Bab IV Hasil dan Pembahasan

Transkripsi

1 Bab IV Hasil dan Pembahasan Penelitian ini didesain sedemikian rupa sehingga diharapkan mampu merepresentasikan aktivitas hipoglikemik yang dimiliki buah tin (Ficus carica L.) melalui penurunan kadar glukosa darah puasa (GDP) hewan uji, sehingga buah ini selanjutnya dapat digunakan sebagai salah satu bahan alternatif dalam terapi herbal, khususnya dalam pengelolaan penyakit diabetes melitus (DM) yang saat ini kasusnya banyak sekali dijumpai di tengah-tengah masyarakat Indonesia. Buah tin yang masih segar diperoleh dari Kompleks Pesantren Qiro atus Sab ah, Limbangan, Garut, Jawa Barat. IV.1 Kegiatan Pendahuluan Sebagai kegiatan pendahuluan, dilakukan penapisan fitokimia terhadap ekstrak buah tin yang ditujukan untuk mengidentifikasi adanya kandungan metabolit sekunder di dalam buah tin. Metabolit sekunder yang dimaksud yaitu alkaloid, saponin, steroid dan triterpenoid. Hasil penapisan fitokimia ini hanya menunjukkan adanya senyawa triterpenoid, yang ditandai dengan terbentuknya warna ungu setelah ekstrak eter buah tin ditetesi dengan pereaksi Liebermann Burchard, seperti tampak pada Gambar IV.1. Sementara hasil penapisan fitokimia selengkapnya dapat dilihat pada Tabel IV.1. Gambar IV.1. Warna ungu yang terbentuk setelah ekstrak eter buah tin diuji dengan Liebermann Burchard 41

2 Tabel IV.1. Pemeriksaan kandungan metabolit sekunder buah tin (Ficus carica L.) melalui penapisan fitokimia No. Metabolit Sekunder Hasil Alkaloid Saponin Steroid Triterpenoid + Selain menggunakan buah tin sebagai bahan utama yang diselidiki aktivitas hipoglikemiknya, dalam penelitian ini digunakan tikus putih jantan galur wistar (Rattus norvegicus L.) sebagai hewan uji yang dikondisikan terlebih dahulu sehingga menderita penyakit diabetes dengan cara diinduksi oleh larutan aloksan monohidrat. Tikus diabetes ini merupakan representasi dari para pasien penderita DM. Kadar GDP dari semua hewan uji terus dipantau, baik sebelum maupun setelah diberi perlakuan, selama 21 hari, hingga diperoleh data yang selanjutnya dapat digunakan sebagai bukti ilmiah mengenai aktivitas hipoglikemik yang dimiliki oleh buah tin. Dan sebagai perbandingan, dilakukan juga penentuan aktivitas hipoglikemik dari salah satu obat antidiabetes oral yang sudah beredar di pasaran, yaitu metformin, terhadap hewan uji yang sama. Hewan uji yang dimaksud diperoleh dari Laboratorium Farmakologi Klinik Rumah Sakit Hasan Sadikin, Bandung, Jawa Barat. IV.2 Pembuatan Ekstrak Air Buah Tin Salah satu manfaat aplikatif yang ingin dicapai melalui penelitian ini yaitu para penderita DM dapat langsung menggunakan buah tin sebagai obat antidiabetes dengan cara yang praktis, tanpa harus susah payah mengisolasi zat aktif antidiabetes terlebih dahulu. Misalnya, cukup dengan mengkonsumsi air rebusan buah tin dengan dosis dan waktu penggunaan yang tepat, maka kadar GDP para penderita DM dapat diarahkan hingga mencapai sasaran yang diinginkan. Untuk kepentingan ini, ekstraksi buah tin dilakukan dengan cara perkolasi menggunakan 42

3 air atau aquades sebagai pelarutnya. Namun, penggunaan air akan mengakibatkan ekstrak buah tin mudah dan cepat ditumbuhi berbagai mikroba yang merugikan. Pertumbuhan mikroba di dalam ekstrak ini akan menimbulkan penyimpangan dari hasil yang diperoleh. Oleh karena itu, ke dalam ekstrak air ditambahkan beberapa tetes etanol 10% yang dimaksudkan supaya ekstrak air buah tin dapat bertahan relatif lebih lama, karena kemungkinan mikroba tumbuh di dalam media yang mengandung etanol sangat kecil. Dari proses perkolasi ini, diperoleh ekstrak air buah tin yang berwarna merah kecokelatan sebanyak 94 ml seperti terlihat pada Gambar IV.2, dengan kadar buah tin sebesar mg/ml. Ekstrak ini selanjutnya disimpan di dalam freezer untuk proses selanjutnya. Gambar IV.2. Ekstrak air buah tin (Ficus carica L.) IV.3 Perlakuan Terhadap Hewan Uji Berdasarkan jenis perlakuannya, hewan uji dibagi menjadi tujuh kelompok. Jumlah sampel, dalam hal ini hewan uji, untuk masing-masing kelompok dihitung berdasarkan rumus Federer, dengan r sebagai jumlah sampel dan t sebagai jumlah perlakuan, sebagaimana terlihat pada persamaan (4.1). (51) (r 1)(t 1) 15 (4.1) (r 1)(7 1) 15 (r 1)6 15 6r 21 r 3,5 43

