MEIKE LIEMOWA STUD1 HUBUNGAN ANTARA KOMBINASI ASAM KLAVULANAT DAN AMOKSISILIN DENGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI (DHP) TERHADAP STAPHYLOCOCCUS AUREUS PENGHASIL BETA-LAKTAMASE I I Lie I I YCP, Kf FAKULTAS FARMASI UNWERSITAS KATOLIK WIDYA MANDALA SURABAYA 19 9 5
STUD1 NUBUNGAN ANTARA KOMBINASI ASAM KLAVULANAT DAN AMOKSISTLIN DENGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI (DHP) TERIIADAP STAPHYLOCOCCUS AUREUS PENGHAS I L BETA-LAKTAMASE SKRIPSI Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi Pada Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya 1995 Oleh Meike Liemowa No. Pokok : 2443089002 Disetujui Oleh Dr. Bamhang Soekardjo, SU; Pembimbing I Dra. Dien Ariani Pembimbing I1
KATA PENGANTAR Puji syukur kchadirat Tuhan Yang Maha esa atas segaln karunia dan rnhmatnya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini. Adapun skripsi ini clibuat guna mclengkapi syarat untuk rnemperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi I'niversitas Ratolik Widya Mandala Surabaya. Pada kesempatan ini, pe~kenakanlah penulis meng- ucapkan rasa terima kasihnya yang tak terhingga kepada : 1. Dr. Bamhang Soekardjo, S.U. dan Dra. Dien Ariani selaku peml~inibing yang telah nleluangkan waktu (1 it engah kesibukannpa. member i kan bimbingan- bin~bingan, saran-saran dan pengarahan yang sangat membantu dan berarti bagi terselesaikonnya skripsi in i. 2. Ibu Pimpinan Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala beserta staf dan seluruh karyawan yang telah banyak niemberikan kemudahan dalarn penyediaan fasilitas dan pelayanannya selama pengerjaan skripsi ini. 3. Kepala Laboratoriurn K.F. Kualitatif. K.F. Kuantitatif dan F.T. Steril Fakultas Farrnasi Universitas Ratolik Ridya Mandala. i i
4. Krpala Laboratorium Mikrobiologi R.S.U.D. dr. Sutomo Surabaya. 5, Segenap staf pengajar yang dengan rela telah rnemberikan ilmu yang rnereka rniliki sehingga penulis dapat melengkapi bahan studi untuk rnenyelesaikan skripsi ini. 6. Bapak Pirnpinan PT. Beecham Pharmaceuticals yang telah rnemberikan bahan amoksisilin trihidrat dan Kaliurn klavulanat untuk penelitian skripsi ini. 7. Orang tua saya yang telah bersusah payah sehingga penulis dapat rnenyelesaikan studi di Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala. 8. Semua pihak yang telah rnernberikan dukungan baik secara langsung maupun tidak langsung dalarn pembuatan skripsi ini. Akhirnya penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna, oleh karena itu saran dan kritik yang positif sangat penulis harapkan dalam rangka penyempurnaannya. Semoga hasil penelitian ini b'ermanfaat bagi dunia farmasi khususnya. Surabaya, Mei 1995 Penyusun
DAFTAR I SI Ha l aman KATA PENGANTAR.... ii DAFTAR IS1... DAFTAR LAMPIRAN... DAFTAR TABEL... DAFTAR GAMBAR... BAR iv viii I PENDAHULUAN... 1 1.1. Latar Relakang Masalah... 1 1.2. Perrnasalahan... 1.3. Tujuan Penelitian... 1.4. Hipotesa... I1 TINJAUAN PUSTARA... I I. I. Staph~lococcus aureus... 6 ix x 11.1.2. Morfologi... 11.1.3. Fisiologi clan Sifat Biokimia... 11.1.4. Struktur Antigen... S 11.1.5. Metabolit... 11.1.6. Patogenitas... 11.1.7. Resistensi... II.l.ti3 Pengobatan... 14
11.1.10. Identifikasi... 11.2. Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotika 11.2.1. Macam-macam Resistensi... 11.2.2. Mekanisme Resistensi Bakteri... 11.3. Penisilin... 11.3.1. Aktivitas dan Spektrum Antimikroba... 11.3.2. Mekanisme Aksi... 11.3.3. Resistensi Bakteri Terhadap Penisilin 11.3.4.1'. Amoksisilin... 11.3.4.2. Sifat Fisika-Kimia Amoksisilin Trihidrat... 11.4. Enzim Beta-Laktamase... 11.4.1. Sintesis Enzim Beta-Laktamase... 11.4.2. Lokasi Enzim Beta-Laktamase... 11.4.3. Interaksi Enzim Beta-Laktarnase dengan Molekul Beta-Laktam... 11.4.4. Deteksi Enzirn Beta-Laktamase... 11.5. Senyawa Pengikat Beta-laktamase... 11.5.1. Asam Klavulanat... 11.5.2. Struktur Asarn Klavulanat... 11.5.3. Mekanisme Kerja Asam Rlavulanat... 1I.G. Kombinasi Antibiotika... 11.6.1. Teori-teori yang Mendasari Penggunaan Kombinasi Antibiotika... 11.6.2. Kerugian - kerugian pada penggunaan Kombinasi Antibiotika... 11.6.3, Mekanisme Kerja dari Kombinasi Antibiotika yang Menghasilkan Efek Sinergis... zr
