Reaksi BIKIMIA PADA UJI BAKTERILGI o UJI BIKIMIA KETEREGA 1. Uji fermentasi karbohidrat Uji positif ditandai dengan perubahan warna indikator BTB (brom timol biru) pada media biakan dari biru menjadi kuning. al ini menunjukkan terbentuknya senyawa yang bersifat asam dari hasil fermentasi karbohidrat seperti asam laktat. Uji negatif ditandai dengan warna indikator BTB yang tetap berwarna biru. al ini menunjukkan tidak terbentuk senyawa yang bersifat asam. 2. Uji Methyl red 3. Uji Sitrat Uji negatif ditandai dengan perubahan warna indikator metil merah menjadi kuning yang menunjukkan p diatas 6,2 Uji positif ditandai dengan warna indikator metil merah yang berwarna merah yang menunjukkan p dibawah 4,4 Uji positif ditandai dengan perubahan warna indikator BTB dalam media biakan dari hijau menjadi biru, yang menunjukkan terbentuknya senyawa yang bersifat basa yaitu amonium ( 4 ) Asam dan basa (identifikasi senyawa yang bersifat asam atau basa dengan mengggunakan indikator BTB) indikator warna BTB asam basa kuning biru Terbentuknya asam campuran hasil fermentasi menyebabkan indikator BTB berwarna kuning Asam dan basa (identifikasi senyawa yang bersifat asam atau basa dengan mengggunakan indikator MR) indikator warna MR asam basa merah kuning Asam dan basa (identifikasi senyawa yang bersifat asam atau basa dengan mengggunakan indikator BTB) indikator warna BTB asam basa kuning biru REAKSI BIKIMIA LE MURSALIM
2 2 a a a sitrat sintase 2 - - 3 a 2 - trinatrium sitrat sitrat ion natrium bersifat basa sehingga menyebabkan warna indikator BTB berubah menjadi biru 4 4 2 P 4 4 amonium dihidrogen fosfat amonium 2 P 4 - dihidrogen posfat Uji negatif ditandai dengan warna indikator dalam medium biakan yang tetap berwarna hijau yang menunjukkan tidak terbentuknya senyawa yang bersifat basa dan masih terdapat senyawa yang bersifat asam dalam media biakan yaitu sitrat. 4. Uji Urease Uji positif ditandai dengan perubahan warna indikator merah fenol (MF) dalam media biakan dari kuning menjadi merah keunguan yang menunjukkan terbentuknya senyawa yang bersifat basa yaitu amoniak ( 3 ) ( 2 ) 2 Asam dan basa (identifikasi senyawa yang bersifat asam atau basa dengan mengggunakan indikator MF) indikator warna MF asam basa kuning Merah keunguan 3 bersifat basa sehingga menyebabkan warna indikator MF berubah menjadi merah keunguan REAKSI BIKIMIA LE MURSALIM
5. Uji oksidase Uji positif ditandai dengan terbentuknya warna hitam pada koloni bakteri setelah penambahan reagen uji oksidase. al ini menunjukkan bakteri memiliki enzim sitokrom oksidase yang dapat mengoksidasi reagen uji. Sedangkan uji negatif memberikan hasil uji yang sebaliknya yakni tidak terbentuk warna hitam pada koloni bakteri 6. Uji reduksi nitrat Uji positif ditandai dengan terbentuknya warna merah atau merah muda setelah penambahan reagen uji, yang menunjukkan nitrat telah tereduksi menjadi nitrit. Dan jika terbentuk gelembung gas pada tabung Durham, hal ini menunjukkan nitrit tereduksi menjadi gas nitrogen. Sedangkan uji negatif memberikan hasil uji yang sebaliknya yakni tidak terjadi perubahan warna dan tidak terbentuk gas - 3 2e - 2 Reaksi reduksi oksidasi (reaksi oksidasi reagen uji oleh enzim sitokrom oksidase) Reaksi reduksi oksidasi (persamaan reaksi reduksi dan identifikasi senyawa yang mengalami reaksi reduksi) 7. Uji hidrolisis pati Uji positif ditandai dengan terbentuknya zona bening disekitar daerah pertumbuhan bakteri dan tidak terjadi perubahan warna media setelah penambahan larutan iod. al ini menunjukkan amilum/pati telah terhidrolisis menjadi sakarida yang lebih sederhana, seperti maltosa dan glukosa Karbohidrat (reaksi hidrolisis suatu polisakarida dengan bantuan enzim dan mengidentifikasi suatu polisakarida dengan bantuan reagen yang spesifik untuk uji hidrolisis pati) REAKSI BIKIMIA LE MURSALIM
