Skripsi. Disusun Oleh: TATA LUGAS NASTITI M

Transkripsi

1 Skripsi SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6- TRIHIDROKSIFENIL) ETANON (DAPG) DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS, KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA Disusun Oleh: TATA LUGAS NASTITI M SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi sebagian persyaratan mendapatkan gelar Sarjana Sains dalam bidang ilmu kimia FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SEBELAS MARET SURAKARTA 2017

2 HALAMAN PENGESAHAN Skripsi SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL) ETANON (DAPG) DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS, KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA TATA LUGAS NASTITI M Skripsi ini dibimbing oleh : Pembimbing I Pembimbing II Dr. Triana Kusumaningsih, M.Si NIP Anif Nur Artanti, M. Sc., Apt. NIP Dipertahankan di depan Tim Penguji Skripsi pada: Hari : Kamis Tanggal : 29 Desember 2016 Anggota Tim Penguji : 1. Dr. Soerya Dewi Marliyana, M.Si 1 NIP Dr. Eddy Heraldy, M.Si 2 NIP Disahkan oleh Kepala Program Studi Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret Surakarta Dr. Triana Kusumaningsih, M.Si NIP ii

3 PERNYATAAN Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi saya yang berjudul SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL) ETANON (DAPG) DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS, KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA belum pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga belum pernah ditulis atau dipublikasikan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surakarta, 12 Januari 2017 TATA LUGAS NASTITI iii

4 SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL) ETANON (DAPG) DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANER SERVIKS, KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA TATA LUGAS NASTITI Program Studi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret ABSTRAK Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon (DAPG) merupakan senyawa turunan ploroglusinol telah berhasil disintesis dengan mereaksikan ploroglusinol dengan asam asetat anhidrid menggunakan katalis asam metasulfonat melalui reaksi esterifikasi dan penataan ulang Fries. Identifikasi senyawa tersebut dikarakterisasi dengan uji titik leleh, spektroskopi FT-IR, dan 1D NMR dan diperoleh rendemen sebesar 34%. Uji sitotoksisitas senyawa DAPG dilakukan pada seri konsentrasi 10; 15; 20; 25; 50; 75; 90; dan 100 µg/ml terhadap sel kanker HeLa, WiDr dan MCF7. Hasil uji sitotoksisitas menunjukkan DAPG hanya aktif terhadap sel HeLa dengan nilai IC 50 sebesar 50,1 µg/ml dan viabilitas sel sebesar 58,73%. Kata kunci: 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil)etanon (DAPG), IC 50, sitotoksisitas, sel HeLa, sel WiDr dan sel MCF7 iv

5 SYNTHESIS OF 1-(3-ACETYL-2,4,6-TRIHYDROXYPHENYL) ETHANONE (DAPG) COMPOUND AND ITS CYTOTOXICITY OF CERVIX CANCER, COLON CANCER AND BREAST CANCER CELLS TATA LUGAS NASTITI Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, University of Sebelas Maret ABSTRACT 1-(3-acetyl-2,4,6-trihydroxyphenyl) ethanone (DAPG) compounds had been successfully synthesized using commercially available phloroglucinol, acetate anhydride and methanesulfonic acid as a catalyst through esterification reaction and Fries rearrangement. The synthesized product, DAPG compound were characterized by FT-IR, NMR spectroscopy which were gave 34% yield. Cytotoxicity assay of DAPG compound had been measured in 10; 15; 20; 25; 50; 75; 90; dan 100 µg/ml of concentration against HeLa, WiDr and MCF7 cancer cells. DAPG compound had showed better bioactivity only on HeLa cancer cells with respectively gave 50,1 µg/ml of IC 50 values and 58,73% of its cell viabillity. Keywords: 1-(3-acetyl-2,4,6-trihydroxyphenyl) ethanone (DAPG), cytotoxicity, IC 50, HeLa, MCF7, and WiDr cancer cells. v

6 MOTTO Jadikanlah sabar dan shalat sebagai penolongmu. Dan sesungguhnya yang demikian itusungguh berat, kecuali bagi orang-orang yang khusyu. (Q.S. Al-Baqarah : 45) Karena sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Sesuangguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Maka apabila kamu telah selesai (dari suatu urusan), kerjakanlah dengan sungguh-sungguh (urusan) yang lain. Dan hanya kepada Tuhanmulah hendaknya kamu berharap. (Q.S. Al-Insyirah : 5-8) Never forget what you are. The rest of the world will not.wear it like armor and it can never be used to hurt you. (Tyrion Lannister, Game of Thrones) No one looks at the context, they only see the effect and believe it as a fact. (Kang Cheol, W-two worlds) It is not the strongest of the species that survive, nor the most intelligent, but the one most responsive to change. (Charles Darwin) It isnt what we say or think that defines us, but something what we do. (Jane Austin, Sense and Sensibility) vi

