BAB III METODE PENELITIAN. dan Teknologi Universitas Airlangga dan di rumah kaca (green haouse) UPT

dokumen-dokumen yang mirip
BAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Sains dan

BAB III METODE PENELITIAN. Pangan dan Hortikultura Sidoarjo dan Laboratorium Mikrobiologi, Depertemen

BAB III METODE PENELITIAN. Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Airlangga Surabaya dan

LAMPIRAN. Jumlah mikroba (CFU/ml) penyusun pupuk hayati (Biofertilizer) pada media selektif

BAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Departemen

BAB III METODE PENELITIAN. Februari 2012 bertempat di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Sains dan

BAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilaksanakan di areal persawahan dusun Mojorejo

komersial, pupuk SP 36, pupuk KCl, NaCl, Mannitol, K 2 HPO 4, MgSO 4.7H 2 O,

BAB III METODE PENELITIAN. Mikrobiologi Tanah dan Rumah Kaca Balai Penelitian Tanaman Kacang- kacangan dan Umbiumbian

BAB III METODELOGI PENELITIAN

BAB III METODE PENELITIAN. Pelaksanaan pengambilan sampel tanah dilakukan di kecamatan Samarinda

II. MATERI DAN METODE

BAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Departemen Biologi

BAB III METODE PENELITIAN

III. METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi

LAMPIRAN. 1. Pertambahan tinggi tanaman kacang hijau (Vigna radiata) Jenis Perlakuan

METODE PENELITIAN. Penelitian dilaksanakan pada bulan Agustus sampai Februari 2014.

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga BAB I PENDAHULUAN

BAB III METODE PENELITIAN

METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi Fakultas

III. METODE PENELITIAN

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga. Lampiran : Uji ANAVA jumlah tubuh buah dalam satu rumpun jamur tiram. One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

III. METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi

BAB III METODE PENELITIAN. Departemen Biologi Fakultas Sains dan Teknologi, Universitas Airlangga,

III. METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan pada bulan Januari hingga Maret 2015.

BAB III METODE PENELITIAN. Biologi dan Laboratorium Biokimia, Departemen Kimia Fakultas Sains dan

III. BAHAN DAN METODE. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Juli sampai bulan November 2009, di

III. MATERI DAN METODE

III. BAHAN DAN METODE. Pelaksanaan vermicomposting dilakukan di rumah plastik FP Unila. Perhitungan

III. BAHAN DAN METODE. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi Pertanian dan

BAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan selama ± 2 bulan (Mei - Juni) bertempat di

BAHAN DAN METODE. Hrp -, IAA +, BPF Hrp -, IAA + + , BPF Hrp. , BPF Hrp -, IAA +, BPF + Hrp. , BPF Hrp. , BPF Hrp. Penambat Nitrogen Penambat Nitrogen

BAB III METODE PENELITIAN

BAB III METODE PENELITIAN. variasi suhu yang terdiri dari tiga taraf yaitu 40 C, 50 C, dan 60 C. Faktor kedua

III BAHAN DAN METODE

II. METODOLOGI PENELITIAN. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana,

BAHAN DAN METODE Bahan Waktu dan Tempat Penelitian Rancangan Percobaan ProsedurPenelitian

BAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini telah dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi, Departemen

III. METODE PENELITIAN. dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Lampung dari bulan Januari sampai

METODE PENELITIAN. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Lampung.

BAB III METODE PENELITIAN. A. Jenis Penelitian. Jenis penelitian ini adalah penelitian non-eksperimental dengan pendekatan

BAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Departemen

III. METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Botani, Fakultas Matematika dan Ilmu

BAB III METODE PENELITIAN. Februari sampai Juli 2012 di Laboratorium Mikrobiologi Departemen Biologi,

BAB III METODE PENELITIAN. lengkap (RAL) pola faktorial yang terdiri dari 2 faktor. Faktor pertama adalah variasi

BAB III METODE PENELITIAN. penelitian bulan Desember 2011 hingga Februari 2012.

III. METODE PENELITIAN. Penelitian telah dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi dan Molekuler. Penelitian ini di lakukan pada Agustus 2011.

