7 Analisis Data Rancangan lingkungan yang digunakan pada percobaan ini adalah Rancangan Acak lengkap (RAL) dengan faktor tunggal yaitu dosis iradiasi sinar gamma. Terdapat 6 taraf dosis iradiasi sinar gamma yaitu 0, 20, 40, 60, 80, dan 100 Gy. Setiap dosis perlakuan iradiasi sinar gamma diulang 5 kali. Seluruhnya terdapat 30 satuan percobaan dan setiap satuan percobaan terdiri 5 botol kultur yang masing-masing ditanam 4 plb anggrek Dendrobium lasianthera. Model statistik yang digunakan sebagai berikut : Yij = µ + τ i + ε ij Yij : Respon pengamatan pada perlakuan iradiasi sinar gamma ke-i, dan ulangan ke-j µ : Nilai tengah umum τ i : pengaruh iradiasi gamma ke-i ε ij : pengaruh galat percobaan perlakuan iradiasi sinar gamma ke-i dan ulangan ke-j Hasil pengamatan dianalisis menggunakan analisis ragam (uji F) pada selang kepercayaan 95% (α = 5%). Apabila terdapat pengaruh nyata, maka dilakukan uji lanjut dengan Duncan Multiple Range Test (DMRT), serta dilakukan analisis LD 30 dan LD 50. Cara menentukan LD 50 dan LD 30 menggunakan persamaan garis menurut Harmita dan Radji (2008). Y= a+bx Y= % kematian X= log dosis HASIL DAN PEMBAHASAN Terbentuknya keragaman genetik dapat terjadi secara alamiah tetapi frekuensinya rendah, yaitu 10-6 pada setiap generasi (Herawati dan Setiamihardja 2000) selain itu keragaman genetik dapat diinduksi dengan pemberian mutagen, baik mutagen fisik (sinar X, sinar α, sinar β, sinar γ) ataupun mutagen kimia (EMS, NMU, NTG) (Poespodarsono 1998). Peneletian ini menggunakan mutagen fisik (sinar gamma) sebagai bahan untuk menginduksi keragaman terhadap anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith). Respon plb berbeda nyata pada setiap peubah yang diamati terlihat hampir pada setiap minggu pengamatan mulai dari minggu ke-6 kecuali pada peubah persentase hidup yang baru terlihat pada minggu ke-9. Hasil penelitian selama enam bulan dan analisis data yang telah dilakukan terhadap semua peubah yang diamati didapatkan bahwa semakin tinggi dosis iradiasi sinar gamma yang diberikan kepada plb maka mengakibatkan kemampuan hidup plb akan semakin menurun. Kemampuan hidup plb dengan perlakuan iradiasi menjadi lebih lambat dibandingkan dengan perlakuan tanpa iradiasi. Iradiasi sinar gamma juga mempengaruhi kemampuan plb dalam membentuk daun, semakin tinggi dosis iradiasi yang diberikan maka jumlah daun yang dihasilkan akan semakin menurun. Peubah jumlah akar juga menunjukkan bahwa semakin tinggi dosis iradiasi sinar gamma yang diaplikasikan maka kemampuan planlet untuk membentuk akar akan semakin menurun. Kontaminasi
8 yang dialami pada penelitian ini sebagian besar disebabkan oleh cendawan, dan muncul mulai minggu pertama setelah tanam hingga minggu ke 22 pun masih ada yang mengalami kontaminasi. Keadaan tersebut diduga karena ruang kultur sudah tidak begitu steril. Persentase Hidup Plb Dosis radiasi sinar gamma nyata berpengaruh menurunkan persentase hidup plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith), mulai dari 9 MST hingga 22 MST. Persentase hidup plb sebelum 9 MST belum nyata dipengaruhi iradiasi. Pada minggu pertama hingga minggu ke-6 sebagian besar plb masih dapat bertahan dari kerusakan sel yang diakibatkan oleh iradiasi sinar gamma yang diterima, setelah masuk minggu ke-9 hingga ke-22 plb anggrek mengalami penurunan daya hidup terutama pada iradiasi 80 Gy dan 100 Gy (Tabel 1). Tabel 1 Persentase hidup plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) pada berbagai dosis iradiasi sinar gamma Dosis MST (Gy) 6 9 12 15 18 22 0 75 77a 75a 73a 74a 76a 20 65 66b 67ab 68ab 64ab 64ab 40 64 68ab 64bc 68ab 63ab 63ab 60 