Lampiran 1. Gambar tumbuhan gambas (Luffa cutangula L. Roxb.) Gambar 1. Tumbuhan gambas (Luffa acutangula L. Roxb.) Gambar 2. Biji Tumbuhan Gambas (Luffa acutangula L. Roxb.)
Lampiran 2. Gambar Mikroskopik dari Irisan Melintang Biji Tumbuhan Gambas (Luffa acutangula L. Roxb.) 1 2 3 4 5 6 7 8 Keterangan : 1. Sel gabus 2. Sklerenkim 3. Palisade 4. Parenkim 5. Endosperm 6. Kotiledon 7. Butir-butir aleuron 8. Tetesan minyak
Lampiran 3. Karakterisasi dan Uji Pendahuluan Senyawa Kimia Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia dari Biji Tumbuhan Gambas (Luffa acutangula L. Roxb.). No Penetapan Kadar 1 Kadar sari yang larut dalam air 11,93% 2. Kadar sari yang larut dalam etanol 21,80% 3. Kadar abu total 4,61% 4. Kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,04% 5. Kadar air 4,63% Tabel 3. Hasil Uji Pendahuluan Senyawa Kimia dari Biji Tumbuhan Gambas (Luffa acutangula L. Roxb.) No Pemeriksaan Hasil 1 Alkaloida + 2 Steroida/triterpenoida + 3 Saponin + 4. Tanin - 5. Flavonoid - 6. Glikosida + Keterangan : (+) = Memberikan hasil (-) = Tidak memberikan hasil
Lampiran 4. Bagan Kerja Pembuatan Ekstrak Biji Gambas Simplisia (Luffa acutangula L. Roxb) Maserasi dengan n-heksana Maserat Ampas maserasi dengan etanol 96% Maserat Ampas Ekstrak etanol Dipekatkan dengan penguapan vakum putar pada suhu 40 o C
Lampiran 5. Bagan Isolasi senyawa saponin dari ekstrak etanol Ekstrak Etanol di kromatografi kolom dengan fase gerak kloroform-metanol (7:3) dan fase diam silika gel 60 mesh 0,063-0,200. di KLT degan fase gerak kloroformmetanol (7:3), fase diam silika gel GF 254. Fraksi 1 Fraksi 2 Fraksi 3 Fraksi 4 Fraksi 5 Fraksi 6 Fraksi 7 Fraksi 8 di KLT preparatif di KLT 2 arah dengan fase gerak I: kloroformdengan fase gerak metanol (7:3), fase gerak II: n-heksana-etil n-heksana-etil asetat (3:7), fase diam silika gel GF 254 asetat (3:7) Isolat murni Pita I Pita II Pita III dikarakterisasi di KLT 2 arah dengan fase ge rak I: kloroformmetanol (7:3), fase gerak II: n-heksana-etil asetat (3:7), fa se diam silika gel GF 254 Isolat murni dikarakterisasi UV IR UV IR
Lampiran 6. Kromatogram KLT Ekstrak Etanol dari Biji Tumbuhan Gambas (Luffa acutangula Roxb. L.) n-heksana-etil asetat Kloroform-metanol 8:2 7:3 6:4 9:1 8:2 7:3 6:4 5:5 Keterangan : Fase diam plat lapis tipis silika gel GF 254 Penampak bercak LB. c = coklat, cl = coklat lemah, kc = kuning coklat, mu = merah ungu, muc = merah ungu coklat, ul = ungu lemah, uc = ungu coklat, k = kuning. tp = titik penotolan bp = batas pengembangan
Lampiran 7. Kromatogram Hasil Kromatografi Kolom ekstrak etanol bp... tp F1 F2 F3 F4 F5 F6 F7 F8 Keterangan: Fase diam plat pra lapis silika gel GF 254 Fase gerak = kloroform-metanol (70:30) Penampak bercak = asam sulfat 50% dalam metanol c = coklat, cl = coklat lemah, ct = coklat tua, k = kuning, kc = kuning coklat, mu = merah ungu, ul = ungu lemah. tp = titik penotolan bp = batas pengembangan F1 = fraksi 1 (vial 1-27), F2 = fraksi 2 (vial 28-33), F3 = fraksi 3 (vial 34-48), F4 = fraksi 4 (vial 49-56), F5 = fraksi 5 (vial 57-72), F6 = fraksi 6 (vial 73-88), F7 = fraksi 7 (vial 89-106), F8 = fraksi 8 (107-110).
