SKRIPSI ATIKAH NADHIFAH FAHMI

Transkripsi

1 SKRIPSI ATIKAH NADHIFAH FAHMI UJI EFEKTIVITAS BENZALKONIUM KLORIDA KONSENTRASI 0,025% b/v DENGAN ph5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonasaeruginosa) PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2016 i

2 ii

3 iii

4 iv KATA PENGANTAR Bismillahirrohmanirrohiim. Segala puji hanya bagi Allah SWT yang telah memberikan anugerah dan hidayah-nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul UJI EFEKTIVITAS BENZALKONIUM KLORIDA KONSENTRASI 0,025% b/v DENGAN ph 5 (Terhadap Bakteri Pseudomonasaeruginosa) untuk memenuhi salah satu persyaratan akademik dalam menyelesaikan Program Sarjana Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah MalangDengan selesainya skripsi ini, penulis berterima kasih kepada : 1. Drs. Sugiyartono, MS, selaku dosen pembimbing I yang telah mengupayakan ilmu, waktu, dan tenaganya untuk membimbing saya dengan segala ketulusannya sehingga dapat menyelesaikan penyusunan tugas akhir ini 2. Arina Swastika M., S.Farm., Apt, selaku dosen pembimbing II yang telah begitu sabar dan tulus memberikan bimbingan hingga naskah skipsi ini bisa terselesaikan dengan baik. 3. Drs. H. Achmad Inoni, Apt dan Dian Ermawati, M.Farm., Apt, selaku Tim Penguji yang memberikan saran, masukan dan kritik yang telah membangun terhadap skripsi yang telah saya kerjakan. 4. YoyokBekti P, M.Kep, Sp.Kom, selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang 5. NailisSyifa S.Farm., Apt., MSc. selaku Ketua Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang 6. Dian Ermawati, M.Farm., Apt selaku dosen wali yang sudah memberikan bantuan moril, arahan, dan bimbingan kepada saya selama menjalani studi. 7. Laboran Laboratorium Teknologi Sediaan Steril dan Laboratorium Biomedik: Mbak Susi, Mas Ferdi, dan Pak Joko yang selalu membantu saya. 8. Abi saya Ir. Achmad Fahmi Thanthawi dan mama saya Umi Salamah Fahmi yang sudah menjadi orang tua terbaik. Terimakasih untuk selalu mendukung, memberikan nasehat, memberikan dorongan, mendoakan

5 v setiap saat dan setiap waktu. Terimakasih untuk segalanya, seribu kata tidak pernah cukup untuk mengucapkan terimakasih kepada kalian. 9. Mas saya Ali Fahmi Bachtiar dan Adik saya Iffa Nabila Fahmi yang selalu mendukung saya dan menghibur setiap saat. Terimakasih telah menjadi saudara terhebat yang saling membantu satu sama lain. Saya sayang kalian. 10. Kayk, neneng, mbah umi, (alm) mbah abi, serta keluarga besar dari mama dan abi tanpa terkecuali. Terimakasih sudah memberikan kebersamaan keluarga yang begitu hangat. Kalian adalah sebaik-baiknya tempat kembali saat lelah. 11. Sahabat-sahabat terbaik Nabila, Anita Silvia Arief, dan Muthmainnah yang selalu ada, selalu memahami, selalu menerima, dan selalu mendengarkan segala keluh kesah saya, serta mendukung segala hal yang saya lakukan. Terimakasih sudah menjadi sahabat-sahabat yang tulus dan gila. 12. Sahabat-sahabat skripsi steril, teman seperjuangan Nabila, Nadia, Nada, Athirah, Niken, Agung, dan Yudha yang selalu membantu sampai skripsi ini selesai. Terimakasih atas kerjasamanya yang begitu kompak, kegilaannya sehingga membuat saya selalu nyaman, dan segala hal bersama kalian selalu menyenangkan. 13. Sahabat-sahabat saya sejak di MAN 3 MALANG Nabila, Yala, Ciripa, Usa, dan Aisy yang selalu memahami saya karena waktu untuk bertemu semakin sempit. Terimakasih pengertiannya. 14. Teman-teman gila di kampus, Nabila, Mumut, Arisa, Ratna, Rike, Nehar, Bima, Tri, Ahya, Agung Tri, Brawi, Puyuk, dan lain-lain. Terimakasih sudah menjadi teman-teman yang gila dan baik hati, senang bisa bersama kalian. 15. Muhammad Riduan, Iwang, dan Mas Aris terimakasih telah meluangkan waktunya dengan mengantarkan ke Surabaya hingga selamat untuk membantu tim skripsi steril. 16. Kakak-kakak skripsi steril 2011, terima kasih karena tidak bosan menjawab segala pertanyaan terkait skripsi ini.