72 64bc 63bc 60b 59b 58b 80 67 57c 50d 50cd 35c 35c 100 77 64bc 56cd 43d 25c 19d KK(%) 12.9 11.7 11.55 13.6 16.95 17.8 Keterangan : Angka pada kolom yang sama yang diikuti huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata berdasarkan DMRT pada taraf α=5% Kematian plb terbesar yang diakibatkan oleh iradiasi sinar gamma ditunjukan pada perlakuan dosis 80 dan 100 Gy. Pada minggu ke-15 kematian yang dialami oleh plb dengan dosis iradiasi 80 Gy mencapai 50%, dan pada minggu ke-22 rata-rata plb anggrek yang hidup hanya tinggal 35%. Plb dengan dosis iradiasi 100 Gy mengalami kematian lebih dari 50% pada minggu ke-15 dan minggu ke-22 rata-rata hanya tinggal 19%. Keadaan tersebut menunjukan bahwa dosis iradiasi sinar gamma yang diberikan mengakibatkan kerusakan sel yang cukup besar dan plb yang tidak mampu memulihkan diri hanya akan bertahan kurang lebih selama 9 minggu saja setelah itu akan mengalami kematian, sesuai dengan pernyataan Romeida et al. (2013) bahwa peningkatan dosis paparan yang lebih tinggi mengakibatkan plb anggrek Spatoglotis plicata hanya mampu bertahan hidup selama 2 bulan saja. Penelitian yang dilakukan oleh Kurniati (2004) menyebutkan bahwa plb anggrek Phalaenopsis himatsuri x Doritaenopsis modern beauty yang diberikan perlakuan dosis iradiasi sinar gamma 40 Gy hanya dapat bertahan hidup 10% - 20%. Dosis iradiasi 40 Gy menyebabkan sebagian besar planlet tersebut mengalami kelambatan pertumbuhan, berwarna coklat dan akhirnya mati.
9 a b Gambar 2. Kondisi plb hasil iradiasi sinar gamma a) Plb mati, b) Plb hidup Kematian plb yang disebabkan iradiasi sinar gamma ditunjukkan dengan perubahan warna plb. Pada awalnya plb yang berwarna hijau akan berubah menjadi kekuningan selanjutnya plb mulai berubah menjadi kecoklatan dan akhirnya menghitam dan mati (Gambar 2). Perubahan warna plb tersebut juga teradi pada penelitian yang dilakukan oleh Romeida et al. (2013) yang menjelaskan bahwa gejala kematian plb anggrek Spatoglotis plicata blum hasil iradiasi sinar gamma dimulai dengan menguningnya plb selanjutnya plb menjadi coklat dan menghitam. Massa plb Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) terlihat berwarna hitam tanda terjadi kematian sel akibat paparan sinar gamma. Kejadian tersebut terjadi pada semua plb hasil iradiasi yang tidak mampu melakukan pemulihan kembali pada kerusakan sel yang dialami. Plb yang mampu melakukan pemulihan dan berhasil bertahan hidup maka memungkinkan untuk menjadi tanaman mutan. Persentase Plb berkecambah Semakin besar dosis radiasi sinar gamma yang diberikan maka persentase plb berkecambah nyata akan semakin menurun. Persentase plb berkecambah didapatkan dari perbandingan antara jumlah total plb yang berkecambah dengan jumlah total plb yang ditanam. Plb yang terkena iradiasi dengan dosis tinggi terutama pada dosis 80 dan 100 Gy memiliki laju perkembangan yang jauh lebih lambat dibandingkan dengan dosis lain (Tabel 2). Royani et al. (2012) menyebutkan bahwa pertumbuhan tanaman obat sambiloto dengan perlakuan iradiasi sinar gamma termasuk lambat, hal tersebut diakibatkan adanya pengaruh iradiasi yang menyebabkan pertumbuhan tanaman tersebut menjadi lambat. Sampai minggu ke-6 tidak terlihat perbedaan nyata pada setiap dosis iradiasi yang diaplikasikan mulai dari dosis 20 hingga 100 Gy. Pada perlakuan dosis iradiasi 80 dan 100 Gy persentase plb berkecambah terus mengalami penurunan setelah minggu ke-6 hingga minggu ke-22. Keadaan tersebut diduga diakibatkan karena plb yang terkena iradiasi sinar gamma tidak mampu melakukan pemulihan akibat besarnya kerusakan sel yang dialami dan akhirnya mengalami kematian.