III. METODE PENELITIAN. Pengetahuan Alam, Universitas Lampung. reaksi, mikropipet, mikrotube, mikrotip, rak tabung reaksi, jarum ose,

III. METODE PENELITIAN. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorik untuk menguji

MATERI DAN METODE. Pekanbaru. Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan Mei sampai September

bio.unsoed.ac.id III. METODE PENELITIAN A. Materi, lokasi, dan waktu penelitian 1. Materi penelitian 1.1. Alat

BAHAN DAN METODE. Pembiakan P. fluorescens dari Kultur Penyimpanan

II. MATERI DAN METODE PENELITIAN. agar, arang, NaOH, HCl dan akuades. spirtus, timbangan analitik, beker gelas, LAF vertikal.

bio.unsoed.ac.id III. METODE PENELITIAN

III. METODE KERJA. Penelitian ini telah dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas

BAB III MATERI DAN METODE. Penelitian mengenai penambahan starter ekstrak nanas dengan level berbeda

III. METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Botani, Jurusan Biologi, Fakultas

III. METODOLOGI PENELITIAN

BAB III METODE PENELITIAN. dari Lactobacillus plantarum yang diisolasi dari usus halus itik Mojosari (Anas

BAB III METODE PENELITIAN

MATERI DAN METODE PENELITIAN

BAB III METODE PENELITIAN. A. Rancangan Penelitian. Pada metode difusi, digunakan 5 perlakuan dengan masing-masing 3

LAMPIRAN. Sterilisasi alat dan bahan. Mengisolasi dan Menghitung Populasi Awal dari Bakteri yang Terkandung dalam Biofertilizer komersial

BAHAN DAN METODE. Kasa Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan dengan ketinggian tempat

BAB III METODE PENELITIAN. menggunakan campuran bakteri (Pseudomonas aeruginosa dan Pseudomonas

BAB III METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilaksanakan dengan rancang bangun penelitian

BAB III METODOLOGI PENELITIAN. Pelaksanaan penelitian ini dilakukan di Laboratorium Kesehatan Masyarakat,

III. METODE PENELITIAN. Persiapan alat dan bahan yang akan digunakan. Pembuatan media PDA (Potato Dextrose Agar)

BAHAN DAN METODE. Metode Penelitian

BAB III METODOLOGI PENELITIAN

BAB III METODE PENELITIAN. dan dilanjutkan dengan identifikasi jenis bakteri Escherichia coli, Salmonella sp,

BAB III METODE PENELITIAN

III. MATERI DAN METODE. Penelitian ini telah dilaksanakan pada bulan Desember 2013 Maret 2014

BAHAN DAN METODE. Penelitian dilaksanakan pada bulan Mei-Agustus Uji potensi

III. METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan pada bulan April - Mei 2015 di Laboratorium

III. METODE PENELITIAN

III. METODOLOGI PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan pada bulan Juli 2012 sampai bulan Desember 2012 di

BAB III METODE PENELITIAN. dan tingkat kerusakan dinding sel pada jamur Candida albicans merupakan penelitian

BAB III METODE PENELITIAN. metode wawancara semi terstruktur (semi-structured interview) disertai dengan

BAB III METODE PENELITIAN

BAHAN DAN METODE Tempat dan Waktu Bahan Peremajaan Aktinomiset dari Kultur Penyimpanan Perbanyakan Sclerotium rolfsii dari Kultur Penyimpanan

PETUNJUK PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI. Disusun oleh : Dr. Henny Saraswati, M.Biomed PROGRAM STUDI BIOTEKNOLOGI FAKULTAS ILMU-ILMU KESEHATAN

III. BAHAN DAN METODE. Penelitian ini dilaksanakan pada di lahan sawah milik warga di Desa Candimas

BAB III METODE PENELITIAN. Biologi FST Universitas Airlangga pada bulan Maret sampai dengan bulan Juli

LAMPIRAN Lampiran 1. Pembuatan Medium Potato Dextrose Agar (PDA) (Fardiaz,1993).

BAHAN DAN METODE Waktu dan Tempat Bahan dan Alat Metode Penelitian Penyediaan Isolat Fusarium sp. dan Bakteri Aktivator

III. METODE PENELITIAN. Penelitian ini dilakukan pada Mei 2011 di Laboratorium Mikrobiologi dan

BAB III METODE PENELITIAN. diperoleh dari perhitungan kepadatan sel dan uji kadar lipid Scenedesmus sp. tiap

BAB III METODE PENELITIAN. Jenis percobaan pada penelitian ini adalah penelitian eksperimental,

BAHAN DAN METODE. Tempat dan Waktu

LAMPIRAN. Ekstraksi dengan 25 ml etil asetat digojog 10 menit dalam corong pemisah. Etil asetat dipisahkan