4 Jadi jumlah minimal sampel untuk setiap kelompok adalah empat ekor hewan uji. Dengan demikian, untuk memenuhi keperluan ini, dibutuhkan hewan uji sebanyak 28 ekor. Akan tetapi dalam penelitian ini digunakan hewan uji sebanyak 35 ekor, dengan perkiraan ada hewan uji yang mati sebelum perlakuan selesai karena kondisi hiperglikemia yang terlalu tinggi, sehingga diperlukan beberapa hewan uji cadangan. Hewan uji tikus yang disiapkan berusia 2 3 bulan, dan setelah ditimbang satu per satu, diperoleh kisaran berat badan tikus antara gram, dengan ratarata berat badan sebesar 194,82 gram. Berat badan ini sangat erat kaitannya dengan jumlah zat yang akan dimasukkan ke dalam tubuh tikus. Semua tikus perlu diadaptasikan terlebih dahulu selama tujuh hari. Hal ini diperlukan untuk menyesuaikan diri terhadap lingkungan yang baru, sehingga tikus tidak stres. Dengan demikian, kondisi hiperglikemia yang disebabkan oleh tingginya tingkat stres pada tikus dapat dihindari. Sejak hari pertama proses adaptasi tersebut, semua tikus diberi makanan pelet dan minuman secukupnya. Tikus yang diberi perlakuan selanjutnya adalah tikus yang mempunyai nilai GDP normal, yaitu nilai GDP di bawah 126 mg/ml, sedangkan tikus yang mempunyai nilai GDP di atas normal tidak dipergunakan. Untuk mengetahui kondisi awal dari semua tikus yang digunakan, maka dilakukan pemeriksaan GDP pra induksi terlebih dahulu. Dari pemeriksaan tersebut, diperoleh kisaran GDP antara 80,40 111,23 mg/dl, dengan rata-rata kadar GDP sebesar 91,22 mg/dl. Berdasarkan nilai GDP yang diperoleh, dapat disimpulkan bahwa semua hewan uji yang disiapkan sudah memenuhi kriteria untuk diberi perlakuan selanjutnya. Mula-mula sebanyak empat ekor tikus dimasukkan ke dalam kelompok satu (K.1) yang merupakan kontrol negatif. Artinya kadar GDP tikus-tikus di dalam kelompok ini dibiarkan berada dalam kisaran normal. Sementara tikus-tikus yang lain diinduksi dengan larutan aloksan monohidrat secara intravena dengan dosis 125 mg/kgbb. Dengan rata-rata berat badan tikus sebesar 194,82 gram, maka banyaknya aloksan monohidrat yang diinduksikan ke dalam tubuh tikus adalah 44

