Lampiran 1. Peremajaan Bakteri Bacillus mycoides

Transkripsi

1 Lampiran 1. Peremajaan Bakteri Bacillus mycoides Nutrien agar dan dilarutkan dengan aquades dan dipanaskan sampai homongen Sterilisasi suhu 121 selama 15 menit, dituang ke dalam tabung reaksi sebanyak 3 ml, dibiarkan padat pada posisi miring Setelah padat, media digores dengan 1 ose isolat Bacillus mycoides secara aseptis dengan metode gores secara zig-zag Media yang sudah berisi isolat bakteri kemudian diinkubasi dalam inkubator selama 24 jam pada suhu

2 Lampiran 2. Kurva Pertumbuhan diambil 1 ose isolat Bacillus mycoides kemudian diinokulasikan ke dalam tabung reaksi yang berisi media Nutrient Broth sebanyak 10 ml diinkubasi dalam waterbath shaker selama 24 jam pada suhu 37 kecepatan 120 rpm diambil 1 ml Bacillus mycoides kemudian diinokulasikan ke dalam 250 ml media Nutrient Broth steril dan diinkubasi dalam incubator pada suhu 37 selama 24 jam Kemudian dilakukan pembacaan OD setiap 2 jam pada panjang gelombang 660 nm dan dibuat kurva pertumbuhan 59

3 Lampiran 3. Fermentasi Onggok dengan Bacillus mycoides Onggok kering giling 1 kg dicampur air 1000 ml, dikukus selama 30 menit dan didinginkan pada suhu ruang Dicampur secara merata dengan 0,1% (v/w) medium (Pepton 10 g, Yeast extract 5 g, NaCl 10 g, (NH 4 ) 2 SO 4 2 g, K 2 HPO 4 3 g, KH 2 PO 4 2 g, MgSO 4.7H 2 O 0,5 g) dalam 1000 ml aquades. Satu ose Bacillus mycoides diinokulasikan ke dalam 10 ml media Nutrien Brorth Diinkubasi selama 24 jam dalam shaker inkubator 120 rpm pada suhu 37. Diambil 1 ml dan dimasukkan ke dalam 100 ml media Nutrien Brorth steril dan diinkubasi pada inkubator pada suhu 37 selama 10 jam Sebanyak 1%, 3% dan 5% inokulum cair dicampurkan secara merata dengan substrat onggok yang telah dicamour mineral dan dikukus serta didinginkan Dimasukkan ke dalam toples dan ditutup rapat untuk mendapatkan kondisi anaerob Diinkubasi dilakukan selama 2 hari, 5 hari dan 8 hari pada suhu 37. Dikeringkan menggunakan oven pada suhu selama 1 hari. Diambil sampel dan dimasukkan dalam freezer untuk keperluan analisis laboratorium. 60

4 Lampiran 4. Tabel data hasil analisa kadar serat kasar onggok setelah difermentasi Sampel Ulangan m krts m sampel m akhir Serat (%) Kontrol 1 1 1,144 2,013 1,346 10, ,145 2,008 1,343 9,861 Kontrol 2 1 1,146 2,011 1,355 10, ,145 2,009 1,352 10,304 Kontrol 3 1 1,144 2,01 1,349 10, ,144 2,008 1,351 10,309 1% 2 hari 1 1 1,145 2,004 1,341 9, ,146 2,016 1,338 9,524 1% 2 hari 2 1 1,145 2,003 1,334 9, ,144 2,007 1,333 9,417 1% 2 hari 3 1 1,144 2,017 1,337 9, ,144 2,004 1,334 9,481 3% 2 hari 1 1 1,146 2,012 1,325 8, ,145 2,005 1,327 9,077 3% 2 hari 2 1 1,143 2,006 1,322 8, ,146 2,016 1,324 8,829 3% 2 hari 3 1 1,145 2,009 1,321 8, ,144 2,012 1,318 8,648 5% 2 hari 1 1 1,145 2,004 1,308 8, ,145 2,008 1,306 8,018 5% 2 hari 2 1 1,146 2,013 1,301 7, ,145 2,002 1,299 7,692 5% 2 hari 3 1 1,145 2,007 1,297 7, ,143 2,019 1,298 7,677 1% 5 hari 1 1 1,146 2,003 1,342 9, ,145 2,012 1,338 9,592 1% 5 hari 2 1 1,144 2,006 1,336 9, ,145 2,007 1,338 9,616 1% 5 hari 3 1 1,146 2,012 1,332 9, ,145 2,004 1,335 9,481 3% 5 hari 1 1 1,145 2,018 1,311 8, ,145 2,004 1,309 8,184 3% 5 hari 2 1 1,146 2,006 1,303 7, ,145 2,011 1,305 7,956 61