10 Tabel 2 Persentase berkecambah plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) pada berbagai dosis iradiasi sinar gamma Dosis MST (Gy) 6 9 12 15 18 22 0 72a 77a 75a 73a 74a 76a 20 56b 62b 67b 68a 64ab 64ab 40 56b 59bc 64b 66a 63ab 63ab 60 56b 57bc 62b 60ab 59b 58b 80 51b 49c 49c 48b 35c 35c 100 50b 48c 48c 31c 25c 19d KK(%) 16.3 15.2 10.8 19.0 17.0 17.8 Keterangan : Angka pada kolom yang sama yang diikuti huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata berdasarkan DMRT pada taraf α=5% Menurut Romeida et al. (2013) bila plb hasil iradiasi sinar gamma mengalami kerusakan sel yang sangat besar maka plb tidak akan mampu melakukan pemulihan dan bertahan hidup, sementara sel-sel yang mampu memulihkan diri akan membelah dan membentuk plb baru dan mungkin berkembang menjadi tanaman mutan. Gambar 3. Kriteria Plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) yang berkecambah Kriteria plb yang berkecambah dilihat dari plb yang telah mengalami penonjolan dan kemudian merekah pada ujung plb anggrek dimana setelah proses tersebut selanjutnya akan mucul bakal daun pada hasil rekahan yang telah terbentuk (gambar 3). Siska et al. (2013) menuliskan bahwa munculnya tunas ditandai dengan membengkaknya plb yang kemudian diikuti dengan merekahnya ujung eksplan sehingga membentuk nod (bakal tunas). Calon tunas mikro dapat terbentuk pada rekahan tersebut yang ditandai dengan munculnya ujung helai daun. Multiplikasi Tunas Hasil pengamatan yang telah dilakukan hingga minggu ke-22 didapatkan hasil bahwa hampir semua plb yang hidup pada semua perlakuan dosis iradiasi
11 sinar gamma mampu menghasilkan tunas baru/bermultiplikasi. Bahkan pada pemberian dosis iradiasi sinar gamma tertentu menghasilkkan jumlah multiplikasi lebih tinggi dibandingkan dengan jumlah multiplikasi pada Plb tanpa dosis iradiasi (Tabel 3). Tabel 3. Rata-rata jumlah multiplikasi plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) hasil iradiasi sinar gamma Dosis MST (Gy) 1 4 12 22 0 0 0.12 0.68cd 0.84cd 20 0 0.16 1.56b 1.84b 40 0 0.16 1.76b 1.96b 60 0 0.16 2.2a 2.84a 80 0 0 0.88c 1.04c 100 0 0 0.44d 0.6d KK(%) 0 151 21.2 42.5 Keterangan : Angka pada kolom yang sama yang diikuti huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata berdasarkan DMRT pada taraf α=5% Plb mulai bermultiplikasi pada minggu ke-4 pada dosis iradiasi 0 hingga 60 Gy dengan rata-rata jumlah multiplikasi 0.12 hingga 0.16. Multiplikasi pada dosis iradiasi 80 Gy teramati pada minggu ke-6 dan pada dosis iradiasi 100 Gy teramati baru pada minggu ke-7. Laju multiplikasi pada minggu ke-12 nyata meningkat pada dosis iradiasi 20 hingga 60 Gy dibandingkan dengan dosis tanpa iradiasi, sedangkan pada dosis iradiasi 80 dan 100 Gy nyata tidak meningkatkan laju multiplikasi dan masih memiliki nilai yang sama dengan dosis iradiasi 0 Gy. Pada akhir pengamatan (22 MST) laju multiplikasi plb masih mengalami peningkatan pada semua taraf dosis iradiasi. Pengaruh iradiasi sinar gamma yang mampu meningkatkan jumlah plb yang bermultiplikasi tertinggi ada pada dosis 60 Gy yakni dengan rata-rata jumlah multiplikasi 2.84. Pada dosis iradiasi 80 dan 100 Gy walaupun mengalami peningkatan rata-rata jumlah multiplikasi tetapi nilainya tidak nyata dengan dosis iradiasi 0 Gy. Kemampuan plb untuk bermultiplikasi walaupun telah mengalami proses iradiasi diduga disebabkan karena dosis iradiasi sinar gamma yang diaplikasikan mampu merangsang sintesis hormon endogen (sitokinin maupun auksin). Pada dosis iradiasi 100 Gy meski tetap mampu bermultiplikasi akan tetapi laju multiplikasinya masih lebih lambat dibandingkan dengan dosis iradiasi 0 Gy hingga 80 Gy. Menurut Lestari et al. (2010) dosis iradiasi sinar gamma 50-60 Gy yang diaplikasikan pada tanaman Artemisia mengakibatkan pertumbuhan tanaman mulai terhambat, tetapi tingkat multiplikasi masih relatif tinggi. Devy dan sastra (2006) menyebutkan bahwa dosis iradiasi sinar gamma 12.5 Gy menghasilkan persentase bertunas paling tinggi yang disebabkan karena dosis tersebut mampu memicu meningkatnya pembelahan sel sehingga terbentuk tunas baru.