5 sebesar 25 mg. Artinya, diperlukan sebanyak 0,25 ml larutan aloksan monohidrat 100 mg/ml untuk menginduksi tikus sehingga menderita diabetes. Dipilihnya dosis ini dengan pertimbangan berdasarkan penelusuran literatur yang telah dilakukan, diperoleh informasi bahwa dosis aloksan monohidrat 125 mg/kgbb merupakan dosis optimal yang dapat menghasilkan sebanyak 80% tikus diabetes dengan kadar glukosa darah mg/dl. Sementara dosis aloksan monohidrat 175 mg/kg BB menghasilkan keadaan diabetes dengan kadar glukosa darah mg/dl dan tikus yang dapat bertahan hidup setelah 48 jam hanya 25%. (43) Proses induksi dengan aloksan monohidrat ini menyebabkan kerusakan pada sel β pankreas sehingga sekresi insulin akan berkurang dan kadar glukosa dalam darah pun akan meningkat, akibatnya tikus-tikus ini menjadi diabetes. Setelah dibiarkan selama tiga hari, GDP hewan uji tikus diperiksa kembali sehingga diperoleh data kadar GDP pasca induksi pada T 0. Tikus yang mempunyai kadar GDP di atas 126 mg/dl dipilih sebagai tikus diabetes. Semua tikus diabetes dikelompokkan menjadi enam kelompok secara acak, masingmasing terdiri dari empat ekor. Jadi secara keseluruhan terdapat tujuh kelompok tikus dengan perlakuan yang berbeda yaitu: kelompok K.1 sebagai kontrol negatif; kelompok K.2 sebagai kontrol positif, hanya diberi Amidis 1 ml per oral setiap hari; kelompok K.3 sebagai kelompok pembanding, diberi metformin 50 mg/kgbb per oral setiap hari; serta kelompok K.4, K.5, K.6 dan K.7 sebagai kelompok pengujian, masing-masing diberi ekstrak air buah tin dengan dosis berturut-turut sebesar 25 mg/kgbb, 50 mg/kgbb, 100 mg/kgbb dan 200 mg/kgbb per oral setiap hari. IV.4 Pemeriksaan Kadar GDP Pemeriksaan GDP dilakukan dengan dua cara. Pertama, dengan menggunakan glukotester elektrik Life Scan tipe Smart Scan. Kedua, dengan menggunakan metoda Somogyi Nelson, yang didasarkan pada pengukuran absorbansi pada panjang gelombang 660 nm dengan spektrofotometer Spectronic Genesys 20. Masing-masing metoda mempunyai kelebihan dan kelemahan tersendiri. Kelebihan pemeriksaan kadar GDP dengan menggunakan glukotester elektrik di 45

6 antaranya yaitu cepat dan praktis. Cukup dengan meneteskan sedikit cuplikan darah yang diambil dari bagian ekor tikus ke atas strip yang sudah terpasang pada bagian tertentu dari glukotester elektrik, maka nilai kadar GDP dalam mg/dl dapat dilihat pada layar setelah 15 detik. Akan tetapi terbatasnya nilai kadar GDP yang terjangkau menjadi salah satu kelemahan dari metoda ini. Glukotester elektrik Life Scan tipe Smart Scan yang digunakan dalam penelitian ini hanya dapat menjangkau nilai GDP sampai 600 mg/dl. Sementara nilai di atas 600 mg/dl tidak dapat terdeteksi dan pada layar akan muncul tulisan HI, artinya kadar GDP sudah terlalu tinggi (high level). Dengan demikian, diperlukan pemeriksaan GDP dengan metoda lain yang dapat menjangkau nilai GDP yang lebih luas. Untuk kepentingan tersebut, pemeriksaan GDP ditentukan pula dengan metoda Somogyi Nelson. Meskipun kurang praktis dan relatif lebih lama, akan tetapi nilai GDP yang dapat dijangkau melalui metoda ini lebih luas. Selain itu, nilai GDP yang terukur melalui metoda Somogyi Nelson tidak jauh berbeda dengan nilai GDP yang terukur melalui glukotester elektrik. Oleh karena itu, untuk kepentingan uji statistik dari data-data yang diperoleh, maka data yang dianalisis dalam penelitian ini adalah data hasil pemeriksaan dengan metoda Somogyi Nelson. Pemeriksaan kadar GDP, baik dengan glukotester maupun dengan metoda Somogyi Nelson, dilakukan terhadap tikus yang sudah dipuasakan terlebih dahulu selama 12 jam. Penentuan kadar glukosa dengan metoda Somogyi Nelson didasarkan pada reaksi redoks antara gula pereduksi dengan ion tembaga serta reaksi redoks ion tembaga dengan ion molibdenum. Reaksi redoks antara gula pereduksi dengan ion tembaga berlangsung dalam suasana basa. Dalam suasana basa ion kompleks Cu 2+ akan membentuk Cu(OH) 2 yang mudah mengendap. Untuk mengatasi supaya tidak terbentuk endapan, maka ion Cu 2+ direduksi menjadi Cu + oleh gugus aldehid dari gula pereduksi dengan bantuan pemanasan. Hasil reaksi terlihat dengan munculnya endapan berwarna merah bata. Persamaan reaksi reduksi ion kompleks Cu 2+ oleh gugus aldehid dapat dilihat melalui persamaan (4.2) berikut: 46