5 Sampel Ulangan m krts m sampel m akhir Serat (%) 3% 5 hari 3 1 1,144 2,009 1,298 7, ,145 2,007 1,301 7,773 5% 5 hari 1 1 1,144 2,016 1,287 7, ,145 2,003 1,286 7,039 5% 5 hari 2 1 1,146 2,002 1,293 7, ,145 2,014 1,292 7,299 5% 5 hari 3 1 1,144 2,003 1,281 6, ,145 2,008 1,284 6,922 1% 8 hari 1 1 1,146 2,006 1,327 9, ,145 2,012 1,327 9,046 1% 8 hari 2 1 1,145 2,009 1,323 8, ,146 2,004 1,326 8,982 1% 8 hari 3 1 1,145 2,003 1,321 8, ,145 2,016 1,324 8,879 3% 8 hari 1 1 1,144 2,006 1,287 7, ,146 2,012 1,289 7,107 3% 8 hari 2 1 1,145 2,004 1,284 6, ,144 2,007 1,289 7,225 3% 8 hari 3 1 1,145 2,016 1,283 6, ,146 2,003 1,284 6,890 5% 8 hari 1 1 1,145 2,007 1,264 5, ,144 2,008 1,262 5,876 5% 8 hari 2 1 1,144 2,014 1,255 5, ,146 2,002 1,257 5,544 5% 8 hari 3 1 1,145 2,01 1,249 5, ,145 2,008 1,251 5,279 62

6 Lampiran 5. Tabel data hasil analisa kadar protein kasar onggok setelah difermentasi Sampel ulangan m smpl titrasi Protein (%) Kontrol 1 1 2,012 1,1 0, ,003 1,2 1,049 Kontrol 2 1 2,008 1,3 1, ,017 1,3 1,129 Kontrol 3 1 2,008 1,3 1, ,011 1,4 1,219 1% 2 hari 1 1 2,009 1,6 1, ,011 1,7 1,480 1% 2 hari 2 1 2,007 1,8 1, ,017 1,7 1,476 1% 2 hari 3 1 2,004 1,7 1, ,002 1,7 1,487 3% 2 hari 1 1 2,012 2,3 2, ,006 2,2 1,920 3% 2 hari 2 1 2,018 2,3 1, ,003 2,3 2,011 3% 2 hari 3 1 2,009 2,4 2, ,016 2,4 2,085 5% 2 hari 1 1 2,003 2,8 2, ,007 2,7 2,356 5% 2 hari 2 1 2,011 2,8 2, ,004 2,9 2,534 5% 2 hari 3 1 2, , ,003 2,9 2,535 1% 5 hari 1 1 2,009 2,6 2, ,003 2,7 2,360 1% 5 hari 2 1 2,017 2,9 2, ,004 2,8 2,447 1% 5 hari 3 1 2,009 2,9 2, ,007 2,9 2,530 3% 5 hari 1 1 2,004 5,8 5, ,012 5,7 4,961 3% 5 hari 2 1 2,005 5,9 5, ,018 5,8 5,033 63

7 Sampel ulangan m smpl titrasi Protein (%) 3% 5 hari 3 1 2,007 5,8 5, ,017 5,8 5,035 5% 5 hari 1 1 2,008 6,3 5, ,003 6,4 5,595 5% 5 hari 2 1 2,017 6,5 5, ,008 6,5 5,668 5% 5 hari 3 1 2,016 6,7 5, ,002 6,6 5,773 1% 8 hari 1 1 2,011 4,7 4, ,003 4,6 4,021 1% 8 hari 2 1 2,017 4,5 3, ,009 4,6 4,009 1% 8 hari 3 1 2,012 4,8 4, ,004 4,7 4,107 3% 8 hari 1 1 2,006 8,3 7, ,003 8,2 7,168 3% 8 hari 2 1 2,016 8,3 7, ,003 8,4 7,343 3% 8 hari 3 1 2,004 8,5 7, ,011 8,5 7,401 5% 8 hari 1 1 2,009 10,2 8, ,003 10,3 9,004 5% 8 hari 2 1 2,012 10,2 8, ,007 10,2 8,899 5% 8 hari 3 1 2,004 10,4 9, ,009 10,5 9,152 64

8 Lampiran 6. Data rata-rata kadar serat kasar onggok setelah difermentasi Perlakuan Jumlah inokulum (Bacillus mycoides) Lama fermentasi Kadar serat kasar onggok setelah fermentasi (%) Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ratarata 2 hari 9,780 9,436 9,569 9,595 1% 5 hari 9,785 9,616 9,481 9,627 8 hari 9,023 8,982 8,879 8,961 2 hari 8,897 8,829 8,761 8,829 3% 5 hari 8,184 7,956 7,773 7,971 8 hari 7,129 7,225 6,890 7,081 2 hari 8,018 7,700 7,677 7,798 5% 5 hari 7,093 7,343 6,922 7,119 8 hari 5,876 5,511 5,174 5,520 Kontrol (0%, 0 hari) 10,035 10,393 10,309 10,245 65

