APLIKASI INSEMINASI SEMEN HASIL SEXING PADA SAPI INDUK PERANAKAN ONGOLE

Transkripsi

1 APLIKASI INSEMINASI SEMEN HASIL SEXING PADA SAPI INDUK PERANAKAN ONGOLE (The Aplication of Sexed Sperm on Ongole Grades Cow) DICKY PAMUNGKAS, L. AFFANDHY, D. B. WIJONO dan HARTATI Loka Penelitian Sapi Potong, Grati Pasuruan ABSTRACT Using centrifugation techniques with Albumin Column as separating media and egg-yolk-tris aminomethane as diluter, the sperm which had been separated their chromosomes was insemintated to 40 of PO female that owned by farmer at Wonorejo and Nguling, Pasuruan district. Twenty head were inseminated by straw which collected from lower fraction and another 20 were inseminated by straw from upper fraction. The method of semen disposition at female reproductive organ were divided into (1) 3-4 position (uterine), and (2) 4 + (cornua uterine). The parameters recorded were: sperm quality (volume, ph, progressive mass, individual motile, concentration, live/death percentage and abnormality), biological response of cow (Nonreturn rate/nrr days, service per conception and conception rate, CR), cost analysis of sexed sperm in strat, and farmer response. As of 11 times of semen collection, the volume of fresh semen was 5,56 ± 1,43 ml/eyakulat; ph 6,9 ± 0,20; mass progressive 3+; individual motile 71,36 ± 16,45%; sperm concentration 1651,27 ± 813,43 million/ml; live-persentage 79,42 ± 17,76%; death-sperm 12,27 ± 12,88 % and abnormality 7,47 ± 5,87%. The sexed sperm motility which had had cooled at 5 o C as long as 6 days in upper and lower were 45 and 35%, respectively. According to Average test, the NRR of 4+ position showed higher than those of 3-4 position either upper fraction (60 vs. 30%) or lower fraction (70 vs 50%). Meanwhile, the CR resulting from 4 + position (upper fraction) was higher than those of 3-4 positions as of 50 vs. 30%. Likewise in lower fraction, the CR (50%) of 4+ positon was higher than those on 3-4 position (30%). The budget of 50 sexed straws (based on 100 ml of Tris) was Rp or Rp 7.810/straw. Farmer response on sexed sperm by AI was good enough in which reflected in highly expecting on male. Key Words: Artificial Insemination, Straw of Sexed Sperm, PO Cattle ABSTRAK Tujuan penelitian ini adalah untuk mengaplikasikan semen hasil sexing pada sapi peranakan Ongole (PO). Menggunakan teknik sentrifugasi dengan medium pemisah gradien Albumin Column dan pengencer Tris aminomethane kuning telur, spermatozoa yang telah dipisahkan kromosomnya di-inseminasikan pada 40 ekor sapi PO betina milik peternak yang tersebar di Kecamatan Wonorejo dan Nguling Kabupaten Pasuruan. Sebanyak 20 ekor diinseminasi dengan straw yang berasal fraksi bawah dan 20 ekor lainnya dari fraksi atas; metode disposisi semen dalam organ reproduksi betina dibedakan atas (1) posisi 3-4 (uteri), dan (2) posisi 4 + (cornua uteri). Parameter yang diamati meliputi: kualitas spermatozoa (volume, ph, gerak massa progresif, motil individu, konsentrasi, persentase hidup/mati dan abnormalitas), respon biologik sapi akseptor (Nonreturn rate/nrr hari dan conception rate, CR), analisis biaya pembuatan straw hasil sexing, dan respon peternak. Hasil 11 kali koleksi semen didapatkan rataan volume semen segar 5,56 ± 1,43 ml/eyakulat; ph 6,9 ± 0,20; gerak massa 3 +; motil individu 71,36 ± 16,45%; konsentrasi spermatozoa 1651,27 ± 813,43 juta/ml; persentase hidup 79,42 ± 17,76; spermatozoa mati 12,27 ± 12,88% dan abnormal 7,47 ± 5,87%. Motilitas spematozoa straw