7 O O R CH + 2OH R C OH + H 2 O + 2e 2Cu e 2Cu + 2Cu + + 2OH Cu 2 O + H 2 O R CHO + 2Cu OH R COOH + Cu 2 O + 2H 2 O (4.2) endapan merah bata Warna yang dihasilkan pada reaksi di atas memiliki intensitas yang sangat rendah untuk dapat diukur dengan spektrofotometer. Oleh karena itu ditambahkan reagen arsenomolibdat untuk meningkatkan intensitas warna senyawa yang akan diukur. Dalam suasana asam, ion Cu + akan kembali teroksidasi menjadi ion Cu 2+, sedangkan molibdenum dengan bilangan oksidasi (VI) akan tereduksi menjadi molibdenum dengan bilangan oksidasi (IV). Reaksi ini menghasilkan senyawa berwarna yang dapat diukur dengan spektrofotometer sinar tampak pada panjang gelombang 660 nm. Dipilihnya panjang gelombang ini karena serapan maksimum terjadi pada panjang gelombang tersebut. Konsentrasi molibdenum yang tereduksi sebanding dengan konsentrasi Cu 2 O, sedangkan konsentrasi Cu 2 O sebanding dengan konsentrasi senyawa gula pereduksi. (49) IV.5 Hasil Pemeriksaan Kadar GDP Perlakuan terhadap hewan uji dilakukan selama 21 hari, sehingga diperoleh data kadar GDP pasca induksi pada T 0, T 7, T 14 dan T 21. Data hasil pemeriksaan kadar GDP pra induksi, pasca induksi, baik pada T 0, T 7, T 14 maupun pada T 21 dapat dilihat pada Tabel IV.2. 47

8 Tabel IV.2. Data hasil pemeriksaan GDP hewan uji pra induksi dan pasca induksi pada T 0, T 7, T 14 dan T 21 Kelompok K.1 K.2 K.3 K.4 K.5 K.6 K.7 No Pra Induksi 87,68 80,81 102,54 94,93 Kadar Glukosa Darah Puasa (mg/dl) Pasca Induksi T 0 T 7 T 14 T 21 91,72 83,64 101,09 90,22 88,08 76,77 98,55 88,77 87,68 79,60 103,26 86,59 84,44 75,15 107,25 90,94 Rata-rata 91,49 91,66 88,04 89,28 89, ,08 80,40 84,04 82,83 638,30 549,36 619,15 537,02 651,49 637,02 645,53 594,04 662,13 649,79 665,11 635,32 Rata-rata 83,84 585,96 632,02 653, ,04 93,74 99,28 94,14 665,53 440,04 562,55 659,15 543,40 419,81 541,28 224,95 65,00 55,45 50,00 57,73 367,39 566,38 567,66 546,81 Rata-rata 92,80 581,82 432,36 57,05 512, ,81 91,31 84,04 89,70 674,04 640,00 679,57 636,60 452,84 221,97 356,66 271,88 95,29 123,19 97,46 72,32 543,40 538,30 540,85 236,50 Rata-rata 86,46 657,55 325,84 97,07 464, ,70 104,71 80,81 106,16 357,48 608,51 452,84 482,56 251,77 399,59 363,26 391,74 57,73 71,92 69,49 56,36 239,85 454,90 466,46 553,19 Rata-rata 95,34 475,35 351,59 63,88 428, ,89 80,40 110,51 97,10 581,28 637,87 622,55 481,32 348,40 374,82 425,59 274,12 77,58 52,73 100,00 143,84 466,05 545,53 371,93 316,62 Rata-rata 94,23 580,76 355,73 93,54 425, ,23 91,72 86,87 87,68 602,98 453,25 373,58 553,62 363,67 355,42 131,88 316,62 77,98 67,73 118,48 92,53 438,80 430,55 371,10 480,91 Rata-rata 94,37 495,86 291,90 89,18 430,34 Data hasil pemeriksaan kadar GDP pra induksi, pasca induksi, baik pada T 0, T 7, T 14 maupun pada T 21 tergambar lebih jelas pada Gambar IV.3 sampai Gambar IV.9. 48

9 Gambar IV.3. Perbandingan GDP tikus kelompok 1 pra induksi dan pasca induksi pada T 0, T 7, T 14 dan T 21 Gambar IV.4. Perbandingan GDP tikus kelompok 2 pra induksi dan pasca induksi pada T 0, T 7, T 14 dan T 21 49

10 Gambar IV.5. Perbandingan GDP tikus kelompok 3 pra induksi dan pasca induksi pada T 0, T 7, T 14 dan T 21 Gambar IV.6. Perbandingan GDP tikus kelompok 4 pra induksi dan pasca induksi pada T 0, T 7, T 14 dan T 21 50

11 Gambar IV.7. Perbandingan GDP tikus kelompok 5 pra induksi dan pasca induksi pada T 0, T 7, T 14 dan T 21 Gambar IV.8. Perbandingan GDP tikus kelompok 6 pra induksi dan pasca induksi pada T 0, T 7, T 14 dan T 21 51

