Kelompok 2: Kromatografi Kolom

Transkripsi

1 Kelompok 2: Kromatografi Kolom

2 Arti Kata Kromatografi PENDAHULUAN chroma berarti warna dan graphien berarti menulis Sejarah Kromatografi Sejarah kromatografi dimulai sejak pertengahan abad ke 19 ketika penggunaan teknik pemisahan pigmen tanaman seperti klorofil. Hasilnya berupa pita-pita berwarna yang terlihat sepanjang kolom sebagai hasil pemisahan komponen-komponen dalam ekstrak tumbuhan. Sejarah Kromatografi Kolom Sebenarnya kromatografi kolom merupakan teknik kromatografi yang paling awal yang pertamakali di lakukan oleh D.T.Davy (1987) yaitu untuk membedakan komposisi minyak bumi. Michael Tswett di tahun 1901, ketika dia mencuci larutan organik dari pigmen tumbuhan melalui kolom gelas vertical yang diisi dengan materi yang dapat mengabsorbsi.

3 Definisi Kromatografi Kolom Kromatografi kolom adalah kromatografi yang menggunakan kolom sebagai alat untuk memisahkan komponen-komponen dalam campuran. Pada dasarnya kromatografi kolom digunakan sebagai teknik pemurnian untuk mengisolasi komponen yang diinginkan dari suatu campuran.

4 Apa sih isi persentasi kali ini? 1. Bagaimanakah mekanisme pemisahan yang terjadi dalam menggunakan teknik kromatografi kolom? 2. Bagaimana kelemahan dan keunggulan analisis dengan menggunakan kromatografi kolom? 3. Bagaimana aplikasi atau penerapan teknik pemisahan kromatografi kolom dalam berbagai keilmuan?

5 Sasaran Setelah Persentasi Mahasiswa mengetahui proses mekanisme pemisahan dalam kromatografi kolom. Mahasiswa memahami kelemahan dan keunggulan analisis menggunakan kromtografi kolom. Mahasiswa mengetahui aplikasi kromatografi kolom secara langsung dalam berbagai bidang keilmuan.

6 Pengertian Kromatografi Kromatografi secara umum. Kromatografi adalah teknik untuk memisahkan campuran menjadi komponennya dengan bantuan perbedaan sifat fisik masing-masing komponen.

7

8 Jenis-jenis Kromatografi Berdasarkan Teknik Kerja yang digunakan, antara lain : 1. Kromatografi Kertas 2.Kromatografi Kolom 3.Kromatografi Lapis Tipis 4.Kromatografi Gas

9 Kromatografi Kolom Menurut Siti Rohayati (2007), kromatografi kolom merupakan suatu teknik pemisahan yang didasarkan pada peristiwa adsorpsi. Menurut Estien Yazid (2005), Kromatografi kolom adalah kromatografi yang menggunakan kolom sebagai alat untuk memisahkan komponen-komponen dalam campuran. Menurut Soebagio (2000), kromatografi kolom merupakan teknik kromatografi yang paling awal ditemukan dari mekanismenya, kromatografi kolom merupakan terapan atau absobsi yang tidak boleh larut dalam fasa gerak, ukuran partikel fasa diam harus seragam. Secara Umum, kromatografi kolom adalah kromatografi yang menggunakan kolom sebagai alat untuk memisahkan komponen-komponen dalam campuran.

10 Prinsip Kerja Kromatografi Kolom Didasarkan pada absorbsi komponen2 campuran dengan afinitas berbeda terhadap permukaan fase diam. Absorben bertindak sebagai fase diam dan fase geraknya adalah cairan yang mengalir membawa komponen campuran sepanjang kolom. Sampel yang mempunyai afinitas besar terhadap absorben akan secara selektif tertahan dan afinitasnya paling kecil akan mengikuti aliran pelarut.