12 a b Gambar 4. Multiplikasi anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) hasil iradiasi sinar gamma. a) Planlet primer, b) Planlet skunder Jumlah Daun Perlakuan dosis iradiasi sinar gamma yang diberikan berpengaruh sangat nyata menurunkan jumlah daun yang terbentuk pada planlet anggrek. Semakin tinggi dosis yang diberikan maka kemampuan planlet anggrek untuk membentuk daun semakin rendah. Pada minggu ke-6 hingga minggu ke-22 planlet anggrek hasil iradiasi memiliki rata-rata jumlah daun lebih rendah dibandingkan dengan planlet anggrek tanpa iradiasi (Tabel 4). Tabel 4 Rata-Rata Jumlah daun per-planlet anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) pada berbagai dosis iradiasi sinar gamma Dosis MST (Gy) 6 9 12 15 18 22 0 1.23a 1.6a 2.44a 2.44a 2.83a 4.1a 20 1.1ab 1.2ab 1.6b 1.9ab 2.4ab 2.9b 40 1.04ab 1.1ab 1.29b 1.82ab 1.9bc 2.6bc 60 0.8ab 1.06ab 1.15b 1.6bc 1.88c 2.23c 80 0.74ab 0.64b 1.12b 1.3bc 1.4c 1.45d 100 0.6b 0.6b 1b 1c 1.3c 1.3d KK(%) 91 41.1 34.7 28.1 26.2 14.8 Keterangan : Angka pada kolom yang sama yang diikuti huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata berdasarkan DMRT pada taraf α=5% Rata-rata jumlah daun per-planlet anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) memiliki perbedaan yang nyata pada beberapa taraf dosis iradiasi (Tabel 4). Pada minggu ke-6 seluruh perlakuan dosis iradiasi sinar gamma tidak menunujukkan pengaruh yang nyata terhadap jumlah daun kecuali pada dosis 0 Gy. Perbedaan yang nyata antar perlakuan baru terlihat pada minggu ke-9 terutama pada dosis iradiasi 80 dan 100 Gy yang nyata memiliki rata-rata jumlah daun lebih sedikit dibandingkan dengan dosis iradiasi 20 hingga 60 Gy. Ketiga dosis tersebut menunjukkan pertumbuhan daun yang lebih cepat dibandingkan dengan dosis iradiasi 80 dan 100 Gy sehingga jumlah daun yang dihasilkan menjadi lebih banyak. Keadaan tersebut menunjukkan bahwa dosis iradiasi 20 hingga 60 Gy memiliki pertumbuhan yang lebih cepat dibandingkan dengan dengan dosis iradiasi 80 dan 100 Gy, selain itu dosis iradiasi 80 dan 100 Gy yang diaplikasikan kepada plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith)
13 menyebabkan besarnya kerusakan sel pada tanaman sehingga mengakibatkan terhambatnya pertumbuhan plb termasuk pertumbuhan daun. Penelitian yang dilakukan oleh Devy dan Sastra (2006) menunjukkan bahwa kultur jahe hasil iradiasi sinar gamma yang telah bertunas tidak semuanya dapat membentuk daun. Kurniati (2004) menyebutkan bahwa dosis iradiasi sinar gamma 40 Gy yang diaplikasikan pada anggrek Phal. hinamatsuri x Dtps. Modern beauty menyebabkan sel yang terkena paparan iradiasi sinar gamma mengalami kematian, sehingga terjadi hambatan pembentukan organ planlet, termasuk daun. Jumlah Akar Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa persen plb berakar menunjukan respon yang nyata menurun akibat perlakuan dosis iradiasi sinar gamma. Berdasarkan data pada Tabel 5 semakin tinggi dosis iradiasi yang diterapkan maka kemampuan planlet untuk membentuk akar akan semakin kecil. Perlakuan dosis iradiasi 20 Gy yang diaplikasikan pada planlet anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) menghasilkan rata-rata persentase jumlah planlet berakar yang cukup tinggi dibandingkan dengan perlakuan dosis iradiasi lain selain