hasil sexing yang didinginkan pada 5 o C sampai 6 hari menunjukkan pada fraksi atas dan bawah masing-masing sebesar 45 dan 35%. Berdasarkan uji beda rata-rata dinyatakan bahwa NRR pada posisi 4+ tampak lebih tinggi dibandingkan dengan posisi 3-4, baik pada fraksi atas (60 vs. 30%) maupun fraksi bawah (70 vs.50). Sementara itu, CR hasil disposisi semen pada posisi 4 + (fraksi atas) tampak lebih tinggi dibandingkan dengan posisi 3-4, yakni 50 vs. 30%. Demikian halnya pada fraksi bawah, CR (50%) pada posisi 4+ lebih tinggi dibandingkan dengan posisi 3-4 (30%). Hasil analisis perhitungan biaya pembuatan 50 straw hasil sexing (berdasarkan 100 ml pengencer Tris) adalah sebesar + Rp atau Rp 7.810/straw. Respon peternak terhadap aplikasi IB hasil sexing cukup baik; ditunjukkan tingginya minat terhadap pedet berkelamin jantan. Kata Kunci: Inseminasi Buatan, Straw Hasil Sexing, Sapi PO 71

2 PENDAHULUAN Usaha ternak sapi potong di Indonesia membutuhkan perhatian khusus dalam kaitannya dengan upaya mempertahankan dan menunjang peningkatan populasi; dimana teknologi tepat guna di bidang reproduksi dan pakan sudah seharusnya bisa diterapkan secara mudah dan efisien. Peningkatan efisiensi reproduksi dalam arti optimalisasi penggunaan inseminasi buatan (IB) diantaranya adalah mengupayakan setiap sapi induk mampu menghasilkan anak setiap tahun dengan jenis kelamin sesuai keinginan, yakni jantan ataupun betina. Di daerah yang cukup tinggi densitas ternaknya, teknologi IB cukup berhasil dan sudah diterima oleh peternak secara luas, karena aplikasinya murah dan cukup efektif dalam menunjang siklus reproduksi betina. Penggunaan IB dinilai bermanfaat untuk meningkatkan kinerja dan potensi ternak, mempermudah tes progeni dan meningkatkan jumlah keturunan dari pejantan yang telah terbukti mempunyai sifat-sifat unggul untuk tujuan produksi tertentu (HUNTER, 1995) Secara langsung maupun tidak, peternak ruminan besar ataupun kecil telah memikirkan masalah gender ternak nya, terkait dengan tipe usaha, yakni apakah ternak yang diusahakannya berkelamin jantan ataukah betina. Ternak jantan menjadi pilihan peternak untuk dipelihara mengingat kemampuan tumbuh dan berkembang sel-sel tubuhnya yang lebih cepat dibanding betina, sehingga sangatlah tepat apabila ternak jantan dibudidayakan untuk tujuan digemukkan (fattening); sedangkan ternak betina dipelihara karena kemampuannya untuk menghasilkan anak dan susu (cow-calf operation). Dalam konteks agribinis, petani peternak akan dihadapkan pada kegiatan mengelola sistem input, proses dan produksi serta sistem output secara efektif dan efisien; sehingga seleksi yang tepat terhadap ternak merupakan modal awal yang akan menentukan keberhasilan usaha. Nilai tambah IB dapat ditingkatkan apabila ditunjang oleh pengembangan bioteknologi di bidang reproduksi. Hal ini dapat berguna untuk mendapatkan pedet betina ataupun jantan sesuai dengan yang diharapkan. Jenis kelamin ditentukan oleh adanya kromosom X dan Y pada spermatozoa pejantan. Seleksi jenis kelamin dengan menggunakan albumen (putih telur) merupakan metode yang mudah diaplikasikan di lapang. Selain mudah pelaksanaannya juga bahannya mudah diperoleh dan murah harganya. Metode ini berdasarkan atas perbedaan motilitas (daya gerak) spermatozoa X dan Y yang disebabkan oleh perbedaan massa dan ukurannya. Ukuran spermatozoa Y lebih kecil dan bergerak lebih cepat sehingga mempunyai daya penetrasi yang lebih tinggi untuk memasuki suatu larutan. Spermatozoa Y akan bergerak ke