Pati o Materi penelitian Materi pembelajaran 8. Uji selulase Uji positif ditandai dengan terbentuknya zona bening disekitar daerah pertumbuhan bakteri, yang menunjukkan selulosa telah dihidrolisis oleh bakteri menjadi sakarida yang lebih sederhana. Sedangkan uji negatif memberikan hasil uji yang sebaliknya yakni tidak terbentuk zona bening Selulosa 9. Uji protease Uji positif ditandai dengan terbentuknya zona bening disekitar daerah pertumbuhan bakteri, yang menunjukkan protein telah terhidrolisis. Sedangkan uji negatif memberikan hasil uji yang sebaliknya yakni tidak terbentuk zona bening Karbohidrat (reaksi hidrolisis suatu polisakarida dengan bantuan enzim) (reaksi hidrolisis protein dengan bantuan enzim) 10. Uji pencairan gelatin Uji positif ditandai dengan mencairnya gelatin yang menunjukkan bakteri dapat menghasilkan enzim gelatinase yang dapat (reaksi hidrolisis gelatin menjadi peptida-peptida kecil) REAKSI BIKIMIA LE MURSALIM
menghidrolisis gelatin menjadi peptida-petida kecil sehingga tidak membentuk gel lagi. Sedangkan uji negatif memberikan hasil uji yang sebaliknya yakni gelatin tidak dapat mencair. Gelatin 11. Uji 2 S Uji positif yang ditandai dengan terbentuknya endapan hitam pada media biakan, yang menunjukkan bakteri memiliki enzim desulfurase yang dapat menghidrolisis asam amino dengan gugus samping S sehingga akan menghasilkan 2 S yang bereaksi dengan FeS 4 dan membentuk endapan hitam FeS. Sedangkan uji negatif memberikan hasil uji yang sebaliknya yakni tidak terbentuk endapan hitam pada media biakan. (hidrolisis asam amino yang memiliki gugus samping S dengan bantuan enzim) Asam amino yang memiliki gugus samping S seperti sistein dan metionin dapat dihidrolisis oleh enzim desulfurase. 2 S sistein desulfurase sistein 3 2 S 3 hidrogen sulfida asam piruvat amoniak 2S FeS 4 FeS 2 S 4 ferro sulfat ferro sulfida asam sulfat 12. Uji Indol Uji positif yang ditandai dengan terbentuknya warna merah pada kaldu media biakan, yang menunjukkan bakteri memiliki enzim (hidrolisis asam amino jenis triptofan yang memiliki gugus samping indol dengan bantuan enzim) REAKSI BIKIMIA LE MURSALIM
triptofanase yang dapat menghidrolisis asam amino jenis triptofan yang memiliki gugus samping indol sehingga indol akan bereaksi dengan reagen uji dan membentuk rosindol yang berwarna merah. 2 2 triptofan triptofanase 2 indol 3 asam piruvat 3 amoniak Asam amino jenis triptofan yang memiliki gugus samping indol dapat dihidrolisis oleh enzim triptofanase. 3 indol ( 3 ) 2 p-dimetil amino benzaldehida (reagen kovac) rosindol (berwarna merah) ( 3 ) 2 2 o Materi penelitian Materi pembelajaran 13. Uji katalase Uji positif ditandai dengan terbentuknya gelembung oksigen di sekitar koloni bakteri, yang menunjukkan bakteri mampu menghasilkan enzim katalase yang dapat mengkatalisis reaksi penguraian 2 2 menjadi 2 dan 2. Sedangkan uji negatif memberikan hasil uji yang sebaliknya yakni tidak terbentuk gelembung gas di sekitar koloni bakteri. Katalis (peran biokatalis dalam suatu reaksi kimia) REAKSI BIKIMIA LE MURSALIM
2 2 UJI BIKIMIA Uji fermentasi karbohidrat Uji positif ditandai dengan perubahan warna indikator BTB (brom timol biru) pada media biakan dari biru menjadi kuning. al ini menunjukkan terbentuknya senyawa yang bersifat asam dari hasil fermentasi karbohidrat seperti asam laktat. Uji negatif ditandai dengan warna indikator BTB yang tetap berwarna biru. al ini menunjukkan tidak terbentuk senyawa yang bersifat asam. Uji Methyl red Uji negatif ditandai dengan perubahan warna indikator metil merah menjadi kuning yang menunjukkan p diatas 6,2 Uji positif ditandai dengan warna indikator metil merah yang berwarna merah yang menunjukkan p dibawah 4,4 Uji Sitrat Uji positif ditandai dengan perubahan warna indikator BTB dalam media biakan dari hijau menjadi biru, yang menunjukkan terbentuknya senyawa yang bersifat basa yaitu amonium ( 4 ) REAKSI BIKIMIA LE MURSALIM
2 2 a a a sitrat sintase 2 - - 3 a 2 - trinatrium sitrat sitrat ion natrium 4 2 P 4 4 amonium dihidrogen fosfat amonium 2 P 4 - dihidrogen posfat Uji negatif ditandai dengan warna indikator dalam medium biakan yang tetap berwarna hijau yang menunjukkan tidak terbentuknya senyawa yang bersifat basa dan masih terdapat senyawa yang bersifat asam dalam media biakan yaitu sitrat. REAKSI BIKIMIA LE MURSALIM
2 2 triptofan triptofanase 2 indol 3 asam piruvat 3 amoniak 3 indol p-dimetil amino ( 3 ) 2 benzaldehida (reagen kovac) rosindol (berwarna merah) ( 3 ) 2 2 3-2e - 2 REAKSI BIKIMIA LE MURSALIM