AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN LEMPUYANG WANGI (Zingiber aromaticum Val.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA SKRIPSI Oleh: NISREEN CHELENG K100100040 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2015
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN LEMPUYANG WANGI (Zingiber aromaticum Val.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta Oleh: NISREEN CHELENG K100100040 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2015 i
KATA PENGANTAR Assalamu alaikum wr. wb Alhamdulillahirrabbil alamiin, segala puji syukur bagi Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Wangi (Zingiber aromaticum Val.) dan Fraksi- Fraksinya Dengan Metode DPPH serta Penetapan Kadar Fenolik Totalnya sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada: 1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. 2. Ibu Zakky Cholisoh, Ph.D., Apt., selaku pembimbing akademik. 3. Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt., selaku pembimbing skripsi. 4. Ibu Ika Trisharyanti DK, M.Farm., Apt dan Ibu Rima Munawaroh, M.Sc., Apt., selaku penguji skripsi. 5. Kedua orang tua dan seluruh keluarga besar tercinta, serta seluruh temanteman. Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis maupun pembaca. Wassalamu alaikum wr. wb. Surakarta, 17 Desember 2014 Penulis iv iv
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... i HALAMAN PENGESAHAN... ii HALAMAN DEKLARASI... iii KATA PENGANTAR... iv DAFTAR ISI... v DAFTAR TABEL... viii DAFTAR GAMBAR....ix DAFTAR LAMPIRAN... x DAFTAR SINGKATAN....xi INTISARI... xii BAB I PENDAHULUAN... 1 A. Latar Belakang Masalah... 1 B. Rumusan Masalah... 3 C. Tujuan Penelitian... 3 D. Tinjauan Pustaka... 3 1. Tanaman lempuyang wangi (Zingiber aromaticum Val.)... 3 a. Klasifikasi tanaman... 3 b. Morfologi tanaman... 4 c. Kandungan kimia... 4 d. Khasiat tanaman... 5 2. Radikal bebas... 5 3. DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylehydrazyl)... 6 4. Antioksidan... 6 5. Fenolik... 7 6. Ekstraksi... 7 E. Landasan Teori... 8 F. Hipotesis... 9 BAB II Metode Penelitian... 10 A. Jenis Penelitian... 10 v
B. Variabel penelitian... 10 C. Alat dan Bahan... 10 1. Alat yang Digunakan... 10 2. Bahan yang Digunakan... 10 D. Tempat Penelitian... 11 E. Jalannya Penelitian..11 1. Pengeringan dan Penyerbukan... 11 2. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Wangi... 11 3. Pembuatan Fraksi n-heksan, Etil asetat, dan Etanol... 11 4. Pembuatan larutan stok uji... 12 a. Pembuatan Larutan Stok DPPH 0.4 Mm... 12 b. Pembuatan Larutan Stok Asam Galat 0,1%... 12 c. Pembuatan Larutan Stok 0,1% Ekstrak Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Lempuyang Wangi... 12 5. Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH Menggunakan Spektrofotometri... 12 6. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel... 13 a. Penentuan Operating Time (OT)... 13 b. Penetapan Panjan Gelombang Maksimal (λ mak )... 13 c. Penetapan Kurva Baku Asam Galat... 13 d. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel... 13 F. Analisis Data... 14 BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN... 15 A. Pengeringan Daun Lempuyang wangi... 15 B. Ekstraksi... 15 C. Fraksinasi... 16 D. Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH... 16 E. Penentuan Kadungan Senyawa Fenolik Total... 19 F. Hubungan Aktivitas Antioksidan dengan kandungan Fenolik Total. 20 vi
BAB IV KESIMPULAN... 22 A. Kesimpulan... 22 B. Saran... 22 DAFTAR PUSTAKA... 23 LAMPIRAN... 27 vii
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1. Rendemen Hasil Fraksinasi Ekstrak Etanol Daun Lempuyang wangi... 16 Tabel 2. Kadar Fenolik Total dari Ekstrak Etanol Daun Lempuyang wangi dan Fraksi-fraksi... 20 Tabel 3. Hubungan kadar aktivitas antioksidan (IC 50 ) dengan kadar fenolik total (GAE)... 20 viii
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Tanaman Zingiber aromaticum Val.... 4 Gambar 2. Aktivitas Antioksidan dengan Nilai IC 50 dari ekstrak dan fraksi-fraksi... 17 Gambar 3. Nilai IC 50 Sampel dan Vitamin E.... 18 Gambar 4. Kurva baku asam galat... 19 Gambar 5. Kurva hubungan antara kadar fenolik total versus IC 50... 21 ix
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Wangi... 27 Lampiran 2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH... 28 Lampiran 3. Perhitungan kosentrasi dengan metode DPPH dan IC 50... 29 Lampiran 4. Kurva Baku Asam Galat... 32 Lampiran 5. Kandungan fenolik total ekstrak, fraksi n-heksan, fraksi etil asetat dan fraksi etanol.... 32 x
DAFTAR SINGKATAN UV : Ultraviolet VIS : Visibel µl : Mikroliter ml : Mililiter g : Gram µg : Mikrogram mg : Miligram nm : Nanometer µm : Mikromol xi
INTISARI Pada penelitian sebelumnya tentang rimpang lempuyang wangi (Zingiber aromaticum. Val) diketahui tanaman tersebut memiliki aktivitas antioksidan, tanaman ini merupakan salah satu tanaman obat yang sering digunakan oleh masyarakat, antara lain digunakan sebagai obat asma, merangsang membran mukosa lambung dan menambah nafsu makan. Kandungan senyawa kimia dalam tanaman ini adalah flavonoid, saponin dan minyak atsiri. Pada bagian daun belum diteliti aktivitas antioksidan, oleh karena itu dalam penelitian ini bertujuan untuk menentukan aktivitas antioksidan fraksi-fraksi serta menetapkan kadar fenolik total dalam daun lempuyang wangi. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dan pelarut etanol. Untuk fraksinasi metode sonikasi dengan pelarut etanol, n-heksan dan etil asetat. Aktivitas antioksidan dari ekstrak dan fraksi ditetapkan dengan DPPH dan kandungan total senyawa fenolik ditetapkan dengan metode Folin-ciocalteu. Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai IC 50 pada ekstrak etanol sebesar 276,75 ppm, fraksi n-heksan sebesar 255,24 ppm, fraksi etil asetat sebesar 224,89 ppm, fraksi etanol sebesar 420,39 ppm, dan vitamin E sebesar 6,488 ppm. Kandungan fenolik total untuk ekstrak etanol 55,876 GAE, fraksi n-heksan sebesar 20,552 GAE, fraksi etil asetat 94,309 GAE, dan fraksi etanol sebesar 35,559 GAE. Hubungan antara aktivitas antioksidan dan kadar fenolik totalnya adalah 46,31% aktivitas antioksidan yang disumbang oleh senyawa fenolik. Kata kunci : Lempuyang wangi (Zingiber aromaticum. Val), Antioksidan, Fenolik, DPPH. xii