6 iv

7 RINGKASAN Pengawet adalah agen kimia atau formulasi yang mampu mengurangi jumlah mikroorganisme yang berkembang (viable) dalam suatu objek atau bidang sehingga mencapai tingkat yang aman untuk (tujuan) penggunaan dan dapat menjaga jumlah mikroorganisme viabel pada atau di bawah kadar yang aman pada penggunaan/usia guna produk. Hal ini sangat penting pada sediaan farmasi multiguna atau sediaan yang rentan menjadi media perkembangbiakan mikroorganisme. Pengawet ditambahkan pada produksi obat-obatan sediaan nonsteril, seperti sediaan oral, krim, gel, suppositoria, dan kapsul yang mengandung cairan, dan juga untuk sedian steril, seperti tetes mata dan sediaan injeksi dosis ganda (multipledose). Salah satu pengawet yang sering digunakan adalah benzalkonium klorida karena toxicitasnya rendah, tidak korosif dan memiliki rentang ph yang luas. Selain itu, benzalkonium klorida sering digunakan untuk modifikasi formulasi karena memiliki stabilitas kimia dan karakteristik antimikroba yang sangat baik.benzalkonium klorida tidak efektif terhadap beberapa bakteri, salah satunya adalah Pseudomonasaeruginosa. Sehingga untuk meningkatkan efektivitas benzalkonium klorida terhadap Pseudomonasaeruginosaperlu peningkatan konsentrasi dan modifikasi ph karena aktivitas menghambat benzalkonium klorida akan meningkat jika konsentrasi ditingkatkan dan dengan adanya modifikasi ph. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui efektivitas benzalkonium klorida konsentrasi 0,025% b/v dengan ph 5 terhadap aktivitas bakteri Pseudomonasaeruginosa. Prosedur pertama yang dilakukan pada penelitian ini adalah identifikasi bahan dan bakteri, sterilisasi alat dan bahan yang akan digunakan, sterilisasi ruang, kontrol ruangan LAFC (Laminar Air FlowCabinet), pembuatan sediaan, pembuatan media uji kontrol positif dan kontrol negatif, uji inaktivasi pengawet, uji sterilitas, dan yang terakhir adalah uji efektivitas pengawet benzalkonium klorida 0,025% b/v dengan ph 5. Pada uji efektivitas, terlebih dahulu dilakukan yaitu membuat suspensi bakteri dengan cara swabbiakan koloni bakteri menggunakan ose lalu encerkan dengan larutan NaCl 0,9% steril. Encerkan suspensi tersebut hingga kekeruhan sesuai dengan standar McFarland yang artinya dalam suspensi tersebut jumlah mikroba adalah 10 8 cfu/ml. Kemudian inokulasi sediaan yang dibuat dengan menggunakan suspensi mikroba sejumlah 50 µl pada masing-masing batch. Sediaan yang telah diinokulasikan disimpan di suhu ruang. Setelah itu diambil 1 µl dengan menggunakan osespreaderdan diratakan ke media agarpada hari ke 0, 7, 14, 21, dan 28, kemudian diinkubasi pada suhu 37 0 C selama 24 jam, dan dihitung jumlah bakterinya, dimana perhitungan jumlah koloni mempunyai syarat yaitu koloni dengan tujuan agar mudah dihitung dan tentukan penurunan jumlah mikroba tersebut selama 28 hari pengujian. Sediaan yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 3 vial dengan perlakuan yang sama. Jika media pada hari ke-0 dan hari ke-7 tidak mengalami penurunan jumlah mikroba maka benzalkonium klorida dinyatakan vii