BAB III METODE PENELITIAN. Rancangan Penelitian ialah menggunakan pola faktorial 4 x 4 dalam

III. BAHAN DAN METODE

III. BAHAN DAN METODE

III. BAHAN DAN METODE. Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Ilmu Penyakit Tumbuhan, Bidang

METODE PENELITIAN. Penelitian ini telah dilakukan pada bulan Januari-Mei 2015 di Laboratorium

METODE PENELITIAN. Penelitian ini di laksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Jurusan Biologi

BAHAN DAN METODE Bahan dan Alat

mesh, kemudian dimasukkan kedalam erlenmeyer 500 ml selanjutnya diamkan selama 30 menit

BAB III MATERI DAN METODE

Transkripsi:

BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Airlangga dan di rumah kaca (green haouse) UPT Pengembangan Agribisnis Tanaman Pangan Dan Hortikultura Lebo Sidoarjo, selama 6 bulan dari bulan Februari 2012 sampai bulan Juli 2012. 3.2 Bahan dan Alat Penelitian 3.2.1 Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini dibagi menjadi beberapa bagian yaitu: a. Bibit cabai rawit Bibit cabai rawit (Capsicum frutescens L.) yang digunakan dalam penelitian ini adalah cabai rawit (Capsicum frutescens L.) varietas Cakra putih yang diperoleh dari PT. BISI Internasiona Tbk Surabaya. b. Media tanam Media tanam yang digunakan dalam penelitian ini adalah tanah yang diperoleh dari persawahan Desa Beji Kecamatan Bangil Kabupaten Pasuruan. 39

40 c. Pupuk kimia Pupuk kimia yang digunakan dalam penelitian ini adalah NPK 16-16-16. Pupuk ini diperoleh dari UPT Pengembangan Agribisnis Tanaman Pangan dan Hortikultura Lebo Sidoarjo. d. Pupuk Kompos Pupuk kompos yang digunakan dalam penelitian ini adalah pupuk kompos yang akan dikombinasikan dalam media tanam. Pupuk kompos tersebut diperoleh dari Rumah Kompos Dinas Kebersihan dan Pertamanan Bratang Surabaya. e. Bahan pembuatan dan analisis kualitas biofertilizer Bahan biofertilizer yang digunakan dalam penelitian ini adalah bakteri dan yeast koleksi dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Airlangga. Komposisi bakteri-bakteri tersebut antara lain terdiri dari Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Pseudomonas sp., Azotobacter sp., Azospirillum sp., Cellulomonas sp. Rhizobium sp., Lactobacillus sp., dan dari kelompok yeast yang digunakan adalah Saccharomyces cereviceae. Media pertumbuhan yang digunakan untuk pertumbuhan bakteri adalah NB (Nutrient broth), glukosa 1% dan akuades steril. Media yang digunakan untuk pembuatan biofertilizer adalah media pertumbuhan bakteri, akuades, dan molase 2%. Media yang digunakan untuk menganalisis kualitas biofertilizer sebelum digunakan untuk pemupukan adalah media semisolid NFB (Nitrogen Fixing Bacteria), media Pikovskaya, media MSA (Mannitol Salt Agar), media PDA (Potato Dextrose Agar), media MRSA (Mannitol Rhogasa Sharpe Agar), dan CMC Agar (Carboxyl Methil Cellulose).

41 3.2.2 Alat Penelitian Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini dibagi menjadi beberapa bagian yaitu: a. Alat pembuatan dan analisis kualitas biofertilizer Alat-alat yang digunakan adalah botol kultur, kapas, alumunium foil, pipet volume, gelas ukur, timbangan analitik Shimadzu AY-220, erlenmeyer, spatula, jarum ose, shaker, kompor listrik, autoclave Ogawa Seiki, pembakar bunsen, tabung reaksi, cawan petri, colony conter, inkubator Heraues Instrument, rak tabung reaksi, solatip, corong, jerigen, cawan petri, spiritus, alkohol, dan kertas label. b. Alat penanaman cabai rawit Alat-alat yang digunakan untuk penanaman cabai rawit adalah sekrup, dan polybag 10 kg dengan panjang 35 cm, lebar 17, 5 cm. c. Alat pemupukan dan penyiraman Alat-alat yang digunakan untuk pemberian biofertilizer adalah alat penyemprot, ember, dan gelas ukur. d. Alat pengukuran pertumbuhan dan produktivitas tanaman cabai rawit Alat-alat yang digunakan untuk pengukuran pertumbuhan (tinggi tanaman dan jumlah daun) adalah penggaris, hand counter, dan untuk pengukuran produktivitas tanaman cabai rawit digunakan timbangan.

