AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG SRIKAYA (Annona squamosa L.) TERHADAP SEL T47D SKRIPSI Oleh: CHADIROTUL UMMA K 100 080 151 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012 i
AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG SRIKAYA (Annona squamosa L.) TERHADAP SEL T47D SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta Oleh: CHADIROTUL UMMA K 100 080 151 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012 ii ii
PENGESAHAN SKRIPSI Berjudul: AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG SRIKAYA (Annona squamosa L.) TERHADAP SEL T47D Oleh: CHADIROTUL UMMA K 100 080 151 Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Pada tanggal: Mengetahui, Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta Dekan, Dr. Muhammad Da i, M.Si., Apt. Pembimbing Utama Pembimbing Pendamping Dr. Haryoto, M.Sc Peni Indrayudha, M.Biotech, Apt. Penguji : 1. Dr. Muhammad Da i, M.Si., Apt. 2. Rosita Melannisa, M.Si., Apt. 3. Dr. Haryoto, M.Sc 4. Peni Indrayudha, M.Biotech., Apt. iii iii
DEKLARASI Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surakarta, 8 Maret 2012 Peneliti (Chadirotul Umma) iv
KATA PENGANTAR Assalamualaikum wr. wb. Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan kasih sayang-nya sehingga penulis diberi kemampuan dan kesempatan untuk menyusun dan menyelesaikan skripsi yang berjudul Aktivitas Sitotoksik Fraksi Polar Ekstrak Etanol Kulit Batang Srikaya (Annona squamosa L.) terhadap Sel T47D. Skripsi ini diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadyah Surakarta. Dalam pelaksanaan penelitian sampai penyelesaian skripsi ini, tidak lepas dari bantuan dan dukungan berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis ingin menyampaikan ucapan terimakasih kepada: 1. Dr. Muhammad Da i, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadyah Surakarta dan sekaligus penguji skripsi. 2. Ratna Yuliani, S.Si, M.Biotech., St., selaku pembimbing akademik 3. Dr. Haryoto, M.Sc., selaku pembimbing utama. 4. Peni Indrayudha, M.Biotech, Apt., selaku pembimbing pendamping. 5. Rosita Melannisa, M.Si, Apt., selaku penguji skripsi. 6. Bapak Aris Budiono dan Ibu Siti Qoriah. 7. Cita, Hefi, dan Woro, selaku tim peneliti. 8. Semua pihak yang telah membantu selama penelitian dan penyusunan skripsi ini. Semoga segala kebaikan yang diberikan menjadi sebuah amalan tersendiri dan semoga kerjasama yang pernah terjalin dapat terus berjalan dengan baik. Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini masih banyak kekurangan karena keterbatasan kemampuan, pengetahuan, dan pengalaman. Oleh karena itu, saran dan kritik yang membangun akan senantiasa diterima untuk menjadikan skripsi ini lebih baik. Penulis berharap agar hasil penelitian ini dapat bermanfaat dan memberikan sumbangan bagi perkembangan ilmu pengetahuan. v
Wassalamualaikum wr. wb. Surakarta, 8 Maret 2012 Penulis vi
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... ii HALAMAN PENGESAHAN... iii HALAMAN DEKLARASI... iv KATA PENGANTAR... v DAFTAR ISI... vii DAFTAR GAMBAR... ix DAFTAR TABEL... x DAFTAR LAMPIRAN... xi DAFTAR SINGKATAN... xii INTISARI... xiii BAB I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang... 1 B. Perumusan Masalah... 2 C. Tujuan Penelitian... 2 D. Tinjauan Pustaka... 3 1. Tumbuhan Srikaya (Annona squamosa L.)... 3 2. Kanker... 5 3. Sel T47D... 7 4. Uji Sitotoksik dengan Metode MTT assay... 7 E. Landasan Teori... 8 F. Hipotesis... 9 BAB II. METODE PENELITIAN A. Kategori penelitian... 10 B. Alat dan bahan... 10 1. Alat yang digunakan... 10 2. Bahan yang digunakan... 11 vii