8 viii tidak efektif, sedangkan jika pada hari ke-0 sampai hari ke-7 mengalami penurunan jumlah mikroba maka benzalkonium klorida memenuhi syarat uji efektivitas. Dari penelitian uji efektivitas benzalkonium klorida konsentrasi 0,025% dengan ph 5 terhadap aktivitas bakteri Pseudomonasaeruginosayang dilakukan menunjukkan adanya penurunan jumlah bakteri Pseudomonasaeruginosamulai hari ke-0 sampai hari ke-28. Sehingga, dapat disimpulkan bahwa benzalkonium klorida konsentrasi 0,025% dengan ph 5 efektif digunakan sebagai pengawet untuk menghambat aktivitas bakteri Pseudomonasaeruginosa.

9 DAFTAR ISI Halaman JUDUL SKRIPSI... i LEMBAR PENGESAHAN... ii LEMBAR PENGUJIAN... iii KATA PENGANTAR... iv RINGKASAN... vii ABSTRAK... ix ABSTRACT... x DAFTAR SINGKATAN... xi DAFTAR ISI... xii DAFTAR TABEL... xvii DAFTAR GAMBAR... xviii DAFTAR LAMPIRAN... xix BAB I PENDAHULUAN Latar Belakang Rumusan Masalah Tujuan Penelitian Manfaat Penelitian... 4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA Tinjauan Tentang Pengawet Definisi Pengawet Pemilihan Pengawet Kategori Pengawet Benzalkonium Klorida Sifat Fisika Kimia Aktivitas Antimikroba Toksisitas Pengawet Tinjauan Tentang ph Pengertian ph Tinjauan Tentang Hubungan ph dengan Bakteri Tinjauan Tentang Hubungan ph dengan Benzalkonium Klorida. 11 xii

10 xiii 2.4. Tinjauan Tentang Mikrobiologi Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Pertumbuhan Sumber Kontaminasi Mikroorganisme Tinjauan Tentang Bakteri Klasifikasi Pseudomonas aeruginosa Morfologi dan Identifikasi Patogenesis Tijauan Tentang Sterilisasi Definisi Sterilisasi Tujuan Sterilisasi Macam-macam Sterilisasi Tijauan Tentang Teknik Aseptik Tinjauan Uji Sterilitas Media untuk Uji Sterilisasi Pengambilan Sampel Untuk Uji Sterilitas Media untuk Sterilisas Metode Uji sterilisasi Prosedur Umum Pelaksanaan Uji Sterilisasi Kontrol dalam Uji Sterilisasi Penafsiran Hasil Uji Sterilitas Tinjauan Uji Efektivitas Pengawet Kategori Produk Uji Organisme Media Persiapan Inokulum Prosedur Kriteria Untuk Efektivitas Antimikroba Tinjauan Tentang Dapar Pengertian Dapar Tinjauan Tentang Dapar Asetat Metode Perhitungan Mikroba BAB III KERANGKA KONSEPTUAL Uraian Kerangka Konseptual Skema Kerangka Konseptual BAB IV METODE PENELITIAN... 42

11 xiv 4.1. Desain Penelitian Lokasi Penelitian Waktu Penelitian Sterilisasi Ruang Preparasi Alat dan Bahan Alat Bahan Prosedur Sterilisasi Alat Preparasi Sediaan Formulasi Prosedur Pembuatan Sediaan (Tanpa Bahan Aktif) Prosedur Sterilisasi Sediaan (Ansel, 2005) Uji Inaktivasi Pengawet Penyiapan Unit Laminar air flow dan Memasukkan Semua Bahan dan Alat Kontrol Lingkungan di luar dan di dalam Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Kontrol Lingkungan Suhu dan Kelembaban di luar Laminar Air Flow Cabinet (Lingkungan Penyimpanan Sampel) Penyiapan Media Uji Sterilitas dan Fertilitas Media Inaktivasi Pengawet Pengenceran Sampel Inokulasi Sampel Uji Sterilitas Uji Efektivitas Penyiapan Media Pembuatan Suspensi Mikroba Uji Tahapan Kerja Penanaman Sampel Pengamatan dan Penafsiran Sampel Uji Skema Kerangka Operasional Metode Penelitian BAB V HASIL PENELITIAN Hasil Uji Kontrol Lingkungan Pada Laminar Air Flow Cabinet

