LAMPIRAN 1 HASIL ANALISA

LAMPIRAN 1 HASIL ANALISA L1.1 CRUDE GLISEROL L1.2 GLISEROL MURNI Gambar L1.1 Hasil Kromatografi GC Crude Gliserol Gambar L1.2 Hasil Kromatografi GC Gliserol Murni 60

L1.3 HASIL FERMENTASI Gambar L1.3 Hasil Fermentasi Gliserol 1 hari, 37 0 C, 10 % Gambar L1.4 Hasil Fermentasi Gliserol 3 hari, 25 0 C, 10 % 61

Gambar L1.5 Hasil Fermentasi Gliserol 2 hari, 37 0 C, 10 % Gambar L1.6 Hasil Fermentasi Gliserol 3 hari, 37 0 C, 5 % 62

Gambar L1.7 Hasil Fermentasi Gliserol 3 hari, 37 0 C, 10 % Gambar L1.8 Hasil Fermentasi Gliserol 3 hari, 37 0 C, 7 % 63

L1.4 KADAR GLISEROL SETELAH FERMENTASI No Variabel Kadar Waktu Volume Suhu Fermentasi (%) Fermentasi (hari) Bakteri (%) ( 0 C) 1 1 5 25 (suhu kamar) 0 2 1 5 37 0 3 1 7 25 (suhu kamar) 0 4 1 7 37 0 5 1 10 25 (suhu kamar) 0 6 1 10 37 0 7 2 5 25 (suhu kamar) 0 8 2 5 37 0 9 2 7 25 (suhu kamar) 0 10 2 7 37 0 11 2 10 25 (suhu kamar) 0 12 2 10 37 0 13 3 5 25 (suhu kamar) 0 14 3 5 37 0 15 3 7 25 (suhu kamar) 0 16 3 7 37 0 17 3 10 25 (suhu kamar) 0 18 3 10 37 0 64

LAMPIRAN 2 PERHITUNGAN L2.1 CRUDE GLISEROL L2.1.1 Densitas Berat piknometer = 15,72 gram Berat piknometer + air = 25,39 gram Massa air = 9,67 gram Suhu air dan sampel = 30 0 C ρρair (30 0 C) = 0,99568 gr/cm 3 Volume Piknometer= m Air ρ Air Dimana: Densitas = m Sampel Volume Piknometer m air = Berat air (gr) ρ air = Densitas air (gr/cm 3 ) Volume Piknometer= 9,67 gr 0,99568 gr/cm 3 Volume Piknometer=9,712 cm 3 Berat piknometer + gliserol = 27,76 gram Berat gliserol = 12,04 gram 12,04 gr Densitas = 9,712 cm 3 Densitas = 1,24 gr cm 3 L2.1.2 Kadar Air Berat cawan kosong = 34,70 gram Berat cawan kosong + sampel (berat sebelum dipanaskan )= 44,70 gram Berat sesuda dipanaskan = 43,52 gram 65

Kadar Air= 44,70 gr-43,52 gr 44,70 gr x 100 % Kadar Air= 2,64 % L2.1.3 Kadar Abu Berat sampel = 10 gram Berat cawan = 44,51 gram Berat cawan + abu = 45,61 gram ( berat cawan + berat abu) berat cawan Kadar Abu = x100% berat sampel Kadar Abu= 45,61-44,51 10 x 100 % Kadar Abu=11 % L2.1.4 Kadar Free Fatty Acid (FFA) Normalitas NaOH = 0,1 N Volume NaOH titrasi = 5,6 ml Massa sampel = 20 gr FFA= Normalitas NaOH x Volume NaOH yang terpakai x BM Gliserol Massa Sampel x 10 x 100 % FFA= 0,1 x 5, 6 ml x 92,11 20 x 10 FFA= 25,79 % x 100 % L2.2 GLISEROL HASIL PEMURNIAN DENGAN H 3 PO 4 L2.2.1 Densitas Berat piknometer = 15,1 gram Berat piknometer + air = 25 gram Massa air = 9,9 gram Suhu air dan sampel = 30 0 C 66