bawah, sedangkan spermatozoa X relatif akan bertahan di lapisan bagian atas. Penggunaan putih telur cukup efektif untuk memisahkan spermatozoa X dan Y pada sapi, dengan proporsi spermatozoa Y pada lapisan bawah sebesar 75,8 ± 13%. Sementara itu, penggunaan pengencer tris aminomethan kuning telur lebih mampu mempertahankan kualitas spermatozoa dibandingkan dengan tris aminomethan tanpa kuning telur (SUSILAWATI, 2002) Hasil penelitian tahun 2003 telah ditentukan alternatif pemisahan kromosom X dan Y menggunakan medium pemisah yang efisien dengan menggunakan gradien putih telur pada imbangan tris buffer : semen = 1 : 0,5 dengan hasil motilitas lebih dari 40% (mampu bertahan hingga 6 hari pada suhu 5 o C), yakni pada fraksi atas menunjukkan motilitas 53,75% (PAMUNGKAS et al., 2003). SUSILAWATI (2001) melaporkan bahwa keberhasilan sexing dengan menggunakan gradien putih telur adalah pada proporsi pemisahan spermatozoa 75% dengan motilitas 55% dan setelah pembekuan sebesar 38% pada lapisan atas dan 40% pada lapisan bawah. Angka kebuntingan yang tinggi dapat ditentukan oleh kualitas spermatozoa dan pakan, kondisi organ reproduksi betina, ketepatan waktu inseminasi dan disposisi semen saat inseminasi. SUSILAWATI (2004) melaporkan bahwa disposisi semen sapi potong pada posisi 4+ menghasilkan kebuntingan yang tinggi. Akan tetapi hal tersebut perlu didukung oleh faktor pakan yang memadai dan ketepatan waktu inseminasinya. Disposisi mid cervical memberikan keberhasilan 15% lebih rendah dari inseminasi yang semennya diposisikan dalam korpus uterus (BEARDEN dan FUQUAY, 1989). Sementara itu, inseminasi recto-vaginal yang disposisi semennya di daerah cranial cervical (bagian servik paling depan) 72

3 memberikan hasil conception rate paling tinggi dibandingkan di daerah vagina dan cervix serta membutuhkan sedikit semen, yakni 0,25 ml untuk terjadinya fertilisasi. Selanjutnya dilaporkan bahwa sapi yang di-ib harus mempunyai tanda-tanda birahi yang jelas dan diinseminasi posisi IB 4 + dengan harapan anak yang dihasilkan adalah jantan; sedangkan maksud disposisi semen pada posisi 4 (menggunakan semen tanpa sexing) adalah untuk merencanakan anak yang dihasilkan adalah betina (SUSILAWATI, 2004). Lebih lanjut dilaporkan bahwa teknik deep insemination semen beku sexing dan non sexing menghasilkan kebuntingan yang tinggi, walaupun hasil evaluasi motilitas spermatozoa hanya sekitar 30-40%. Tujuan penelitian: (1) mengetahui keberhasilan kebuntingan sapi PO betina akseptor yang diinseminasi dengan sexed sperm hasil sentrifugasi menggunakan albumen column dan (2) mengetahui tingkat keberhasilan metode disposisi semen di dalam uterus terkait dengan upaya peningkatan fertilitas dan ketepatan jenis kelamin anak yang dihasilkan. MATERI DAN METODE Kegiatan penelitian diawali dengan proses pemisahan spermatozoa menggunakan sentrifugasi dengan medium pemisah gradien Albumin Column dan pengencer Tris aminomethane kuning telur dilakukan di laboratorium Reproduksi Lolit Sapi Potong. Selanjutnya setelah proses pendinginan, semen hasil sexing dikemas dalam straw yang siap untuk diinseminasikan. Tahapan pemisahan spermatozoa dan inseminasi (Gambar 1). Prosedur pelaksanaan penelitian Koleksi dan evaluasi semen 1. Penampungan semen segar di kandang percobaan. 2. Pemeriksaan semen segar (volume, konsentrasi sperma, warna, konsistensi, ph, motilitas massa, motilitas individu dan persentase hidup). 