PRODUKSI DAN MUTU SIMPLISIA PURWOCENG BERDASARKAN LINGKUNGAN TUMBUH DAN UMUR TANAMAN

Transkripsi

1 PRODUKSI DAN MUTU SIMPLISIA PURWOCENG BERDASARKAN LINGKUNGAN TUMBUH DAN UMUR TANAMAN (Production and Quality of Purwoceng in Different Locations and Plant Ages) Mono Rahardjo 1), I. Darwati 1) dan A. Shusena 2) 1) Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat 2) PT. Gujati 59 Utama Abstract Purwoceng (Pimpinella pruatjan Molkenb) commonly used as aphrodisiac, and indigenous to, is now classified as endangered commodity. However it has potential to adapt to other locations (ex situ). This experiment aiming at studying the effect of locations and plant ages on quantity and quality of production was conducted in, Wonosobo, Central Java (in situ) and, Cipanas, West Java (ex situ), during 2004 and Plant ages were applied at 3, 6 and 9 months. Ten plants were sampled from each 200 m 2 crops. The results showed that total production of dry matters of simplisia at 3, 6 and 9 months in were 15.30, and g/10 plants respectively higher than the dry matters of simplisia in at similar ages. Simplisia production at 3 months was rather low (39.40 g), then increased 2.58 times after 6 months and 3.91 times after 9 months in. Sitosterol content was found only on plant root in. Stigma sterol was found on shoot and root, however vitamin E was found only on shoot at 3, 6 and 9 months of harvesting, both in and. Bergapten and vitamin E in shoot, vitamin E in root was higher in than in. Production and quality of simplisia were higher in than production and quality of simplisia in. Keyword: Pimpinella pruatjan Molkenb, plant location, plant age, production and quality Naskah diterima tanggal 2 Desember 2005, disetujui tanggal 11 Desember 2006 Alamat koresponden: Jl. Ir. H. Juanda No. 22, Bogor, PENDAHULUAN Purwoceng (Pimpinella pruatjan Molkenb) sebagai obat untuk meningkatkan vitalitas pria, secara empiris turun temurun sudah diketahui. Herba purwoceng banyak dimanfaatkan kususnya di daerah Wonosobo, bahkan telah menyebar ke banyak daerah (1). Secara ilmiah khasiat purwoceng sebagai afrodisiak sedang diteliti. Hasil penelitian Taufiqurrachman dan Wibowo (2) menunjukkan bahwa ekstrak purwoceng cenderung dapat meningkatkan testosteron hewan percobaan tikus jantan. Hasil penelitian ini merupakan petunjuk awal secara ilmiah bahwa purwoceng berfungsi sebagai afrodisiak. Terdapat kecenderungan peningkatan penggunaan obat afrodisiak di dunia termasuk di Indonesia. Fenomena ini berdampak terhadap besarnya minat industri obat tradisional untuk membuat produk jamu berbahan baku purwoceng, sehingga nilai jual simplisianya meningkat. Harga herba segar simplisia purwoceng mencapai Rp /kg (3). Berdasarkan kajian analisis usahatani purwoceng, dalam satu kali masa tanam selama tahun diperoleh keuntungan sebesar Rp /ha dengan modal usaha Rp (1). Purwoceng, tanaman obat asli Indonesia tumbuh subur pada tempat berketinggian m dpl (di atas permukaan laut) (4). Sebelum dibudidayakan tanaman purwoceng yang merupakan tanaman liar, tumbuh di bawah tegakan hutan Pegunungan. Tanaman ini sudah termasuk kategori langka, sekarang hanya dijumpai di Pegunungan dalam