Ρair (30 0 C) = 0,99568 gr/cm 3 Dimana: m air = Berat air (gr) ρ air = Densitas air (gr/cm 3 ) Volume Piknometer= m Air ρ Air m Sampel Densitas = Volume Piknometer 9,9 gr Volume Piknometer= 0,99568 gr/cm 3 Volume Piknometer=9,94 cm 3 Berat piknometer + gliserol = 27,8 gram Berat gliserol = 12,7 gram Densitas = 12,7 gr 9,94 cm 3 Densitas = 1,277 gr cm 3 L2.2.2 Kadar Air Berat cawan kosong = 28,50 gram Berat cawan kosong + sampel (berat sebelum dipanaskan )= 38,50 gram Berat sesudah dipanaskan = 38,0 gram Kadar Air= 38,5 gr-38 gr 38,5 gr x 100 % Kadar Air= 1,298 % L2.2.3 Kadar Abu 67

Berat sampel = 10 gram Berat cawan = 112, 1 gram Berat cawan + abu = 112,7 gram ( berat cawan + berat abu) berat cawan Kadar Abu = x100% berat sampel Kadar Abu= 112,7-112,1 10 Kadar Abu=6 % x 100 % L2.2.4 Kadar Free Fatty Acid (FFA) Normalitas NaOH = 0,1 N Volume NaOH titrasi = 1,7 ml Massa sampel = 20 gram FFA= Normalitas NaOH x Volume NaOH yang terpakai x BM Gliserol Massa Sampel x 10 x 100 % FFA= 0,1 x 1,7 ml x 92,11 20 x 10 FFA= 7,83 % x 100 % L2.3 KADAR GLISEROL SETELAH FERMENTASI Kadar Gliserol (%)= T1-T2 x N x 9,209 W [34] dengan; T1 = volume NaOH untuk titrasi contoh (ml) T2 = volume NaOH untuk titrasi blangko (ml) N = normalitas NaOH (N) W = bobot contoh (gram) Faktor gliserol = 9,209 T2 = 0,05 ml N = 0,5 N ; W = 0,5 gram 68

Tabel L2.1 Hasil Titrasi Sampel Hasil Fermentasi No Waktu Fermentasi (hari) Variabel Volume Bakteri (%) Suhu Fermentasi ( 0 C) T1 (ml) 1 1 5 25 (suhu kamar) 0,05 2 1 5 37 0,05 3 1 7 25 (suhu kamar) 0,05 4 1 7 37 0,05 5 1 10 25 (suhu kamar) 0,05 6 1 10 37 0,05 7 2 5 25 (suhu kamar) 0,05 8 2 5 37 0,05 9 2 7 25 (suhu kamar) 0,05 10 2 7 37 0,05 11 2 10 25 (suhu kamar) 0,05 12 2 10 37 0,05 13 3 5 25 (suhu kamar) 0,05 14 3 5 37 0,05 15 3 7 25 (suhu kamar) 0,05 16 3 7 37 0,05 17 3 10 25 (suhu kamar) 0,05 18 3 10 37 0,05 Kadar Gliserol (%)= (0,05-0,05)x 0,5 x 9,209 0,5 Kadar gliserol = 0 % L2.4 PERHITUNGAN KONSENTRASI 1,3-PROPANADIOL 69

Konsentrasi (mol/ml) = dimana : ρ camp = densitas campuran (gr/ml) ρ camp x 10 x % BM % = kemurnian 1,3-Propanadiol BM = berat molekul 1,3-Propanadiol (gr/mol) Perhitungan densitas campuran dapat dihitung dengan rumus : Σ ρρ x % Contoh perhitungan konsentrasi 1,3-Propanadiol pada fermentasi 1 hari dengan suhu 37 dan Rasio Inokulum : Substrat 0,1 : Diketahui : ρ asam laktat =1,209 gr/ml ; % asam laktat = 8,596 % ρ 3-hidroksipdhd =1,016 gr/ml ; % 3-hidroksipdhd = 2,037 % ρ asam butirat =0,964 gr/ml ; % asam butirat = 23,499 % ρ 2,3-butanadiol =1,002 gr/ml ; % 2,3-butanadiol = 18,960 % ρ 1,3-propanadiol =1,053gr/ml ; % 1,3-propanadiol = 46,068 % Densitas campuran : ρ camp = Σ ρρ x % =(ρ asam laktat x % asam laktat ) + (ρ 3-hidroksipdhd x % 3-hidroksipdhd ) + (ρ asam butirat x % asam butirat ) + (ρ 2,3-butanadiol x % 2,3-butanadiol ) + (ρ 1,3-propanadiol x % 1,3-propanadiol ) = (1,209 x 0,08596) + (1,016 x 0,02037) + (0,964 x 0,23499) + (1,002 x 0,18960) + (1,053 x 0,46068) = 1,023 gr/ml Sehingga konsentrasi 1,3-Propanadiol : Konsentrasi 1,3-Propanadiol (mol/ml) = ρ camp x 10 x % BM Konsentrasi 1,3-Propanadiol = 1,023 gr/ml x 10 x 46,0685 = 6,196 mol/ml 76,11 gr/mol Tabel L2.2 Hasil Perhitungan Konsentrasi 1,3-Propanadiol dari Fermentasi Gliserol Pada Suhu 37 dan Rasio Inokulum : Substrat 0,1 70

