ANALISIS BENZO(a)PYRENE PADA DAGING SAPI, KAMBING DAN BABI YANG DIBAKAR DENGAN METODE GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROSCOPY (GC-MS) SKRIPSI Untuk memenuhi sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1 Lusyana Dewi Apriani 0908010013 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO PURWOKERTO 2013
1 ANALISIS BENZO(a)PYRENE PADA DAGING SAPI, KAMBING DAN BABI YANG DIBAKAR DENGAN METODE GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROSCOPY (GC-MS) SKRIPSI Untuk memenui sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1 Lusyana Dewi Apriani 0908010013 FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO PURWOKERTO 2013 i
2 ii
3 iii
4 iv
5 INTISARI LUSYANA DEWI APRIANI. Analisis Benzo(a)pyrene pada Daging Sapi, Kambing dan Babi yang dibakar dengan Metode Gas Chromatography-Mass Spectroscopy (GC-MS). Dibawah Bimbingan: Nunuk Aries Nurulita dan Suparman Latar Belakang: Benzo(a)pyrene atau BaP merupakan senyawa kelompok Hidrokarbon Polisiklik Aromatik (HPA) yang berasal dari produk hasil pembakaran bahan-bahan organik yang tidak sempurna. BaP ditemukan pada makanan yang proses pengolahannya dibakar atau dipanggang. Berdasarkan latar belakang tersebut diharapkan dapat melakukan analisis benzo(a)pyrene pada daging sapi, daging kambing dan daging babi yang dibakar dengan metode GC- MS. Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk menentukan adanya benzo(a)pyrene pada daging sapi, daging kambing dan daging babi yang dibakar dengan metode menggunakan GC-MS. Metode Penelitian : Kandungan benzo(a)pyrene pada sampel daging dianalisis secara kualitatif dan kuantitatif menggunakan metode GC-MS. Hasil: Hasil validasi metode diperoleh persamaan garis regresi linear y= 2088,3x + 948,967 dengan nilai koefisien korelasi (r) sebesar 0,997, nilai perolehan kembali (% recovery) sebesar 66073,15 %, uji ketelitian dengan nilai SD sebesar 372,0168, KV sebesar 13,78 % dan ketelitian alat 86,22%, nilai LOD sebesar 0,118 ppm dan LOQ sebesar 0,393 ppm. Validasi pada analisis benzo(a)pyrene dengan Gas Chromatography Mass Spectroscopy (GC-MS) hasilnya kurang valid karena ada parameter yang tidak memenuhi persyaratan. Sampel daging sapi, kambing dan babi yang dibakar yang dianalisis dengan metode GC-MS tidak terdeteksi adanya senyawa benzo(a)pyerene Kesimpulan: Validasi pada analisis benzo(a)pyrene dengan GC-MS hasilnya kurang valid karena ada parameter yang tidak memenuhi persyaratan. Sampel daging sapi, kambing dan babi yang dibakar yang dianalisis dengan metode GC- MS tidak terdeteksi adanya senyawa benzo(a)pyerene Kata Kunci: daging sapi, daging kambing, daging babi, benzo(a)pyrene, GC-MS. v
6 ABSTRACT LUSYANA DEWI APRIANI. Analysis of Benzo(a)pyrene in toasted Beef, Mutton and Pork using Gas Chromatography-Mass Spectroscopy (GC-MS) Method. Under supervising Nunuk Aries Nurulita and Suparman. Background: Benzo(a)pyrene or BaP is a group of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAH) compounds is derived from incomplete combustion of organic materials on toasted or grilled food. This study perform to analyzed BaP in toasted beef, mutton and pork using GC-MS method. Objective: This study aimed to determine benzo(a)pyrene on toasted beef, mutton and pork using the GC-MS method. Methode: The content of benzo(a)pyrene in meat samples were analyzed qualitatively and quantitatively using GC-MS method. Results: The results of the validation method of linear regression line equation y = 2088.3 x + 948.967 with a correlation coefficient of (r) 0.997, value recovery (% recovery) of 66073,15 %, SD