42 3.3 Rancangan Penelitian Penelitian ini adalah penelitian eksperimental yang menggunakan rancangan faktorial dengan pola 2x5 dengan tiga kali pengulangan. Faktor perlakuan pertama adalah dosis pupuk (D) yang terdiri dari D- (dosis biofertilizer 0 ml/tanaman), D+ (pupuk kimia NPK 10 g/tanaman), D5 (dosis biofertilizer 5 ml/tanaman), D10 (dosis biofertilizer 10 ml/tanaman), D15 (dosis biofertilizer 15 ml/tanaman). Faktor kedua adalah media tanam (M) yang terdiri dari M1 dan M2. M1 merupakan perlakuan dengan menggunakan media tanam tanah dan M2 merupakan perlakuan dengan menggunakan kombinasi media tanam tanah dan kompos dengan perbandingan 1:1. Kombinasi perlakuan penelitian dapat dilihat pada tabel 3.1 Tabel 3.1 Kombinasi perlakuan penelitian Media tanam Dosis M1 M2 D- M1D- M2D- D+ M1D+ M2D+ D5 M1D5 M2D5 D10 M1D10 M2D10 D15 M1D15 M2D15 Keterangan: M1 : media tanam tanah

43 M2 : kombinasi media tanam tanah dan kompos (1:1) D- : dosis biofertilizer 0 ml/tanaman D+ : dosis pupuk kimia NPK 10 g/tanaman D5 D10 D15 : dosis biofertilizer 5 ml/tanaman : dosis biofertilizer 10 ml/tanaman : dosis biofertilizer 15 ml/tanaman 3.4 Variabel Penelitian Variabel yang digunakan dalam penelitian ini adalah: a). Variabel bebas : dosis biofertilizer, media tanam, dan kombinasi dosis biofertilizer dengan media tanam. b). Variabel terikat : pertumbuhan cabai rawit (tinggi tanaman (cm) dan jumlah daun (helai) dan produktivitas cabai rawit (berat buah (g) dan jumlah buah (buah)). c). Variabel terkendali : jenis tanaman cabai rawit (Capsicum frutescens L.), jenis tanah, dan perlakuan dalam polybag. 3.5 Prosedur Penelitian Langkah-langkah penelitian yang akan dilakukan meliputi tahap-tahap sebagai berikut : 3.5.1 Tahap Pembuatan Biofertilizer 3.5.1.1 Pembuatan media NB (Nutrient Broth) NB (Nutrient Broth) merupakan media yang digunakan sebagai media pertumbuhan dan perbanyakan mikroba, mikroba yang ditumbuhkan dan

44 diperbanyak di media ini berasal dari peremajaan dari media NA miring dan PDA. Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan 700 ml media NB ini adalah 9,1 g media NB, 1% glukosa dari 700 ml yaitu 7 g, kemudian kedua bahan tersebut dilarutkan di akuades sambil diaduk, apabila kedua bahan tersebut susah untuk dilarutkan, maka bisa dilakukan pemanasan di kompor listrik. Setelah terlarut dengan sempurna, larutan media tersebut dipindahkan kedalam tujuh botol kultur yang masing-masing botol berisi 100 ml media NB. Ketujuh mulut botol kultur disumbat dengan kapas dan alumunium foil, kemudian disterilkan dengan pemanasaan uap (autoclave) pada tekanan 1 atm, dan pada suhu 121 o C selama ± 15 menit. Setelah media-media tersebut dingin, di tanami masing-masing inokulan yang terdiri atas : (1) Azotobacter sp. dan Azospirillum sp. (bakteri fiksasi nitrogen non simbiotik); (2) Rhizobium sp. (bakteri fiksasi nitrogen simbiotik); (3) Bacillus megaterium dan Bacillus subtilis (bakteri pelarut fosfat); (4) Pseudomonas sp. (bakteri pelarut fosfat); (5) Cellulomonas sp. (bakteri dekomposer); (6) bakteri dekomposer Lactobacillus sp.; dan (7) Saccharomyces cereviceae (yeast dekomposer) yang telah diremajakan. Masing masing mikroba diambil satu ose, kemudian di homogenkan dengan shaker selama semalam. Setelah homogen, biakan-biakan tersebut diinkubasi selama 24 jam pada suhu ruangan, dengan tujuan agar jumlah mikrobanya berkembang menjadi banyak, sebelum dilakukan pencampuran pada media pupuk. 3.5.1.2 Pembuatan larutan molase 2% Dalam pembuatan pupuk hayati ini digunakan molase 2%, molase ini dipergunakan sebagai sumber karbon oleh mikroba setelah menjadi pupuk.

