KATA PENGANTAR Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, karena atas berkat rahmat-nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul Pengembangan Metode Penetapan Kadar Flavonoid Total Dalam Simplisia Umbi Ubi Jalar Ungu (Ipomoea Batatas L.) Menggunakan Lapis Tipis Spektrofotodensitometri dengan baik, sebagai syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm) di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana. Penyusunan skripsi ini tidak terlepas dari bimbingan, saran dan dukungan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada semua pihak yang telah memberikan bantuan baik secara langsung maupun tidak langsung, yaitu kepada: 1. Ida Sang Hyang Widhi Wasa yang selalu memberikan kesehatan, petunjuk dan Berkat-Nya kepada penulis mulai awal hingga akhir sehingga skripsi ini selesai dengan baik dan tepat waktu. 2. Bapak Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si., selaku Dekan Fakultas - Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana. 3. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt., selaku Ketua Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana dan selaku dosen pembimbing II yang dengan penuh perhatian telah memberikan motivasi, semangat, bimbingan dan saran dalam penyusunan skripsi ini. iii
4. Luh Putu Mirah Kusuma Dewi SF., M.Sc.,Apt., selaku dosen pembimbing I yang dengan penuh perhatian telah memberikan motivasi, semangat, bimbingan dan saran dengan sabar selama penulis mengikuti pendidikan di Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana, khususnya dalam penyusunan skripsi ini. 5. Seluruh dosen dan staf pegawai di Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah memberikan bantuan kepada penulis selama penyusunan skripsi ini. 6. Keluarga yaitu orang tua yang sangat saya cintai dan hormati, I Wayan Sudarma dan Ni Putu Nadi serta kakak kandung saya I Agus Darmadi Putra dan Arlan Pramana Nanda yang telah mendoakan dan memberi motivasi dalam penyusunan skripsi ini. 7. Semua sahabat sabahat tersayang, Kak Tata, Dek Pueteri, Dewi Oktavianti, Agastya aparigraha, Sulys Wintari, dan Inggrid Wage yang selalu menemani selama penelitian. 8. Keluarga besar Analisis Farmasi Udayana, para dosen serta laboran yang selalu memberikan motivasi dan semangat saat penulis menghadapi kesulitan. 9. Seluruh rekan mahasiswa Dioscuri Hygeia angkatan 2012 dan Vanadium Spectra Analisis 2012 yang saya cintai tim seperjuangan penulis, khusunya tim Purple Sweet Potato (PSP) yaitu Gung Rias, Sonia, Claudia, Krisnawan, Dewa dan Made, serta Mbok Dwi dan Bu Nova yang banyak membantu dan memberikan semangat dalam penyusunan skripsi ini. iv
10. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih belum sempurna, untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang memerlukan. Bukit Jimbaran, Juni 2016 Penulis v
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... i LEMBAR PENGESAHAN... ii KATA PENGANTAR... iii DAFTAR ISI... vi DAFTAR TABEL... ix DAFTAR GAMBAR... x DAFTAR SINGKATAN... xi DAFTAR ISTILAH... xii DAFTAR LAMPIRAN... xiii ABSTRAK... xiv ABSTRACT... xv BAB I PENDAHULUAN... 1 1.1 Latar Belakang... 1 1.2 Rumusan Masalah... 4 1.3 Tujuan Penelitian... 4 1.4 Manfaat Penelitian... 5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA... 5 2.1 Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas L.)... 5 2.1.1 Klasifikasi Tanaman... 5 2.1.2 Deskripsi Tanaman... 5 2.1.3 Kandungan Kimia... 6 2.1.4 Khasiat Umbi Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas L.)... 6 2.2 Flavonoid... 7 2.2.1 Definisi dan Jenis Flavonoid... 7 2.2.2 Ekstraksi Flavonoid... 8 2.2.3 Kadar Flavonoid Total... 10 2.3 Pemanfaatan Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 12 2.4 Validasi Metode Analisis... 14 BAB III METODOLOGI PENELITIAN... 17 vi
3.1 Rancangan Penelitian... 17 3.2 Lokasi dan waktu Penelitian... 17 3.3 Alat dan Bahan Penelitian... 18 3.3.1 Alat Penelitian... 18 3.3.2 Bahan Penelitian... 18 3.4 Prosedur Penelitian... 18 3.4.1 Determinasi Tanaman... 18 3.4.2 Preparasi Sampel... 19 3.4.3 Preparasi Larutan Standar... 19 3.4.4 Optimasi Waktu dan Kestabilan Reaksi... 20 3.4.5 Validasi Metode Spektrofotometri UV-Vis... 20 3.4.6 Pengukuran dan Perhitungan Kadar Flavonoid Total pada Sampel dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis. 22 3.4.7 Pengembangan Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 23 3.5 Analisis Data... 24 3.6 Skema Umum Penelitian... 24 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN... 25 4.1 Sampel... 25 4.1.1 Determinasi Tanaman... 25 4.1.2 Hasil Penetapan Susut Pengeringan... 25 4.2 Optimasi Waktu Reaksi Flavonoid dengan Pereaksi AlCl 3... 26 4.3 Penetapan Kadar Flavonoid Total dan Uji Validasi dengan Spektrofotometri UV-Vis... 27 4.4 Pengembangan Metode Penetapan Kadar Flavonoid Total dan Uji Validasi Menggunakan Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 30 4.5 Korelasi Hasil Penetapan Kadar Flavonoid Total Sampel Umbi Ubi Jalar Ungu Menggunakan Spektrofotometri Uv-Vis dan Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 33 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN... 36 vii
