Lampiran 1. Hasil identifikasi tanaman
Lampiran 2. Gambar serbuk majakani (Quercus infectoria G. Olivier)
Lampiran 3. Bagan kerja penelitian Tikus Dikondisikan selama 2 minggu 1. Diukur Kadar 2. Diinduksi dengan Glukosa Darah aloksan dosis 125 mg/kg bb Kadar glukosa Darah puasa Ditunggu kenaikan Kadar gula darah Selama 3 hari Diukur kadar glukosa Darah Kadar Hiperglikemia Kadar Glukosa Darah 3. Diberikan perlakuan dengan dan tanpa pemberian ekstrak etanol majakani dan metformin diukur kadar glukosa darah pada hari ke 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17 dan hari ke 19.
Lampiran 4. Gambar alat pengukur kadar glukosa darah i ii iii iv Keterangan Gambar: i = Glucotest Nesco Multi Check ii = Wadah Strip iii = Chips iv = Glucotest strip
Lampiran 5. Volume maksimum larutan sediaan uji yang dapat diberikan pada hewan uji (Mulyono, 1984) Jenis hewan uji Volume maksimum (ml) sesuai jalur pemberian i.v. i.m. i.p. s.c. p.o. Mencit (20-30 g) 0,5 0,05 1,0 0,5-1,0 1,0 Tikus (200 g) 1,0 0,1 2-5 2-5 5,0 Hamster (50 g) - 0,1 1-2 2,5 2,5 Marmot (300 g) - 0,25 2-5 5,0 10,0 Kelinci (2,5 kg) 5-10 0,5 10-20 5-10 20,0 Kucing (3 kg) 5-10 1,0 10-20 5-10 50,0 Anjing (5 kg) 10-20 5,0 20-50 10,0 100,0
Lampiran 6. Tabel konversi dosis hewan dengan manusia Konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia (Laurence and Bacharach, 1964). Mencit 20 g Tikus 200 g Marmut 400 g Kelinci 1,2 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg Mencit 20 g Tikus 200 g Marmu t 400 g Kelinci 1,2 kg Kera 4 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg 1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,2 387,9 0,14 1,0 1,74 3,9 9,2 17,8 56,0 0,08 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5 0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2 0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1 0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1 0,0026 0,018 0,031 0,07 0,16 0,32 1,0
Lampiran 7. Contoh Perhitungan Dosis Contoh perhitungan volume larutan induksi aloksan yang diambil untuk diinjeksi secara intraperitoneal (i.p.) pada hewan uji tikus - Dosis induksi aloksan untuk tikus = 125 mg/kg BB (i.p.) - Syarat volume maksimum larutan sediaan uji yang diberikan pada hewan uji tikus (200 g) secara i.p. adalah 5,0 ml (ada di Lampiran 6) - Konsetrasi larutan induksi aloksan yang dibuat 1 %. Maka : Konsentrasi larutan induksi aloksan = 1 g / 100 ml = 1000 mg / 100 ml = 10 mg / ml Berapa volume larutan induksi aloksan yang akan diinduksikan? Mis : BB Tikus = 200 g a. Jumlah obat yang diberikan = (125 mg / 1 kg) x BB = (125 mg / 1000 g) x 200 g = 25 mg b. Volume larutan yang diberi = 25 mg / 10 mg/ml = 2,5 ml Maka volume larutan induksi aloksan yang diambil sebanyak 2,5 ml
Lampiran 8. (Lanjutan) Contoh perhitungan dosis Metformin yang akan diberikan pada tikus secara per oral (p.o.) - Tiap tablet Metformin mengandung 500 mg Metformin-HCl - Dosis maksimum untuk manusia dewasa = 500 mg 3 g - Konversi dosis manusia (70 kg) ke dosis untuk hewan uji Tikus dikali 0,018 (ada di Lampiran 6) - Dosis Metformin untuk tikus (200 g) = (500 mg 3000 mg) x 0,018 = 9 mg 54 mg Metformin-HCl yang digunakan = 10 mg untuk tikus 200 g. Dosis Metformin yang diberikan = 10 mg/200 g = 50 mg/kg bb Tiap tablet Metformin mengandung 500 mg metformin dilarutkan dalam 100 ml. Maka kadar suspensi Metformin = 500 mg/100 ml = 0,5% Contoh perhitungan dosis metformin 50 mg/kg bb untuk tikus 200 g. = x 10 mg = 10 mg Maka volume larutan yang diberikanadalah = x 1 ml = 2 ml