11 Klasifikasi Kromatografi Kolom 1. Berdasarkan Interaksi Komponen dengan Adsorben a. Kromatografi Adsorbsi b. Kromatografi Partisi c. Kromatografi Pertukaran Ion d. Kromatografi Filtrasi Gel 2. Berdasarkan Gaya yang Bekerja pada Kolom a. Kromatografi Kolom Gravitasi b. Kromatografi Kolom Tekanan

12 Fasa Pada Kromatografi Kolom 1. Fasa Gerak Fase yang mengalir melalui kolom dan merupakan fase yang akan melarutkan zat komponen campuran Fase gerak pada kromatografi kolom dapat berupa pelarut tunggal atau campuran beberapa pelarut dengan komposisi tertentu Contoh : Perfluorokarbon, Hidrokarbon jenuh, Hidrokarbon tak jenuh, Halida & eter, Aldehid & keton, Alkohol & thiol, Asam & basa 2. Fasa Diam Fase yang akan menahan komponen campuran. Fasa diam berupa adsorben yang tidak boleh larut dalam fasa gerak, ukuran partikel fasa diam harus seragam. Contoh : Alumina, silika gel, arang, bauksit, magnesium karbonat, talk, pati, selulosa, dll.

13 Cara Pembuatan Kromatografi Kolom Cara kering yaitu silika gel dimasukkan ke dalam kolom yang telah diberi kapas kemudian ditambahkan cairan pengelusi. Cara basah yaitu silika gel terlebih dahulu disuspensikan dengan cairan pengelusi yang akan digunakan kemudian dimasukkan ke dalam kolom melalui dinding kolom secara kontinyu sedikit demi sedikit hingga masuk semua, sambil kran kolom dibuka

14 kolom signal Proses Elusi Kromatografi Kolom D Sp Solvent E B + E E A + E E Elusi : proses terbawanya komponen dlm suatu camp, shg ada pemisahan komponen yg dibawa oleh fasa gerak dari ujung atas kolom bawah t R : waktu yg diperlukan oleh komponen untuk bermigrasi sepanjang kolom V r : volume FG yg dibutuhkan untuk membawa komponen dari titik awal kolom akhir kolom t R

15 Analisa dalam Kromatografi Analisa kualitatif akan menjelaskan ada atau tidak adanya senyawa tertentu dalam cuplikan. Analisa kuantitatif digunakan untuk menunjukkan banyaknya masingmasing komponen campuran.

16 Analisa Kromatogram 1. Analisa profil puncak dan pelebaran puncak 2. Analisa puncak asimetris : a. Metode tinggi puncak. b. Metode luas puncak. 3. Analisa Faktor Retensi Nilai Rf sangat berpengaruh pada karakterisitik untuk senyawa tertentu pada eluen tertentu.

17 Mekanisme Kromatografi Kolom Mekanisme pemisahan yang terjadi dalam menggunakan teknik kromatografi kolom adalah sampel yang akan dipisahkan dimasukkan ke dalam kolom yang terdiri dari fase diam (bahan penyerap) dan fase gerak (eluen). Masing-masing komponen akan bergerak turun melalui kolom dan pada bagian atas kolom akan terjadi kesetimbangan baru antara bahan penyerap, komponen campuran dan eluen. Maka akan terbentuk pita-pita (zona-zona) yang setiap zona berisi satu macam komponen. Setiap zona yang keluar dari kolom dapat ditampung dengan sempurna sebelum zona yang lain keluar dari kolom.

18 Kelemahan dan Keunggulan Kromatografi Kolom Kelebihan Kromatografi Kolom : Dapat digunakan untuk analisis dan aplikasi preparatif Digunakan untuk menentukan jumlah komponen campuran karena komponenkomponen penyusunnya akan terpisahkan pada saat elusi berlangsung. Dapat digunakan untuk analisis dan aplikasi preparative Digunakan untuk menentukan jumlah komponen campuran Digunakan untuk memisahkan dan purifikasi substansi Kekurangan Kromatografi Kolom : Untuk mempersiapkan kolom dibutuhkan kemampuan teknik dan manual. Membutuhkan waktu yang lama

19 Aplikasi Kromatografi Kolom Analisis senyawa-senyawa kimia bahan alam Bidang pertanian Pemisahan molekul-molekul penting seperti asam nukleat, karbohidrat, lemak, vitamin dan molekul penting lainnya

20 TERIMA KASIH