12 xv (LAFC) Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air FlowCabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pembuatan Sediaan Tetes Mata Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air FlowCabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Uji Inaktivasi Pengawet Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air FlowCabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Uji Inaktivasi Pengawet Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Positif) Hasil Uji Sterilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Negatif) Hasil Uji Inaktivasi Pengawet dengan Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino Hasil Uji Sterilitas Sediaan Tetes Mata dengan Menggunakan MediaTioglikolat Cair dan Kasamino Hasil Uji Efektivitas Benzalkonium Klorida Konsentrasi 0,025% dengan ph 5 Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas aeruginosa Hasil Kontrol Lingkungan Uji Efektivitas Pengawet Jumlah Awal Rata-rata Mikroba Uji dalam cfu (Colony FormingUnits) per ml untuk Uji Efektivitas Pengawet Jumlah Mikroba dalam cfu (Colony Forming Units) per ml Pada UjiEfektivitas Pengawet BAB VI PEMBAHASAN BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan Saran DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN... 75

13 xvi DAFTAR TABEL Tabel Halaman II.1 Klasifikasi atau Grade Ruangan Steril (Lukas, 2006) II.2 Perlengkapan dan Kandungan Kuman dari Manusia II.3 Jumlah Minimum yang Digunakan untuk Tiap Media...26 II.4 Jumlah Minimum Bahan yang Diuji Sesuai dengan II.5. Jumlah Volume dan Media untuk Bahan Cair II.6. Kategori Produk Berdasarkan Kompendia II.7. Kondisi Inokulum dalam Kultur II.8. Kriteria Untuk Tes Mikroorganisme (Anonim, 2007) V.1 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pembuatan Sediaan V.2 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pembuatan Sediaan V.3 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pengujian Sterilitas V.4 Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Positif) V.5 Hasil Uji Sterilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino (Kontrol Negatif) V.6 Hasil Uji Inaktivasi Pengawet Benzalkonium Klorida Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino V.7 Hasil Uji Sterilitas Sediaan Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino V.8 Hasil Kontrol Lingkungan Uji Efektivitas Pengawet dalam LAFC. 63 V.9 Jumlah Awal Rata-rata Mikroba Uji dalam cfu (Colony Forming Units) per ml untuk Uji Efektivitas Pengawet V.10 Jumlah Mikroba dalam cfu (Colony Forming Units) per ml Pada Uji Efektivitas Pengawet V.11 Persentase Rata-Rata dan Logaritma Penurunan Jumlah Mikroba Pada Uji Efektivitas... 64

14 xvii V.12 Rata-Rata Persentase dan Logaritma Penurunan Jumlah Mikroba Pada Uji Efektivitas... 65

15 xviii DAFTAR GAMBAR Gambar Halaman 2.1. Struktur Kimia Benzalkonium Klorida Pseudomonas aeruginosa pada nutrien agar Asam Asetat Natrium Asetat Skema kerangka konseptual Letak Media Agar dalam Unit Laminar Air Flow Cabinet Sebelum Pengujian Sterilitas Letak Media Agar dalam Unit Laminar Air Flow Cabinet Saat Pengujian Sterilitas Berlangsung Skema Kerangka Operasional... 53

