SENYAWA TURUNAN STEROL ANTIJAMUR DARI KAYU AKAR MELOCHIA UMBELLATA (HOUTT) STAPF VARITAS DEGRABRATA K.

Transkripsi

1 SENYAWA TURUNAN STEROL ANTIJAMUR DARI KAYU AKAR MELOCHIA UMBELLATA (HOUTT) STAPF VARITAS DEGRABRATA K. AN ANTIFUNGAL STEROL DERIVATIVE FROM THE ROOT WOOD OF MELOCHIA UMBELLATA (HOUTT) STAPF VARIETAS DEGRABRATA K. Ahmad Ridhay a*, Alfian Noor b, Nunuk H. Soekamto b, dan Tjodi Harlim b a Jurusan Kimia FMIPA Universitas Tadulako, Kampus Bumi Tondo Palu. b Jurusan Kimia FMIPA Universitas Hasanuddin, Kampus Tamalanrea Makassar *Kontak: ahmadridhay@yahoo.co.id ABSTRAK Senyawa turunan sterol, stigmasterol, telah diisolasi dari fraksi nheksan kayu akar Melochia umbellata (Houtt) Stapf var. degrabrata K. Struktur Senyawa tersebut ditentukan berdasarkan data spektroskopi FTIR, 1 H dan 13 C NMR, HMBC, dan GCMS, serta perbandingan data sejenis yang telah dilaporkan. Uji antijamur menunjukkan senyawa tersebut aktif terhadap Aspergillus niger. Keyword: Melochia umbellata., Sterculiaceae, kayu akar, Stigmasterol, Aspergillus niger ABSTRACT A sterol derivative, stigmasterol, has been isolated from the nhexane fraction of root wood of Melochia umbellata (Houtt) Stapf var. degrabrata K. The compound structure was determined on spectroscopic evidences including FTIR, 1 H dan 13 C NMR, HMBC, GCMS and compared to previous data.the isolate was active against Aspergillus niger. Keywords: Melochia umbellata, sterculiaceae, root wood, stigmasterol, Aspergillus niger PENDAHULUAN Melochia umbellata (Houtt) Stapf var. degrabrata K. (Sterculiaceae) adalah salah satu tumbuhan tingkat tinggi yang telah lama digunakan oleh masyarakat Sulawesi

2 Selatan sebagai obat tradisional yang berkhasiat untuk mengobati beberapa penyakit antara lain: Hepatitis, liver, tekanan darah tinggi dan kolesterol tinggi (Heyne, 1987; dan Raflizar, et al., 2005). Pada publikasi sebelumnya telah dilaporkan isolasi dan penentuan struktur senyawa baru isoflavan dari kayu batang dan adanya senyawa stigmasterol terglikosida yang bersifat antijamur dari kayu akar tumbuhan ini (Erwin et al., 2010 ; dan Ridhay et al., 2012). Pada artikel ini akan dilaporkan isolasi dan penentuan struktur senyawa turunan sterol (stigmasterol) dari kayu akar tumbuhan tersebut berdasarkan data spektroskopi meliputi spektrum FTIR, 1 H dan 13 C NMR, HMBC dan GCMS serta hasil uji antifungal terhadap Malazesia furfureus, Candida albicans and Aspergillus niger. PERCOBAAN Bahan Tumbuhan Sampel kayu akar M. umbellata dikumpulkan pada bulan November 2009 dari kelurahan Panaikang Makassar Sulawesi Selatan. Determinasi tumbuhan dilaksanakan di Herbarium Bogoriense Bogor Umum Titik leleh ditentukan dengan menggunakan alat pengukuran titik leleh mikro (John Fisher) yang tidak terkoreksi. Spektrum FTIR diukur dengan Spektrometer Perkin Elmer. Spektrum NMR 1 H, 13 C dan HMBC diukur menggunakan Spektrometer JEOL JNM EX400 FTNMR yang bekerja pada 500 MHz ( 1 H) dan 125 MHz ( 13 C) menggunakan TMS sebagai standar. Spektrum GCMS diukur dengan QP2010S SHIMADZU Pengionan: EI. Kromatografi cair vakum (KCV) dilakukan menggunakan Si gel Merck 60 ( mesh), dan analisis kromatografi lapis tipis (KLT) pada pelat

