Gambar 1. Pengambilan Contoh untuk Pemeriksaan Biologi Pada Permukaan Secara Langsung

Transkripsi

1 Lampiran 1. Metode Pengambilan Contoh Air Pemeriksaan Mikrobiologi (SNI ) Pengambilan contoh untuk pemeriksaan mikrobiologi dapat dilakukan pada air permukaan dan air tanah dengan penjelasan sebagai berikut : 1. Siapkan botol yang volumenya paling sedikit 100 ml dan telah disterilkan pada suhu120 C selama 15 menit atau dengan cara sterilisasi lain; 2. Ambil contoh dengan cara memegang botol steril bagian bawah dan celupkan botol steril + 20 cm di bawah permukaan air dengan posisi mulut botol berlawanan dengan arah aliran. Gambar 1. Pengambilan Contoh untuk Pemeriksaan Biologi Pada Permukaan Secara Langsung 64

2 Lampiran 2. Pengambilan Sampel 65

3 Lampiran 3. Lokasi Pengambilan Sampel No. Jenis Sampel Kode Sampel 1 Air Laut KA1 S: ,9 E: ,6 Koordinat ph Salinitas Suhu 7, C 2 Air Laut KA2 S: ,8 E: ,9 3 Sedimen Lempung KS1 S: ,4 E: ,4 4 Sedimen Pasir KS2 S: ,4 E: ,9 7, C 8, C 8, C 66

4 Lampiran 4. Komposisi Media Pertumbuhan Bakteri Media Komposisi Jumlah Referensi CaCO 3 5 gram NH 4 NO 3 2,5 gram Stone Mineral Salt Solution + Ekstrak Ragi (SMSSe) Na 2 HPO 4.7H 2 O KH 2 PO 4 MgSO 4.7H 2 O MnCl 2.7H 2 O 1 gram 0,5 gram 0,5 gram 0,2 gram (Sharpley 1966) Ekstrak ragi 0,01% (b/v) Akuades 1 liter CaCO 3 5 gram NH 4 NO 3 2,5 gram Na 2 HPO 4.7H 2 O 1 gram Stone Mineral Salt KH 2 PO 4 0,5 gram Solution + Ekstrak MgSO 4.7H 2 O 0,5 gram Ragi (SMSSe) padat MnCl 2.7H 2 O 0,2 gram Ekstrak ragi 0,01% (b/v) Bacto agar 15 gram Akuades 1 liter 67

5 Lampiran 5. Proses Isolasi Bakteri Menuangkan media Sampel Diencerkan sampai 10-7 dimasukkan ke dalam tabung reaksi Tabung 10-7 dan 10-6 disebar ke media menggunakan L-Glass Diinkubasi pada suhu 30 C 68

6 Lampiran 6. Prosedur Pewarnaan Gram Bakteri Prosedur pewarnaan gram, yaitu: 1. Biakan murni bakteri yang akan diidentifikasi, dioleskan pada objek gelas, difiksasi dengan 3x melewati api Bunsen 2. Olesan bakteri yang telah menempel / kering dan dingin, kemudian ditetesi dengan larutan karbol-gentian-violet, dibiarkan selama 5 menit 3. Zat warna berlebih kemudian dibuang dan dibilas dengan akuades 4. Selanjutnya olesan dibubuhi dengan larutan lugol, didiamkan selama kirakira 1-3 menit 5. Lugol dibuang dan preparat dicuci dengan alkohol 96%, sampai warna gentian violet lepas 6. Olesan dibubuhi dengan air fuchsin dibiarkan selama 1-2 menit 7. Terakhir olesan bakteri dicuci dengan akuades dan dikeringkan dalam temperatur kamar, kemudian dilakukan pengamatan dengan menggunakan mikroskop 8. Pengamatan di bawah mikroskop dilakukan dengan menambahkan 1 tetes minyak imersi di atas gelas objek untuk menghindari indeks bias pada saat pengamatan. 9. Pengamatan morfologi dan warna sel serta gram bakteri. Bakteri Gram positif berwarna ungusedangkan jika warna sel berwarna merah menandakan bakteri tersebut bakteri Gram negatif. 69

