BAB III TEKNIK PELAKSANAAN 3.1 Tempat dan Waktu Pelaksanaan Kegiatan ini dilaksanakan di Balai POM di Gorontalo, Jalan Tengah, Toto Selatan, Bone Bolango Gorontalo selama dua bulan, mulai dari Tanggal 8 Maret sampai 8 Mei 2012. 3.2 Alat dan Bahan 3.2.1 Penetapan Kadar Air Alat yang digunakan untuk Penetapan Kadar Air adalah Moisture balance tipe HG63 dan Bahan yang digunakan yaitu Kerupuk udang. 3.2.2 Penetapan Kadar Protein Alat yang digunakan untuk Penetapan Kadar Protein adalah Labu kjeldahl 100 ml, Alat penyuling dan kelengkapannya, Pemanas listrik / pembakar, Neraca analitik. Bahan adalah kerupuk udang dan Pereaksi adalah Indikator protein, HCl 0,1 N, H 3 BO 3 4%, NaOH 32 %, H 2 SO 4 pekat, Na 2 CO 3 3.3 Metode Pelaksanaan Metode yang digunakan adalah metode survei dan eksperimen. Dari hasil survei dan eksperimen di dapatkan data-data berupa data primer dan data sekunder. Data primer adalah data-data yang di dapatkan melalui wawancara langsung dengan kepala seksi dan Karyawan Pengujian Bahan Pangan Berbahaya dan Mikrobiologi Balai POM di Gorontalo dan eksperimen/pengujian PK Air dan Protein di labotorium Bahan Pangan Berbahaya dan Mikrobiologi/ Sedangkan data sekunder adalah data yang diperoleh dari studi literatur terhadap buku-buku, 15
serta data-data yang berasal dari internet yang berhubungan. dengan judul tugas akhir. 3.4 Objek yang Diamati Objek yang diamati selama kegiatan yang dilaksanakan di Balai POM di Gorontalo adalah Penetapan Kadar Air dan Protein pada Kerupuk udang 3.5 Prosedur Kerja 3.4.1 Penetapan Kadar Air Acuan : SNI. 01-2891-1992 butir 5.1 Ruang lingkup : Intruksi kerja ini digunakan untuk penetapan kadar air dalam contoh Prosedur : - Timbang seksama 1-2 gram contoh dalam Moisture balance tipe HG63. - Keringkan pada Moisture balance tipe HG63 suhu 105 0 C selama beberapa menit Kadar Air = W a W b W a 100% W a : bobot cuplikan sebelum dikeringkan, dalam gram W b : bobot dikeringkan, dalam gram 16
3.4.2 Penetapan Kadar Protein Pustaka : SNI 01-2891-1992 Prinsip : Senyawa nitrogen di ubah menjadi ammonium sulfat oleh H 2 SO 4 pekat. Ammonium sulfat yang terbentuk diuraikan dengan NaOH. Amoniak yang diikat oleh asam borat dan kemudian di titer dengan larutan baku asam Prosedur : a) Proses Dektruksi - Timbang seksama 0,5 gram cuplikan, masukkan kedalam labu kjeldahl 100 ml - Tambah 1 tablet kjeldahl dan 25 ml H 2 SO 4 pekat - Hidupkan terlebih dahulu scrubber selama 10 menit - Labu kjeldhal dipasangkan pada alat destruksi dan pasang alat penghisap ( suction module ) kemudian hidupkan alat dektruksi ( tombol diputar ke angka 10 selama 10 menit kemudian turunkan ke angka 8 ) - Dektruksi dilakukan hingga larutan menjadi jernih kehijauan ( ± 1,5 2 jam ) - Setelah selesai turunkan skala pemanas ke angka 0 lalu matikan alat dektruksi tetapi scrubber tidak dimatikan hingga asap pada labu tidak ada lagi b) Proses Destilasi - Labu kjeldhal hasil dektruksi dipasang pada alat destilasi - Tambahkan aquades dengan cara menekan tombol Reagent 1 - Tambahkan NaOH 32 % dengan cara menekan tombol Reagent 2 17
- Sebagai penampung gunakan erlenmeyer yang telah diisi asam borat 4% sebanyak 50 ml dan ditambah 3 tetes indicator protein - Destilasi selama 5 menit dengan steam 80 % c) Proses Titrasi Dititrasi dengan HCl 0,1N hingga warna oranye bening kemudian dipanaskan bila berubah warna maka dititrasi kembali hingga warna oranye bening. Kemudian dicatat volume HCl 0,1 N yag terpakai Perhitungan : Kadar Protein = V x N x 0, 014 x F W x 100% Keterangan V : Vol HCl 0,1 N untuk titrasi sampel N : Normalitas HCl 0,1 N W : Berat sampel F : Faktor dari sampel untuk susu (6,38) Cara pembuatan pereaksi : a) Indikator protein siapkan larutan Bromcresol green 0,1 % dan larutan metil merah 0,1 % dalam etanol secara terpisah. Campurkan 10 ml bromcresol green 0,1% dengan 2 ml metil merah 0,1 %. a) Larutan Asam borat (H 3 PO 3 ) 4 % Larutkan 40 gram asam borat dilarutkan dengan 1000 ml dengan aquades 18
b) Larutan HCl 0,1 N Encerkan 9,5 ml HCl pekat dengan aquades hingga 1000 ml c) Larutan NaOH 32 % Timbang 320 g NaOH kemudian larutkan dengan aquades bebas CO 2 ad 1000 ml Pembakuan HCl 0,1 N - HCl 0,1 N dibakukan dengan larutan Na 2 CO 3 yang terlebih dahulu telah di keringkan dalam oven selama ± 2 jam pada suhu 105ºC kemudian didinginkan dalam desikator. - Ditimbang serbuk Na 2 CO 3 sebanyak ± 0,05 kemudian dimasukkan ke erlenmeyer 250 ml kemudian ditambahkan 50 ml aquadest dan 3-4 tetes indikator campuran / indicator sindu merah. - Dititrasi dengan HCl 0,1N hingga warna oranye bening kemudian dipanaskan bila berubah warna maka dititrasi kembali hingga warna oranye bening. - Kemudian dicatat volume HCl 0,1 N yag terpakai 19
Perhitungan: N = W BM 1 V Dimana: N W : normalitas HCl : massa Na 2 CO 3 yang ditimbang dalam mg BM : berat molekul Na 2 CO 3 (52,99) V : volume HCl 0,1N yang terpakai 20