12 Gambar IV.9. Perbandingan GDP tikus kelompok 7 pra induksi dan pasca induksi pada T 0, T 7, T 14 dan T 21 Berdasarkan data yang tertera pada Tabel IV.2 dan grafik pada Gambar IV.3 sampai Gambar IV.9 di atas, dapat dilihat bahwa pada kelompok 1 relatif tidak terdapat perubahan antara nilai GDP pra induksi dan pasca induksi, mengingat kelompok 1 ini merupakan kontrol negatif, yaitu kelompok yang tidak diinduksi dengan aloksan monohidrat. Akibatnya hingga pemeriksaan pada T 21, nilai GDP mereka relatif konstan dan berada pada kisaran normal, dengan rata-rata kadar GDP sebesar 89,98 mg/dl. Begitu juga yang terjadi pada semua hewan uji pada kelompok 2 sampai kelompok 7. Sebelum diinduksi dengan aloksan monohidrat, semua hewan uji pada kelompok-kelompok tersebut menunjukkan nilai GDP yang normal. Akan tetapi setelah diinduksi aloksan dengan dosis 125 mg/kgbb, terjadi kenaikan GDP yang cukup drastis. Nilai GDP hewan uji pada kelompok 2 semakin lama semakin tinggi. Pada T 0, T 7 dan T 14, rata-rata kadar GDP kelompok 2 berturut-turut adalah sebesar 585,96 mg/dl; 632,02 mg/dl; dan 653,09 mg/dl. Bahkan pada T 21 semua hewan uji pada kelompok ini mati karena kondisi hiperglikemia yang terlalu tinggi. Sebelumnya telah dijelaskan bahwa kelompok 2 merupakan kontrol positif, yaitu kelompok yang tidak diberi obat hipoglikemik apa pun setelah diinduksi dengan aloksan monohidrat, melainkan hanya diberi makan dan minum serta diberi Amidis 1 ml per oral setiap hari. Dengan demikian, dapat disimpulkan 52

13 bahwa pemberian Amidis tanpa pemberian obat hipoglikemik ini tidak mampu menurunkan kadar GDP pada hewan uji. Lain halnya yang terjadi pada kelompok 3 sampai kelompok 7. Telah disebutkan sebelumnya bahwa kelompok 3 merupakan kelompok pembanding, yaitu kelompok yang diberi salah satu obat hipoglikemik komersil yang sudah beredar di pasaran, yaitu metformin, setelah diinduksi dengan aloksan monohidrat. Sementara hewan uji pada kelompok 4 sampai kelompok 7 diberi ekstrak air buah tin dengan dosis yang berbeda-beda. Dan berdasarkan data yang diperoleh, semua hewan uji pada kelompok 3 sampai kelompok 7 menunjukkan kemiripan perubahan nilai GDP, baik pada T 0, T 7, T 14 maupun pada T 21. Sebelumnya telah disebutkan bahwa proses induksi aloksan pada hewan uji tikus menyebabkan terjadinya kenaikan nilai GDP yang drastis. Berdasarkan data yang diperoleh pada T 0, diketahui bahwa rata-rata kadar GDP hewan uji pada kelompok 3 sampai kelompok 7 berturut-turut sebesar 581,82 mg/dl; 657,55 mg/dl; 475,35 mg/dl; 580,76 mg/dl; dan 495,86 mg/dl. Akan tetapi setelah diberi perlakuan hingga T 7, nilai GDP hewan uji pada kelompok 3 sampai kelompok 7 mengalami penurunan dengan rata-rata kadar GDP berturut-turut sebesar 432,36 mg/dl; 325,84 mg/dl; 351,59 mg/dl; 355,73 mg/dl; dan 291,90 mg/dl. Nilai GDP tikus pada kelompok 3 sampai kelompok 7 kembali mengalami penurunan yang lebih signifikan lagi hingga T 14. Bahkan nilai GDP pada saat itu lebih rendah daripada nilai GDP pra induksi, dengan rata-rata kadar GDP tikus pada kelompok 3 sampai kelompok 7 pada T 14 berturut-turut sebesar 57,05 mg/dl; 97,07 mg/dl; 63,88 mg/dl; 93,54 mg/dl; dan 89,18 mg/dl. Namun, kadar GDP dari semua hewan uji pada kelompok 3 sampai kelompok 7 kembali mengalami kenaikan yang cukup drastis pada T 21, dengan rata-rata kadar GDP berturut-turut sebesar 512,06 mg/dl; 464,76 mg/dl; 428,60 mg/dl; 425,03 mg/dl; dan 430,34 mg/dl. Dengan demikian dapat disimpulkan bahwa pemberian obat hipoglikemik, baik metformin maupun ekstrak air buah tin terhadap hewan uji yang sudah diinduksi aloksan, efektif dilakukan sampai T