16 xix DAFTAR LAMPIRAN Lampiran Halaman 1. Daftar Riwayat Hidup Surat Anti-Plagiasi Sertifikat Bahan Sertifikat Bahan Sertifikat Bahan Benzalkonium Klorida Sertifikat Bakteri Pseudomonas aeruginosa Sertifikat Bakteri Bacillus subtilis Sertifikat Bakteri Candida albicans Perhitungan Bahan Sedian Benzalkonium Klorida Konsentrasi 0,025% dengan ph Foto Alat dan Bahan Skema Tahapan Pembuatan Sediaan Skema Kerja Uji Inaktivasi Pengawet Skema Kerja Uji Sterilitas Sediaan Skema Kerja Pembuatan Media Nutrient Agar Skema Uji Efektivitas Pengawet Gambar Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar AirFlow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pembuatan Sediaan Gambar Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Uji Inaktivasi Pengawet Gambar Hasil Uji Kontrol Lingkungan di dalam dan di luar Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Sebelum dan Selama Pengujian Sterilitas Gambar Hasil Uji Kontrol Lingkungan Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Selama Pengujian Efektivitas Pengawet Sediaan Gambar Kontrol Jumlah Mikroba Standar 0,5 McFarland (Pseudomonas aeruginosa) Gambar Hasil Uji Fertilitas dan Sterilitas Media Tioglikolat Cair dan Kasamino Gambar Hasil Uji Inaktivasi Pengawet dengan Menggunakan Media Kasamino

17 xx 23. Gambar Hasil Uji Inaktivasi Pengawet dengan Menggunakan Media Tioglikolat Cair Gambar Hasil Uji Sterilitas Sediaan dengan Menggunakan Media Tioglikolat Cair dan Kasamino Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025% b/v Dengan ph 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas aeruginosa) Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025% b/v Dengan ph 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas aeruginosa) Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025% b/v Dengan ph 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas aeruginosa) Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025% b/v Dengan ph 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas aeruginosa) Gambar Hasil Uji Efektivitas Benzalkoium Klorida Konsentrasi 0,025% b/v Dengan ph 5 (Terhadap Aktivitas Bakteri Pseudomonas aeruginosa) Perhitungan Persentase dan Logaritma Penurunan Jumlah Bakteri.. 111

18 DAFTAR PUSTAKA Agoes, Goeswin Pengembangan Sediaan Farmasi. Edisi Revisi dan Perluasan. Bandung : Penerbit ITB Agoes, Goeswin Sediaan Farmasi Steril.Bandung : Penerbit ITB Ansel, Howard C., Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi Edisi Keempat. Jakarta : Penerbit Universitas Indonesia (UI-Press). Anonim United State Pharmacopoeia, Edisi 30. Rockville : USPConvention, Inc. Anonim Pseudomonasaeruginosa. Diakses pada tanggal 23 September 2015 AyselUgur, OzgurCeylan, andbelmaaslim Characterization of Pseudomonasspp. Krom Seawater of The Southwest Coast of Turkey. Turkey : J. Biol. Environ. SCI Badan Pengawas Obat dan Makanan Pedoman Cara Pembuatan Obat Yang Baik. Jakarta : Badan POM. Bore, Erland., etal AdaptedTolerancetoBenzalkoniumChlorideinEscheriachia coli K-12 StudiedbyTranscriptomeandProteomeAnalyses. France : Microbiology. Cooper, J. W., 1975, Dispensing for Pharmaceutical Students, twelfth Ed.10, pitmanmedicalpublishingco. ltd, London CVUA Stuttgart, Schaflandstr QuaternaryAmmoniumCompounds (QAC). Germany : Europa Union ReferenceLaboratory for Residues of Pesticides. Denyer, SP. And Baird, R.M., GuideMicrobiological Control In Pharmaceuticalsand Medical Devices, 2 th ed., BocaRaton CRC Press, Taylor & Francis Group. Departemen Kesehatan Republik Indonesia Farmakope Indonesia. Edisi keempat. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Departemen Kesehatan Republik Indonesia Farmakope Indonesia. Edisi kelima. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Dosunmu, etal Silver-coatedCarbonNanotubesDownregulate The Expression of PseudomonasaeruginosaVirulenceGenes: a PotentialMechanism for TheirAntimicrobialEffect. USA : International Journal of Nanomedicine. Elder, David., Crowley, Patrick., AntimicrobialPreservativePart Two: Choosing a Preservative. UK : American Pharmaceutical Review. Fischetti, A.V., R.P. Novick, J.J. Ferreti, D.A. Portnoy, andj.i. Rood Gram Positif. Washington DC: ASM Press. 72

