Bab IV Hasil dan Pembahasan

Transkripsi

1 Bab IV Hasil dan Pembahasan IV.1 Uji pendahuluan Uji pendahuluan terhadap daun Artocarpus champeden secara kualitatif dilakukan dengan teknik kromatografi lapis tipis dengan menggunakan beberapa variasi eluen yang berbeda kepolarannya. Hasil uji kualitatif daun dengan eluen polar memberikan hasil yang positif, dibuktikan dengan adanya noda yang berpendar di bawah sinar ultraviolet dan teroksidasi oleh reagen serum sulfat membentuk endapan berwarna merah kecoklatan. Hal ini menunjukkan bahwa daun dari spesies tersebut memiliki kandungan flavonoid. IV.2 Senyawa Flavan-3-ol dari daun Artocarpus champeden Dari daun Artocarpus champeden berhasil diisolasi 2 senyawa flavan-3-ol yang berupa padatan berwarna putih kekuningan. Kedua senyawa ini diidentifikasi sebagai dua senyawa dengan kerangka yang sama berdasarkan kesamaan data dari spektrum UV dan IR, dan hasil perbandingan spektrum IR dengan spektrum senyawa yang pernah diisolasi dari penelitian sebelumnya yang tercatat pada database spektrum IR di Laboratorium Kimia rganik Bahan Alam ITB. IV.2.1 Senyawa 1 Senyawa 1 diperoleh dari pemisahan fraksi B berupa padatan berwarna putih kekuningan dengan titik leleh C. Spektrum UV (Me) menunjukan serapan maksimum pada 206 nm, 280 nm, dan serapan maksimum (Me+Na) pada 291 nm. Spektrum IR (KBr) ν maks (-), (-CH alifatik), 1624 dan 1519 (aril), 1245 dan 1216 (aril--), 1142, 1108, 793. Data spektrum 1 H NMR dapat dilihat pada tabel IV.1. Spektrum UV senyawa tersebut menunjukkan dua serapan maksimum pada 206 dan 280 nm yang merupakan serapan khas untuk kromofor flavan dan flavan-3-ol. Serapan maksimum pada 280 nm bergeser secara batokromik menjadi 291 nm pada penambahan pereaksi geser Na, yang berarti senyawa ini memiliki gugus fenol bebas.

2 29 Gambar IV.1 Spektrum UV senyawa 1 Adanya gugus fenol bebas tersebut juga didukung oleh spektrum IR senyawa tersebut dengan adanya serapan maksimum pada cm -1. Selain itu, spektrum IR juga menunjukkan serapan-serapan maksimum pada 2930 cm -1 untuk gugus alkil dan 1624 dan 1519 cm -1 untuk gugus aromatik. C-H -H C=C Gambar IV.2 Spektrum IR senyawa 1

