AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL BIJI SRIKAYA (Annona squamosa L.) TERHADAP SEL T47D SKRIPSI OLEH: MUSTIKA ERLINANINGRUM K 100 080 187 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012
AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL BIJI SRIKAYA (Annona squamosa L.) TERHADAP SEL T47D SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta Oleh : MUSTIKA ERLINANINGRUM K 100 080 187 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2012 i
DEKLARASI Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surakarta, 10 Maret 2012 Penulis Mustika Erlinaningrum iii
KATA PENGANTAR Assalamu alaikum warahmatullahi wabarakatuh Alhamdulillah, dengan menyebut nama Allah yang Maha Pengasih lagi Maha Penyayang, segala puji bagi Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-nya kepada penulis sehingga penulis mampu menyusun dan k Etanol Biji Srikaya (Annona squamosa memenuhi salah satu syarat dalam mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Pada kesempatan kali ini, penulis ingin menyampaikan rasa terima kasih kepada berbagai pihak yang telah memberikan bantuan berupa arahan, dorongan, dan motivasi selama penulis menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih kepada : 1. Bapak Dekan Fakultas Farmasi UMS 2. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc., selaku pembimbing utama skripsi 3. Bapak Dr. Supardi Wongso, Apt., selaku pembimbing akademik 4. Bapak Prof. Dr. M. Kuswandi, SU, M. Phil., Apt., selaku penguji I 5. Bapak Peni Indrayudha, M. Biotech., Apt., selaku penguji II 6. Kedua orang tuaku dan adik-adikku serta abangku Edi Iskandar, Oben Priandra, Rohman, dan Noorhadi Seto yang selalu memberi motivasi untukku 7. Tim peneliti aktivitas sitotoksik terhadap sel T47D yang terdiri dari Wildan, Yennie, Desilia, Adi, Eva, Indah, Iwan, Umma, Woro, Cita, dan Hefi Semoga segala kebaikan yang telah diberikan mendapatkan balasan yang berlimpah dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa penulisan ini masih banyak kekurangan karena keterbatasan kemampuan, pengetahuan, dan pengalaman. Oleh karena itu, penulis mengharapkan saran dan kritik dari pembaca. Penulis berharap penelitian ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan. Wassalamu alaikum warahmatullahi wabarakatuh Surakarta, 28 Februari 2012 Penulis iv
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... i HALAMAN PENGESAHAN... ii HALAMAN DEKLARASI... iii KATA PENGANTAR... iv DAFTAR ISI... v DAFTAR TABEL... vii DAFTAR GAMBAR... viii DAFTAR LAMPIRAN... ix DAFTAR SINGKATAN... x INTISARI... xi BAB I. PENDAHULUAN... 1 A. Latar Belakang Masalah... 1 B. Perumusan Masalah... 2 C. Tujuan Penelitian... 3 D. Tinjauan Pustaka... 3 1. Tumbuhan Srikaya... 3 a. Sistematika Tanaman... 3 b. Nama Daerah... 3 c. Nama Asing... 4 d. Nama Simplisia... 4 e. Morfologi Tumbuhan... 4 f. Kandungan Kimia... 4 g. Bagian Tanaman yang Digunakan... 5 h. Khasiat.... 5 i. Ekstraksi dan Isolasi... 5 2. Metode Penyarian... 6 3. Kanker... 6 v
4. Sel T47D... 8 5. Sitotoksik... 9 6. Metode MTT... 9 E. Landasan Teori... 10 F. Hipotesis... 11 BAB II. METODE PENELITIAN... 12 A. Kategori Penelitian... 12 B. Variabel Penelitian... 12 C. Alat dan Bahan... 13 D. Tempat Penelitian... 13 E. Jalannya Penelitian... 13 1. Determinasi Tanaman... 13 2. Pengumpulan Bahan... 13 3. Preparasi Bahan... 13 4. Analisis Kualitatif... 14 5. Uji Sitotoksik... 15 F. Analisis Data... 17 BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN... 19 A. Determinasi Tanaman... 19 B. Pengumpulan Bahan... 19 C. Ekstraksi Bahan... 19 D. Hasil Uji Aktivitas Sitotoksik... 20 E. Analisis Kualitatif Kandungan Kimia... 23 BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN... 28 A. Kesimpulan... 28 B. Saran... 28 DAFTAR PUSTAKA... 29 LAMPIRAN... 33 vi