3. Evaluasi kualitas semen sesuai standar pembuatan straw (motilitas >70%, gerakan massa >++, sperma hidup >70%, konsentrasi sperma >500 (juta/ml). Proses pemisahan spermatozoa X dan Y 1. Dimasukkan 2 ml putih telur (30%) dalam pengencer Tris Aminomethane kuning telur ke dalam tabung reaksi. 2. Dimasukkan di atasnya 2 ml putih telur (10%) dalam pengencer Tris Aminomethane kuning telur. 3. Pengenceran semen segar dan Tris Aminomethane kuning telur (10%) 4. Dimasukkan semen yang telah diencerkan ke dalam tabung 2 lapisan yang berisi putih telur dan dibiarkan selama waktu inkubasi 20 menit pada suhu 5 o C. 5. Setiap tabung lapisan bagian atas diambil 2 ml, lapisan tengah dibuang 1 ml dan lapisan bawah diambil 2 ml. 6. Dimasukkan ke centrifuge dan diputar selama 5 menit dengan kecepatan 1500 rpm. 7. Supernatannya dibuang, diuji kualitasnya dan didentifikasi spermatozoa X dan Y 8. Penyimpanan hasil sexing dilakukan secara bertahap dengan mengatur suhu pada 33 o C ditambahkan larutan A, kemudian suhu diturunkan sampai 20 o C dan akhirnya sampai suhu 5 o C. Setelah 5 o C ditambahkan larutan B. 9. Dievaluasi kualitas spermatozoa Penginseminasian Straw yang mengandung sexed sperm diujicobakan pada 40 ekor sapi betina akseptor milik peternak yang tersebar di Kecamatan Nguling dan Kecamatan Wonorejo (Kabupaten Pasuruan). Sebanyak 20 ekor mendapat straw yang berasal dari semen fraksi atas dan 20 ekor 73

4 lainnya berasal dari semen fraksi bawah. 10 ekor masing-masing dibedakan teknik inseminasinya, yakni (A) Cara IB pada posisi 4+ (di tengah-tengah leher uterus) dan (B) Cara IB pada posisi 3-4. Sapi induk calon akseptor dipilih secara purposive random sampling yakni berdasarkan kriteria: (1) pernah beranak, (2) fungsi organ reproduksi normal, serta (3) sapi tersebut mendapatkan pakan yang mendekati seragam. Parameter Parameter yang diamati meliputi: kualitas spermatozoa (volume, ph, gerak massa progresif, motil individu, konsentrasi, persentase hidup/mati dan abnormalitas), respon biologik sapi akseptor (Non-return rate/nrr hari, service per conception, s/c dan conception rate, CR), analisis biaya pembuatan straw hasil sexing, dan respon peternak. Analisis data Data kualitas semen segar, semen hasil sexing, pembuatan straw hasil sexing dan respon peternak dianalisis secara deskriptif; sedangkan respon biologik sapi akseptor (NRR, S/C dan CR) di bedakan dengan uji beda rata-rata. HASIL DAN PEMBAHASAN Kualitas semen segar sapi PO Data kualitas semen segar sapi PO yang diobservasi di laboratorium Lolit Sapi Potong pada 11 kali penampungan tertera pada Tabel 1; sedangkan data rataan kualitas spermatozoa sapi PO dalam kondisi segar, pascasentrifugasi, pascaekuilibrasi dan setelah didinginkan pada 5 o C selama 6 hari (Tabel 2 dan 3) Koleksi dan Evaluasi semen Pengenceran semen segar dengan Tris-Buffer Fraksi atas Fraksi bawah Sentrifugasi Sentrifugasi Diencerkan 100 juta/ml Diencerkan 100 juta/ml 5 o C Simpan 5 o C Simpan 6 hari Inseminasi 6 hari Inseminasi Gambar 1. Tahapan pemisahan dan inseminas 74

5 Tabel 1. Pemeriksaan semen segar pejantan sapi PO Pengamatan Volume (ml) PH Gerak massa Motilitas Konsentrasi (juta/ml) Hidup Mati Abnormal 1 4,5 6, ,5 35,04 15,4 2 4,5 6, ,5 35,04 15, ,6 10, ,6 10, ,02 14,01 14, ,2 0,97 0,97 7 8, ,2 2,5 2,5 8 7, ,3 3,5 3, ,3 3,5 3,5 10 5, ,6 2,2 2, Rataan 5,564 6,909 71, ,27 79,420 12,269 7,475 SD 1,433 0,202 16, ,46 17,760 12,888 5,875 Kualitas semen segar pejantan sapi PO dalam 11 kali penampungan menunjukkan hasil yang cukup baik tertera pada Tabel 1; rataan volume semen mencapai 5,60 ± 1,43 ml/ejakulasi. Standar/patokan kualitas semen yang ditentukan oleh Lolit Sapi Potong adalah apabila dalam satu ejakulasi untuk dapat diproses lebih lanjut adalah dengan gerak massa minimal 2+; dimana ciri-ciri gerakan cepat seperti mendung yang berputar (PARTODIHARJO, 1992). Volume semen sapi PO sebagai materi penelitian ini adalah hampir sama dengan volume semen yang dihasilkan oleh sapi turunan Simmental, yaitu 5,8 ± 0,8 ml per ejakulasi, sebagaimana dilaporkan ANGGRAENY et al. (2004). Rataan volume semen sapi PO per ejakulasi dalam kondisi peternakan rakyat tampak lebih tinggi dibandingkan dengan hasil penelitian ini yakni mencapai 6,1 ± 0,2 ml (AFFANDHY et al., 2003). ph semen bervariasi 6,5-7 (rataan 6,9 ± 0,2), gerak massa bervariasi + hingga +++ (81,8% adalah +++). Konsentrasi per ml 1651± 813,46 juta, sedangkan motilitas dan sperma hidup masing-masing 71,36 ± 16,45% dan 79,42 ± 17,76%. Dengan demikian dapat dinyatakan bahwa rataan kualitas semen segar pejantan sapi PO yang digunakan sebagai materi percobaan adalah baik, karena berada di atas persyaratan minimal sebagai semen yang digunakan untuk persyaratan sexing. Untuk pembuatan semen beku (standard BIB Singosari), konsentrasi spermatozoa yang diperlukan adalah minimal 500 juta/ml per ejakulasi (HEDAH, 1992). Kualitas semen hasil sexing Setelah dilakukan proses pemisahan spermatozoa, dilakukan serangkaian observasi terhadap kualitas spermatozoa (motilitas, sperma hidup, sperma mati dan abnormalitas). Pada fraksi atas dimana terdapat dominasi keberadaan spermatozoa X terhadap spermatozoa Y tampak bahwa motilitas spermatozoa mengalami penurunan yaitu kondisi segar (71,36%), pascasentrifugasi (68,18%), pascaekuilibrasi (65,45%) hingga dikemas dalam straw dingin (45%). Hal ini seiring dengan penurunan kuantitas spermatozoa hidup, yakni menurun sebanyak 12,05% dari kondisi segar hingga dalam kondisi didinginkan 5 o C selama 6 hari. Data Tabel 2 juga menunjukkan bahwa terdapat penurunan persentase sperma hidup dari kondisi segar (79,42%) sampai pascasexing, yakni setelah cooling pada suhu 5 o C selama 6 hari (67,37%). 75

6 Tabel 2. Hasil observasi kualitas spermatozoa fraksi atas Kondisi semen Motilitas Sperma hidup Sperma mati Abnormalitas Segar 71,36 79,42 18,07 7,47 Pascasentrifugasi 1500 rpm 5 menit 68,18 74,40 16,33 8,81 Pascaekuilibrasi 3 jam 5 o C 65,45 73,63 15,07 10,32 Straw dingin pada 5 o C 6 hari 45,00 67,37 28,00 4,50 Tabel 3. Hasil observasi kualitas spermatozoa fraksi bawah Kondisi semen Motilitas Sperma hidup Sperma mati Abnormalitas Segar 71,36 79,42 18,07 7,47 Pasca sentrifugasi 1500 rpm, 5 menit 63,22 71,41 17,90 8,48 Pascaekuilibrasi 3 jam 5 o C 65,91 68,03 20,80 11,12 Straw dingin pada 5 o C 6 hari 35,00 61,14 46,00 6,00 Penurunan kualitas ini adalah cukup wajar, mengingat serangkaian proses yang mengkondisikan spermatozoa untuk diperlakukan sebagaimana prosedur pemisahan telah dilaksanakan. EINARSSON (1992) menyatakan bahwa proses cooling, freezing dan thawing sangat mempengaruhi stabilitas dan fungsi-fungsi hidup sel membran. Penurunan motilitas dari kondisi segar (sebelum proses) sampai kondisi didinginkan pada fraksi bawah tidak menunjukkan perbedaan dengan fraksi atas. Fraksi bawah adalah proporsi spermatozoa Y lebih banyak dibandingkan dengan spermatozoa X. Dalam Tabel 3 tampak bahwa motilitas spermatozoa Y pada pendinginan 5 o C selama 6 hari (35%) lebih rendah dibandingkan dengan motilitas spermatozoa X (fraksi atas) yakni 45%. Tabel 4. Keragaan