3 30 Spektrum 1 H NMR (Tabel IV.1) menunjukan sepasang sinyal doblet AB koplingmeta pada δ 5,8 dan 6,01 ppm (d, J = 2,6 Hz) yang khas untuk proton aromatik pada cincin A kerangka flavan-3-ol, dimana posisi C-5 dan C-7 teroksigenasi. Senyawa 1 ini memperlihatkan tiga sinyal proton aromatik sistem spin ABX pada cincin B berupa tiga sinyal dengan multiplisitas berbeda, pada 6,74 ppm (1H,dd, J=1,9 & 8,2 Hz), terdapat sinyal doble doblet dengan kopling meta (1,9 Hz) dan orto (8,2 Hz), pada 6,78 ppm (1H,d, J=8,0 Hz), terdapat sinyal doblet dengan kopling orto, dan pada 6,88 ppm (1H,d, J=1,9 Hz) terdapat sinyal doblet dengan kopling meta. Sehingga dari data tersebut diperoleh informasi posisi substituen hidroksi pada cincin B dari senyawa 1 ini adalah pada C-3 dan C-4, karena dengan posisi tersebut maka akan muncul sinyal doblet dengan kopling meta dari H-2, sinyal doblet dengan kopling orto dari H-5, dan sinyal doble doblet dengan kopling orto dan meta dari H-6. Tabel IV.1 Data spektrum 1 H NMR Katecin H δh Katecin a δh Katecin b 2 4,54 (1H,d, J=8 Hz) 4,74 (1H,d, J=8 Hz) 3 3,98 (1H,m) 4,01 (1H,m) 4β 2,5 (1H,dd, J=8,6 & 16 Hz) 2,48 (1H,dd, J=8,6 & 16 Hz) 4α 2,89 (1H,dd, J=5,1 & 16 Hz) 2,79 (1H,dd, J=5,1 & 16 Hz) 6 6,01 (1H,d, J=2,3 Hz) 5,89 (1H,d, J=2,3 Hz) 8 5,86 (1H,d, J=2,3 Hz) 5,72 (1H,d, J=2,3 Hz) 2' 6,88 (1H,d, J=1,9 Hz) 6,90 (1H,d, J=1,9 Hz) 6,74 (1H,dd, J=1,9 & 8,2 Hz) 6,64 (1H,dd, J=1,9 & 8,2 Hz) ' 6,78 (1H,d, J=8,0 Hz) 6,66 (1H,d, J=8,0 Hz) a hasil isolasi dari daun Artocarpus champeden b hasil isolasi dari kulit akar Artocarpus glauca (Agustini,1999) Senyawa dengan kerangka flavan-3-ol memiliki dua atom C kiral pada C-2 dan C- 3. Stereokimia pada dua atom C kiral dari senyawa 1 ditetapkan dari adanya sinyal

4 31 doblet dari proton di H-4β dengan konstanta kopling 8,6 Hz yang menyatakan adanya kopling aksial-aksial dengan proton di C-3, sehingga dengan demikian proton di C-3 juga berada pada posisi β. Sinyal proton di C-2 menunjukkan adanya sinyal doblet dengan konstanta kopling 8 Hz yang menyatakan adanya kopling aksial-aksial dengan proton di C-3. Dengan demikian proton di C-2 juga memiliki posisi β terhadap kerangka karbon, dan stereokimia relatif senyawa 1 tersebut ditetapkan sebagai trans. Dari data yang sudah berhasil diintrepretasi tersebut maka senyawa 1 diidentifikasi sebagai katecin. 8 7 A ' 3' 4' B 2 5' 1' 3 Gambar IV.3 Struktur dan penomoran pada senyawa 1 Hasil pengukuran putaran optis dari katecin diperoleh harga putaran optis dengan nilai [α] D = -0,5 Berdasarkan literatur, katekin memiliki empat buah stereoisomer, yaitu epikatekin, (2R,3R), (-)-cis, dengan [α] D = -68; katekin, (2R,3S), (+)-trans, dengan [α] D = +17; ent-katekin, (2S,3R), (-)-trans, dengan [α] D = -16 dan entepikatekin (2S,3S), (+)-cis, dengan [α] D = +59. (+) Katecin (2R,3S) (-) Katecin (2S,3R) Dengan demikian katecin hasil isolasi dari daun Artocarpus champeden merupakan campuran rasemat.

5 32 IV.2.2 Senyawa 2 Senyawa 2 diperoleh dari pemisahan fraksi B, yang berbeda kepolarannya dari senyawa 1 berdasarkan hasil uji dengan teknik kromatografi lapis tipis, perbedaan Rf pada plat KLT menyatakan bahwa senyawa 2 ini bersifat lebih non polar dari senyawa 1. Senyawa 2 ini berupa padatan berwarna putih kekuningan dengan titik leleh C. Spektrum UV (Me) menunjukan serapan maksimum pada 207 nm dan 275 nm, dan serapan maksimum (Me+Na) pada 276 nm. Spektrum IR (KBr) ν maks (-), (-CH alifatik), 1624 dan 1519 (aril), 1245 dan 1216 (aril--), 1142, 1108, 793. Data spektrum 1 H NMR dapat dilihat pada tabel IV.2. Spektrum UV senyawa tersebut menunjukkan dua serapan maksimum pada 207 dan 275 nm yang merupakan serapan khas untuk kromofor flavan dan flavan-3-ol. Serapan maksimum pada 275 nm bergeser secara batokromik menjadi 276 nm pada penambahan pereaksi geser Na, yang berarti senyawa ini memiliki gugus fenol bebas. Adanya gugus fenol bebas tersebut juga didukung oleh spektrum IR senyawa tersebut dengan adanya serapan maksimum pada cm -1. Selain itu, spektrum IR juga menunjukkan serapan-serapan maksimum pada 2930 cm -1 untuk gugus alkil dan 1624 dan 1519 cm -1 untuk gugus aromatik. Gambar IV.4 Spektrum UV senyawa 2