DAFTAR TABEL Tabel 1. Kadar Ekstrak Etanol Biji Srikaya dan Prosentase Sel Hidup Setelah Perlakuan... 22 Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Biji Srikaya (Annona squamosa L.)... 23 Tabel 3. Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol Biji Srikaya (Annosa squamosa L.). 25 vii
DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Skema Uji Aktivitas Sitotksik Ekstrak Etanol Biji Srikaya (Annona squamosa L.) Terhadap Sel T47D... 18 Gambar 2. Reaksi Reduksi MTT menjadi Farmazan oleh Enzim Reduktase.. 21 Gambar 3. 21 Gambar 4. Kurva Hubungan %Sel Hidup dengan Log Konsentrasi... 22 Gambar 5. Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Biji Srikaya Sebelum Disemprot... 25 Gambar 6. Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Biji Srikaya Sesudah Disemprot... 26 viii
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi... 33 Lampiran 2. Gambar Tumbuhan Srikaya... 35 Lampiran 3. Perhitungan Seri Konsentrasi... 36 Lampiran 4. Perhitungan Kadar Tertinggi DMSO Ekstrak... 37 Lampiran 5. Perhitungan Jumlah Sel Tiap Sumuran... 38 Lampiran 6. Data Absorbansi Sel Hasil Uji Aktivitas Sitotoksik... 39 Lampiran 7. Perhitungan % Sel Hidup Setelah Penambahan Ekstrak Etanol Biji Srikaya (Annona squamosa L)... 40 Lampiran 8. Perhitungan IC 50 Ekstrak etanol Biji Srikaya (Annona squamosa L.) Terhadap Sel T47D... 42 ix
DAFTAR SINGKATAN A-549 Human Lung Carcinoma BCl-2 B-Cell Limphoma 2 BCL XL B-Cell Limphoma Extra Large Bel-7402 Human Hepatocellular Carcinoma CNE 2 Human Nasopharyngeal Carcinoma DMSO Dimetil sulfoksida ELISA Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay FBS Fetal Bovine Serum HT-29 Human COLON adenocarcinoma IC 50 Inhibitory Concentration 50% KLT Kromatografi Lapis Tipis K-562 Human Erythtomyeloblastoid Leukemia LAF Laminar Air Flow MCF-7 Human Breast Carcinoma MTT 3-(4,5-Dimetilltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromide PBS Phosphate Buffered Saline PC-3 Human Prostate Adenocarcinoma Penstrep Penicillin Streptomycin Rf Retardation fact ROS Reactive Oxygen Species T47D Human Ductal Breast Epitheal Tumor UV Ultraviolet x
INTISARI Beberapa penelitian menunjukkan bahwa senyawa asetogenin dalam biji srikaya mempunyai aktivitas sitotoksik, antiparasit, pestisida, dan imunosupresif. Telah dilakukan penelitian uji aktivitas sitotoksik ekstrak etanol biji srikaya (Annona squamosa L.) terhadap sel T47D. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui harga IC 50, efek sitotoksik ekstrak etanol biji srikaya terhadap sel T47D, dan senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanol biji srikaya. Ekstrak etanol biji srikaya dibuat dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Ekstrak diuji aktivitas sitotoksiknya terhadap sel T47D dengan seri konsentrasi 150; 100; 50; 25; dan 10 µg/ml menggunakan metode MTT assay dan dibaca pada ELISA reader. Hasil uji aktivitas sitotoksik menunjukkan bahwa ekstrak etanol biji srikaya mempunyai efek penghambatan sel kanker payudara dengan nilai IC 50 sebesar 62,80 µg/ml. Hasil analisisis kualitatif dengan menggunakan uji kromatografi lapis tipis menunjukkan adanya kandungan senyawa flavonoid, alkaloid, dan polifenol. Kata kunci : Sitotoksik, sel T47D, Annona squamosa L., MTT assay, IC 50 xi