14 IV.5.1 Analisis Data Hasil Pemeriksaan GDP Pra Induksi Berdasarkan analisis varian oneway ANOVA, diperoleh nilai F hitung sebesar 0,890 dengan nilai sig 0,520. Nilai sig (0,520) > 0,05 sehingga pengujian tidak memberikan hasil yang signifikan, artinya ketujuh kelompok perlakuan pada waktu pra induksi menunjukkan nilai rata-rata kadar GDP yang tidak berbeda satu sama lainnya. Dan berdasarkan uji jarak berganda DUNCAN, diketahui bahwa semua kelompok berada pada satu grup yang sama. Artinya tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara kadar GDP dari ketujuh kelompok perlakuan yang diuji. IV.5.2 Analisis Data Hasil Pemeriksaan GDP pada T 0 Berdasarkan analisis varian oneway ANOVA, diperoleh nilai F hitung sebesar 24,533 dengan nilai sig 0,000. Nilai sig (0,000) < 0,05 sehingga pengujian memberikan hasil yang signifikan, artinya terdapat perbedaan nilai rata-rata kadar GDP di antara ketujuh kelompok perlakuan pada waktu T 0. Dan berdasarkan uji jarak berganda DUNCAN, diketahui terdapat tiga grup yang berbeda signifikan satu sama lain. Grup satu terdiri atas kelompok 1, yang menunjukkan nilai ratarata kadar GDP terendah pada waktu T 0. Di grup kedua ada kelompok 5, kelompok 7, kelompok 6, kelompok 3 dan kelompok 2. Sedangkan di grup ketiga ada kelompok 6, kelompok 3, kelompok 2 dan kelompok 4. Dengan demikian, kesimpulan yang dapat diambil dari hasil pengujian kadar GDP pada T 0 adalah: a. rata-rata kadar GDP tertinggi dihasilkan oleh kelompok 4 sebesar 657,55 mg/dl dan terendah dihasilkan oleh kelompok 1 sebesar 91,66 mg/dl; b. kelompok 1 berbeda signifkan dengan 6 kelompok lainnya; c. kelompok 5, kelompok 7, kelompok 6, kelompok 3 dan kelompok 2 tidak berbeda satu sama lainnya; d. kelompok 6, kelompok 3, kelompok 2 dan kelompok 4 tidak berbeda satu sama lainnya; e. kelompok 5 dan kelompok 7 keduanya berbeda signifikan dengan kelompok 6, kelompok 3, kelompok 2 dan kelompok 4; dan f. kelompok 4 berbeda signifikan dengan kelompok 5, kelompok 7, kelompok 6, kelompok 3 dan kelompok 2. 54

15 IV.5.3 Analisis Data Hasil Pemeriksaan GDP pada T 7 Berdasarkan analisis varian oneway ANOVA, diperoleh nilai F hitung sebesar 13,744 dengan nilai sig 0,000. Nilai sig (0,000) < 0,05 sehingga pengujian memberikan hasil yang signifikan, artinya terdapat perbedaan nilai rata-rata kadar GDP di antara ketujuh kelompok perlakuan pada waktu T 7. Dan berdasarkan uji jarak berganda DUNCAN, diketahui terdapat tiga grup yang berbeda signifikan satu sama lain. Grup satu terdiri atas kelompok 1, yang menunjukkan nilai ratarata kadar GDP terendah pada waktu T 7. Di grup kedua ada kelompok 7, kelompok 4, kelompok 5, kelompok 6 dan kelompok 3. Sedangkan di grup ketiga hanya ada kelompok 2. Dengan demikian, kesimpulan yang dapat diambil dari hasil pengujian kadar GDP pada T 7 adalah: a. rata-rata kadar GDP tertinggi dihasilkan oleh kelompok 2 sebesar 632,02 mg/dl dan terendah dihasilkan oleh kelompok 1 sebesar 88,04 mg/dl; b. kelompok 1 berbeda signifkan dengan 6 kelompok lainnya; dan c. kelompok 7, kelompok 4, kelompok 5, kelompok 6 dan kelompok 3 tidak berbeda satu sama lainnya dan berbeda signifikan dengan kelompok 1 maupun kelompok 2. IV.5.4 Analisis Data Hasil Pemeriksaan GDP pada T 14 Berdasarkan analisis varian oneway ANOVA, diperoleh nilai F hitung sebesar 468,608 dengan nilai sig 0,000. Nilai sig (0,000) < 0,05 sehingga pengujian memberikan hasil yang signifikan, artinya terdapat perbedaan nilai rata-rata kadar GDP di antara ketujuh kelompok perlakuan pada waktu T 14. Dan berdasarkan uji jarak berganda DUNCAN, diketahui terdapat empat grup yang berbeda signifikan satu sama lain. Grup satu terdiri atas kelompok 3 dan kelompok 5. Di grup kedua ada kelompok 5, kelompok 7, kelompok 1 dan kelompok 6. Di grup ketiga ada kelompok 7, kelompok 1, kelompok 6 dan kelompok 4. Sedangkan di grup empat hanya ada kelompok 2. Dengan demikian, berdasarkan pengujian kadar GDP pada T 14, dapat dinyatakan bahwa rata-rata kadar GDP tertinggi dihasilkan oleh kelompok 2 sebesar 653,08 mg/dl dan terendah dihasilkan oleh kelompok 3 sebesar 57,04 mg/dl. 55