45 Molase ini dibuat dengan cara melarutkan molase murni 126 ml dengan menggunakan akuades atau air isi ulang sebanyak 6174 ml kemudian dimasukkan kedalam jerigen sehingga total volume 6300 ml. Pembuatan molase ini dikerjakan pada saat akan melakukan proses percampuran bakteri-bakteri dan yeast yang berada dalam tujuh botol kultur ke dalam jerigen. 3.5.1.3 Pencampuran mikroba Mikroba yang telah diinkubasi pada media NB di tujuh botol kultur, dicampurkan dalam jerigen yang sudah berisi 6300 ml larutan molase 2%, proses percampuran mikroba yang sudah diinkubasi dapat langsung dituang pada larutan molase 2% yang sudah dibuat terlebih dahulu di dalam jerigen. Setelah dihomogenkan, maka pupuk hayati (biofertilizer) sudah selesai dibuat. Tetapi sebelum dipakai dalam proses pemupukan, pupuk tersebut harus diinkubasi selama 24 jam terlebih dahulu untuk pengujian analisis kualitas pupuk. 3.5.1.4 Analisis kualitas pupuk hayati (biofertilizer) Analisis kualitas pupuk hayati (biofertilizer) dilakukan setelah pupuk hayati yang sudah jadi telah diinkubasi selama 24 jam. Analisis kualitas pupuk ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui keberadaan mikroba-mikroba fungsional yang terdapat pada pupuk tersebut, agar dapat bekerja secara optimal pada proses pemupukan nantinya. Pada analisis kualitas pupuk ini dibutuhkan enam macam media untuk menumbuhkan mikroba-mikroba tersebut. Enam media dibuat untuk menumbuhkan mikroba, dan dibedakan berdasarkan kemampuan yang dimiliki oleh mikroba-mikroba tersebut. Keenam media tersebut adalah:

46 a). Media semi solid NFB (Nitrogen Fixing Bacteria) Media semi solid NFB (Nitrogen Fixing Bacteria) merupakan media yang digunakan untuk mengetahui keberadaan bakteri pemfiksasi nitrogen yang non simbiosis dalam konsorsium pupuk hayati. Adapun bakteri pemfiksasi nitrogen yang ditumbuhkan dengan media ini adalah Azotobacter sp. dan Azospirillum sp.. Pertumbuhan bakteri tersebut dalam media ini dihitung secara kuantitatif dengan menggunakan metode MPN (Most Probably Number). Media ini dibuat dengan campuran bahan-bahan kimia seperti : Malic acid 0,5 g, KOH 0,8 g, K 2 HPO 4 0,05 g, FeSO 4 0,005 g, MnSO 4 0,001 g, MgSO 4 0,01 g, NaCl 0,002 g, CaCl 2 0,002, N 2 MoO 2 0,001, Brotimol blue 1 ml, Bacto Agar 0,18 g, yang dilarutkan dalam 100 ml akuades, kemudian dimasak di kompor listrik, kemudian setelah agak dingin dimasukkan kedalam 9 tabung reaksi sebanyak 10 ml. Kemudian disterilkan dengan pemanasan uap (autoclave) selama 15 menit. Setelah disterilkan dan keadaan media dalam tabung reaksi dalam keadaan dingin, bisa langsung dilakukan penanaman. Sebelum dilakukan penanaman, pupuk hayati yang akan diuji keberadaan bakteri pemfiksasi nitrogennya, dilakukan pengenceran sampai 10-7, dengan mengambil 25 ml sampel pupuk kemudian diencerkan kedalam 225 ml akuades steril, sebanyak tujuh kali, setelah itu pada pengenceran 10-6 dan 10 7 diambil sebagai sampel yang akan ditanam. Sampel tersebut ditanam pada tiga tabung reaksi media NFB sebanyak 0,1 ml, kemudian tiga tabung lagi ditanami sampel sebanyak 1 ml, dan tiga tabung reaksi lagi ditanami sampel sebanyak 10 ml. Kesembilan sampel tersebut diinkubasikan selama lima sampai sepuluh hari. Setelah itu dilihat pertumbuhannya, pertumbuhan bakteri tersebut dapat dilihat

