PEMERIKSAAN STERILITAS INSTRUMEN PASKA STERILISASI DI SUB INSTALASI CENTRAL STERILE SUPPLY DEPARTMENT (CSSD) RSUD DR. MOEWARDI SURAKARTA SKRIPSI Oleh: Oleh: NOVI INDRIYATI K100070129 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA 2011
PEMERIKSAAN STERILITAS INSTRUM MEN PASKA STERILISASI DI SUB INSTALASI CENTRAL STERILE SUPPLY DEPARTMENTT (CSSD) RSUD DR. MOEWARDI SURAKARTA SKRIPSI Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjanaa Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta Oleh: NOVI INDRIYATI K100070129 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA 2011 ii
iii
MOTTO Sesungguhnya sesudah kesulitan ada kemudahan (QS. AL Insyirah : 6) Raihlah ketinggian, karena bintang-bintang tersembunyi di dalam jiwamu. Bermimpilah dalam-dalam, karena setiap impian mengawali tujuan (Pamela Vaull Starr) Setiap tetes keringat perjuangan akan membawa kemakmuran dan kesejahteraan iv
PERSEMBAHAN Sebuah karya kecil yang ku persembahkan untukmu ya Allah sebagai sujud dan syukurku atas kesempatan yang Kau berikan kepadaku untuk menuntut ilmu di bangku kuliah. Semoga akan selalu ada kesempatan dan kemudahankemudahan lain untuk meraih cita-citaku. Kupersembahkan untuk orang-orang yang mengisi hidupku. Ibu dan bapak tanpa kasih sayang dan do amu aku takkan berarti apa-apa dan takkan pernah menjadi seperti sekarang. Emak dan bapak karena cintamu aku menjadi lebih berarti. Kakak-kakakku, Joko, Dwi, Eko yang memberikan dukungan dan semangat dalam perjuangan hari-hariku. Adikku Ita dan Agung tetaplah menjadi bintang untuk semua orang. Seseorang yang akan mendampingiku kelak, sungguh kau adalah karunia Allah SWT yang tak pernah habis untuk aku syukuri. Jagoan-jagoan kecilku Daffa, Andro, Arkhan yang selalu kurindukan. Buat Sholly sahabatku yang selalu mengiringku melewati perjuangan hariku. Teman-teman yang selalu memberiku banyak pengalaman dan dukungan. Almamaterku. v
DEKLARASI Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka. Surakarta, 3 Juni 2011 Peneliti, Novi Indriyati vi
KATA PENGANTAR Alhamdulillahirabbil alamin, puji syukur ke hadirat Allah SWT yang telah memberikan karunia, rahmat, hidayah dan bimbingan-nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul. PEMERIKSAAN STERILITAS INSTRUMEN PASKA STERILISASI DI SUB INSTALASI CENTRAL STERILE SUPPLY DEPARTMENT (CSSD) RSUD DR. MOEWARDI SURAKARTA. Skripsi ini diajukan dan dipertahankan di hadapan panitia penguji skripsi untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Penulis menyadari bahwa tanpa adanya partisipasi dari berbagai pihak yang membimbing dan memberikan bantuan maka skripsi ini tidak akan selesai dengan baik. Untuk itu dengan kerendahan hati dan penghargaan yang tulus, penulis mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada: 1. Bapak Dr. Muhammad Da i, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. 2. Bapak Drs. Suharsono, SP. FRS., Apt selaku pembimbing utama yang selalu bersedia meluangkan waktu memberikan bimbingan, pengarahan, dukungan, serta ilmu yang bermanfaat selama skripsi. 3. Bapak Peni Indrayudha, M. Biotech., Apt selaku pembimbing pendamping yang dengan sabar memberikan bimbingan, pengarahan selama penelitian dan penyusunan skripsi. vii
4. Ibu Ratna Yuliani, M. Biotech. St. selaku penguji I yang telah meluangkan waktu, tenaga dan pikiran untuk menguji skripsi ini, serta memberikan koreksi, kritik dan saran yang menyempurnakan karya ini. 5. Ibu Ika Trisharyanti DK, M. Farm., Apt. selaku penguji II yang telah meluangkan waktu, tenaga dan pikiran untuk menguji skripsi ini, serta memberikan koreksi, kritik dan saran yang menyempurnakan karya ini. 6. Bapak Imam Prayitno, S. Farm., Apt atas segala bantuan dan waktu yang telah diberikan untuk membantu penelitian ini. 7. Ibu Tri Hastuti Retnoningsih, SKM, Ibu Lanny Imelia, S. Farm., Apt, dan seluruh staf CSSD Dr. Moewardi Surakarta yang telah membantu penelitian ini. 8. Teman-temanku Ikal, Faiz, Isna, Nira, Tyaz, Eno, Dewi, Komar, Tesa, Puji, Nur, Uti, Dhesti yang selalu mendukung hingga akhir penyelesaian skripsi ini. 9. Seluruh laboran di laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, atas berbagai kemudahan sehingga pelaksanaan penelitian ini dapat berjalan dengan lancar. Semoga kebaikan yang telah diberikan menjadi amal yang bermanfaat dikemudian hari. Penulis berharap agar skripsi ini menjadi sesuatu yang mempunyai manfaat dan wawasan pagi pembaca. Surakarta, 13 April 2011 Penulis viii
DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... HALAMAN PENGESAHAN... MOTTO... PERSEMBAHAN... DEKLARASI... KATA PENGANTAR... DAFTAR ISI... DAFTAR GAMBAR...... DAFTAR TABEL... DAFTAR LAMPIRAN... DAFTAR SINGKATAN.... INTISARI... i iii iv v vi vii ix xiii xiv xv xvi xvii BAB I PENDAHULUAN... 1 A. Latar Belakang... 1 B. Perumusan Masalah... 4 C. Tujuan Penelitian... 4 D. Tinjauan Pustaka... 4 1. Central Sterile Supply Department (CSSD)..... 4 a. Pengertian.... 5 b. Tugas dan Fungsi.... 5 ix
c. Tata Ruang.... 6 1) Ruang Dekontaminasi.... 6 2) Ruang Pengemasan Alat.... 7 3) Ruang Pemrosesan Linen.... 7 4) Ruang Sterilisasi.... 7 5) Ruang Penyimpanan Barang Steril.... 8 2. Instrumen.... 8 a. Pengertian.... 8 b. Penggolongan.... 8 3. Sterilisasi.... 10 a. Pengertian... 10 b. Metode Sterilisasi.... 10 1) Sterilisasi dengan Panas Basah (autoklaf)... 10 2) Sterilisasi dengan Panas Kering.... 11 3) Sterilisasi dengan Gas.... 12 a) Sterilisasi dengan Etilen Oksida.... 12 b) Sterilisasi dengan Uap Formaldehid.... 13 4) Sterilisasi dengan Plasma.... 13 4. Penilaian Sterilitas.... 14 a. Indikator... 14 b. Kultur Mikroorganisme... 15 5. Identifikasi Mikroorganisme... 16 a. Pengecatan... 16 x
b. Uji pada Media Selektif... 16 c. Uji Biokimia... 17 E. Keterangan Empiris.... 18 BAB II. METODE PENELITIAN... 19 A. Jenis Penelitian... 19 B. Alat dan Bahan... 19 1. Alat... 19 2. Bahan... 19 C. Jalannya Penelitian... 20 1. Persiapan Alat dan Bahan.... 20 2. Proses Sterilisasi.... 20 3. Pemeriksaan Sterilitas Instrumen pakai ulang.... 22 a. Pemeriksaan Indikator.... 22 b. Sterilisasi Alat dan Bahan.... 23 c. Pembuatan Media.... 24 d. Kultur Mikroorganisme.... 24 4. Penghitungan Angka Kuman.... 26 5. Uji Identifikasi.... 27 a. Pengecatan.... 27 b. Uji pada Media Selektif.... 29 c. Uji Biokimia.... 29 D. Cara Analisis.... 29 xi
1. Analisis Uji Identifikasi Enterobacteriaceae.... 29 2. Analisis Hasil Angka Kuman Total... 30 BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN... 32 A. Sterilisasi Instrumen... 32 B. Pemeriksaan Sterilitas Instrumen... 33 1. Pemeriksaan Indikator.... 33 2. Kultur Mikroorganisme.... 36 C. Penghitungan Angka Kuman.... 40 D. Identifikasi Mikroorganisme.... 42 1. Pengecatan.... 42 2. Uji pada Media Selektif... 44 3. Uji Biokimia.... 45 BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN... 50 A. Kesimpulan... 50 B. Saran... 50 DAFTAR PUSTAKA... 52 LAMPIRAN...... 55 xii
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Denah Ruang Pusat Sterilisasi Di Sub Instalasi Central Sterile Supply Department (CSSD) RSUD Dr. Moewardi Surakarta... 9 Gambar 2. Skema Proses Sterilisasi Instrumen Pakai ulang Di Sub Instalasi Central Sterile Supply Department (CSSD) RSUD Dr. Moewardi Surakarta... 22 Gambar 3. Skema Kultur Mikroorganisme Instrumen Pakai ulang Paska Sterilisasi Pada Media Plate Count Agar (PCA)... 26 Gambar 4. Skema Proses Pengecatan Gram... 28 Gambar 5. Pengamatan Indikator Kimia Setelah Proses Sterilisasi.... 34 Gambar 6. Pengamatan Indikator Biologi.... 36 Gambar 7. Pengamatan Pertumbuhan Mikroorganisme.... 40 Gambar 8. Koloni Pertumbuhan Mikroorganisme.... 40 Gambar 9. Grafik Perhitungan Angka Kuman.... 42 Gambar 10. Pengecatan Gram... 44 Gambar 11. Uji pada Media MacConkey... 45 Gambar 12. Uji Biokimia yang diduga Bakteri E. coli, Shigella dysenteriae, Salmonella typhi, dan Klebsiella... 49 xiii