kontrol. Keadaan tersebut diduga diakibatkan karena kerusakan yang disebabkan oleh dosis iradiasi 20 Gy tidak begitu besar sehingga sebagian besar planlet masih mampu memulihkan diri lebih cepat dan akhirnya mampu tumbuh secara normal. Sementara itu pada perlakuan dosis iradiasi 40 Gy dan 60 Gy memiliki rata-rata persentase planlet berakar lebih rendah dibandingkan dengan dosis iradiasi 20 Gy. Perlakuan dosis iradiasi 80 dan 100 Gy memiliki rata-rata persentase planlet berakar paling rendah. Terbentuknya akar pada perlakuan dosis tersebut baru terlihat pada minggu ke-12 dengan rata-rata planlet berakar sebesar 1%. Keadaan tersebut diduga diakibatkan karena pemberian dosis iradiasi sinar gamma yang terlalu tinggi mengakibatkan besarnya kerusakan sel pada plb sehingga mengakibatkan banyaknya plb yang mati dan pada plb yang mampu bertahan hidup akan mengalami pertumbuhan yang sangat lambat. Tabel 5 Persentase planlet berakar per-botol anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) pada berbagai dosis iradiasi sinar gamma Dosis MST (Gy) 6 9 12 15 18 22 0 6a 21a 54a 56a 69a 76a 20 0b 5b 37b 55a 58a 64b 40 0b 2bc 11c 23b 40b 51c 60 0b 2bc 10c 16bc 31b 39d 80 0b 0c 1c 6cd 8c 11e 100 0b 0c 1c 3d 4c 6e KK(%) 223 69 38.9 34.2 26.9 20 Keterangan : Angka pada kolom yang sama yang diikuti huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata berdasarkan DMRT pada taraf α=5% Hasil analisis ragam menunjukkan bahwa perlakuan dosis iradiasi memberi pengaruh sangat nyata menurunkan rata-rata jumlah akar pada planlet. Semakin tinggi dosis iradiasi yang diberikan maka jumlah akar yang dihasilkan akan semakin sedikit (Tabel 6). Menurut Gonzales (2007) bahwa dosis iradiasi
14 yang diberikan pada tiga spesies anggrek tanah menyebabkan penurunan terhadap jumlah akar mulai dari dosis 10 Gy dan pertumbuhan semakin terhambat pada dosis yang lebih tinggi. Kerusakan sel yang diakibatkan oleh iradiasi yang diberikan berpengaruh terhadap pertumbuhan akar. Semakin tinggi dosis yang diberikan maka semakin sedikit jumlah akar yang dihasilkan oleh tanaman akibat kerusakan sel tanaman yang semakin besar. Menurut Kurniati (2004) bahwa dosis iradiasi 10 Gy dan 20 Gy adalah dosis yang masih sesuai untuk pertumbuhan akar dan pertumbuhan daun pada anggrek Phalaenopsis hinamatsuri x Dtps. Modern beauty. Tabel 6 Rata-Rata jumlah akar per-botol anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) pada Berbagai Dosis Iradiasi sinar Gamma Dosis MST (Gy) 6 9 12 15 18 22 0 0.24a 1.08a 3.72a 5.88a 7.72a 11.28a 20 0b 0.2b 2.76b 5.16a 7.4a 9.56a 40 0b 0.08bc 1.4cd 2.36b 4.32b 6.88b 60 0b 0.08bc 1.8c 2.12b 4.24b 5.8b 80 0b 0c 1.04d 1.24c 1.6c 1.88c 100 0b 0c 1.04d 1.24c 1.6c 1.84c KK(%) 200 53.3 43.5 35.1 35.27 34.33 Keterangan : Angka pada kolom yang sama yang diikuti huruf yang sama menunjukkan hasil yang tidak berbeda nyata berdasarkan DMRT pada taraf α=5% Pada minggu ke-6 belum terlihat adanya pembentukan akar pada semua eksplan yang diradiasi kecuali pada dosis 0 Gy, pertumbuhan akar pada dosis iradiasi 20, 40 dan 60 Gy baru terjadi pada minggu ke-9. Pada perlakuan dosis iradiasi 20 hingga 60 Gy masih memiliki rata-rata jumlah akar cukup banyak. Pada perlakuan dosis iradiasi 80 dan 100 Gy memiliki rata-rata jumlah akar perbotol sangat sedikit. Keadaan tersebut