11.6.4. Kombinasi Asam Klavulanat dan Turunan Penisilin... 11.6.5. Studi Laboratorium Kombinasi Penisi-. lin dan Pengikat Beta-Laktarnase... 11.7. Evaluasi Daya Antibakteri... 11.7.1. Metode Pengenceran Bertingkat... 11.7.2. Metode Difusi Agar... 11.7.3. Metode Vible Plate Count... III METODOLOGI PENE. LITIAN... 111.1. Bahan Penelitian dan Bahan Penunjang Penelitian... 111.1.1. Bahan Penelitian... 111.1.2. Bahan Penunjang Penelitian... 111.2. Alat-alat... 111.3. Bakteri U ji... 111.4. Metode Kerja... 111.4.1. Rancangan Penelitian... 111.4.2. Analisa Data... 111.4.3. Tahapan Penelitian... 111.4.3.1. Pembuatan Media Perbenihan... 111.4.3.2. Identifikasi Kualitatif Rakteri Staphylococcus aureus... 111.4.3.3. Uji Adanya Enzim Beta-laktzmase Dengan Metode Indometri Terhadap Kuman Percobaan... 111.4.3.4. Pernbuatan Larutan 31C Farland I... 111.4.3.5. Pembuatan Suspensi Kuman...
111.4.3.7. Penyediaan Cakram Yang Mengandung Kornbinasi Amoksisilin dan Asam Klavulanat... IV 111.4.3.8. Pengukuran Aktivitas Antihakteri (DHP) Dari Kombinasi Asam Klavu- lanat dan Amoksisilin Pada Staphy- ~OCOCCUS aureus... HASIL PERCOBAAN... i... IV.l. Perneriksaan Staphylococcus aureus... IV.l.l. Perneriksaan Makroskopis Koloni Staphylococcus aureus Pada Media Selektif MSA dan BPA... IV. 1.2. Perneriksaan Mikroskopis Staphylococcus aureus Dengan Pengecat an Gram. IV.1.3. Uji Katalase, Uji Koagulase dan Uji Fermentasi Manitol Dar i Staphylo- COCCUS aureu.5... IV.2. Uji Beta-laktamase Pada Staphylococcus aureus... IV.3. Pengukuran Daerah Hamhatan Pertumbuhan Staphylococcus aureus Karena Kombinasi Asam Klavulanat dan Amoksisilin... \I PEMBAHASAN... VI KESIMPULAN... VII SARAN-SARAN... ABSTRAK... DAFTAR PUSTAKA...
DAFTAR LAMPIRAN Lampi ran I. 11. 111. IV. VI. VII. VIII. IX. X. XI. Tahap Pemeriksaan StaphyIococcus aureus Penyediaan Cakram Mengandung Kombinasi Antibiotika... Tahapan Uji Aktivitas antibiotika... Penentuan Regresi Terbaik Secara " Stepwise Regresion "... Profil dari Hubungan/Persaman yang Ter- baik... Penentuan Kornbinasi Optimal... Daftar Tabel F... Foto Hasil Percobaan... Sertifikat Analisis Amoksisilin Trihidrat..,... Sertifikat Analisis Kalium Klavulanat... Surat Keterangan... viii
DAFTAR TABEL Tabe 1 Ha 1 aman I. Perbedaan Staphylococcus aureus Dengan Stalococcus Lain... 17 11. Rancangan Penelitian... 56 111. Analisis Varian Metode Langkah Mundur... 6 1 IV. Hasil Pemeriksaan Makroskopis Koloni Staphylococcus aureus Pada Media Selektif MSA dan BPA... V. Hasil Perneriksaan Mikroskopis Staphylococcus aureus Dengan Pengecatan Gram... VI. Hasil Uji Katalase, Uji Koagulase dan Uji Fermentasi Mani to1 Dari Staphylococcus aureus... VII. HasiI Gji Beta-laktamase Pada Staphyloco- ccus aureus... VIII. Hasil Pengukuran Daerah Harnbatan Perturnbuhan Staphyfococcus aureus Karena Kornbinasi Asam Klavulanat dan Amoksisilin...
DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Model Stereonletrik Dari Dreiding Antara Penisilina dan D-alanil-D-alanin... 2. Lokasi Enzirn Beta-laktarnase Pada Bakteri Gram Positif... 3. Lokasi Enzirn Beta-laktarnase Pada Bakteri Gram Negatif... 4. Hasil Peruraian Enzim Beta-laktamase dan Enzirn Amidase Pada Penisilin... 5. Fragrnentasi Jntrarnolekular Asam Klavulanat.. 6. Pengukuran Diameter Daerah Hamba t an Perturnbuhan Bakteri...