16 IV.6 Penurunan Kadar GDP dari T 0 ke T 14 Tabel IV.3 menunjukkan penurunan nilai GDP pasca induksi yang terjadi pada semua hewan uji, antara pra perlakuan pada T 0 dan pasca perlakuan pada T 14. Berdasarkan data pada Tabel IV.3, terlihat bahwa pada kelompok 1 dan 2 relatif tidak terdapat perubahan antara GDP pada T 0 dan T 14, sedangkan pada kelompok 3 sampai kelompok 7 terlihat penurunan GDP yang sangat besar. Tabel IV.3. Data penurunan kadar GDP hewan uji pasca induksi pada T 0 (pra perlakuan) dan T 14 (pasca perlakuan) Kelompok No. Kadar GDP (mg/dl) T 0 T 14 ΔGDP (mg/dl) Rata-rata ΔGDP (mg/dl) K.1 kontrol negatif ,72 83,64 101,09 90,22 87,68 79,60 103,26 86,59 4,04 4,04 2,17 3,63 2,39 K.2 kontrol positif ,30 549,36 619,15 537,02 662,13 649,79 665,11 635,32 23,83 100,43 45,96 98,30 67,13 K.3 metformin 50 mg/kgbb ,53 440,04 562,55 659,15 65,00 55,45 50,00 57,73 600,53 384,59 512,55 601,42 524,77 K.4 ekstrak buah tin 25 mg/kgbb ,04 640,00 679,57 636,60 95,29 123,19 97,46 72,32 578,75 516,81 582,11 564,28 560,49 K.5 ekstrak buah tin 50 mg/kgbb ,48 608,51 452,84 482,56 57,73 71,92 69,49 56,36 299,75 536,59 383,35 426,20 411,47 K.6 ekstrak buah tin 100 mg/kgbb ,28 637,87 622,55 481,32 77,58 52,73 100,00 143,84 503,70 585,14 522,55 337,48 487,22 K.7 ekstrak buah tin 200 mg/kgbb ,98 453,25 373,58 553,62 77,98 67,73 118,48 92,53 525,00 385,52 255,10 461,09 406,68 Gambaran lebih jelas untuk penurunan GDP tiap kelompok dapat dilihat pada Gambar IV.10 sampai Gambar IV

17 Gambar IV.10. Perbandingan GDP kelompok 1 pasca induksi pada T 0 dan T 14 Gambar IV.11. Perbandingan GDP kelompok 2 pasca induksi pada T 0 dan T 14 Gambar IV.12. Perbandingan GDP kelompok 3 pasca induksi pada T 0 dan T 14 57

18 Gambar IV.13. Perbandingan GDP kelompok 4 pasca induksi pada T 0 dan T 14 Gambar IV.14. Perbandingan GDP kelompok 5 pasca induksi pada T 0 dan T 14 Gambar IV.15. Perbandingan GDP kelompok 6 pasca induksi pada T 0 dan T 14 58

19 Gambar IV.16. Perbandingan GDP kelompok 7 pasca induksi pada T 0 dan T 14 Berdasarkan data yang tertera pada Tabel IV.3 dan grafik pada Gambar IV.10 sampai IV.16 di atas, dapat dilihat bahwa penurunan kadar GDP yang terjadi secara drastis antara T 0 dan T 14 dialami oleh kelompok 3 sampai kelompok 7, dengan persentase penurunan rata-rata kadar GDP berturut-turut sebesar 90,20%; 85,24%; 86,56%; 83,89%; dan 82,02%. IV.7 Analisis Data Penurunan Kadar GDP dari T 0 ke T 14 Untuk melihat apakah penurunan kadar GDP dari ketujuh kelompok pengamatan berbeda signifikan atau tidak, terlebih dahulu dicari selisih kadar GDP antara T 0 dengan T 14, seperti yang dapat dilihat kembali pada Tabel IV.3. Dipilihnya T 14 ini adalah karena pada waktu tersebut rata-rata kadar GDP telah memenuhi persyaratan efek yang diinginkan. Berdasarkan analisis varian oneway ANOVA, diperoleh nilai F hitung sebesar 38,878 dan sig sebesar 0,000. Nilai sig (0,000) < 0,05 sehingga dapat disimpulkan bahwa penurunan kadar GDP ketujuh kelompok pengamatan berbeda signifikan. Dan berdasarkan uji jarak berganda DUNCAN, diketahui bahwa kelompok 2, sebagai kontrol positif, memiliki rata-rata penurunan kadar GDP yang negatif, artinya sejak saat induksi hingga hari ke-14 terjadi kenaikan GDP dengan rata-rata sebesar 67,13 mg/dl. Kelompok kontrol negatif memiliki rata-rata penurunan GDP hanya sebesar 2,38. 59