diduga diakibatkan karena banyaknya planlet anggrek yang mati serta terhambatnya pertumbuhan planlet akibat pemberian iradiasi sinar gamma dengan dosis yang terlalu tinggi. Akibatnya planlet tidak mampu membentuk akar dengan baik. Menurut Wattimena (1990) proses pembentukan akar dimulai dari sel meristem yang secara terus menerus membelah membentuk sekelompok sel-sel kecil (primordia akar) yang terus menerus berkembang. Sel meristem yang terkena iradiasi sinar gamma dengan dosis yang terlalu tinggi maka akan terjadi kerusakan yang besar termasuk pada sel meristem dan selanjutnya pertumbuhan planlet akan terhambat dan planlet tidak akan mampu berkembang membentuk akar maupun daun. Planlet yang tidak berakar pada percobaan ini terjadi pada perlakuan dosis iradiasi 80 dan 100 Gy. Kedua dosis iradiasi ini mengakibatkan kerusakan sel yang terlalu besar sehingga mengakibatkan banyaknya plb yang mati pada fase awal, dan plb yang masih dapat bertahan hidup selanjutnya tidak dapat berkembang dengan baik dan menghambat pertumbuhan daun serta akar pada planlet. Menurut Devy dan Sastra (2006) terjadinya penghambatan pertumbuhan akar pada tanaman jahe hasil iradiasi sinar gamma diduga diakibatkan karena adanya gangguan aktivitas auksin endogen yang terjadi setelah proses iradiasi sehingga konsentrasi endogen berkurang dan akarpun tidak terbentuk.
Persentase Plb Hidup 15 Lethal Dose (LD) Hasil analisis LD 30 dan LD 50 pada plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) yang sudah diiradiasi pada 6 taraf dosis iradiasi sinar gamma menghasilkan kurva Polynomial Fit dengan persamaan (y= 97.769-1.918x + 0.0321x 2-0.0002x 3 ) dan didapatkan nilai LD 30 pada dosis iradiasi 19.7697 dan untuk LD 50 pada dosis iradiasi 67.3504 (Gambar 5). Hasil tersebut menunjukkan bahwa kemungkinan mutan putative terbanyak yang akan didapatkan berada diantara dosis iradiasi 19.7697 hingga 67.3504 karena pada rentang dosis tersebut kematian yang diakibatkan oleh proses iradiasi sinar gamma masih dibawah 50 persen. S = 8.57506537 r = 0.98077288 108.10 91.90 75.70 59.50 43.30 LD 30 = 19.7697 LD 50 = 67.3504 27.10 10.90 0.0 18.3 36.7 55.0 73.3 91.7 110.0 Dosis Iradiasi Gamma Gambar 5. Nilai LD 30 serta LD 50 berdasarkan persentase hidup plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) Penelitian yang dilakukan oleh Kurniati (2004) pada plb anggrek Phalaenopsis hinamatsuri x Doritaenopsis modern beauty didapatkan nilai LD 50 27.8084. Penelitian yang dilakukan oleh Romeida et al. (2013) didapatkan bahwa mutan terbanyak yang dihasilkan pada proses iradiasi sinar gamma pada plb anggrek Spatoglotis plicata Blum dihasilkan pada dosis sekitar LD 50. Nilai LD 50 yang didapatkan pada penelitian yang dilakukan oleh Romeida et al. (2013) berdasarkan persentase plb hidup adalah 47.71 dan nilai LD 30 yang didapatkan adalah 35.69. Nilai LD 50 dari kedua penelitian tersebut berbeda dengan nilai LD 50 yang diperoleh pada penelitian iradiasi sinar gamma pada plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith). Perbedaan besarnya nilai LD 50 tersebut diduga disebabkan karena perbedaan sensitivitas plb dalam menerima radiasi sinar gamma. Sensitifitas tersebut diduga diakibatkan karena perbedaan jenis anggrek atau perbedaan umur plb yang diberikan paparan sinar gamma sehingga