hasil IB sexed sperm berdasarkan disposisi straw dalam uterus Asal semen Posisi 3 4 Posisi 4+ NRR CR NRR CR Fraksi Atas 30,0 30,0 60,0 50,0 Fraksi Bawah 50,0 30,0 70,0 50,0 NRR : Non return rate CR : Conception rate Respon biologik betina akseptor Non return rate (NRR) Merupakan alat deteksi kebuntingan berupa persentase jumlah betina yang tidak menunjukkan birahi kembali setelah di-ib dengan sexed sperm dalam observasi antara waktu hari setelah penginseminasian. NRR posisi 3-4 (30%) pada fraksi atas tampak lebih rendah dibandingkan dengan fraksi bawah (50,0%); sedangkan NRR posisi 4 + (70%) pada fraksi bawah tampak lebih tinggi dibanding fraksi atas (60%). NRR pada posisi 4+ tampak lebih tinggi dibanding posisi 3 4, baik pada fraksi atas (60 vs 30%) maupun fraksi bawah (70 vs 50%). Dengan demikian ada indikasi bahwa disposisi semen pada posisi 4+ meningkatkan NRR. Implikasi dari rendahnya nilai NRR adalah meningkatnya pengulangan penginseminasian, sehingga efisiensinya menurun. Terkait dengan deteksi kebuntingan pada sapi aksepor IB hasil sexing, SUSILAWATI (2004) melaporkan bahwa berdasarkan NRR pada 21, 41 dan 63 hari keberhasilan kebuntingan IB hasil sexing tampak lebih rendah dibandingkan IB dengan semen beku/kontrol. Conception rate Adalah satu tolok ukur keberhasilan IB yang ditunjukkan dengan angka kebuntingan dari induk akseptor. Angka CR ini diperoleh melalui pemeriksaan 76

7 kebuntingan pada usia 3-4 bulan (dengan palpasi rektal). Seperti halnya hasil NRR, inseminasi IB sexed sperm pada posisi 4+ (fraksi atas) tampak lebih tinggi dibandingkan dengan posisi 3-4, yakni 50 vs. 30%. Demikian halnya pada fraksi bawah, CR (50%) pada posisi 4+ lebih tinggi dibandingkan dengan posisi 3 4 (30%). Rendahnya CR dalam penelitian ini diduga dapat disebabkan oleh rendahnya motilitas spermatozoa pasca separasi dan teknik pengemasannya. Keberhasilan kebuntingan hasil IB sexing dengan filtrasi sephadex (menghasilkan 90% kebuntingan) antara lain disebabkan oleh persyaratan minimal motilitas spermatozoa telah terpenuhi, sebagaimana dilaporkan SUSILAWATI (2004). Respon peternak Berdasarkan hasil wawancara, sebagian besar (90%) responden (peternak pemelihara sapi induk, akseptor IB sexed sperm) menyatakan sangat antusias dengan uji coba inseminasi menggunakan straw yang sudah dipisahkan spermatozoanya. Akan tetapi 10% responden yang lain menyatakan keraguannya terhadap keberhasilan kebuntingan, mengingat pelaksanaan IB dengan straw beku (yang sekarang sedang berjalan) dirasakan kurang efektif akibat sering terjadinya kawin berulang. Respon lain terhadap kebutuhan/ permintaan oleh peternak (terkait penawaran straw jantan atau betina), bahwa hampir semua (94,34%) responden (n=53 orang) berminat terhadap straw yang mengandung permatozoa Y, yakni memperoleh turunan sapi yang berkelamin jantan. Beberapa alasan yang diajukan antara lain: (1) pertumbuhan cepat, (2) jika performan turunan sangat baik, maka akan tetap dipelihara sebagai pemacek, (3) harga jual pedet jantan lebih tinggi dibandingkan dengan betina (pasaran Jawa Timur dan Bali). Tabel 5. Perhitungan biaya pembuatan straw hasil sexing (berdasarkan 100 ml larutan pengencer Tris, setara dengan 50 straw) Items Harga bahan (Rp/kemasan) Kebutuhan bahan untuk 100 ml Tris-buffer Jumlah kebutuhan (unit) Harga/unit (Rp) Total harga (Rp) Tris amino methane /100 g 5 g Asam citrat /500 g 2 g Fructosa /250 g 2 g Antibiotik 20000/5 g 0,2 g Gliserol /liter 15 ml Sraw kosong /1000 bj 50 biji Telur 1000/butir 1 butir Aquadest 500 Semen segar 15 ml Tenaga kerja 4 orang Total biaya Lain-lain (listrik, air, dan lain-lain) 0,15 x Total harga 50934,75 Biaya per 50 straw ,75 Biaya per straw

