- ~Tf(.efTDMyClA./ -- STICEfTOMYCP-S ~Kl~ E'US HANIM MAFULAH ISOLASI DAN IDENTIFlKASI ANTIBIOTIKA STREPTOMISIN HASIL BIAKAN Streptomyces griseus ATCC 10137 DALAM MEDIA YANG MENGANDUNG AMPAS TABU iv_lilt ~ l I ~ FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA BAGIAN KIMIA FARMASI SURABAYA 200J 1 PERPUSTAKAAN W'NrnmSITAS AIRLANOOA suaabaya,
LEMBAR PENGESAHAN ISOLASI DAN IDENTIFIKASI ANTIBIOTIKA STREPTOMISIN BASIL BIAKAN Streptomyces grueils ATCC l0137dalam MEDIA YANG MENGANDUNG AMPASTAHU Dibuat untuk memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Aidangga 2003 Olell : HANIM MAFVLAH 09912178 Pembimbiq Utama... ~------ Prof. Dr. H. ~nham.~ Mulja, Apt NIp. 130675 596 Pembimbing Sma ~~/"r c::;7 Drs. H. Harjaua, MSc. AJ!t NIP. 130 3SS 37J /~k$ Dr. fer. net H. Mocbammad Yuwooo, MS. Apt. NIP. 131 S69384
RINGKASAN ISOLASI DAN IDENTIFlKASI ANTIBIOTlKA STREPTOMISlN HASIL BIAKAN Streptomyces griseus ATCC 10137 DALAM MEDIA YANG MENGANDUNG AMPAS TABU Hanim Mafulah Ampas tabu pada umumnya masih mengandung protein kasar 21-29% bib bahan kering (Hennana, 1985). HasH penelitian pendahuluan menunjukkan bahwa ampas tabu mengandung 16-18 macam asam amino dengan kadar bervariasi. Namun selama ini arnpas tahu hanya digunakan sebagai campuran pakan ternak dan makanan tradisional, sebingga pernanfaatannya rnasih perlu dikernbangkan lagi. Streptomyces griseus ATCC 10137 merupakan bak.teri aerob farnili Streptomycetaceae dari ordo Actinomycetes yang merniliki karakteristik mampu mernproduksi antlbiotika pada media fennentasi yang mengandung surnber nitrogen dan karbohidrat yang mernenulri persyaratan nisbah CIN. Berdasarkan kedua hal di atas, maka dapat dilakukan upaya untuk meningkatkan nilai ekonorni arnpas tahu dengan memanfaatkannya sebagai sumber nitrogen altematif dalarn media produksi antibiotikanya. Tujuan penelitian ini adalah untuk mernbuktikan apakah ampas tahu dapat digunakan sebagai sumber nitrogen pada media produksi anbbiotika basil biakan Streptomyces griseus ATCC 10137 dan apakah antibiotika yang dihasilkan adalah streptornisin. Penelitian dilakukan dengan pernbiakan Streptomyces griseus ATCC 10137 pada media PDA padat lalu dipindahkan ke media pertumbuhan ISP-4 cairo Setelah dari media pertumbuban kemudian dipindahkan ke dalam media produksi yang mengandung ampas tabu dengan konsentrasi 2%. Kaldu ferrnentasi yang diperoleh diuji potensi dengan Bacillus subtilis ATCC 9466 sebagai bakteri uji. Isolasi antibiotika dalam kaldu ferrnentasi menggunakan adsorben arang aktif, dielusi dengan methanol-hcl 0,5 N dan diserapkan pada kromatografi kolom penukar kation CG-50 (NI-I/) bingga didapatkan fraksi eluat yang kernudian diuji dengan reak.si warna. Fraksi eluat positif yang didapatkan dikurnpulkan, dipekatkan dan dinetralkan. Selanjutnya, ekstrak yang diperoleb dianalisis kualitatif secara KLT-Densitometri dan bioautografi antibiotika kernudian dibsndingkan dengan baku streptomisin. Dari hasil KLT-Densitometri menggunakan ernpat macam fasa gerak yaitu: KH2P04 5% b/v; KH2P04 7,5% b/v; H20 - NfLtOH etil asetat asam asetat glasial; NaC1I,5% dalam metanol80% menghasilkan kromatogram dengan warna noda yang sarna dengan baku strqltomisin, yaitu ungu tetapi warna tersebut tidak stabil dalam jangka waktu satu 'Sampai dua jam kernudian mengalami perubahan warna yang berbeda dengan baku streptomisin. Namun harga Rf dan panjang gelombang dan profil kromatograrnnya berbeda dengan baku streptomisin. vii
Sedangkan identifikasi dengan teknik bioautografi yang mmggunakan fasa gerak KH2PO. 5% b/v dan Bacillus subtilis ATCC 9466 sebagai bakteri uji didapatkan zona hambatan yang harga Rfuya berbeda dengan baku streptomisin. Berdasarkan basil penelitian yang diperoleh, maka dapat disimpulkan bahwa ampas tahu dapat digunakan sebagai media Streptomyces griseus ATCC 10137 untuk memproduksi antibiotika dan antibiotika yang dihasilkan berbeda atau bukan streptomisin. Dati pmelitian ini, maka dapat disarankan untuk mmggunakan ampas tahu sebagai komponen sumber nitrogen altematif dalam media produksi antibiotika. Vlll
ABSTRACT Isolation and identification of streptomycin antibiotic from the culture of Streptomyces griseus ATCC 10137 in a medium containing tofu refuse (okara). In order to know whether tofu refuse (okara) can be used as an alternative nitrogen source for Streptomyces griseus ATCC 10 137 to produce antibiotics, and to show whether antibiotics are yielded is a streptomycin, isolation and identification of antibiotics from Streptomyces griseus ATCC 10137 which was growth in a medium containing tofu refuse (okara) had been done. Isolation of antibiotics from the fermentation bmth was -carried out by carbo adsorbent and Cation Exchanger Column Chromatography CG-50 <N'H4J. Identification of the crude extracts was done by TLC-Densitometry using four different eluents (KH2P04 5% b/v; KH2P04 7.5% b/v; H20 - N:f40H ethyl acetat -glacial acetic acid; NaCI 1.5% in methanol 80%) which was compared with streptomycin reference standard. The result showed that the crude exstracts have the same colour as streptomycin standard for a moment but its colour changed to a different colour from streptomycin standard for one until two hours, Rf values, maximum length waves and chromatogram's profiles were different from streptomycin standard. Identification of crude exstracts by an antibiotic bioautography technique using KH2P04 5% b/v as an eluen and Bacillus subtilis ATCC 10137 as test bactery gained a different Rf value of blocked zone areas from streptomycin standard. This study indicated that tofu refuse (okara) can be used an alternative nitrogen source in the medium of culture Streptomyces griseus ATCC 10137 to produced antibiotics. And the produced antibiotics couldnot be identified as a streptomycin. Keyword: Tofu refuse (okara) medium; Streptomyces griseus ATCC 10137; Isolation and identification of streptomycin. IX