mengakibatkan berbedanya ketebalan dari dinding sel. Keragaman Planlet Iradiasi sinar gamma dapat menyebabkan terjadinya perubahan di semua bagian tanaman termasuk daun dan akar. Pada daun pengaruh iradiasi sinar gamma dapat menyebabkan berubahnya ukuran dan bentuk daun. Pada perlakuan iradiasi sinar gamma yang diaplikasikan mengakibatkan beberapa daun berubah bentuk diantaranya adalah munculnya daun yang berbentuk melebar dan berbentuk spiral (Tabel 7). Data yang didapatkan menunjukkan bahwa bentuk
16 memanjang masih sangat dominan dibandingkan dengan bentuk daun yang lain. Perubahan bentuk daun yang teramati terdapat hampir pada setiap perlakuan iradiasi dengan persentase yang tidak terlalu besar. Bentuk daun yang paling beragam ada pada perlakuan dosis iradiasi 60 Gy dan 80 Gy. Penelitian yang dilakukan oleh Royani et al.(2012) mendapatkan bentuk daun spiral pada tanaman obat sambiloto hasil iradiasi sinar gamma cobalt 60. Pada penelitian lain yang dilakukan oleh Romeida et al. (2013) menghasilkan daun spiral pada tanaman anggrek Spatoglotis plicata blume hasil iradiasi sinar gamma dengan dosis 30 Gy. Menurut Kurniati (2004) keragaman bentuk daun pada anggrek Phalaenopsis hinamatsuri x Doritaenopsis modern beauty muncul sebagai akibat adanya abnormalitas sel mutan yang berkembang menjadi jaringan dan organ yang berbeda dari sel asalnya. Tabel 7 Morfologi daun anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) hasil iradiasi sinar gamma pada 22 MST Perlakuan Persentase (Gy) Memanjang Melebar Spiral (normal) 0 100 (122/122) 0 0 20 98.42 (125/127) 0 1.57 (2/127) 40 95.57 (108/113) 4.42 (5/113) 0 60 80.73 (88/109) 18.35 (20/109) 0.92 (1/109) 80 94.54 (51/55) 3.64 (2/55) 3.64 (2/55) 100 83.33 (25/30) 16.67 (5/30) 0 *Data dalam kurung menunjukkan banyaknya bentuk daun tertentu per total jumlah daun Bentuk daun normal pada planlet anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) adalah memanjang dengan ujung yang runcing. Perubahan bentuk daun yang teramati yakni bentuk melebar dan spiral (Gambar 6). a b c Gambar 6. Keragaman bentuk daun anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) hasil iradiasi sinar gamma. (a) Daun memanjang (normal), (b) Daun melebar, (c) Daun spiral Perlakuan dosis iradiasi sinar gamma juga berpengaruh terhadap petumbuhan akar. Ukuran akar pada setiap dosis iradiasi menunjukkan adanya perbedaan yang terjadi karena dosis iradiasi sinar gamma yang diaplikasikan menyebabkan terhambatnya pertumbuhan tanaman. Semakin tinggi dosis iradiasi yang diberikan maka kerusakan yang dialami oleh tanaman akan lebih besar
17 sehingga menghambat pertumbuhan tanaman termasuk pertumbuhan akar (Tabel 8). Tabel 8 Morfologi akar planlet anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) hasil iradiasi sinar gamma pada 22 MST Perlakuan Besar Sedang Kecil (Gy) 0 24.56 (84/342) 26.61 (91/342) 48.83 (167/342) 20 18.66 (53/294) 28.91 (85/294) 53.06 (156/294) 40 13.48 (29/215) 36.74 (79/215) 49.77 (107/215) 60 13.47(26/193) 34.2 (66/193) 52.3 (101/193) 80 0 27.71 (23/83) 72.29 (60/83) 100 0 23.53 (20/85) 76.47 (65/85) *Data dalam kurung menunjukkan banyaknya ukuran akar tertentu per total jumlah akar Akar berukuran kecil pada setiap perlakuan dosis iradiasi memiliki persentase yang labih besar dibandingkan