1750,1750,1750,100,100,150,000,000,000,050,050,150,150,00,00,00,00,400,400,50,50,3450,3450,300,300,300,300,350,350,350,3700,3700,4450,350,700,7350,7400,7900,075,075,075 1,000,075 1,000,0 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,000. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. b. Alpha =,05.
Lampiran 0 Hasil analisis statistik pertumbuhan L. plantarum IS-1050 (log cfu/ml) pada pengujian pengaruh prebiotik Between-Subjects Factors media waktu A B C 0 1 Value Label N Inulin FOS Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: L.plantarum Source Corrected Model Intercept media waktu media * waktu Error Total Corrected Total Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. 3,340 a,91 1135,34,000 131,47 1 131,47 513303,4,000 1,979,99 35,199,000 0,051 10,05 3903,031,000 1,311 4,3 17,553,000,03 9,003 1341,40 1 3,33 17 a. R Squared =,999 (Adjusted R Squared =,99) Between-Subjects Factors N Kode 0 A 0 B 0 C 1 A 1 B 1 C A B C Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable: L.plantarum Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Corrected Model 3,340(a),91 1135,34,000 Intercept 513303,41 131,47 1 131,47 9,000 Kode 3,340,91 1135,34,000 Error,03 9,003 Total 1341,40 1 Corrected Total 3,33 17 a R Squared =,999 (Adjusted R Squared =,99) Homogenous subsets Tukey HSD a,b Kode 0 A 0 B 0 C 1 A A C 1 C B 1 B Sig. L.plantarum N 1 3 4 5,993400 7,07900 7,175100 Subset,7450,09550,09550,99700 9,477100 9,505100 10,300,03,33,09,999 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,003. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. b. Alpha =,05.
Lampiran 1. Hasil analisis statistik ph media pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan L. plantarum IS-1050 Between-Subjects Factors media waktu A B C 0 4 1 N Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: ph Source Corrected Model Intercept media waktu media * waktu Error Total Corrected Total Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. 7,01 a 11,4 111,77,000 7,04 1 7,04 41449,,000 10,0 5,034 41,00,000 1,45 3 4,14 197,933,000 4,59,75 37,133,000,05 1,00 94,710 4 7,10 3 a. R Squared =,999 (Adjusted R Squared =,99) Between-Subjects Factors kode 0 A 0 B 0 C 1 A 1 B 1 C 4 A 4 B 4 C A B C N
Dependent Variable: ph Source Corrected Model Intercept kode Error Total Corrected Total Tests of Between-Subjects Effects Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. 7,01 a 11,4 111,77,000 7,04 1 7,04 41449,,000 7,01 11,4 111,77,000,05 1,00 94,710 4 7,10 3 a. R Squared =,999 (Adjusted R Squared =,99) Homogenous Subsets Tukey HSD a,b kode 1 C C B 1 B 4 B 4 C A 4 A 0 A 0 B 0 C 1 A Sig. ph N 1 3 4 5 4,00 4,00 4,00 Subset 4,950 5,550 5,550,550,700 7,00 7,00 7,00 7,50 1,000,144 1,000,144,99 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,00. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. b. Alpha =,05.
Lampiran. Hasil analisis statistik TAT (% asam laktat) media pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan L. plantarum IS-1050 Between-Subjects Factors media waktu A B C 0 4 1 N Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: TAT_asam_laktat Source Corrected Model Intercept media waktu media * waktu Error Total Corrected Total Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig.,594 a 11,054 301,49,000,059 1,059 11493,33,000,19,099 553,000,000, 3,07 47,341,000,134,0 14,90,000,00 1,000,5 4,59 3 a. R Squared =,99 (Adjusted R Squared =,993) Between-Subjects Factors kode 0 A 0 B 0 C 1 A 1 B 1 C 4 A 4 B 4 C A B C N
Dependent Variable: TAT_asam_laktat Source Corrected Model Intercept kode Error Total Corrected Total Tests of Between-Subjects Effects Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig.,594 a 11,054 301,49,000,059 1,059 11493,33,000,594 11,054 301,49,000,00 1,000,5 4,59 3 a. R Squared =,99 (Adjusted R Squared =,993) Homogenous Subsets Tukey HSD a,b kode 0 C 0 A 0 B 1 A A 4 A 4 B 4 C B C 1 B 1 C Sig. TAT_asam_laktat N 1 3 4 5,1300,1400,1400,1500,1500,1750,1750,000,900,3100 Subset,450,400,400,4950,000,1,07,91,33,33 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,000. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. b. Alpha =,05.