47 dari adanya selaput tipis dibawah permukaan media yang membentuk cincin pelikel. Kemudian jumlah tabung positif dicocokkan dengan tabel MPN. b). Media Pikovskaya Media Pikovskaya merupakan media yang digunakan untuk mengetahui keberadaan bakteri pelarut fosfat dalam konsorsium pupuk hayati. Adapun bakteri pelarut fosfat yang ditumbuhkan dengan media ini adalah Pseudomonas sp., Bacillus subtilis, dan Bacillus megaterium. Pertumbuhan bakteri tersebut dalam media ini dihitung secara kuantitatif dengan menggunakan metode TPC (Total Plate Count). Media ini dibuat dengan campuran bahan-bahan kimia seperti : glukosa 1 g, Ca 3 PO 4 0,25 g, (NH 4 ) 2 SO 4 0,025 g, KCl 0,01 g, MgSO 4 0,005 g, MnSO 4 0,005 g, FeSO 4 0,005 g, yeast ekstrak 0,025 g, agar-agar 0,75 g, akuades 50 ml. Kemudian bahan-bahan tersebut dicampurkan dan dilakukan pelarutan di dalam erlenmeyer. Setelah itu dilakukan pemasakan di kompor listrik, kemudian disterilkan dengan pemanasan uap (autoclave) selama 15 menit. Setelah disterilkan dan keadaan media dalam erlenmeyer dalam keadaan dingin, bisa langsung dilakukan penuangan pada cawan petri steril sebanyak 25 ml, cawan petri tersebut sebelumnya sudah diberi sampel pupuk pada pengenceran 10-6 dan 10-7, kemudian dilakukan homogenisasi dengan cara memutar-mutar cawan petri membentuk angka delapan. Setelah biakan dalam cawan petri tersebut padat, kemudian diinkubasi selama tiga hari pada suhu ruangan. Jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada cawan petri setelah diinkubasi dihitung dengan menggunakan colony counter, dan koloni yang dihitung adalah koloni yang di sekitarnya terdapat zona terang.

48 c). Media MSA (Mannitol Salt Agar) Media MSA (Mannitol Salt Agar) merupakan media yang digunakan untuk mengetahui keberadaan bakteri pemfiksasi nitrogen yang dapat bersimbiosis dengan perakaran tanaman dalam konsorsium pupuk hayati. Adapun bakteri pemfiksasi nitrogen yang ditumbuhkan dengan media ini adalah Rhizobium sp.. Pertumbuhan bakteri tersebut dalam media ini dihitung secara kuantitatif dengan menggunakan metode TPC (Total Plate Count). Media ini dibuat dengan campuran bahan-bahan kimia seperti : MSA 5,55 g, akuades 50 ml. Kemudian bahan-bahan tersebut dicampurkan dan dilakukan pelarutan di dalam erlenmeyer. Setelah itu dilakukan pemasakan di kompor listrik, kemudian disterilkan dengan pemanasan uap (autoclave) selama 15 menit. Setelah disterilkan dan keadaan media dalam erlenmeyer dalam keadaan dingin, bisa langsung dilakukan penuangan pada cawan petri steril sebanyak 25 ml, cawan petri tersebut sebelumnya sudah diberi sampel pupuk pada pengenceran 10-6 dan 10-7, kemudian dilakukan homogenisasi dengan cara memutar-mutar cawan petri membentuk angka delapan. Setelah biakan dalam cawan petri tersebut padat, kemudian diinkubasi selama tiga hari pada suhu ruangan. Jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada cawan petri setelah diinkubasi dihitung dengan menggunakan colony counter, dan koloni yang dihitung adalah koloni yang di sekitarnya terdapat zona terang. d). Media PDA (Potato Dextrose Agar) Media PDA (Potato Dextose Agar) merupakan media yang digunakan untuk mengetahui keberadaan yeast dekomposer dalam konsorsium pupuk hayati.