dengan akar dengan berukuran sedang dan besar. Keadaan tersebut menunjukkan bahwa pengaruh dosis iradiasi pada dosis tinggi mengakibatkan terhambatnya proses pertumbuhan planlet anggrek sehingga akar sulit untuk tumbuh menjadi besar. Hasil penelitian ini didapatkanbahwa akar berukuran besar sama sekali tidak terbentuk pada perlakuan dosis iradiasi 80 Gy dan 100 Gy. Gambar 7. Bentuk planlet anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) pada berbagai dosis iradiasi sinar gamma Iradiasi sinar gamma mempengaruhi kemampuan tumbuh tanaman semakin tinggi dosis iradisi sinar gamma yang diberikan maka kemampuan tumbuh tanaman akan semakin terhambat. Pengamatan secara visual memperlihatkan bahwa dosis iradiasi 80 dan 100 Gy memiliki pertumbuhan yang lebih lambat dibandingkan dengan dosis iradiasi lain. Planlet terlihat menjadi lebih pendek dibandingkan dosis iradiasi 0 hingga 60 Gy (Gambar 7).
18 SIMPULAN DAN SARAN Simpulan Iradiasi sinar gamma bepengaruh nyata menurunkan pertumbuhan plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith) berdasarkan peubah persentase plb hidup, persentase plb berkecambah, jumlah daun, jumlah akar, jumlah multiplikasi, dan persentase plb berakar serta ukuran akar. Semakin tinggi dosis iradiasi yang dihasilkan maka semakin rendah kemampuan hidup dan pertumbuhan plb anggrek Dendrobium lasianthera (JJ. Smith). Dosis iradiasi sinar gamma yang menghasilkan pertumbuhan plb paling lambat adalah dosis iradiasi 80 dan 100 Gy. Perubahan bentuk daun yang teramati yakni munculnya daun berbentuk melebar dan berbentuk spiral pada planlet hasil iradiasi. Planlet hasil iradiasi sinar gamma yang memiliki keragaman paling tinggi ada pada dosis iradiasi 60 dan 80 Gy. Lethal dose 30% (LD 30 ) berada pada dosis iradiasi 19.7697 dan untuk LD 50 berada pada dosis iradiasi 67.3504. Saran Penelitian lanjutan perlu dilakukan hingga fase generatif sehingga seluruh perubahan tanaman akibat proses iradiasi sinar gamma dapat diidentifikasi dan dilihat kestabilan genetiknya. DAFTAR PUSTAKA Ahloowalia BS, Maluszynski M. 2001. Induced mutation A new paradigm in plant breeding. Euphytica. 118:167-173 Devy L, Sastra DR. 2006. Pengaruh iradiasi sinar gamma terhadap kultur in vitro tanaman jahe. J. Sains dan Teknologi Indonesia. 8(1) : 7-14 Fatimah N. 2008. Teknologi kultur jaringan. Surabaya(ID): PBT Pertama BBP2TP Gonzales MA. 2007. Radiosensitivity of three species of ground orchid (Spatoglotis plicata, S. kimballiana var. angustifolia and S. tomentosa) to acute gamma radiation. Tesis. Philippines (PH) : Central Luzon State University Gunawan LW. 1992. Teknik kultur jaringan tanaman. Bogor(ID). Departemen Pendidikan dan Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi Pusat Antara Universitas Bioteknologi IPB. Handayani F. 2007. Mengenal dan bertanam anggrek. Bandung (ID). Amico Handoyo F. 2008. Anggrek hibrida ragam dan perawatannya. Jakarta (ID) : Flona Serial Harmita, Radji M. 2008. Buku ajar analisis hayati edisi 3. Jakarta (ID): Buku kedokteran ECG Herawati T dan Setiamihardja R, 2000. Pemuliaan Tanaman Lanjutan. Diktat kuliah. Fakultas Pertanian. Bandung (ID). Universitas padjajaran Kurniati R. 2004. Induksi keragaman genetik Phalaenopsis hinamatsuri x Doritaenopsis modern beauty dan Phalaenopsis amabilis x Phalaenopsis