Lampiran 8. Kromatogram hasil KLT Fraksi 1 dengan Berbagai Fase Gerak n-heksana-etil asetat (3:7) Fase gerak Toluol-etil asetat (1:1) bp... tp Keterangan : Fase diam silika gel GF 254 Penampak bercak LB mu = merah ungu tp = titik penotolan bp = batas pengembangan
Lampiran 9. Gambaran Kromatogram KLT Preparatif Fraksi 1 bp... I II III tp Keterangan : Fase diam silika gel GF 254 Penampak bercak LB fase gerak = n-heksan-etil asetat (3:7) mu = merah ungu. tp = titik penotolan bp = batas pengembangan
Lampiran 10. Kromatogram KLT 2 Arah Isolat 1 bp... A1 tp A2 bp Keterangan : Fase diam silika gel GF 254 Penampak bercak LB Fase gerak I = kloroform-metanol (7:3) Fase gerak II = n-heksana-atil asetat (3:7) mu = merah ungu. tp = titik penotolan bp = batas pengembangan A1 = arah pengembangan pertama A2 = arah pengembangan kedua
Lampiran 11. Kromatogram KLT 2 Arah Isolat 4 bp... A1 tp A2 bp Keterangan : Fase diam silika gel GF 254 Penampak bercak LB Fase gerak I = kloroform-metanol (7:3) Fase gerak II = n-heksana-etil asetat (3:7) mu = merah ungu tp = titik penotolan bp = batas pengembangan A1 = arah pengembangan pertama A2 = arah pengembangan kedua
Lampiran 12. Spektrum Ultraviolet Isolat 1 230 nm S e r a p a n Panjang gelombang (nm) Gambar 3. Spektrum Ultraviolet Isolat 1
Lampiran 13. Spektrum Ultraviolet Isolat 4 232 nm S e r a p a n Panjang gelombang (nm) Gambar 4. Spektrum Ultraviolet Isolat 4
Lampiran 14. Spektrum Inframerah Isolat 1 % T r a n s m i t a n (%T) Bilangan gelombang (cm -1 ) Gambar 6. Spektrum Inframerah Isolat 1
Lampiran 15. Spektrum Inframerah Isolat 4 % T r a n s m i t a n (%T) Bilangan gelombang (cm -1 ) Gambar 7. Spektrum Inframerah Isolat 4
Lampiran 16. Perhitungan Kadar Karakterisasi Simplisia 1. Penetapan kadar Air I. Berat simplisia = 5,002 g Volume air I = 2,0 ml Volume air II = 2,2 ml % kadar air 2,2ml 2,0ml = 100 0 0 0 = 3, 998 0 5,002g II. Berat simplisia = 5,043 g Volume air I = 2,2 ml Volume air II = 2,4 ml % kadar air 2,4ml 2,2ml = 100 0 0 0 = 3, 966 0 5,043g III. Berat simplisia = 5,072 g Volume air I = 2,4 ml Volume air II = 2,7 ml % kadar air 2,7ml 2,4ml = 100 0 0 0 = 5, 915 0 5,072g (3,998 + 3,966 + 5,915)% % kadar rata-rata = = 4,626 0 0 3 2. Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air I. Berat simplisia = 5,001 g Berat sari = 0,121 g % kadar sari air 0,121g 100 = 100% = 12,097% 5,001g 20 II. Berat simplisia = 5,000 g Berat sari = 0,120 g % kadar sari air 0,120g 100 = 100% = 12% 5,000g 20 III. Berat simplisia = 4,999 g Berat sari = 0,117 g 0,117g 100 % kadar sari air = 100% = 11,702% 4,999g 20 (12,097 + 12 + 11,702)% % kadar rata-rata = = 11,933 0 0 3
3. Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol I. Berat simplisia = 4,999 g Berat sari = 0,212 g % kadar sari 0,212g 100 = 100% = 21,204% 4,999g 20 II. Berat simplisia = 5,000 g Berat sari = 0,220 g % kadar sari 0,220g 100 = 100% = 22,0% 5,000g 20 III. Berat simplisia = 4,998 g Berat sari = 0,222 g % kadar sari 0,222g 100 = 100% = 22,209% 4,998 20 (21,204 + 22,0 + 22,209)% % kadar rata-rata = = 21,804 0 0 3 4. Penetapan kadar Abu Total I. Berat simplisia = 2,6979 g Berat abu = 0,1188 g 0,1188g % kadar abu total = 100 0 0 0 = 4, 40 0 2,6979g II. Berat simplisia = 2,1438 g Berat abu = 0,1025 g 0,1025g % kadar abu total = 100 0 0 0 = 4, 78 0 2,1438g III. Berat simplisia = 2,3547 g Berat abu = 0,1094 g 0,1094g % kadar abu total = 100 0 0 0 = 4, 64 0 2,3547g (4,40 + 4,78 + 4,64)% % kadar rata-rata = = 4,61 0 0 3 4. Penetapan kadar Abu tidak larut dalam asam I. Berat simplisia = 2,6979 g Berat abu = 0,0011 g 0,0011g % kadar abu tidak larut dalam asam = 100 0 0 0 = 0, 04 0 2,6979g
II. Berat simplisia = 2,1438 g Berat abu = 0,0010 g 0,0010g % kadar abu tidak larut dalam asam = 100 0 0 0 = 0, 05 0 2,1438g III. Berat simplisia = 2,3547 g Berat abu = 0,0010 g 0,0010g % kadar abu tidak larut dalam asam = 100 0 0 0 = 0, 04 0 2,3547g (0,04 + 0,05 + 0,04)% % kadar rata-rata = = 0,043 0 0 3