49 Adapun yeast dekomposer yang ditumbuhkan dengan media ini adalah Saccharomyces cereviceae. Pertumbuhan yeast tersebut dalam media ini dihitung secara kuantitatif dengan menggunakan metode TPC (Total Plate Count). Media ini dibuat dengan campuran bahan-bahan kimia seperti : PDA 1,95 g, akuades 50 ml. Kemudian bahan-bahan tersebut dicampurkan dan dilakukan pelarutan di dalam erlenmeyer. Setelah itu dilakukan pemasakan di kompor listrik, kemudian disterilkan dengan pemanasan uap (autoclave) selama 15 menit. Setelah disterilkan dan keadaan media dalam erlenmeyer dalam keadaan dingin, bisa langsung dilakukan penuangan pada cawan petri steril sebanyak 25 ml, cawan petri tersebut sebelumnya sudah diberi sampel pupuk pada pengenceran 10-6 dan 10-7 dan antibiotik kloramfenikol steril sebanyak 1 ml, kemudian dilakukan homogenisasi dengan cara memutar-mutar cawan petri membentuk angka delapan. Setelah biakan dalam cawan petri tersebut padat, kemudian diinkubasi selama empat sampai lima hari pada suhu ruangan. Jumlah koloni yeast yang tumbuh pada cawan petri setelah diinkubasi dihitung dengan menggunakan colony counter dan koloni yang dihitung adalah koloni yang seperti tetes susu. e). Media MRSA (Mannitol Rhogasa Sharpe Agar) Media MRSA (Mannitol Rhogasa Sharpe Agar) merupakan media yang digunakan untuk mengetahui keberadaan bakteri dekomposer dalam konsorsium pupuk hayati. Adapun bakteri dekomposer yang ditumbuhkan dengan media ini adalah Lactobacillus sp.. Pertumbuhan bakteri tersebut dalam media ini dihitung secara kuantitatif dengan menggunakan metode TPC (Total Plate Count). Media ini dibuat dengan campuran bahan-bahan kimia seperti : MRS 1 g, yeast ekstrak

50 0,75 g, glukosa 1 g, agar-agar 0,85 g, akuades 50 ml. Kemudian bahan-bahan tersebut dicampurkan dan dilakukan pelarutan di dalam erlenmeyer. Setelah itu dilakukan pemasakan di kompor listrik, kemudian disterilkan dengan pemanasan uap (autoclave) selama 15 menit. Setelah disterilkan dan keadaan media dalam erlenmeyer dalam keadaan dingin, bisa langsung dilakukan penuangan pada cawan petri steril sebanyak 25 ml, cawan petri tersebut sebelumnya sudah diberi sampel pupuk pada pengenceran 10-6 dan 10-7, kemudian dilakukan homogenisasi dengan cara memutar-mutar cawan petri membentuk angka delapan. Setelah biakan dalam cawan petri tersebut padat, kemudian diinkubasi selama tiga hari pada suhu ruangan. Jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada cawan petri setelah diinkubasi dihitung dengan menggunakan colony counter dan koloni yang dihitung adalah koloni yang media di sekitarnya berubah warna dari merah menjadi kuning. f). Media CMC Agar (Carboxyl Methil Cellulose) Media CMC Agar (Carboxyl Methil Cellulose) merupakan media yang digunakan untuk mengetahui keberadaan bakteri pendegadasi selulosa dalam konsorsium pupuk hayati. Adapun bakteri pendegadasi selulosa yang ditumbuhkan dengan media ini adalah Cellulomonas sp.. Pertumbuhan bakteri tersebut dalam media ini dihitung secara kuantitatif dengan menggunakan metode TPC (Total Plate Count). Media ini dibuat dengan campuran bahan-bahan kimia seperti : selulosa 0,5 g, NH 4 NO 3 0,05 g, NaCl 0,1 g, agar-agar 0,5 g, akuades 50 ml. Kemudian bahan-bahan tersebut dicampurkan dan dilakukan pelarutan di dalam erlenmeyer. Setelah itu dilakukan pemasakan di kompor listrik, kemudian

51 disterilkan dengan pemanasan uap (autoclave) selama 15 menit. Setelah disterilkan dan keadaan media dalam erlenmeyer dalam keadaan dingin, bisa langsung dilakukan penuangan pada cawan petri steril sebanyak 25 ml, cawan petri tersebut sebelumnya sudah diberi sampel pupuk pada pengenceran 10-6 dan 10-7, kemudian dilakukan homogenisasi dengan cara memutar-mutar cawan petri membentuk angka delapan. Setelah biakan dalam cawan petri tersebut padat, kemudian diinkubasi selama tiga hari pada suhu ruangan. Jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada cawan petri setelah diinkubasi dihitung dengan menggunakan colony counter dan koloni yang dihitung adalah koloni yang di sekitarnya terdapat zona terang. 3.5.2 Tahap Penanaman Cabai Rawit Proses penanaman cabai rawit terdiri atas beberapa tahap yang diawali dengan pembenihan, penyiapan media tanam, penanaman, pemeliharaan, pemanenan, dan perawatan hasil panen. Masing-masing tahap akan dijabarkan sebagai berikut : 1. Pembenihan Biji cabai rawit yang akan ditanam, dilakukan penjemuran terlebih dahulu, kemudian dilakukan perendaman dalam air, dalam perendaman ini akan ada biji yang mengapung dan biji yang tenggelam. Biji yang baik untuk digunakan dalam pembenihan adalah biji yang tenggelam. Pembenihan ini di lakukan di tempat penyemaian terlebih dahulu sebelum dipisahkan dan dipindahkan ke dalam polybag. Tempat penyemaian diberi media tanam terlebih dahulu, kemudian