7 Lampiran 7. Hasil Pewarnaan Gram KS1 1.1 KS1 1.2 KS1 1.3 KS

8 71 KS1 1.5 KS1 1.6 KS1 1.7 KS1 1.8

9 72 KS1 1.9 KS KS KS1 1.12

10 73 KS KS KA1 1.1 KA1 1.2

11 74 KA1 1.3 KA2 1.1 KS2 1.1

12 Lampiran 8. Hasil Uji Emulsifikasi KS1 1.1 KS1 1.2 KS1 1.3 KS1 1.4 KS1 1.5 KS1 1.6 KS1 1.7 KS1 1.8 KS

13 76 KS KS KS KS KS 1.14 KA1 1.1 KA1 1.2 KA1 1.3 KA2 1.1

14 KS

15 Lampiran 9. Prosedur Pengukuran Bobot Minyak Mentah dengan Metode Gravimetri (SNI ) a) Contoh uji dipindahkan ke corong pisah. Menentukan volume contoh uji seluruhnya (berat contoh uji ditimbang). Bilas botol contoh uji dengan 30 ml kloroform dan tambahkan pelarut pencuci ke dalam corong pisah. b) Dikocokdengan kuat selama 2 menit. Biarkan lapisan memisah, keluarkan lapisan air. c) Lapisan pelarut dikeluarkan melalui corong yang telah dipasang kertas saring dan 10 g Na 2 SO 4 anhidrat, yang keduanya telah dicuci dengan pelarut, ke dalam labu bersih yang telah ditimbang. d) Jika tidak dapat diperoleh lapisan pelarut yang jernih (tembus pandang), dan terdapat emulsi lebih dari 5 ml, lapisan pelarutdisentrifugasi selama 5 menit pada putaran 2400 rpm. Bahan yang disentrifugasi dipindahkan ke corong pisah dan lapisan pelarut dikeringkan melalui corong dengan kertas saring dan 10 g Na 2 SO 4, yang keduanya telah dicuci sebelumnya, ke dalam labu bersih yang telah ditimbang. e) Lapisan air dan emulsi sisa atau padatan dalam corong pisah digabungkan. Ekstraksi 2 kali lagi dengan pelarut 30 ml tiap kalinya, sebelumnya dicuci dahulu wadah contoh uji dengan tiap bagian pelarut. f) Langkah pada butir e) diulangi lagi jika terdapat emulsi dalam tahap ekstraksi berikutnya. g) Ekstrak dalam labu destilasi yang telah ditimbang digabungkan, termasuk cucian terakhir dari saringan dan Na 2 SO 4 anhidrat dengan tambahan 10 ml sampai dengan 20 ml pelarut. h) Destilasi pelarut dalam penangas air pada suhu 85 C. Untuk memaksimalkan perolehan kembali pelarut dilakukan destilasi. i) Saat terlihat kondensasi pelarut berhenti, labu dari penangas air dipindahkan. Labu didinginkan dalam desikator selama 30 menit sampai labu kering dan timbang sampai diperoleh berat tetap. 78

16 Lampiran 10. Hasil Total Plate Count (TPC) Jam ke Isolat Jumlah Koloni Tiap Cawan Petri Jumlah Bakteri (CFU/ml) KS KS KA KS KS KA KS KS KA KS KS KA KS KS KA KS KS KA KS KS KA

17 Lampiran 11. Hasil Total Plate Count (TPC) Isolat KS1 1.6 Jam Jumlah Koloni Tiap Cawan Petri Jumlah Bakteri ke (CFU/ml)

18 Lampiran 12. Hasil Pengukuran Bobot Minyak Mentah dengan Metode Gravimetri No Kode Sampel Jam ke- Berat Botol (gram) Berat Botol + sampel kering (gram) Bobot Minyak (gram) 1 Tanpa isolat 119, ,1505 0, KS , ,505 0, KS , ,1203 0, KS , ,9827 0, KS , ,9709 0, KS , ,6867 0, KS , ,1992 0, KA , ,3513 0, KA , ,7075 0, KA , ,5841 0,

19 Lampiran 13. Perhitungan Kadar Total Petroleum Hydrocarbon (TPH) Keterangan: A = berat labu + ekstrak (mg) B = berat labu kosong (mg) 1. Kadar TPH Awal sebelum ditambahkan Bakteri Penghasil Biosurfaktan = 6294,67 mg/l 2. Kadar TPH dengan isolat KS1 1.6 setelah inkubasi 24 jam = 3474 mg/l 3. Kadar TPH dengan isolat KS1 1.6 setelah inkubasi 48 jam = 2901,33 mg/l 4. Kadar TPH dengan isolat KS1 1.6 setelah inkubasi 72 jam = 2474 mg/l 82