koleksi kecil-kecilan oleh petani pemerhati purwoceng (3). Perkembangan usaha industri obat tradisional yang meningkat dan nilai jual herba yang sangat tinggi ikut menjadi pemicu penambangan purwoceng secara besar-besaran. Penambangan herba tanpa diikuti budidaya menyebabkan purwoceng makin langka dan membahayakan masa depan tanaman ini. Usaha pertanian secara intensif di Pegunungan dan sekitarnya, menjadi salah satu faktor tergesernya komoditas purwoceng oleh komoditas sayuran terutama kentang yang dapat dipenen tiga kali dalam setahun. Untuk mengurangi

2 Jurnal Bahan Alam Indonesia ISSN Vol. 5, No. 1, Januari 2006 pengaruh kompetisi dengan tanaman kentang di habitat asli purwoceng, maka dilakukan penelitian pengembangannya di luar habitat asli. Pada umumnya, produktivitas purwoceng dipengaruhi oleh lingkungan tumbuh dan umur panen tanaman. Semakin panjang umur tanaman semakin tinggi produksi herba yang dapat dipanen. Hasil penelitian terhadap pengaruh umur tanaman menjelaskan, bahwa kadar metabolit sekunder meningkat pada fase generatif tanaman obat penghasil herba, juga tergantung pada genera, species, atau strain tanaman (5). Selain itu mungkinkah waktru panen purwoceng dapat dipercepat, agar petani lebih cepat memetik hasil. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh lingkungan tumbuh dan umur panen terhadap produktivitas dan mutu herba purwoceng. Informasi ini menjadi petunjuk untuk pengembangan purwoceng di luar habitatnya. METODE Penelitian ini dilaksanakan pada tahun di dataran tinggi (1.990 m dpl) dan di dataran tinggi (1.540 m dpl). Gunung Putri dikategorikan sebagai luar habitat asli (ex situ). Kondisi agro-ekologi dan kesuburan tanah lokasi penelitian dicatumkan pada Tabel 1. Perlakuan penelitian ini meliputi dua lingkungan tumbuh dan tiga umur panen. Dua lingkungan tumbuh tersebut adalah: (1) Dataran tinggi dan (2) Gunung Putri, sedangkan tiga perlakuan umur panen adalah umur: (a) 3 bulan, (b) 6 bulan dan (c) 9 bulan. Penelitian menggunakan jarak tanam 40 x 30 cm pada lahan seluas 200 m 2 di masing-masing lokasi. Dosis pupuk yang diberikan adalah 20 t pupuk kandang/ha, 400 kg urea/ha, 200 kg SP36/ha dan 300 kg KCl/ha. Penanaman dilakukan pada tanggal 25 Agustus Pemeliharaan tanaman meliputi penyiraman di musim kemarau dan penyiangan percobaan tiap dua bulan selama pertumbuhan. Selama penelitian tidak dialami gangguan hama dan penyakit, sehingga pengendaliannya baik dengan pestisida maupun cara lain tidak dilakukan. Tanaman dinaungi dengan paranet dengan tingkat naungan 25%. Kegiatan ini merupakan suatu kegiatan observasi dengan cara pengambilan contoh tanaman (spesimen) secara acak pada waktu panen di satu hamparan pertanaman purwoceng. Pengambilan contoh tanaman di ke dua lokasi dilakukan pada umur 3, 6 dan 9 bulan, masing-masing berjumlah 10 tanaman. Contoh tanaman pada umur panen 12 bulan tidak diambil, karena tanaman telah masak penuh dan mengalami senesen pada umur 10 bulan. Tabel 1. Karakteristik agro-ekologi dan sifat fisik dan kimia tanah lokasi penelitian di dan. Uraian Tinggi tempat (m dpl) Suhu udara C 15,5-25,8 0 C Kelembaban udara 60 75% 60-95% Curah hujan > mm > mm Fraksi pasir (%) 