3 alumunium berlapis Si gel Merck Kieselgel 60 F 254, 0,25 mm. Pelarut yang digunakan pada percobaan ini adalah berkualitas p.a dan teknis. Ekstraksi dan Isolasi Serbuk kering kayu akar M. umbellata (12 Kg) dimaserasi dengan metanol (3 X 24 Jam). Ekstrak metanol disaring, dikumpulkan kemudian dievaporasi menghasilkan padatan berwarna coklat gelap (1,2 Kg). Sebagian ekstrak (600 g) dipartisi caircair dengan nheksan menghasilkan 41 g ekstrak nheksan. Ekstrak tersebut difraksinasi dengan Kromatografi Cair Vakum menggunakan n heksan, n heksanetilasetat, aseton, dan metanol dengan kepolaran yang ditingkatkan menghasilkan 31 fraksi. Pada fraksi 21 terbentuk endapan kristal jarum berwarna putih kekuningan kemudian direkristalisasi dengan metanol panas beberapa kali sehingga diperoleh kristal serbuk berwarna putih (39 mg). Uji kemurnian dilakukan dengan penentuan titik leleh dan analisis KLT menggunakan tiga sistem eluen dengan nilai Rf yang berbedabeda. Senyawa 1 diperoleh berbentuk serbuk berwarna putih, titik leleh o C. Positif steroid dengan pereaksi LB. Spektrum IR (KBr) max cm 1 : 3425 (OH), 2940 dan 2870 (CH alifatik), 1658, 1604 (C=C), 1458 (CH 2 ), 1373 (CH 3 ), 1242, 1057 (CO), 964 (CCO) dan 833 (CH keluar bidang). EIMS (GCMS) M + (412) (C 29 H 48 O). 1 H NMR (CDCl 3, 500 MHz) δ (ppm); 13 C NMR (CDCl 3, 125 MHz) δ (ppm); dan HMBC: lihat Tabel 1. Uji Antifungal Tabel 2. Hasil Uji Antifugal Senyawa 1 Konsentrasi Senyawa Aspergillus niger Candida albicans Malazesia furfureus 1 (µg/ml)

4 Daya hambat isolat diuji terhadap pertumbuhan tiga jenis fungi yaitu: Candida albicans, Malazesia furfureus dan Aspergillus niger dengan metode difusi agar. Hasil uji tersebut menunjukkan bahwa senyawa isolat hanya aktif terhadap Aspergillus niger pada konsentrasi 50 µg/ml dengan luas zona penghambatan adalah 13,03 mm. Table 1. Data NMR Senyawa 1 (CDCl 3 ) C No δ H (jumlah H, multiplisitas, J δ C (ppm) HMBC ( 1 H => 13 C) =Hz) 1 1,86 (1H, m) & 1,09 (1H, m) 37,4 C5, C10, C3, C19 2 1,83 (1H, m) & 1,51 (1H, m) 31,9 C10, C3. C4 3 3,52 (1H, m) 72,0 4 2,29 (1H, m) & 2,23 (1H,m) 42,5 C5, C6, C2, C10, C ,9 6 5,35 (1H, br d, 3,9) 121,9 C4, C7, C10, C8 7 1,97 (1H, m) & 1,50 (1H, m) 32,1 C6, C5, C9, C14 8 1,45 (1H, m) 32,1 C9 9 0,92 (1H, m) 50,3 C19, C10, C11, C ,7 11 1,47 (2H, m) 21,3 12 2,02 (1H, m) & 1,19 (1H, m) 40,0 C9, C14, C ,4 14 1,00 (1H, m) 57,1 C7, C8 15 1,55 (1H, m) & 1,07 (1H, m) 24,6 C14, C ,71 (1H, m) & 1,28 (1H, m) 29,1 17 1,16 (1H, m) 56,1 C16, C13, C18, C22, C ,70 (3H, s) 12,2 C17, C14, C12, C ,01 (3H, s) 19,6 C10, C9, C1, C5 20 2,06 (1H, m) 40,7 21 1,03 (3H, d, 6,3) 21,4 C17, C20, C ,15 (1H, dd, 8,5 & 9,1) 138,5 C20, C 24, C21, C ,03 (1H, dd, 9,1 & 8,5) 129,5 C20, C24, C ,52 (1H, m) 51,4 C ,54 (1H, m) 32,1 C28, C ,85 (3H, d, 7,2 ) 21,3 C24, C25, C ,80 (3H, d, 7,5) 19,2 C24, C ,42 (1H, m) & 1,18 (1H, m) 25,6 C25, C ,82 (3H, t, 6,5) 12,4 C28