6 33 C-H -H C=C Gambar IV.5 Spektrum IR senyawa 2 Spektrum 1 H NMR (Tabel IV.2) menunjukan sepasang sinyal doblet AB koplingmeta pada δ 5,8 dan 6,01 ppm (d, J = 2,6 Hz) yang khas untuk proton aromatik pada cincin A kerangka flavan-3-ol, dimana posisi C-5 dan C-7 teroksigenasi. Senyawa kedua memperlihatkan 2 sinyal proton aromatik sistem spin AA BB pada 6,81 ppm (2H,dd, J= 8,2 Hz), berupa sinyal doble doblet dengan kopling meta dan kopling orto, dan 7,25 ppm (2H,dd, J= 8,2 Hz) yang juga berupa sinyal doblet dengan kopling orto. Dari data tersebut bisa disimpulkan bahwa terdapat satu subtituen hidroksi di posisi 4, karena dengan posisi hidroksi di C-4 tersebut, maka akan muncul 2 sinyal doblet dengan kopling orto, yang masing-masing mewakili 2 sinyal proton yang simetri, H-2 akan muncul sebagai sinyal yang sama dengan H-6, dan H-3 akan muncul sebagai sinyal yang sama dengan H-5. Seperti halnya senyawa 1, senyawa 2 ini juga memiliki stereokimia relatif trans, karena sinyal proton di C-2 menunjukkan adanya sinyal doblet dengan konstanta

7 34 kopling 8 Hz yang menyatakan adanya kopling aksial-aksial dengan proton di C- 3. Hal terebut diperkuat dengan hasil analisis sinyal-sinyal pada spektrum NESY. Analisis sinyal pada spektrum NESY menunjukkan tidak adanya korelasi antara H-2 dan H-3. Dari interpretasi data tersebut maka senyawa 2 diidentifikasi sebagai transafzelecin. Tabel IV.2 Data spektrum 1 H NMR Afzelecin H δh Afzelecin a δh Afzelecin b 2 4,58 (1H,d, J=8 Hz) 4,61 (1H,d, J=8 Hz) 3 3,9 (1H,m) 4,00 (1H,m) 4β 2,5 (1H,dd, J=8,6 & 16 Hz) 2,53 (1H,dd, J=8,4 & 16,4 Hz) 4α 2,9 (1H,dd, J=5,7 & 16 Hz) 2,89 (1H,dd, J=5,5 & 16,4 Hz) 6 6,01 (1H,d, J=2,3 Hz) 6,20 (1H,d, J=2,3 Hz) 8 5,8 (1H,d, J=2,3 Hz) 6,14 (1H,d, J=2,3 Hz) 2' 7,24(2H,dd, J= 8,6 Hz) 7,21 (2H,dd, J= 8,5 Hz) 3 5' 6,81(2H,dd, J= 8,6 Hz) 6,78(2H,dd, J= 8,5 Hz) a hasil isolasi dari daun Artocarpus champeden b hasil isolasi dari batang Daphniphyllum oldhami (Shao,et.al., 2003) A 1 4 2' 3' 2 1' 3 B 4' 5' Gambar IV.6 Struktur dan penomoran pada senyawa 2