17,19 67,07 Fraksi debu (%) 62, Fraksi liat (%) 20,36 9,62 ph H 2 O 5,65 5,41 ph KCl 5,12 5,04 C organik 6,26 3,77 N total (%) 0,35 0,27 C/N ratio 17,89 13,96 P tersedia (ppm) 7,09 1,31 S (ppm) 24,70 20,11 Basa dd (me/100g) : Ca 7,89 6,43 Mg 1,16 0,71 K 1,08 0,35 Na 0,31 0,23 KTK 25,20 17,00 Parameter yang diamati meliputi komponen pertumbuhan seperti: bobot segar dan bobot kering bagian tajuk (batang + daun + bunga/biji) dan akar serta mutu simplisia sepert: kadar air, kadar abu, 311

3 kadar sari larut alkohol dan larut air, serta komponen steroid terdiri atas: sitosterol, stigma sterol, (stigmasta-7, 16 dien-3-ol), dan (stigmasta-7, 25 dien- 3-ol), komponen atsiri terdiri atas: germacrene, β- besabolene, β-caryophylline, α-humulene, dan carvacrol, turunan furanokumarin terdiri atas: bergapten dan xanthotoxin. Contoh tanaman diambil dengan cangkul sedemikian sehingga tidak terjadi kerusakan akar atau ada yang tertinggal. Hasil panen tersebut dicuci bersih dengan air mengalir, kemudian dikeringanginkan. Setelah dipisah diadakan penimbangan terhadap akar dan tajuk untuk mengetahui bobot segar ke dua bagian itu. Masing-masing bagian dipotong-potong dengan ukuran lebih kurang 0,5 cm, masing-masing dikeringkan di dalam oven pada suhu 50 o C selama 96 jam. Setelah simplisia purwoceng mencapai kering mutlak ditimbang untuk memperoleh bobot keringnya. Analisis komponen kimia diamati dengan menggunakan alat GSMS. HASIL DAN PEMBAHASAN Produksi Simplisia Produksi simplisia purwoceng berupa biomas segar dan kering di habitat asli () lebih tinggi dari pada produksi tanaman di luarnya (). produksi simplisia (tajuk dan akar) segar pada umur panen 3, 6 dan 9 bulan berturut-turut 141,25 g, 756,70 g dan 996,05 g/10 tanaman di dan 136,78 g, 211,25 g dan 400,15 g/10 tanaman di, menunjukkan perbedaan rata-rata yang tinggi, yaitu 4,47 g (3,26%), 545,45 g (258,20%) dan 595,90 g (148,91%) berturutturut untuk umur 3, 6 dan 9 bulan (Tabel 2). Gambaran serupa juga terjadi untuk bobot kering siplisia tajuk dan akar pada umur panen 3, 6 dan 9 bulan, yaitu berturut-turut 39,40 g, 101,80 g dan 154,00 g/10 tanaman di dan 24,10 g, 33,25 g dan 58,75 g/10 tanaman di (Tabel 3), menunjukkan perbedaan rata-rata yang tinggi, yaitu 15,30 g (63,48%), 68,55 g (206,16%) dan 95,25 g (162,12%) berturut-turut untuk umur 3, 6 dan 9 bulan. Rendahnya produksi simplisia di Gunung Putri pada umur panen 3, 6 dan 9 bulan diduga selain dipengaruhi oleh kondisi tempat seperti elevasi (lebih rendah), suhu udara (lebih tinggi), kelembaban udara (lebih tinggi) dan kesuburan tanah (lebih rendah) (Table 1) yang kurang menguntungkan bagi pertumbuhan purwoceng. Kecenderungan ini sejalan dengan pernyataan Santoso et al. (6) dan Karama et al. (7). Rendahnya tingkat kesuburan tanah di dibandingkan dengan tanah dicirikan oleh fraksi pasir yang lebih tinggi, C- organik yang lebih rendah dan kandungan N, P, K, Ca dan Mg di dalam tanah yang lebih rendah (Tabel 1). Penampilan tanaman purwoceng di kurang subur, sehingga hasil biomas di lebih rendah dibandingkan dengan hasil biomas tanaman di. Produktivitas purwoceng di masih berpeluang ditingkatkan dengan penambahan dosis pupuk baik organik