52 benihnya di semaikan dan dilakukan penyiraman, lalu ditutup dengan media tanah lagi kira-kira setebal 1-1,5 cm agar terhindar dari sengatan matahari. 2. Penyiapan media tanam Sebelum dimasukkan ke dalam polybag, tanah harus diolah terlebih dahulu. Adapun cara pengolahannya adalah tanah dibersihkan dari kotoran terlebih dahulu, kemudian dilakukan pencampuran dengan kompos. Kemudian media tanah yang sudah siap dimasukkan ke dalam polybag, setelah itu di lakukan pemupukan 3 hari sebelum ditanami. 3. Penanaman Setelah menyiapkan media tanam dan memasukkannya dalam polybag, langkah selanjutnya adalah membuat lubang pada media tanam, kemudian memasukkan satu bibit yang sudah mempunyai 7-8 helai daun yang sudah berumur sebulan ke dalam lubang tadi dan kemudian di tutup dengan sedikit media tanam, kemudian dilakukan penyiraman. Setelah itu bibit yang sudah ditaman dalam polybag. 4. Pemeliharaan Pada tahap ini dilakukan penyiraman tanaman sehari sekali, penyulaman tanaman, pemberantasan gulma, pembuangan daun sakit, pemupukan. Pemupukan dilakukan pada 30 dan 60 hari setelah tanam. Disamping itu juga di lakukan pengukuran tinggi tanaman, dan penghitungan jumlah daun yang tumbuh pada tiap tanaman setiap seminggu sekali.

53 5. Pemanenan Cabai rawit yang sudah ditanam dalam polybag selama 80 85 hari biasanya sudah berbuah dan siap dipanen. Buah yang di panen adalah buah yang sudah sudah tua, biasanya ditandai dengan warna buah yang menguning atau berwarna merah. Pada waktu pemanenan ini dilakukan penghitungan jumlah buah di tiap tanaman kemudian dilakukan penimbangan buah pertanaman. 3.6 Prosedur Pengambilan Data Data yang diambil untuk mengetahui proses pertumbuhan adalah tinggi tanaman (cm) yang diukur dari permukaan tanah sampai ujung kuncup teratas dan jumlah daun (helai) per tanaman setiap minggu. Sedangkan untuk proses produktivitas data yang diambil adalah jumlah buah (buah) per tanaman yang datanya didapat dari tiga kali pengambilan dan berat buah (g/pohon cabai), buah yang dipanen adalah buah yang sudah tua atau sudah matang. 3.7 Analisis Data Data yang didapat dari penelitian ini adalah data pertumbuhan yang meliputi jumlah daun (helai) dan tinggi tanaman (cm), serta data produktivitas yang meliputi jumlah buah (buah) per tanaman dan berat buah per tanaman (g) dianalisis secara deskripsi dan dihitung nilai RAE (Relative Agronomic Effectiveness) nya.

54 3.8 Penilaian Efektivitas Pupuk Hayati Keefektifan pupuk hayati didasarkan pada peningkatan pertumbuhan tanaman pada fase vegetatif (tinggi tanaman), hasil panen, atau kualitas hasil yang diperbandingkan dengan perlakuan lain berdasarkan hasil analisis sidik ragam dan uji beda nyata atau nilai RAE (Relative Agronomic Effectiveness). Nilai RAE ditentukan dengan membandingkan antara nilai hasil perlakuan pupuk hayati yang di uji dikurangi hasil dari perlakuan kontrol dan nilai hasil perlakuan standar dikurangi perlakuan kontrol dikalikan 100% (Machay et al. (1984) dalam Saraswati dkk. (2008)). Persamaannya adalah : RAE = hasil pada pupuk hayati yang diuji - hasil pada kontrol x 100% hasil pada pupuk standar hasil pada kontrol