7 PERSEMBAHAN Karya kecil ini kupersembahkan untuk : Papa dan mama, yang selalu memberi dukungan doa, semangat, motivasi, cinta dan kasih sayang yang tiada henti Saudara-saudaraku, Taufiq Putra; Unggul Tan Ngasorake; dan Kamulan Indupati Pinasthika, yang turut memberi doa, kasih sayang serta candatawa yang mengisi hidupku Sahabat baikku, Luthfi Fadhila (Alm.), terima kasih atas dukungan baikmu selama ini yang tidak ada hentinya. vii

8 KATA PENGANTAR Puji syukur atas kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat, karunia, dan ijin-nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan skripsi ini. Sholawat dan salam senantiasa penulis haturkan kepada Rasulullah SAW sebagai pembimbing seluruh umat manusia. Penyusun bersyukur dan berterima kasih kepada semua pihak yang telah membantu hingga selesainya penyusunan skripsi ini: 1. Dr. Triana Kusumaningsih., selaku Kepala Program Studi Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret serta selaku Pembimbing I yang telah banyak memberikan penulis masukan ilmu dan bimbingan materi maupun moral selama penulisan. 2. Anif Nur Artanti, M.Sc., Apt., selaku Pembimbing II yang telah banyak memberikan penulis masukan ilmu dan bimbingan materi maupun moral selama penulisan. 3. Dr. Eddy Heraldy, M.Si., selaku Pembimbing Akademik 4. Muhammad Widyo Wartono, M.Si., yang telah banyak memberikan penulis masukan ilmu dan bimbingan materi maupun moral selama penulisan. 5. Rumbiwati, ST., M.Sc., selaku pembimbing dan teknisi Laboratorium Phroto bagian parasitologi, Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada yang telah banyak memberikan masukan ilmu dan bimbingan materi selama penelitian. 6. Orang tua dan keluarga yang selalu memberikan kasih sayang, cinta, semangat, dukungan, dan doanya. 7. Dyah Choiriyah sebagai teman bekerja selama di laboratorium yang telah banyak memberikan bantuan sehingga skripsi dan penelitian ini selesai tepat waktu. 8. Luthfi Fadhila (Alm.) sahabat penulis yang telah banyak memberikan dukungan dan masukan moral sehingga skripsi dan penelitian ini selesai tepat waktu. viii

9 9. Vaishnavita Nawakusuma, Dwita Nur Aisyah, Wendah Herawati, Patimah dan Euodia N. Maranatha, sahabat-sahabat penulis yang bersedia berbagi tawa dan haru serta memberikan dukungan moral sehingga skripsi dan penelitian ini selesai tepat waktu. 10. Ichsan, Zuhdi, Susanti, Gesti, Nais, Bagus, Taufik, Imroatu, Dheo, Muslim, Tika, Tari, Karin, Carissa, Prapti, Frillia, Ida, Natasya, dan Salsabila,teman-teman seperjuangan di Laboratorium Riset Kimia Organik dan Analit. Terima kasih atas semangat dan bantuannya dalamm penelitian ini. 11. Teman-teman dan semua pihak yang telah membantu hingga selesainya penyusunan dan penulisan skripsi ini. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih sangat jauh dari sempurna, untuk itu penulis selalu mengharap dan menerima kritik dan saran yang membangun agar lebih sempurnanya skripsi ini. Penulis juga berharap semoga penelitian ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan, khususnya di bidang ilmu Kimia. Surakarta, 10 Desember 2016 Penyusun ix

10 DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL... HALAMAN PERSETUJUAN... HALAMAN PERNYATAAN... HALAMAN ABSTRAK... HALAMAN ABSTRACT... HALAMAN MOTTO... HALAMAN PERSEMBAHAN... KATA PENGANTAR... DAFTAR ISI... DAFTAR GAMBAR... DAFTAR TABEL... DAFTAR LAMPIRAN... i ii iii iv v vi vii viii x xiii xiv xv BAB I PENDAHULUAN... 1 A. Latar Belakang... 1 B. Perumusan Masalah Identifikasi Masalah Batasan Masalah Rumusan Masalah... 5 C. Tujuan dan Manfaat Tujuan Penelitian Manfaat Penelitian... 6 BAB II LANDASAN TEORI... 7 A. Tinjauan Pustaka Ploroglusinol Asil Ploroglusinol... 8 a. Senyawa 1-(2,4,6-trihidroksifenil) etanon (MAPG)... 9 b. Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-tihidroksifenil) etanon (DAPG) x