maupun anorganik. Karena berdasarkan hasil pengamatan secara visual, ada beberapa tanaman purwoceng yang pertumbuhannya lebih subur pada tanah yang tingkat kesuburanya lebih tinggi. Tabel 2. Bobot segar biomas purwoceng menurut umur dan bagian tanaman. Umur tanaman (bulan) 3 103,15 38,10 141,25 108,24 28,54 136, ,65 72,05 756,70 161,20 50,05 211, ,80 80,25 996,05 327,00 73,15 400,15 Sebagian besar biomas purwoceng terdapat di tajuk yaitu sekitar 80 98%, sisanya di akar. Beberapa pemerhati purwoceng berpendapat (komunikasi pribadi), bahwa yang mempunyai khasiat afrodisiak adalah akarnya saja. Namun hasil penelitian Taufiqurrachman dan Wibowo (2) dan Rahardjo et al. (13), semua bagian tanaman termasuk tajuk (batang + daun + bunga/buah) juga mengandung bahan berkhasiat afrodisiak dan cenderung dapat 312 meningkatkan testosteron hewan percobaan tukus jantan. Berdasarkan hasil wawancara dengan petani purwoceng, biasanya purwoceng dipanen pada umur 9 12 bulan, bahkan ada yang pada umur di atas satu tahun, namun pada saat-saat petani sangat memerlukan uang, petani juga memanen tanamannya pada umur 6 bulan. Hasil penelitian ini menunjukkan tanaman telah mencapai masak maksimal pada umur

4 Jurnal Bahan Alam Indonesia ISSN Vol. 5, No. 1, Januari bulan di kedua tempat, pada umur ini bijinya sudah masak dan daunnya mulai rontok (senesen). Apabila tanaman tidak dipanen pada saat ini, akan mengalami stagnasi pertumbuhan dan kemudian bersemi kembali dan tumbuh di tahun berikutnya. Tabel 3. Bobot kering biomas purwoceng menurut umur dan bagian tanaman. Umur tanaman (bulan) 3 30,50 8,90 39,40 19,22 4,88 24, ,90 10,90 101,80 27,60 5,65 33, ,75 13,25 154,00 48,75 10,00 58,75 Tabel 4. Kadar air, kadar sari larut air dan larut alkohol, serta kadar abu simplisia (tajuk + akar) purwoceng. Kandungan kimia Kadar air (%) 9,41 9,28 8,80 9,52 9,40 9,25 Kadar sari larut alkohol (%) 4,42 4,02 4,24 4,30 4,35 4,28 Kadar sari larut air (%) 32,42 26,55 42,25 30,25 31,05 39,45 Kadar abu (%) 11,98 12,6 10,29 11,40 10,90 10,25 Semakin panjang umur tanaman semakin tinggi hasil biomas, seperti yang diperlihatkan oleh pertanaman di dan di. Tanaman yang dipanen pada fase vegetatif (umur 3 bulan), hasil biomas kering masih sangat sedikit, kemudian menjadi 2,58 kali pada umur 6 bulan dan 3,91 kali pada tanaman berumur 9 bulan di (Tabel 3). Sedangkan hasil biomas kering di umur panen 3 bulan baru mencapai 24,10 g/10 tanaman, menjadi 1,38 kali pada umur panen 6 bulan dan 2,44 kali pada umur 9 bulan. Tanaman purwoceng umur 6 bulan sudah mulai berbunga baik yang di maupun di. Pada umumnya tanaman obat mulai dapat dipanen pada saat tanaman sudah mulai berbunga, diasumsikan metabolit sekunder sudah terbentuk secara optimal di dalam jaringan tanaman. Mutu Simplisia Secara empiris dan turun temurun dari nenek moyang kita hingga saat ini, purwoceng telah dan terus dimanfaatkan sebagai obat kuat pria. Namun belum banyak hasil penelitian yang merinci komponen kimia apa saja yang terkandung di dalam simplisia purwoceng, sehingga berfungsi sebagai afrodisiak. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kadar abu, kadar sari larut alkohol dan air tidak banyak dipengaruhi baik oleh lingkungan tumbuh maupun umur tanaman (Tabel 4). Berdasarkan hasilhasil penelitian terahulu, bahwa kadar abu, kadar sari larut alkohol dan sari larut air lebih banyak dipengaruhi oleh proses pasca panen. Porwoceng sebagai afrodisiak mengandung metabolit sekunder berupa komponen kimia kelompok steroid, atsiri, furanokumarin dan vitamin, yang terdapat baik di jaringan tajuk maupun di akar. Namun jumlah komponen kimia di jaringan tajuk lebih banyak jenisnya dari pada di akar, hal ini disebabkan proses pembentukan (sintesis) metabolit sekunder terdapat di jaringan tajuk terutama di daun, termasuk steroid diproduksi pada bagian sitosol dan plastid di dalam sel (8). Kelompok steroid terdiri atas: sitosterol, stigma sterol, (stigmasta-7, 16 dien-3-ol), dan (stigmasta-7, 25 dien-3-ol). Sitosterol hanya ditemukan pada akar tanaman purwoceng umur 3 dan 6 bulan yang ditanam di (Tabel 5), tetapi tidak ditemukan pada umur 9 bulan. Hal ini disebabkan sitosterol dapat dikonversi ke dalam bentuk komponen steroid lainnya dan ratio sitosterol dengan stigma sterol dapat berubah pada kondisi tanaman senesen (9). Disamping itu, sitosterol di dalam jaringan tanaman berfungsi sebagai permeabilitas 313

5 membran sel (10), sehingga sitosterol pada tanaman lebih banyak diproduksi pada fase vegetatif. Stigma sterol ditemukan pada tajuk dan akar dari tanaman berumur 3, 6 dan 9 bulan baik di maupun di, dengan kadar lebih tinggi di. Stigmasta-7, 16 dien-3-ol ditemukan pada tanaman berumur 3 dan 6 bulan di dan di pada tanaman berumur 3, 6 dan 9 bulan. Stigmasta-7, 25 dien-3-ol ditemukan hanya pada tanaman purwoceng umur 9 bulan di. Tabel 5. Kandungan komponen kimia tajuk purwoceng pada tiga tingkat umur di dan. Kandungan kimia Komponen steroid: 1. Stigmasterol (ppm) 0,048 0,036 0,064 0,053 0,045 0, Stigmasta-7, 16 dien-3-ol ada ada - ada ada ada 3. Stigmasta-7, 25 dien-3-ol - - ada Komponen atsiri: 1. Germacrene ada ada - ada ada - 2. β-besabolene ada ada - ada ada ada 3. β-caryophylline - - ada ada ada ada 4. α-humulene - - ada - - ada 5. Carvacrol - - ada ada - - Turanan Furanokumarin: 1. Bergapten (ppm) - - 5,19 1,94 3,20 3,18 2. Xanthotoxin ada Vitamin E (ppm) 0,084 0,111 0,053 0,066 0,048 0,054 Keterangan: - : tidak terdeteksi Kadar stegma sterol di tajuk tidak berbeda antara purwoceng di dan di, namun kadar stegma sterol akar purwoceng di lebih tinggi dari pada di (Tabel 4). Sintesis metabolit sekunder termasuk steroid dipengaruhi oleh proses metabolisme primer (5,11) tanaman yang lebih subur akan mengasilkan metabolit sekunder lebih banyak, karena produk metabolit primernya tinggi. Oleh karena itu purwoceng di lebih tinggi kandungan metabolit sekundernya dari pada purwoceng di. purwoceng di mengandung sitosterol, sedangkan di tidak (Tabel 5), hal ini disebabkan sitosterol dapat dikonversi menjadi komponen steroid yang lain. Dilihat dari jumlah dan macam kompenen metabolit sekunder, simplisia purwoceng di lebih tinggi mutunya dari pada simplisia purwoceng di. Kadar stigma sterol dan sitosterol pada akar dapat meningkat dengan perlakuan pemupukan dibandingkan dengan tanaman yang tidak dipupuk (12), oleh karena itu diperkirakan dengan