19 73 Gillespie, Stephen dan Kathleen Bamford At A Glance Mikrobiologi Medis dan Infeksi. Edisi ketiga. Jakarta : Penerbit Erlangga. Hunter, P.R The microbiology of bottled natural mineral waters. United Kingdom : Journal of AppliedBacteriology Jawetz, Melnick, &Adelberg s Mikrobiologi Kedokteran. Edisi dua puluh dua. Jakarta : Penerbit Salemba Medika. Jawetz, Melnick, &Adelberg s Medical MicrobiologyTwentyFourth Ed. USA : The McGraw-HillCompanies, Inc. Kimata,etal Pseudomonasaeruginosaisolatedfrommarineenvironmentsin Tokyo Bay.Japan : Ocean Research Institute. Kumar, Surinder Textbook of Microbiology. New Delhi : Jaypee Brothers Medical Publishers. Martin, A.N., Swarbrick, J., dan Cammarata, A Farmasi Fisik. Edisi III. Jakarta : UI-Press. McDonnell, Gerald. And Russell, Denver., Antiseptics dan Disinfectants: Activity, Action, andresistance.united Kingdom : ClinicalMicrobiologyReview. Mesaros, etal Pseudomonasaeruginosa: resistanceandtherapeuticoptionsattheturn of thenewmillennium. Belgium : European Society of ClinicalMicrobiologyandInfectiousDiseases Patrick J. Crowley& David P. Elder, 2012.AntimicrobialPreservativesPart One : Choosing a Preservative System. American Pelczar, Michael dan E.C.S.Chan. (1986). Dasar-Dasar Mikrobiologi. Cetakan I. Jakarta:UI-Press. Hal PratiwiSyivia T., Mikrobiologi Farmasi. Jakarta : Erlangga. Prescott, L.M., J.P. Harley, andd.a. Klein Microbiology. 5 ed. New York : McGraw Hill. Rangkuti.D Penuntun Penelitian Mikrobiologi. Padang : Sekolah Menengah Analis Kimia Remington, J. P Remington s Pharmaceutical The Science andpracticeinpharmacy 21 st Edition. Pennsylvania : Lippincott Williams & Wilkins. Rowe, C Raymond, dkk Handbook of Pharmaceutical Excipients. Edisi keenam. London : Pharmacetical Press. Ryan, K.J., J.J. Champoux, S. Falkow, J.J. Plonde, W.L. Drew, F.C. Neidhardt, andc.g. Roy Medical

20 74 MicrobiologyAnIntroductiontoInfectiousDiseases. 3rd ed. Connecticut: Appleton&Lange Siswandono dan Soekarjo, Bambang Kimia Medisinal. Surabaya : Airlangga University. Solveig, Langsurd AdaptedTolerenceToBenzalkoniumChloride In Eschericia Coli K-12 StudiedByTranscriptomeandProteomeAnalysis. Great BritainPrinted. Stefanus Lukas Formulasi Steril. Yogyakarta : Penerbit ANDI Suriani, Sanita., Soemarno, Suharjono Pengaruh Suhu dan ph terhadap Laju Pertumbuhan Lima Isolat Bakteri Anggota Genus Pseudomonas yang diisolasi dari Ekosistem Sungai Tercemar Deterjen di sekitar Kampus UniveristasBrawijaya. Indonesia : Universitas Brawijaya. Syukri., Kimia Dasar 2. Bandung : Penerbit ITB. Vogel Buku Analisis Anorganik Kualitatif Makro dan Semimikro. Edisi Kelima. Bagian I. PT Kalman Pustaka : Jakarta. Voigt, R Buku Ajar Teknologi Farmasi. Edisi kelima. Yogyakarta : Gadjah Mada University Press. Volk, W. A. dan M. F. Wheeler Mikrobiologi Dasar, Erlangga, Jakarta Waluyo. L Mikrobiologi Umum. UMM Press. Malang Zabrzewska, Beata., etal Development Studies On Determination of PreservativesDecomposition Products.Poland : Polish Pharmaceutical Society.