11 3. Esterifikasi Penataan Ulang Fries Sel HeLa Sel WiDr Sel MCF Uji Sitotoksisitas Inhibition Concentration (IC 50 ) B. Kerangka Pemikiran C. Hipotesis BAB III METODOLOGI PENELITIAN A. Metodologi Penelitian B. Tempat dan Waktu Penelitian C. Alat dan Bahan D. Prosedur Penelitian Sintesis Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon (DAPG) Kultur Sel Uji Sitotoksitas a. Pembuatan Larutan Uji b. Uji Sitotoksisitas dengan MTT assay Teknik Pengumpulan dan Analisa Data a. Analisis Gugus Fungsional (FT-IR) b. Analisis Struktur Senyawa ( 1 H-NMR dan 13 C-NMR) c. Penetuan IC 50 Senyawa Produk Terhadap Sel Kanker BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Sintesis Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon. (DAPG) B. Karakterisasi Senyawa Hasil Reaksi Karateristik Fisik (Melting Point Apparatus) Analisis Gugus Fungsional (FT-IR) Analisis Struktur Senyawa ( 1 H-NMR dan 13 C-NMR) xi

12 C. Uji Sitotoksitas senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon (DAPG) Terhadap Sel Kanker BAB V PENUTUP A. Kesimpulan B. Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN xii

13 DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Senyawa Ploroglusinol yang mengalami tautomer... 7 Gambar 2. Senyawa Aspidinol-B hasil isolasi dari Dryopteris crassirhizoma... 8 Gambar 3. Senyawa MAPG (2) dan DAPG (3)... 9 Gambar 4. Mekanisme reaksi esterifikasi Gambar 5. Reaksi penataan ulang fenil asetat Gambar 6. Penampakan sel HeLa di bawah mikroskop Gambar 7. Penampakan sel WiDr dibawah mikroskop Gambar 8. Penampakan sel MCF7 dibawah mikroskop Gambar 9. Reaksi umum sintesis asil ploroglusinol; Senyawa MAPG (2) dan DAPG (3) Gambar 10 Reaksi umum sintesis asil ploroglusinol; Senyawa MAPG (2) dan DAPG (3) Gambar 11. Kemungkinan mekanisme reaksi pembentukan fenil ester (iii).. 27 Gambar 12. Kemungkinan mekanisme reaksi pembentukan MAPG (2) dan DAPG (3)... Gambar 13. Spektra FTIR: (a) senyawa ploroglusinol murni; dan (b) senyawa DAPG (3) Gambar 14. Spektrum 1 H-NMR senyawa DAPG (3) (CD 3 COCD 3, 400 MHz)... Gambar 15. Spektrum 13 C-NMR senyawa DAPG (3) (CD 3 COCD 3, 100 MHz)... Gambar 16. Grafik analisa probit dari sel HeLa Gambar 17. Grafik analisa probit dari sel WiDr Gambar 18. Grafik analisa probit dari sel MCF Gambar 19. Grafik analisa probit dari doxorubicin Gambar 20. Penampakan sel WiDr sebelum perlakuan sampel dibawah xiii

14 invented microscope Gambar 21. Penampakan sel MCF7 sebelum perlakuan sampel dibawah invented microscope xiv

15 DAFTAR TABEL Tabel 1. Perbandingan karakteristik fisik fraksi A (F A ) dan fraksi B (F B ) dengan senyawa muni ploroglusinol... Tabel 2. Perbandingan hasil spektra FT-IR senyawa DAPG (9) dengan senyawa murni ploroglusinol... Tabel 2. Perbandingan hasil spektra NMR senyawa DAPG (3) dengan data literatur xv

16 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Perhitungan mol bahan yang digunakan Lampiran 2. Perhitungan rendemen Lampiran 3. Spektra FT-IR senyawa ploroglusinol murni dan senyawa 1- (3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon Lampiran 4. Perhitungan seri konsentrasi pengenceran sampel Lampiran 5. Penampakan sel di bawah invented microscope Lampiran 6. Perhitungan persen viabilitas sel dan nilai IC Lampiran 7. Grafik analisis probit xvi