meningkatnya tingkat kesuburan tanah dan tanaman maka mutu simplisianya dapat meningkat. Steroid merupan komponen kimia berkhasiat dalam sintesis hormon testoteron pada manusia (2). Beberapa hasil penelitian menunjukkan anak ayam yang diberi ramuan ekstrak purwoceng pertumbuhan jenggernya lebih cepat. Purwoceng selain mengandung steroid juga mengandung atsiri dengan turunannya yang meliputi germacrene, β-besabolene, β-caryophylline, α- humulene, dan carvacrol. Komponen ini jenisnya lebih banyak pada jaringan tajuk daripada akar. Pada jaringan akar hanya ditemukan germacrene dan β- besabolene sedangkan pada tajuk ditemukan germacrene, β-besabolene, β-caryophylline, α- humulene dan carvacrol, hal ini disebabkan atsiri disintesis di dalam daun. Germacrene pada jaringan tajuk ditemukan pada tanaman umur 3 dan 6 bulan baik di maupun di, β-caryophylline ditemukan pada tanaman umur 3 dan 6 bulan di dan pada umur 3, 6 dan 9 bulan di. Sedang β- caryophylline ditemukan pada tanaman berumur 9 bulan di dan pada tanaman umur 3, 6 dan 9 bulan di. Bagaimanapun, α-humulene hanya ditemukan pada tanaman umur 9 bulan baik di maupun di. Carvacrol ditemukan pada tanaman umur 9 bulan di pada umur 3 bulan di. Tidak ada perbedaan 314

6 Jurnal Bahan Alam Indonesia ISSN Vol. 5, No. 1, Januari 2006 turunan atsiri antara hasil purwoceng di dan di (Tabel 4 dan 5). Purwoceng juga mengandung turunan furanokumarin yaitu bergapten dan xanthotoxin. Bergapten ditemukan pada jaringan tajuk tanaman pada umur 9 bulan di dan pada umur 3, 6 dan 9 bulan di. Bergapten juga ditemukan pada jaringan akar tanaman purwoceng pada saat tanaman berumur 6 bulan di. Bergapten pada jaringan tajuk tanaman pada umur 9 bulan di mencapai (5,19 ppm) lebih tinggi daripada di (3,18 ppm), perbedaannya cukup tinggi yaitu 2,01 ppm (63,20%) (Tabel 4). Xanthotoxin hanya ditemukan pada jaringan tajuk tanaman di. Dilihat dari kandungan bergapten, simplisia di mutunya lebih tinggi dari pada di. Vitamin E hanya ditemukan pada jaringan tajuk tanaman baik di maupun di Gunung Putri. Kadar vitamin E tertinggi ditemukan di pada tanaman umur 6 bulan, yaitu tanaman yang mulai berbunga. Perbedaan kandungan komponen kimia yang mencolok antara purwoceng di dan di adalah sitoterol yang hanya terdapat pada tanaman purwoceng yang ditanam di. Vitamin E di lebih tinggi dibandingkan hasil di (Tabel 4 dan 5). Tabel 5. Kandungan komponen kimia akar purwoceng pada tiga tingkat umur di dan. Kandungan kimia Sterol: 1. Stigma sterol (ppm) 0,067 0,047 0,003 0,005 0,020 0, Sitosterol (ppm) 6,41 10, Atsiri: 1. Germacrene ada β-besabolene ada ada - ada ada ada Turanan Furanokumarin: Bergapten (ppm) ,036 - Keterangan: - : tidak terdeteksi Purwoceng dapat dibudidayakan di Gunung Putri (ex situ), namun produksi dan mutunya lebih rendah daripada di (in situ). Diperkirakan dengan meningkatkan kesuburan tanah melalui pemberian pupuk yang optimal dengan diimbangi pemberian pupuk oganik yang tinggi maka dapat meningkatkan produksi dan mutu simplisia. KESIMPULAN 1. Purwoceng dapat dibudidayakan di (ex situ), namun produksi dan mutunya lebih rendah dari pada di (in situ). 