test accuracy with a value of 372.0168 KV amounted to 13.78% and 86.22% precision tools, the value of LOD and LOQ of 0.118 ppm 0.393 ppm. Validation on analysis of benzo(a)pyrene by GCMS results are less valid because there are ineligible validation parameters. Samples on toasted Beef, mutton and pork were analyzed by GC-MS method was not detected the benzo(a)pyrene compound. Conclusion: Validation on analysis of benzo(a)pyrene by GCMS results are less valid because there are ineligible validation parameters. Samples on toasted Beef, mutton and pork were analyzed by GC-MS method was not detected the benzo(a)pyrene compound. Key words: beef, mutton, pork, benzo(a)pyrene, GC-MS. vi
7 HALAMAN PERSEMBAHAN Skripsi ini dipersembahkan untuk orang-orang yang berpengaruh dan mewarnai kehidupan penulis: 1. Ayahku Mardianto dan Ibuku Iin Suhartini S.Pd tercinta yang selalu memberikan semangat, motivasi dan doanya. 2. Adikku Imam Setiawan yang selalu memberikan doa dan dukungan. 3. Gito Sanjoyo S.Hut yang telah memberikan semangat, dukungan dan doanya. 4. Bapa dan Ibu kos terima kasih atas doa dan dukungannya. 5. Semua keluarga besar, terima kasih atas semua doa dan dukungannya. 6. Teman-teman Fakultas Farmasi angkatan 2009. vii
8 PRAKATA Alhamdulilah, segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-nya sehingga penulis mampu menyelesaikan skripsi ini yang berjudul ANALISIS BENZO(a)PYRENE PADA DAGING SAPI, KAMBING DAN BABI YANG DIBAKAR DENGAN METODE GAS CHROMATOGRAPHY-MASS SPECTROSCOPY (GC-MS). Skripsi ini disusun guna memenuhi persyaratan untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Muhammadiyah Purwokerto. Penulis menyadari bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak, penulis tidak dapat menyelesaikan tugas ini dengan baik. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada : 1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H. Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto 2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si, Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi dan dosen pembimbing I yang telah memberikan arahan, masukan dan bimbingan dalam penyusunan skripsi ini. 3. Suparman, S. F, M. Sc., Apt. selaku dosen pembimbing II yang telah memberikan arahan, masukan dan bimbingan dalam penyusunan skripsi ini. 4. Dr. Asmiyenti D. S.Si., M.Si. dan Wiranti Sri Rahayu, M.Si., Apt. selaku penguji skripsi yang telah banyak memberikan saran bagi kesempurnaan skripsi. 5. Seluruh dosen Fakultas Farmasi UMP yang telah memberikan ilmunya sehingga dapat membantu penulis dalam menyelesaikan penulisan skripsi ini. 6. Bapak Mardianto dan Ibu Iin Suhartini S.Pd selaku orang tua atas bimbingannya serta kasih sayang yang begitu besar, juga dukungan yang diberikan dan yang mengiringi setiap langkah perjalananku. 7. Imam Setiawan adikku terima kasih atas dukungan dan doanya dalam setiap langkah perjalananku. 8. Felentina, Resti dan Siti yang telah berjuang bersama dan terima kasih atas kerjasamanya dalam menyelesaikan skripsi ini. viii
9 9. Sahabat-sahabatku (Lusiana, Athi, Hendri, Dani, Agil) terima kasih atas dukungan dan doa dari semuanya. 10. Teman-teman Farmasi angkatan 2009 terima kasih atas kebersamaannya. 11. Semua pihak yang telah membantu penulis dalam menulis skripsi ini. Besar harapan penulis, penulisan sksipsi ini dapat bermanfaat. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak penyusunan skripsi ini tidak akan berjalan dengan baik. Semoga skripsi ini dapat berguna untuk setiap orang yang membacanya. Amien. Purwokerto, Agustus 2013 Penulis LUSYANA DEWI APRIANI ix