Lampiran 9. (Lanjutan) Contoh perhitungan dosis ekstrak etanol majakani yang akan diberikan pada tikus diabetes. - Syarat volume maksimum larutan sediaan uji yang diberikan pada hewan uji tikus (200 g) secara per oral (p.o.) adalah 5,0 ml (ada di lampiran 5) - Dosis suspensi ekstrak etanol majakani yang akan dibuat adalah 50 mg/kg bb, 100 mg/kg bb, 200 mg/kg bb Konsentrasi suspensi majakani = 1 g / 100 ml = 1000 mg / 100 ml = 10 mg / ml Berapa volume ekstrak etanol yang akan diberikan pada tikus diabetes? - Mis : Berat badan tikus 200 g Jumlah EEM dosis 50 mg / kg bb = x 50 mg / kg bb = 10 mg Volume larutan yang di beri = x 1 ml = 1 ml - Mis : Berat badan tikus 200 g Jumlah EEM dosis 100 mg/kg bb = x 100 mg / kg bb = 20 mg Volume larutan yang di beri = x 1 ml = 2 ml - Mis : Berat badan tikus 200 g Jumlah EEM dosis 200 mg/kg bb = x 200 mg / kg bb = 40 mg Volume larutan yang di beri = x 1 ml = 4 ml
Lampiran 10. Data Hasil Orientasi Kelompok uji Kontrol Na Cmc Kontrol Na Cmc EEM 100 mg/kg bb EEM 100 mg/kg bb EEM 200 mg/kg bb EEM 200 mg/kg bb EEM 400 mg/kg bb EEM 400 mg/kg bb Metformin 50 mg/kg bb Metformin 50 mg/kg bb BB Hewn (gram) KGD puasa sebelum diinduksi aloksan (mg/dl) KGD setelah diinduksi aloksan (mg/dl) ke 3 Ke 5 Ke 7 KGD setelah perlakuan Ke 9 Ke 11 Ke 13 Ke 15 Ke 17 184,6 79 505 600 559 581 576 595 mati - - - 183,8 76 498 593 582 597 583 575 mati - - - 175,9 77 360 331 281 197 203 126 140 112 97 103 163,7 83 381 350 275 223 205 113 125 118 100 56 190,5 79 600 600 476 377 280 190 115 120 117 115 191,3 81 575 600 515 395 275 193 109 119 96 85 159,6 74 381 371 400 219 290 75 low - - - 163,7 79 402 395 381 319 280 99 low - - - 167,7 76 599 338 249 331 281 213 249 198 99 95 168,2 79 531 381 260 371 260 219 221 178 121 101 Ke 19
Lampiran 11. Data Pengukuran Kadar Glukosa Darah (KGD) Tikus Metode Induksi Aloksan 1. KGD tikus setelah pemberian suspensi Na-CMC 0,5% No Hewan BB Hewan (gram) KGD puasa sebelum diinduksi aloksan (mg/dl) KGD puasa setelahdiin duksi aloksan (mg/dl) ke 3 Ke 5 Ke 7 KGD setelah perlakuan Ke 9 Ke 11 Ke 13 Ke 15 Ke 17 1 160,5 99 312 313 321 319 350 343 317 330 340 360 2 173,4 102 309 308 330 315 370 354 322 340 351 380 3 185,4 101 330 321 331 348 356 317 381 371 389 370 4 170,8 95 298 325 301 350 360 378 321 317 351 361 5 171,5 98 301 335 329 360 381 371 361 383 340 331 6 165,9 101 319 311 320 340 332 361 391 329 351 341 Ke 19 Rata-rata SD 99,3 2,58 311,5 11,81 318,83 10,16 322 11,31 338,66 17,99 358,16 16,85 354 21,92 348,8 33,07 345 26,11 353,66 18,12 357,16 18,19
Lampiran 11. (Lanjutan) 2. KGD tikus setelah pemberian Ekstrak Etanol Majakani 50 mg/kg bb No Hewan BB Hewan (gram) KGD puasa sebelum diinduksi aloksan (mg/dl) KGD puasa setelah diinduksi aloksan (mg/dl) ke 3 Ke 5 Ke 7 KGD setelah perlakuan Ke 9 Ke 11 Ke 13 Ke 15 Ke 17 Ke 19 1 159,7 100 401 390 370 301 284 261 209 178 150 121 2 174,3 98 390 381 369 312 289 272 212 181 143 119 3 180,2 99 395 395 342 322 263 212 201 192 169 109 4 178,1 93 412 412 361 312 291 261 211 174 151 117 5 160,5 91 398 398 354 300 279 241 219 199 128 120 6 185,2 97 373 373 351 332 301 241 230 201 170 108 Rata-rata SD 96,3 3,55 394,8 24,12 394,8 14,13 357,8 10,90 313,16 12,30 284,5 12,86 248 21,48 213,6 9,87 187,5 11,39 151,8 15,96 115,6 5,71