2. produksi simplisia purwoceng kering di lebih tinggi dari pada di, perbedaannya berturut-turut 15,30 g (63,48%), 68,55 g (206,16%) dan 95,25 g (162,12%) pada umur 3, 6 dan 9 bulan. 3. produksi simplisia kering masih sangat sedikit pada tanaman umur 3 bulan, yaitu 39,40 g/10 tanaman, menjadi 2,58 kali pada umur 6 bulan dan 3,91 kali pada umur 9 bulan di dan di umur 3 bulan hanya mencapai 24,10 g/10 tanaman, menjadi 1,38 kali pada umur 6 bulan dan 2,44 kali pada umur 9 bulan. 4. Kandungan bergapten dan vitamin E pada jaringan tajuk lebih tinggi di, namun kandungan stigma sterol pada jaringan tajuk tidak berbeda antara hasil di dan di. 5. Kandungan stigma sterol pada jaringan akar purwoceng lebih tinggi di dari pada di dan sitosterol hanya terdapat pada jaringan akar tanamn di. Stigma sterol dan vitamin E ditemukan pada jaringan tajuk tanaman pada ketiga umur panen baik di maupun di. 6. purwoceng mengandung stigma sterol pada ketiga umur panen baik di maupun di. DAFTAR RUJUKAN 1. Rahardjo, M Purwoceng, budidaya dan pemanfaatan untuk obat perkasa pria. Buku Tanaman Obat G LXXIV/1032/2005. Penebar Swadaya. 59 hal. 2. Taufiqurrachman and S. Wobowo Purwoceng (Pimpinella alpina KDS) experimental study in male rats sprague dawley. Makalah disamnpaikan pada Seminar Nasional 315

7 Tumbuhan Obat Indonesia POKJANAS TOI ke XXVIII, tanggal September 2005 di Bogor. 8 hal. 3. Rahardjo, M Purwoceng tanaman obat afrodisiak yang langka, Warta Penelitian dan Pengembangan Tanaman Industri, Puslitbangbun 9(2): Heyne, K Tumbuhan Berguna Indonesia (Buku III). Dept. Kehutanan, Jakarta hal. 5. Herbert, R.B The biosynthesis of secondary metabolites. Second Edition, Chapman and Hall, London, New York, 23 hal. 6. Santoso, D., J.S. Adiningsih, and Heryadi N, S, P and K status of soils in Islanda outside Java. Sulfur fertilizer polecy for lowland and upland rice cropping systems in Indonesia, Aciar Proceedings : Karama, A.S., A.R. Marzuki dan I. Manwan Penggunaan pupuk oragaik pada tanaman pangan. Proseeding Lokakarya Nasional Efisiensi Penggunaan Pupuk V, Cisarua, Nopember 1990, Puslittanak : Hartmann, M.A. and L. Wentzinger Tobaco BY-2 cells as an useful experimental, system for investigating regulation of the sterol pathway. hartmann pdf, Januari Moreao, R.A., B.D. Whitaker, K.B. Hicks Phytosteros, phytostanols, and their conjugates in food : structursl diversity, quantitative analisys, and health-promoting uses. Progres in Lipid Research 41: Taiz, L. and E. Zeiger Plant physiology. Sinauer associate, Inc. Publishers, Massechusetts. 689 hal. 11. Dalimoenthe, S.L Kultur jaringan sebagai sarana untuk menghasilkan metabolit sekunder. Seminar Nasional Metabolit Sekunder, Yogyakarta : Rahardjo, M., Rosita SMD dan I. Darwati. 2005a. Pengaruh pemupukan terhadap produksi dan mutu simplisia purwoceng (Pimpinella pruatjan Molkenb). Makalah disampaikan pada Seminar Nasional POKJANAS TOI ke XXVIII, tanggal September di Bogor. 14 hal. 13. Rahardjo, M., S. Wahyuni, O. Trisilawati, dan E. Djauhariya. 2005b. Ciri agronomis, mutu dan lingkungan tumbuh tanaman obat langka purwoceng (Pimpinella pruatjan Molkenb). Makalah disampaikan pada Seminar Nasional POKJANAS TOI ke XXVIII, tanggal September 2005 di Bogor. 11 hal. 316