Waktu (hari) Kemurnian 1,3-Propanadiol (%) Densitas Campuran (gr/ml) Berat Molekul (gr/mol) Konsentrasi (mol/ml) 1 46,0685 1,0236 6,196 2 32,6744 1,0148 76,11 4,357 3 27,7948 1,0441 3,813 Tabel L2.3 Hasil Perhitungan Konsentrasi 1,3-Propanadiol dari Fermentasi Gliserol Pada Suhu 37 dan Waktu Fermentasi 3 Hari Rasio Inokulum : Substrat Kemurnian 1,3-Propanadiol (%) Densitas Campuran (gr/ml) Berat Molekul (gr/mol) Konsentrasi (mol/ml) 0,05 29,5197 1,0321 4,003 0,07 31,5919 1,0240 76,11 4,251 0,10 27,7948 1,0441 3,813 Tabel L2.4 Hasil Perhitungan Konsentrasi 1,3-Propanadiol dari Fermentasi Gliserol Pada Waktu Fermentasi 3 Hari dan Rasio Inokulum : Substrat 0,1 Suhu ( ) Kemurnian 1,3-Propanadiol (%) Densitas Campuran (gr/ml) Berat Molekul (gr/mol) Konsentrasi (mol/ml) 25 51,2461 0,9554 76,11 6,433 37 27,79483 0,7921 2,893 LAMPIRAN 3 71

DOKUMENTASI PENELITIAN L3.1 FOTO CRUDE GLISEROL Gambar L3.1 Crude Gliserol L3.2 FOTO CRUDE GLISEROL DENGAN PENAMBAHAN H 3 PO 4 Gambar L3.2 Hasil Penambahan Asam Phospat L3.3 FOTO GARAM HASIL PEMURNIAN GLISEROL 72

Gambar L3.3 Garam yang Terbentuk Pada Proses Pemurnian Crude Gliserol L3.4 FOTO GLISEROL MURNI Gambar L3.4 Gliserol Murni L3.5 FOTO AUTOCLAVE Gambar L3.5 Autoclave L3.6 FOTO STERILISASI MEDIA PERTUMBUHAN 73

Gambar L3.6 Proses Sterilisasi Media Pertumbuhan L3.7 FOTO INOKULASI BAKTERI Gambar L3.7 Proses Inokulasi Bakteri L3.8 FOTO PEMBIAKAN BAKTERI DALAM WATER BATCH Gambar L3.8 Pembiakan Bakteri Dalam Water Batch L3.9 FOTO PROSES PENGENCERAN 10 8 74

Gambar L3.9 Pengenceran 10 8 L3.10 FOTO PERHITUNGAN KOLONI DENGAN COLONI COUNTER Gambar L3.10 Perhitungan Jumlah Koloni dengan Coloni Counter L3.11 FOTO HASIL TITRASI PENENTUAN KADAR GLISEROL Gambar L3.11 Hasil Titrasi Penentuan Kadar Gliserol L3.12 FOTO DISTILASI HASIL FERMENTASI 75

Gambar L3.12 Proses Distilasi L3.13 FOTO 1,3-PROPANADIOL Gambar L3.13 (a) (b) a) 1,3-Propanadiol sebelum proses Distilasi b) 1,3 Propanadiol setelah proses Distilasi 76