9 Lampiran 7. Data rata-rata kadar protein kasar onggok setelah difermentasi Perlakuan Jumlah inokulum (Bacillus mycoides) Lama fermentasi Kadar protein kasar setelah fermentasi (%) Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ratarata 2 hari 1,480 1,570 1,487 1,512 1% 5 hari 2,360 2,518 2,530 2,469 8 hari 4,092 4,009 4,177 4,092 2 hari 2,002 2,011 2,085 2,032 3% 5 hari 5,068 5,033 5,035 6,733 8 hari 7,245 7,343 7,401 7,329 2 hari 2,448 2,534 2,535 2,505 5% 5 hari 5,595 5,643 5,773 5,671 8 hari 9,004 8,899 9,152 9,018 Kontrol (0%, 0 hari) 1,049 1,129 1,134 1,104 66

10 Lampiran 8. Analisis Hasil Anava Ganda Kadar Serat Kasar Onggok a. Uji ANAVA terfermentasi Dependent Variable:data Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model a E3.000 inokulum Lama inokulum * lama Error Total a. R Squared = (Adjusted R Squared =.999) b. Uji DMRT Pengaruh Jumlah Inokulum terhadap Kadar Serat Kasar Onggok Setelah Fermentasi Duncan Inokul um N Subset Sig

11 c. Uji DMRT Pengaruh Lama Fermentasi terhadap Kadar Serat Kasar Onggok setelah fermentasi Duncan lama N Subset Sig d. Uji DMRT Interaksi Jumlah Inokulum dan Lama Fermentasi terhadap Kadar Serat Kasar Onggok setelah fermentasi Duncan interaksi N Subset Sig

12 Lampiran 9.Analisis Hasil Anava Ganda Kadar Protein Kasar Onggok a. Uji ANAVA setelah fermentasi Source Type III Sum of Squares df Mean Square F Sig. Model a E3.000 lama E3.000 inokulum E3.000 lama * inokulum Error Total a. R Squared =.999 (Adjusted R Squared =.999) b. Uji DMRT Pengaruh Jumlah Inokulum terhadap Kadar Protein Kasar Onggok setelah fermentasi Duncan Subset inokulum N Sig

13 c. Uji DMRTPengaruh Lama Fermentasi terhadap Kadar Protein Kasar Onggok setelah fermentasi Duncan lama N Subset Sig d. Uji DMRT Interaksi Jumlah Inokulum dan Lama Fermentasi terhadap Kadar Protein Kasar Onggok Setelah Fermentasi Duncan Interaksi N Subset Sig

14 Lampiran 10. Gambar Onggok Saat Fermentasi Onggok setelah inkubasi suhu 37 selama 2 hari ( inokulum 1%,3%,5%) Onggok setelah inkubasi suhu 37 selama 5 hari ( inokulum 1%,3%,5%) Onggok setelah inkubasi suhu 37 selama 8 hari ( inokulum 1%,3%,5%) 71

15 Lampiran 11. Onggok Hasil Fermentasi yang telah dioven dan digiling Kontrol (inokulum 0% ; lama fermentasi 0 hari) Inokulum 1% ; Lama fermentasi 2 hari Inokulum 1% ; Lama fermentasi 5 hari 72

16 Inokulum 3% ; Lama fermentasi 2 hari Inokulum 3% ; Lama fermentasi 5 hari Inokulum 3% ; Lama fermentasi 8 hari 73

17 Inokulum 5% ; Lama fermentasi 2 hari Inokulum 5% ; Lama fermentasi 5 hari Inokulum 5% ; Lama fermentasi 8 hari 74

18 Lampiran 12. Gambar Alat Penelitian Timbangan analitik Hotplate Shaker inkubator Inkubator 75

19 Autoklaf Laminar Air Flow Oven Lemari es 76

20 KEMENTERIAN AGAMA RI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI (UIN) MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI Jl. Gajayana No. 50 Dinoyo Malang (0341) Fax.(0341) BUKTI KONSULTASI SKRIPSI Nama : Mahmudah NIM : Fakultas/Jurusan : Sains dan Teknologi/Biologi Judul Skripsi : Pengaruh Jumlah Inokulum dan Lama Fermentasi oleh Bacillus mycoides Terhadap Kadar Serat Kasar dan Protein Kasar Onggok Pembimbing I : Dr. Hj. Ulfah Utami, M.Si Pembimbing II : Dr. H. Murnirul Abidin, M.A No Tanggal HAL TandaTangan Januari 2013 Konsul BAB I, II Februari 2013 Revisi BAB I, II Februari 2013 Konsul BAB I, II, III Februari 2013 Revisi BAB I, II, III Februari 2013 Revisi BAB I, III Maret 2013 Revisi BAB III Maret 2013 Revisi BAB III Maret 2013 ACC BAB I, II, III Juni 2013 Konsul BAB I, II, IV Agama Juni 2013 Konsul BAB IV Juni 2013 Revisi BAB I, II, IV Agama Juni 2013 Revisi BAB IV Juni 2013 Revisi BAB I, II, IV Agama Juli 2013 ACC Skripsi 14 Malang, 01 Juli 2013 Mengetahui, Ketua Jurusan Biologi Dr. H. Eko Budi Minarno, M.Pd NIP