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1. Identifikasi Enterobacteriaceae dengan Uji Biokimia... 30 Tabel 2. Pengamatan Sterilitas Instrumen... 37 Tabel 3. JumLah Koloni per ml Sampel... 41 Tabel 4. Pengamatan Identifikasi Uji Biokimia Pada Media Kligler Iron Agar (KIA), Lysine Iron Agar (LIA), dan Motility Indol Ornithine (MIO)... 46 xiv
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1. Surat Keterangan Selesai Penelitian... 56 Lampiran 2. Surat Ijin Penelitian.... 57 Lampiran 3. Grafik Proses Sterilisasi... 58 Lampiran 4.Gambar Pemeriksaan Sterilitas Instrumen pada Media Plate Count Agar (PCA)... 59 Lampiran 5. Gambar Pemeriksaan Sterilitas Instrumen pada Media Brain Heart Infusion (BHI).... 62 Lampiran 6. Gambar Perhitungan Angka kuman... 65 Lampiran 7. Hasil Perhitungan Koloni Total... 66 Lampiran 8. Gambar Pengecatan Gram... 67 Lampiran 9. Gambar Uji pada Media MacConkey.... 68 Lampiran 10. Gambar Uji Biokimia... 69 Lampiran 11. Gambar Alat-alat Inkubasi..... 71 Lampiran 12. Gambar Autoklaf tipe Selectomat SL 100323... 72 Lampiran 13. Gambar Colony Counter SC6 (Stuart)... 72 Lampiran 14. Gambar Mikroskop Olympus CX 21... 73 Lampiran 15. Gambar Laminar Air Flow/LAF (Srikandi Laboratory).... 76 Lampiran 16. Gambar Ruang Penyimpanan CSSD Dr. Moewardi Surakarta. 77 xv
DAFTAR SINGKATAN CSSD KIA LIA MIO E.coli PCA LAF RL BHI MH UV RSUD Fp : Central Sterile Suplly Department : Kligler Iron Agar : Lysine Iron Agar : Motility Indol Ornithine Medium : Escherichia coli : Plate Count Agar : Laminar Air Flow : Ringer Laktat : Brain Heart Infusion : Mueller Hinton : Ultraviolet : Rumah Sakit Umum Daerah : Faktor pembagi xvi
INTISARI Rendahnya infeksi nosokomial menjadi salah satu indikator keberhasilan dalam pelayanan rumah sakit. Faktor penyebab terjadinya infeksi nosokomial dapat berupa faktor endogen dan faktor eksogen. Instrumen pakai ulang yang digunakan di rumah sakit merupakan faktor eksogen terjadinya infeksi nosokomial, sehingga perlu dilakukan upaya pencegahan infeksi nosokomial dengan metode sterilisasi. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui ada tidaknya pertumbuhan mikroorganisme pada instrumen pakai ulang paska sterilisasi pada hari ke satu hingga ke empat belas, hari mulai ditemukan pertumbuhan mikroorganisme, dan mengetahui jumlah serta jenis mikroorganismenya. Metode sterilisasi instrumen pakai ulang yang digunakan adalah dengan sterilisasi panas basah (autoklaf). Suhu yang digunakan 135ºC selama 7 menit. Uji sterilitas instrumen pakai ulang dilakukan dengan metode Standart Plate Count. Sampel diencerkan dengan larutan steril Ringer Laktat (RL), kemudian ditanam pada cawan petri yang berisi media yang telah memadat. Cawan petri diinkubasi pada suhu 37ºC selama 24 jam. Hari pertama tumbuh mikroorganisme dihitung angka kuman totalnya dengan menghitung jumlah koloni dikalikan faktor pembagi dari ketiga petri kemudian dirata-rata. Uji identifikasi dilakukan dengan metode pengecatan Gram dan uji biokimia. Uji biokimia dilakukan dengan media Kligler Iron Agar (KIA), Lysine Iron Agar (LIA), dan Motility Indol Ornithine (MIO). Identifikasi dilakukan dengan mencocokkan evaluasi hasil penanaman mikroorganisme pada media biokimia dengan tabel Enterobacteriaceae. Hasil penelitian menunjukkan bahwa instrumen pakai ulang di Sub Instalasi Central Sterile Supply Department (CSSD) RSUD Dr. Moewardi Surakarta masih dalam keadaan steril hingga hari ke sembilan dan mulai tidak steril pada hari ke sepuluh. Angka kuman total rata-rata pada hari ke sepuluh sebanyak 1.768 koloni/ml dan hari ke sebelas sebanyak 2.357 koloni/ml. Dari hasil mikroskopis ditemukan bakteri Gram negatif, berwarna merah berbentuk batang. Bakteri pada instrumen pakai ulang yang telah terkontaminasi diduga berupa Escherichia coli, Shigella dysenteriae, Salmonella typhi, dan Klebsiella. Kata kunci : Sterilisasi, instrumen, panas basah, Standart Plate Count. xvii