8 Analisis biaya pembuatan straw hasil sexing (chilled semen) Hasil analisis biaya pembuatan straw hasil sexing tertera pada Tabel 5 yang berupa semen dingin (tanpa dibekukan) menunjukkan bahwa untuk membuat 50 straw adalah Rp ,75. (komponen biaya meliputi: bahan chemikalia, semen, straw, tenaga kerja, listrik dan air). Dengan demikian untuk membuat 1 (satu) straw dingin dengan sexed sperm dibutuhkan biaya Rp Biaya ini lebih tinggi apabila dibandingkan dengan biaya pembuatan semen dingin dengan bahan pengencer air kelapa, sebesar Rp. 2000/straw (AFFANDHY et al., 2003). Perbedaan ini terkait dengan komponen biaya pada komposisi chemikalia, jumlah semen, dan tenaga kerja (prosesing). KESIMPULAN Aplikasi semen hasil sexing pada sapi PO posisi 4+ memberikan hasil lebih baik dibandingkan dengan posisi 3 4 terhadap keberhasilan kebuntingan. Namun demikian, observasi masih dilanjutkan untuk memperoleh data kelahiran dan ketepatan jenis kelamin pedet. Respon peternak terhadap aplikasi IB hasil sexing cukup baik; ditunjukkan tingginya minat terhadap pedet berkelamin jantan. DAFTAR PUSTAKA AFFANDHY, L., D. PAMUNGKAS. A. RASYID dan P. SITUMORANG Uji fertilitas semen cair dan beku pada pejantan sapi potong lapang. Laporan Penelitian. Loka Penelitian Sapi Potong. ANGGRAENY, Y.N., L. AFFANDHY dan A. RASYID Efektifitas substitusi pengencer trissitrat dan kolesterol menggunakan air kelapa dan kuning telur terhadap kualitas semen beku sapi potong. Pros. Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner. Bogor, 4 5 Agustus Puslitbang Peternakan, Bogor. hlm BEARDEN, J.H. and J.W FUQUAY Applied animal reproduction. 2nd Ed. Reston Publish.Co.inc. A prentice Halls Company Virginia. pp EINARSSON S Concluding Remarks. In: Influence of Thawing Method on Motility, Plasma Membrane Integrity and Morphology of Frozen Stallion Spermatozoa. BOR, K., B. COLENBRANDER, A.FAZELLI, J. PALLEVLIET and L. MALMGREN (Eds.). Theriogenology Vl. 48 th pp HEDAH, D Peranan Balai Inseminasi Buatan Singosari dalam Meningkatkan Mutu Sapi Madura Melalui Inseminasi Buatan. Proc. Pertemuan Ilmiah Hasil Penelitian dan Pengembangan Sapi Madura. Sub Balitnak Grati. hlm HUNTER, R.H.F Physiology and Technology of Reproduction in Female Domestic Animal. Alih Bahasa oleh: PUTRA, D.K.H dan R.B. MATRAM. Fisiologi dan Teknologi Reproduksi Hewan Betina. Domestik. Penerbit ITB. Bandung. PAMUNGKAS, D., L.. AFFANDHY, A. RASYID, D.B. WIJONO dan T. SUSILOWATI teknologi pemisahaan spermatozoa X dan Y sapi potong skala laboratorium. Laporan Penelitian. Loka Penelitian Sapi Potong. PARTODIHARDJO S Ilmu Reproduksi Hewan. Cetakan ketiga. Fakultas Kedokteran Hewan. Institut Pertanian Bogor. Penerbit Mutiara Sumber Wijaya, Jakarta Pusat SUSILAWATI, T Optimalisasi Inseminasi Buatan dengan Semen Beku Hasil Pemisahan pada Sapi Bali Guna Memperoleh Jenis Kelami Anak Sesuai Harapan. esearch reported. Fakultas Peternakan. Universitas Brawijaya. Malang. SUSILAWATI, T Tingkat keberhasilan inseminasi buatan pada sapi Peranakan Ongole menggunakan hasil sexing dengan gradient konsentrasi putih telur. Fakultas Peternakan. Universitas Brawijaya. (Laporan). SUSILAWATI, T Keberhasilan IB menggunakan semen sexing setelah dibekukan. Pros. Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner. Puslitbang Peternakan. Bogor. hlm