10 RIWAYAT HIDUP Nama : Lusyana Dewi Apriani NIM : 0908010013 Fakultas : Farmasi Tempat, tanggal lahir : Kuningan, 01 Maret 1991 Jenis Kelamin : Perempuan Alamat :RT/RW 02/01 Kampung Manis Desa Haurkuning Kecamatan Nusaherang Kabupaten Kuningan Jawa Barat. Riwayat Pendidikan SD : SD N 2 Haurkuning Lulus: 2003 SLTP : SMP N 1 Kadugede Lulus: 2006 SLTA : SMK Farmasi Bakti Indonesia Lulus: 2009 PT : Universitas Muhammadiyah Purwokerto x
11 DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL... i HALAMAN PERSETUJUAN... HALAMAN PENGESAHAN... iii HALAMAN PERNYATAAN... INTISARI... v ABSTRACT... vi HALAMAN PERSEMBAHAN... PRAKATA... viii RIWAYAT HIDUP... x DAFTAR ISI... xi DAFTAR TABEL... xiii DAFTAR GAMBAR... DAFTAR LAMPIRAN... xv BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang... 1 B. Rumusan Masalah... 2 C. Tujuan Penelitian... 3 D. Manfaat Penelitian... 3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Daging... 4 B. Benzo(a)pyrene... 4 C. Gas Chromatography -Mass Spectroscopy (GC-MS)... 7 BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian... 10 B. Variabel Penelitian... 10 C. Definisi Variabel Penelitian... 10 D. Waktu dan Tempat Penelitian... 11 E. Bahan dan Alat... 11 F. Cara Penelitian... 11 1. Preparasi Sampel... 11 2. Ekstraksi... 12 3. Validasi Metode... 12 a. Pembuatan larutan baku... 12 ii iv vii xiv xi
12 b. Pembuatan kurva baku... 12 c. Uji akurasi (accuracy)... 12 d. Uji ketelitian (precision)... 13 e. Linearitas... 13 f. Batas deteksi dan batas kuantitas (LOD dan LOQ)... 13 4. Analisis Kualitatif dan Kuantitatif menggunakan Gas Chromatography-Mass Spectroscopy (GC-MS)... 14 G. Analisis Data... 15 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Preparasi Sampel... 16 B. Ekstraksi... 17 C. Validasi metode Penetapan Kadar Benzo(a)pyrene secara Gas Chromatography-Mass Spectroscopy (GC-MS)... 17 1. Pembuatan larutan baku dan kurva baku... 17 2. Uji Akurasi (accuracy)... 18 3. Ketelitian (precision)... 19 4. Linearitas... 20 5. Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitas (LOQ)... 20 D. Analisis Menggunakan Gas Chromatography-Mass Spectroscopy (GC-MS)... 21 BAB V PENUTUP A. Kesimpulan... 28 B. Saran... 28 DAFTAR PUSTAKA... 29 LAMPIRAN... 33 xii
13 DAFTAR TABEL Tabel Halaman Tabel 1. Sifat fisiska dan kimia benzo(a)pyrene... 5 Tabel 2. Sistem GC-MS... 14 Tabel 3. Data hasil uji akurasi... 19 Tabel 4. Data hasil uji ketelitian... 19 Tabel 5. Data perhitungan batas deteksi dan batas kuantitas... 21 xiii
14 DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman Gambar 1. Struktur senyawa benzo(a)pyrene... 5 Gambar 2. Kurva hubungan konsentrasi larutan standar benzo(a)pyrene dengan luas area... 18 Gambar 3. Kromatogram benzo(a)pyrene 0,1... 23 Gambar 4. Kromatogram sampel kontrol daging sapi... 24 Gambar 5. Kromatogram sampel daging sapi... 24 Gambar 6. Kromatogram sampel kontrol daging kambing... 25 Gambar 7. Kromatogram sampel daging kambing... 25 Gambar 8. Kromatogram sampel kontrol daging babi... 26 Gambar 9. Kromatogram sampel daging babi... 26 xiv
15 DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman Lampiran 1. Metode GC-MS yang digunakan. 34 Lampiran 2. Data hasil penentuan kurva baku. 35 Lampiran 3. Data hasil perhitungan uji akurasi.. 36 Lampiran 4. Data hasil perhitungan uji ketelitian (precision). 37 Lampiran 5. Data hasil perhitungan batas deteksi (LOD) dan batas kuantitas (LOQ).. 38 Lampiran 6. Hasil Kromatogram standar 39 Lampiran 7. Hasil kromatogram uji akurasi (accuracy) 44 Lampiran 8. Hasil kromatogram uji ketelitian (precision). 50 Lampiran 9. Hasil kromatogram sampeln.. 56 xv