5 PEMBAHASAN Senyawa 1 diperoleh sebagai serbuk putih. Spektrum EIMS memperlihatkan M + pada m/z 412 yang sesuai dengan rumus molekul C 29 H 48 O dengan derajat ketidakjenuhan enam. Spektrum FTIR senyawa 1 memperlihatkan adanya serapan untuk gugus OH, CH ulur simetri dan asimetri, CH 3 dan CH 2 tekuk, ikatan rangkap C=C, dan CH 2 tekuk keluar bidang (Pateh et al., 2009). Spektrum 1 H NMR senyawa 1 (Tabel 1) menunjukkan ada dua metil tersier yaitu pada δ H 0,70 (Me18) dan 1,01 ppm (Me 19), tiga metil sekunder yaitu pada δ 1,03 (Me21), 0,85 (Me26) dan 0,80 (Me27), satu metil primer yaitu pada δ H 0,82 ppm (Me29), satu proton trisubstitusi olefinik yaitu pada δ H 5,35 ppm (H6), dua proton disubstitusi olefinik yaitu pada δ H 5,15 (H22) dan 5,02 ppm (H23) dan satu proton oksi karbon pada δ H 3,52 ppm (H3). Spektrum NMR 13 C senyawa 1 (Tabel 1) menunjukkan ada 29 atom karbon yang meliputi enam metil, sembilan metilen, sebelas metin dan tiga kuarterner. Resonansi olefinik pada δ C 121,9; 138,5; 129,5 dan 140,9 ppm adalah masingmasing menunjukkan sinyal untuk C6, C22, C23 dan C5. Hubungan ikatan dalam struktur dibuktikan melalui korelasi jarak jauh 1 H => 13 C dari spektrum HMBC (Tabel 1). Korelasi jarak jauh proton pada δ H 5,35 ppm (H6) dengan karbon metilen pada δ C 42,5 ppm (C4), karbon metilen pada 32,1 ppm (C7), karbon kuarterner pada 36,7 ppm (C10), dan karbon metin pada 32,1 ppm (C8) memperkuat bahwa C5 dan C6 sebagai ikatan olefinik pada cincin kedua struktur 1. Lebih lanjut, korelasi jarak jauh proton pada δ 5,15 (H22) dengan karbon metin pada 40,7 (C20), karbon metin pada 51,4 (C24), karbon metil pada 21,4 (C21), dan karbon metin olefinik pada 129,5 (C23) serta adanya korelasi jarak jauh proton pada δ 5,02 (H 23) dengan karbon metin pada δ 40,7 (C20), karbon metin pada 51,4 (C24), dan

6 karbon metin olefinik pada 138,5 (C22) memperkuat bahwa C22 dan C23 merupakan olefinik yang berposisi antara C20 dan C24 pada struktur 1. Berdasarkan data spektroskopi tersebut struktur 1 dapat dirumuskan. Perbandingan dengan data 1 H dan 13 C NMR senyawa stigmasterol standar yang telah dilaporkan adalah mirip sehingga juga mendukung struktur senyawa 1 (Forgo et al., 2004; dan Pateh et al., 2009). Uji Bioassay senyawa 1 terhadap 3 jenis fungi yaitu: Candida albicans, Malazesia furfureus dan Aspergillus niger menunjukkan bahwa senyawa 1 hanya aktif terhadap Aspergillus niger dengan diameter zona hambatan 13,03 mm pada konsentrasi 50 µg/ml. KESIMPULAN Senyawa 1, Stigmasterol (5,22stigmastadien3βol) telah diisolasi untuk pertamakalinya dari kayu akar M. umbellata (Houtt.) Stapf var. degrabrata K. Senyawa tersebut mampu menghambat pertumbuhan Aspergillus niger pada konsentrasi 50 µg/ml.

7 UCAPAN TERIMAKASIH Penelitian ini sebagian didukung oleh BPPS Dirjen Dikti Mendiknas RI. Terimakasih disampaikan kepada Pusat Penelitian Kimia LIPI Serpong yang telah menganalisis 1 H, 13 C NMR dan HMBC dari senyawa tersebut juga kepada Staf Herbarium Bogoriense Bogor LIPI yang telah mendeterminasi tumbuhan ini serta Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin untuk uji antifungal. DAFTAR PUSTAKA 1. Erwin, Noor, A., Soekamto, N. H., et al., 2010, 6,6 Dimethoxy4,4 Dihydroxy 3,2 FuranoIsoflavane, A New Compound From Melochia umbellata (Houtt) Stapf Var. Degrabrata K. (Paliasa), Indonesian Journal of Chemistry, 10, 2, Forgo, P., and Kover, K. E., 2004, Gradient Enhanced Selective Experiments in The 1 H NMR Chemical Shift Assignment of the Skeleton and Sidecain Resonances of Stigmasterol, A Phytosterol Derivative, Steroid, 69, Heyne, K., 1987, Tumbuhan Berguna Indonesia, Badan Litbang Kehutanan, Departemen Kehutanan, Jakarta, Pateh, U.U., Haruna, A.K., Garba, M., et al., 2009, Isolation of Stigmasterol, β sitosterol, and 2Hydroxyhexadecanoic Acid Methyl Ester From The Rhizomes of Stylochiton Lancifolius Pyer and Kotchy (Araceae), Nigerian Journal of Pharmaceutical Sciences, 7, 1, Raflizar, Adimunca, C., dan Tuminah, S., 2006, Cermin Dunia Kedokteran, 50, Ridhay, A., Noor, A., Soekamto, N. H., et al., 2012, A Stigmasterol Glycoside from the Root Wood of Melochia umbellata (Houtt) stapf var. degrabrata K., Indonesian Journal of Chemistry,12, 1,