Lampiran 11. (Lanjutan) 3. KGD tikus setelah pemberian Ekstrak Etanol Majakani 100 mg/kg bb No Hewan BB Hewan (gram) KGD puasa sebelum diinduksi aloksan (mg/dl) KGD puasa setelah diinduksi aloksan (mg/dl) ke 3 Ke 5 Ke 7 KGD setelah perlakuan Ke 9 Ke 11 Ke 13 Ke 15 Ke 17 1 154,3 98 465 418 380 371 365 301 267 201 137 107 2 180,3 95 457 420 373 361 352 311 251 211 140 103 3 170,5 90 471 432 381 368 349 313 260 201 159 101 4 181,2 94 490 451 399 370 330 301 281 221 192 98 5 172,7 98 439 401 391 369 321 300 278 212 134 101 6 165,4 91 501 430 383 361 303 292 264 209 141 101 Ke 19 Rata-rata SD 94,3 3,38 470,5 22,42 425,33 16,72 384,5 9,15 366,66 4,50 336,66 22,86 256,33 7,77 266,3 11,23 209,16 7,54 150,5 22,13 101,16 3,60
Lampiran 11. (Lanjutan) 4. KGD tikus setelah pemberian Ekstrak Etanol Majakani 200 mg/kg bb No Hewan BB Hewan (gram) KGD puasa sebelum diinduksi aloksan (mg/dl) KGD puasa setelah diinduksi aloksan (mg/dl) ke 3 Ke 5 Ke 7 KGD setelah perlakuan Ke 9 Ke 11 Ke 13 Ke 15 Ke 17 Ke 19 1 190,3 93 374 362 302 281 264 231 211 171 121 101 2 183,8 98 380 337 293 262 242 231 219 168 130 99 3 174,5 92 373 352 298 258 231 228 220 258 128 97 4 160,4 94 392 348 279 243 229 219 215 161 132 102 5 177,8 89 378 351 302 261 234 217 208 178 142 94 6 185,3 93 369 338 281 232 219 210 189 168 140 103 Rata-rata SD 93,16 2,92 377,6 8,01 348 9,40 292,5 10,25 356,16 16,94 236,5 15,39 222,6 8,64 210,3 11,41 167,33 7,14 132,16 7,80 99,331 3,38
Lampiran 11. (Lanjutan) 5. KGD tikus setelah pemberian Metformin dosis 50 mg/kg bb No Hewan BB Hewan (gram) KGD puasa sebelum diinduksi aloksan (mg/dl) KGD puasa setelah diinduksi aloksan (mg/dl) ke 3 Ke 5 Ke 7 KGD setelah perlakuan Ke 9 Ke 11 Ke 13 Ke 15 Ke 17 Ke 19 1 178,5 89 393 321 301 281 271 240 192 160 121 92 2 165,3 95 389 312 300 279 261 234 182 171 120 93 3 180,4 83 401 329 311 291 250 231 173 163 131 89 4 190,3 89 381 330 301 282 259 229 201 181 145 98 5 171,2 99 362 319 302 271 249 201 198 173 151 97 6 160 101 402 320 300 281 253 219 200 163 129 92 Rata-rata SD 92,6 6,86 388 14,93 321,83 6,73 302,5 4,23 281,16 6,46 257,16 8,30 225,66 13,90 191 11,27 168,5 7,94 132,8 12,65 93,5 3,39
Lampiran 12. Hasil perhitungan AUC Perhitungan AUC Suspensi Na-CMC 0,5% AUC = 1 1. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 625 2 = 634 2 = 640 2 = 669 2 = 693 2 = 660 2 = 647 2 = 670 2 = 700 AUC total = 5938 2. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 617 2 = 638 2 = 645 2 = 685 2 = 724 2 = 676 2 = 662 2 = 691 2 = 731 AUC total = 6069
3. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 651 2 = 652 2 = 679 2 = 704 2 = 673 2 = 698 2 = 752 2 = 760 2 = 759 AUC total = 6328 4. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 623 2 = 626 2 = 651 2 = 710 2 = 738 2 = 699 2 = 638 2 = 668 2 = 721 AUC total = 6065 5. AUC 1-3 = = = 2 = 636 2 = 664 2 = 689
= AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 741 2 = 752 2 = 732 2 = 744 2 = 723 2 = 671 AUC total = 6352 6. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 630 2 = 631 2 = 660 2 = 672 2 = 693 2 = 752 2 = 720 2 = 680 2 = 692 AUC total = 6130 Perhitungan AUC EEM dosis 50 mg/kg bb 1. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = 2 = 791 2 = 760 2 = 671 2 = 585 2 = 545
AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 470 2 = 387 2 = 328 2 = 271 AUC total = 4808 2. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2= 771 2= 750 2= 681 2= 601 2= 561 2= 484 2= 393 2= 324 2= 262 AUC total = 4827 3. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = 2 = 716 2 = 713 2 = 664 2 = 585 2 = 475 2 = 413 2 = 393 2 = 361
AUC 17-19 = 2 = 278 AUC total = 4598 4. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 811 2= 760 2= 673 2= 603 2= 552 2= 472 2= 385 2= 325 2= 268 AUC total = 4849 5. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 770 2 = 726 2 = 654 2 = 579 2 = 520 2= 460 2 = 418 2 = 327 2 = 248 AUC total = 4702
6. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2= 733 2= 711 2= 683 2= 633 2= 542 2= 471 2= 431 2= 371 2= 278 AUC total = 4853 Perhitungan AUC EEM dosis 100 mg/kg bb 1. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 883 2 = 798 2 = 751 2 = 736 2 = 666 2 = 568 2 = 468 2= 338 2= 244 AUC total = 5447 2. AUC 1-3 = = 2 = 877 2 = 793
= = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 734 2 = 713 2 = 663 2 = 562 2 = 462 2 = 351 2 = 243 AUC total = 5398 3. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 903 2 = 813 2 = 749 2 = 717 2 = 662 2 = 573 2 = 461 2 = 360 2 = 260 AUC total = 5498 4. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = 2 = 941 2 = 850 2 = 769 2 = 700 2 = 631
AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 582 2 = 501 2 = 413 2 = 290 AUC total = 5678 5. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 840 2 = 792 2 = 760 2 = 690 2 = 621 2 = 578 2 = 490 2 = 346 2 = 231 AUC total = 4907 6. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = 2 = 931 2 = 813 2 = 744 2 = 664 2 = 595 2 = 556 2 = 473 2 = 350
AUC 17-19 = 2 = 242 AUC total = 5368 Perhitungan AUC EEM dosis 200 mg/kg bb 1. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 736 2 = 664 2 = 583 2 = 545 2 = 495 2 = 442 2 = 382 2 = 292 2 = 222 AUC total = 4361 2. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 717 2 = 630 2 = 555 2 = 504 2= 473 2 = 450 2= 387 2= 298 2= 229 AUC total = 3739
3. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 725 2 = 650 2 = 556 2 = 489 2 = 459 2 = 448 2 = 378 2 = 286 2 = 225 AUC total = 4216 4. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 740 2 = 627 2= 522 2= 472 2= 448 2 = 434 2= 376 2= 293 2= 234 AUC total = 4146 5. AUC 1-3 = = = 2 = 729 2 = 653 2 = 563
= AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 495 2 = 451 2 = 425 2 = 386 2 = 320 2 = 236 AUC total = 4258 6. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2= 707 2= 619 2= 513 2= 451 2= 429 2= 210 2= 357 2= 308 2= 243 AUC total = 3337 Perhitungan AUC Metformin dosis 50 mg/kg bb 1. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = 2 = 714 2 = 622 2 = 584 2 = 554 2 = 511 2 = 432
AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 352 2 = 281 2 = 213 AUC total = 4263 2. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 701 2 = 612 2 = 579 2 = 540 2 = 495 2 = 416 2 = 353 2 = 291 2 = 213 AUC total = 4200 3. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2= 730 2= 640 2= 602 2= 541 2= 481 2= 404 2= 336 2= 294 2= 220
AUC total = 3948 4. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2= 711 2= 631 2= 583 2= 541 2= 488 2= 430 2= 382 2= 326 2 = 243 AUC total = 4335 5. AUC 1-3 = = = = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 681 2 = 621 2 = 573 2 = 520 2 = 450 2 = 399 2 = 371 2 = 324 2 = 248 AUC total = 4187 6. AUC 1-3 = = 2 = 722 2 = 620
= = AUC 9-11 = AUC 11-13 = AUC 13-15 = AUC 15-17 = AUC 17-19 = 2 = 581 2 = 534 2 = 472 2 = 419 2 = 363 2 = 292 2 = 221 AUC total = 422
Lampiran 13. Hasil analisis data SPSS ANOVA Kadar gula darah Sum of Squares DfS Mean Square F Sig. Between Groups 1.858E7 4 4645826.617 84.589.000 Within Groups 1373058.500 25 54922.340 Total 1.996E7 29 Kadar gula darah Duncan a Perlakuan Subset for alpha = 0.05 N 1 2 3 4 EEM 200 mg/kg 6 4009.5000 bb Metformin 6 4192.8333 EEM 50 mg/kg bb 6 4772.8333 EEM 100 MG/KG bb 6 5382.6667 Cmc Na 0,5% 6 6147.0000 Sig..188 1.000 1.000 1.000