20 Dari analisis tersebut dapat disimpulkan bahwa semua kelompok perlakuan yang diberi ekstrak air buah tin, baik pada dosis 25 mg/kgbb, 50 mg/kgbb, 100 mg/kgbb maupun 200 mg/kgbb per oral dikategorikan dapat memberikan penurunan kadar GDP yang tidak berbeda signifikan dengan kelompok yang diberi obat pembanding metformin dengan dosis 50 mg/kgbb. Namun terdapat perbedaan yang signifikan antara penurunan kadar GDP pada kelompok 7 dengan kelompok 4. Perbedaan yang signifikan terdapat pula di antara kelompok 5 dan kelompok 4. Penurunan kadar GDP tertinggi diberikan oleh kelompok 4 yang diberi ekstrak air buah tin dengan dosis 25 mg/kgbb per oral. Penurunan kadar GDP pada kelompok ini mempunyai rata-rata sebesar 560,49 mg/dl dan lebih tinggi daripada kelompok 3, sebagai kelompok pembanding yang diberi metformin dengan dosis 50 mg/kgbb per oral, dengan rata-rata penurunan GDP sebesar 524,77 mg/dl. Kelompok 6 yang diberi ekstrak air buah tin sebesar 100 mg/kgbb memberikan rata-rata penurunan kadar GDP yang mendekati rata-rata penurunan kadar GDP pada kelompok 3 sebagai pembanding, dengan rata-rata penurunan kadar GDP sebesar 487,22 mg/dl. Angka ini tidak berbeda signifikan dengan rata-rata penurunan kadar GDP yang diberikan oleh kelompok 3 sebagai kelompok pembanding. Perbandingan rata-rata penurunan kadar GDP dari semua kelompok hewan uji ini lebih jelas terlihat melalui grafik pada Gambar IV.17. Gambar IV.17. Perbandingan rata-rata penurunan kadar glukosa darah puasa kelompok hewan uji 60

21 Dengan demikian, secara umum dapat disimpulkan bahwa ekstrak air buah tin dapat menurunkan kadar GDP, baik pada dosis 25 mg/kgbb, 50 mg/kgbb, 100 mg/kgbb maupun 200 mg/kgbb per oral. Hasil secara keseluruhan menunjukkan bahwa penurunan kadar GDP yang ditunjukkan oleh keempat dosis ekstrak tin tersebut tidak berbeda nyata dengan penurunan kadar GDP yang ditunjukkan oleh kelompok 3 yang diberi obat pembanding berupa metformin dengan dosis 50 mg/kgbb per oral. Namun, ekstrak air buah tin dengan dosis 25 mg/kgbb per oral memberikan penurunan yang lebih tinggi dari kelompok 3 tersebut. Dosis ekstrak air buah tin di atas 25 mg/kgbb per oral memberikan nilai penurunan kadar GDP yang lebih rendah. Sehingga dosis ekstrak air buah tin 25 mg/kgbb per oral adalah dosis terbaik untuk menurunkan kadar GDP dalam waktu 14 hari. Berdasarkan uraian di atas, diketahui bahwa pola fluktuasi kadar GDP pada semua kelompok pengujian yang diberi ekstrak air buah tin mirip dengan kelompok pembanding yang diberi metformin. Dengan demikian, dapat diduga bahwa mekanisme kerja senyawa aktif antidiabetes yang terkandung dalam ekstrak air buah tin adalah melalui peningkatan sensitivitas terhadap insulin dengan cara menurunkan kadar glukosa darah dengan memperbaiki transport glukosa ke dalam sel otot yang dirangsang oleh insulin, memperbaiki ambilan glukosa, menurunkan produksi glukosa hati dengan jalan mengurangi glikolisis dan glukoneogenesis dan meningkatkan jumlah reseptor insulin. 61