5.1 Kesimpulan... 36 5.2 Saran... 36 DAFTAR PUSTAKA... 37 viii
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 2.1 Penafsiran Spektrum Pereaksi Geser... 9 Tabel 3.1 Perhitungan Standar Deviasi... 24 Tabel 4.1 Hasil Susut Pengeringan Serbuk Umbi Ubi Jalar Ungu... 25 Tabel 4.2 Hasil Presisi Standar Rutin pada Metode Spektrofotometri UV- Vis... 27 Tabel 4.3 Hasil Persentase Perolehan Kembali pada Spektrofotometri UV- Vis... 29 Tabel 4.4 Hasil Penetapan Kadar Flavonoid Total dalam Sampel Umbi Ubi Jalar Ungu pada Metode Spektrofotometri UV-Vis... 30 Tabel 4.5 Hasil Presisi Standar Rutin pada Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 31 Tabel 4.6 Hasil Persentase Perolehan Kembali pada Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 33 Tabel 4.7 Hasil Penetapan Kadar Flavonoid Total dalam Sampel Umbi Ubi Jalar Ungu pada Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 33 Tabel 4.8 Hasil Validasi Metode Spektrofotometri UV-Vis dan Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 35 ix
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 2.1 Ubi Jalar Ungu... 7 Gambar 2.2 Struktur Dasar Flavonoid... 7 Gambar 2.3 Mikrokuvet... 12 Gambar 2.4 Contoh Prosedur Penelitian Menggunakan Lapis Tipis Densitometri untuk Evaluasi Antioksidan... 13 Gambar 2.5 Spektrum DPPH Setelah Ditambah Sampel pada Panjang Gelombang 530 nm... 14 Gambar 3.1 Skema Kerja Penelitian Secara Garis Besar... 26 Gambar 4.1 Kurva Optimasi Waktu Reaksi Senyawa Flavonoid dengan Pereaksi AlCl 3... 27 Gambar 4.2 Kurva Kurva Uji Linieritas Standar Rutin pada Metode Spektrofotometri UV-Vis... 29 Gambar 4.3 Kurva Uji Linieritas Standar Rutin pada Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 33 Gambar 4.4 Kurva Korelasi Kadar Total Flavonoid antara Metode Spektrofotometri UV-Vis dengan Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 35 x
DAFTAR SINGKATAN AlCl 3 AUC FHI LOD LOQ NaOAc nm RSD UV-Vis : Aluminium klorida : Area Under Curve : Farmakope Herbal Indonesia : Limit of detection (batas terkecil analit yang dapat dideteksi) : Limit of quantification (batas terkecil analit yang dapat dihitung) : Natrium asetat : Nano meter : Relative Standard Deviation : Ultraviolet visible xi
DAFTAR ISTILAH Aglikon : Bagian bukan gula dari suatu glikosida Autosampler : Pengambilan sampel secara otomatis Densitometer : Alat yang digunakan untuk analisis plat kromatografi lapis tipis. Ekstrak : Sediaan kering, kental, atau cair dibuat dengan menyari simplisia nabati atau hewani menurut cara yang cocok, diluar pengaruh cahaya matahari langsung. Glikon : Bagian gula dari suatu glikosida Magnetik stirer : Alat pengaduk dengan menggunakan kekuatan magnet yang berputar. Mikrokuvet : Wadah untuk menampung larutan yang akan dianalisis pada alat spektrotometri UV- Vis. Quality control : Pengawasan kualitas suatu produk. Rotary vacuum evaporator : Alat yang digunakan untuk memekatkan larutan dengan Prinsip menguapkan pelarut berdasarkan tekanan. Sonikator : Alat yang memiliki energi ultrasonik untuk memisahkan partikel partikel yang menempel pada sampel. xii
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Hasil Determinasi... 41 Lampiran 2. Certificate of Analysis Standar Rutin... 43 Lampiran 3. Perhitungan Campuran Pereaksi Aluminium Klorida... 44 Lampiran 4. Skema Penotolan pada Plat Lapis Tipis... 45 Lampiran 5. Hasil Optimasi Waktu Reaksi Senyawa Flavonoid dengan AlCl 3... 46 Lampiran 6. Perhitungan Kadar Flavonoid Total pada Spektrofotometri UV- Vis... 47 Lampiran 7. Perhitungan Parameter Presisi pada Metode Spektrofotometri UV-Vis... 48 Lampiran 8. Perhitungan Parameter LOD dan LOQ pada Metode Spektrofotometri UV-Vis... 49 Lampiran 9. Perhitungan Kadar Flavonoid Total pada Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 50 Lampiran 10. Perhitungan Parameter Presisi pada Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 51 Lampiran 11. Perhitungan Parameter LOD dan LOQ pada Metode Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 52 Lampiran 12. Perhitungan Hasil Korelasi Penetapan Kadar Flavonoid Total pada Metode Spektrofotometri UV-Vis dan Lapis Tipis Spektrofotodensitometri... 53 xiii