20 83 5. Kadar TPH dengan isolat KS setelah inkubasi 24 jam = 4760 mg/l 6. Kadar TPH dengan isolat KS setelah inkubasi 48 jam = 3962,67 mg/l 7. Kadar TPH dengan isolat KS setelah inkubasi 72 jam = 3375,33 mg/l 8. Kadar TPH dengan isolat KA1 1.1 setelah inkubasi 24 jam = 5651,33 mg/l 9. Kadar TPH dengan isolat KA1 1.1 setelah inkubasi 48 jam = 3982,67 mg/l

21 Kadar TPH dengan isolat KA1 1.1 setelah inkubasi 72 jam = 3458 mg/l

22 Lampiran 14. Perhitungan Persentase Biodegradasi Minyak Bumi Keterangan: % B = persentase biodegradasi BMo = bobot minyak bumi awal (g) BMn = bobot minyak bumi akhir (g) 1. Persentase biodegradasi minyak bumi dengan isolat KS1 1.6 setelah inkubasi 24 jam 2. Persentase biodegradasi minyak bumi dengan isolat KS1 1.6 setelah inkubasi 48 jam 3. Persentase biodegradasi minyak bumi dengan isolat KS1 1.6 setelah inkubasi 72 jam 85

23 86 4. Persentase biodegradasi minyak bumi dengan isolat KS setelah inkubasi 24 jam 5. Persentase biodegradasi minyak bumi dengan isolat KS setelah inkubasi 48 jam 6. Persentase biodegradasi minyak bumi dengan isolat KS setelah inkubasi 72 jam 7. Persentase biodegradasi minyak bumi dengan isolat KA1 1.1 setelah inkubasi 24 jam

24 87 8. Persentase biodegradasi minyak bumi dengan isolat KA1 1.1 setelah inkubasi 48 jam 9. Persentase biodegradasi minyak bumi dengan isolat KA1 1.1 setelah inkubasi 72 jam

25 Lampiran 15. Hasil Identifikasi Bakteri 88

26 RIWAYAT HIDUP Fika Andina dilahirkan di Bandung pada tanggal 6 Juli 1991 dari pasangan Enang Ridwansah dan Lastri Sulastri. Penulis adalah anak pertama dari dua bersaudara. Pada tahun 1996 Penulis menempuh pendidikan Taman Kanak- Kanak di TK Pravitasari Kota Bandung. Tahun 1997 melanjutkan pendidikan Sekolah Dasar di SDN Sukapura 2 Kota Bandung. Tahun 2003 melanjutkan pendidikan Sekolah Menengah Pertama di SMP Negeri 8 Kota Bandung. Setelah itu, melanjutkan pendidikan ke Sekolah Menegah Atas di SMA Negeri 24 Kota Bandung dan lulus pada tahun Pada tahun 2009 Penulis diterima sebagai Mahasiswi di Program Studi Ilmu Kelautan di Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Padjadjaran Jatinangor, melalui jalur SNMPTN (Seleksi Nasional Masuk Perguruan Tinggi Negeri). Selama kuliah penulis aktif dalam mengikuti ajang Program Kreativitas Mahasiswa (PKM) setiap tahun yang dimulai pada tahun PKM yang pernah diikuti yaitu PKM Penerapan Teknologi, PKM Kewirausahaan, dan PKM Penelitian. Selama kuliah, Penulis pernah menjadi Asisten Praktikum Mata Kuliah Mikrobiologi Laut tahun 2012, Pengantar Farmakologi Laut tahun 2012, dan Ekotoksikologi Perairan tahun Penulis juga aktif dalam kegiatan organisasi fakultas dan universitas, diantaranya adalah menjadi Staff Biro Ekonomi KewirausahaanFKDF (Forum Komunikasi Dakwah Islam Fakultas) UNPAD tahun 2010, Kepala Divisi Keputrian PERMADANI (Persaudaraan Mahasiswa dalam Nuansa Islami) tahun 2011, Kepala Divisi Syiar PERMADANI tahun 2012, Kepala Bidang Bioteknologi Divisi Keprofesian LK MAHAIKA (Lembaga Keprofesian Mahasiswa Ilmu Kelautan) tahun 2012, dan Staff Departemen PKM (Pengabdian Kepada Masyarakat) tahun Penulis juga terlibat dalam kepanitiaan PAB (Penerimaan Anggota Baru) Angkatan 2010, MABIM (Masa Bimbingan) Angkatan 2011 dan 2012 serta Pemilihan Umum Mahasiswa KEMA FPIK UNPAD. 89