Lampiran 3 Hasil analisis statistik pertumbuhan L. casei strain Shirota (log cfu/ml) pada pengujian pengaruh prebiotik Between-Subjects Factors Value Label N media A B Inulin C FOS waktu 0 1 Dependent Variable: L.casei Tests of Between-Subjects Effects Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Corrected Model 4,7(a) 3,090 51,05,000 Intercept 1303,504 1 1303,504 1534,33,000 media,955,47 7,91,010 waktu 3,03 11,531 190,50,000 media * waktu,704 4,17,90,05 Error,545 9,01 Total 13,771 1 Corrected Total 5,7 17 a R Squared =,97 (Adjusted R Squared =,959) media Dependent Variable: L.casei Tukey HSD Multiple Comparisons (I) media Inulin FOS (J) media Inulin FOS FOS Inulin Based on observed means. *. The mean difference is significant at the,05 level. Mean Difference 95% Confidence Interval (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound -,53950*,14043,00 -,90544 -,1735 -,99533,14043,143 -,917,09701,53950*,14043,00,1735,90544,4417,14043,05 -,13177,1011,99533,14043,143 -,09701,917 -,4417,14043,05 -,1011,13177
Homogenous Subsets Tukey HSD a,b media FOS Inulin Sig. L.casei Subset N 1,193,51517,51517,75933,143,05 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,01. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. Waktu b. Alpha =,05. Dependent Variable: L.casei Tukey HSD Multiple Comparisons (I) waktu 0 1 (J) waktu 1 0 1 0 Mean Difference 95% Confidence Interval (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound -,17443*,14043,000 -,571077-1,7779 -,577000*,14043,000 -,973594 -,1040,17443*,14043,000 1,7779,571077 -,40517*,14043,047 -,799111 -,00593,577000*,14043,000,1040,973594,40517*,14043,047,00593,799111 Based on observed means. *. The mean difference is significant at the,05 level. Homogenous Subsets
Tukey HSD a,b waktu 0 1 Sig. L.casei Subset N 1 3,9593 9,10047 9,5093 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,01. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. b. Alpha =,05.
Lampiran 4. Hasil analisis statistik ph media pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan L. casei strain Shirota Between-Subjects Factors media waktu A B C 0 4 1 N Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: ph Source Corrected Model Intercept media waktu media * waktu Error Total Corrected Total Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. 1,45 a 11 1,1 0,455,000 103,0 1 103,0 499,000 3, 1,43 443,000,000 5,041 3 1,0 4033,000,000 4,11, 147,000,000,005 1,000 1049,070 4 1,50 3 a. R Squared = 1,000 (Adjusted R Squared =,999) Between-Subjects Factors kode 0 A 0 B 0 C 1 A 1 B 1 C 4 A 4 B 4 C A B C N
Dependent Variable: ph Source Corrected Model Intercept kode Error Total Corrected Total Tests of Between-Subjects Effects Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. 1,45 a 11 1,1 0,455,000 103,0 1 103,0 499,000 1,45 11 1,1 0,455,000,005 1,000 1049,070 4 1,50 3 a. R Squared = 1,000 (Adjusted R Squared =,999) Homogeneous Subsets Tukey HSD a,b kode 1 B 1 C B C 4 C 4 A 4 B A 0 A 0 B 0 C 1 A Sig. ph Subset N 1 3 4 5,00 5,00 5,00 5,00,750,00,00,00 7,00 7,00 7,00 7,700 1,000,44 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,000. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. b. Alpha =,05.
Lampiran 5. Hasil analisis statistik TAT (% asam laktat) media pada pengujian pengaruh prebiotik terhadap pertumbuhan L. casei strain Shirota Between-Subjects Factors media waktu A B C 0 4 1 N Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: TAT_asam_laktat Source Corrected Model Intercept media waktu media * waktu Error Total Corrected Total Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig.,04 a 11,00 1,997,000, 1, 1959,59,000,003,00 3,15,05,034 3,011 5,50,000,0,004 9,0,000,005 1,000,951 4,070 3 a. R Squared =,93 (Adjusted R Squared =,5) Between-Subjects Factors kode 0 A 0 B 0 C 1 A 1 B 1 C 4 A 4 B 4 C A B C N
Dependent Variable: TAT_asam_laktat Source Corrected Model Intercept kode Error Total Corrected Total Tests of Between-Subjects Effects Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig.,04 a 11,00 1,997,000, 1, 1959,59,000,04 11,00 1,997,000,005 1,000,951 4,070 3 a. R Squared =,93 (Adjusted R Squared =,5) Homogeneous Subsets Tukey HSD a,b kode 0 B 0 C 1 A 4 B 4 C 4 A A 0 A 1 B C B 1 C Sig. TAT_asam_laktat Subset N 1,1300,1300,1450,1500,1550,100,1950,1950,000,000,500,550,00,700,141,09 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Based on Type III Sum of Squares The error term is Mean Square(Error) =,000. a. Uses Harmonic Mean Sample Size =,000. b. Alpha =,05.