C. Jalannya Penelitian... 11 1. Determinasi tanaman... 11 2. Penyiapan Bahan... 11 3. Ekstraksi... 12 4. Fraksinasi... 12 5. Uji Kandungan Senyawa dengan KLT... 13 6. Uji Aktivitas Antikanker... 13 D. Cara Analisis... 15 1. Uji sitotoksik... 15 2. Analisis Kromatografi Lapis Tipis... 15 BAB III. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN A. Determinasi Tanaman... 16 B. Ekstraksi... 16 C. Fraksinasi... 17 D. Uji Sitotoksik Fraksi Polar Ekstrak Etanol Kulit Batang Srikaya (Annona squamosa L.) terhadap sel T47D... 18 E. Analisis Kualitatif Kandungan Kimia... 21 BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan... 25 B. Saran... 25 DAFTAR PUSTAKA... 26 LAMPIRAN... 30 viii
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Strukutur umum senyawa asetogenin... 5 Gambar 2. Reaksi reduksi MTT menjadi formazan oleh enzim reduktase... 8 Gambar 3. Profil KLT hasil fraksinasi... 17 Gambar 4. Profil KLT hasil gabungan fraksi... 18 Gambar 5. Morfologi sel T47D... 19 Gambar 6. Grafik hubungan antara log konsentrasi versus pesen sel hidup... 20 Gambar 7. Hasil KLT fraksi polar ekstrak etanol kulit batang srikaya... 21 ix
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1. Persentase sel hidup dari sel T47D akibat perlakuan fraksi polar ekstrak etanol kulit batang srikaya (Annona squamosa L.)... 20 Tabel 2. Identifikasi golongan senyawa fraksi polar ekstrak etanol kulit batang srikaya dengan beberapa pereaksi semprot... 21 x
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Surat keterangan determinasi... 30 Lampiran 2. Foto tanaman srikaya (Annona squamosa L.)... 32 Lampiran 3. Foto Alat Fraksinasi... 33 Lampiran 4. Perhitungan seri konsentrasi fraksi polar ekstrak etanol kulit batang srikaya... 34 Lampiran 5. Perhitungan kepadatan stok sel T47D... 35 Lampiran 6. Data uji sitotoksik dengan metode MTT... 36 Lampiran 7. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan fraksi polar ekstrak etanol kulit batang srikaya (Annona squamosa L.)... 37 Lampiran 8. Perhitungan harga IC 50... 39 xi
DAFTAR SINGKATAN DMSO ELISA FBS Dimetil sulfoksida Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay Fetal Bovine Serum IC 50 Inhibitory Concentration 50% KLT LAF RPMI MTT PBS Penstrep Rf UV SDS Kromatografi Lapis Tipis Laminar Air Flow Rosewell Park Memorial Institute 3-(4,5-Dimetilltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromide Phosphate Buffered Saline Penicillin Streptomycin Retardation factor Ultraviolet Sodium Dodecyl Sulphate xii
INTISARI Senyawa kimia dalam tanaman tertentu terbukti berpotensi sebagai agen sitotoksik. Beberapa penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa senyawa dalam biji dan daun srikaya mempunyai aktivitas sebagai antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas sitotoksik dari kulit batang srikaya yang diharapkan memiliki potensi sebagai antikanker dan mengetahui golongan senyawa yang terkandung. Kulit batang srikaya dimaserasi menggunakan pelarut etanol 96%, kemudian difraksinasi dengan kromatografi cair vakum menggunakan pelarut n- heksan:etil asetat yang ditingkatkan kepolarannya. Fraksi polar diuji aktivitas sitotoksiknya terhadap sel T47D dengan seri konsentrasi 150; 100; 50; 25; 10µg/mL. Identifikasi golongan senyawa kimia menggunakan metode kromatografi lapis tipis dengan menggunakan beberapa pereaksi semprot yaitu FeCl 3, sitroborat, dan Dragendorff. Hasil uji sitotoksik menunjukkan bahwa fraksi polar ekstrak etanol kulit batang srikaya mempunyai efek penghambatan sel kanker payudara dengan nilai IC 50 sebesar 43,524µg/mL serta mengandung golongan senyawa alkaloid dan flavonoid. Kata Kunci: Annona squamosa L, Fraksi Polar, Sitotoksik, KLT, T47D xiii