WIDYASTUTI ET AL.: KERAGAMAN KARAKTER BUNGA TANAMAN PADI. Studi Keragaman Genetik Karakter Bunga yang Mendukung Persilangan Alami Padi

Transkripsi

1 WIDYASTUTI ET AL.: KERAGAMAN KARAKTER BUNGA TANAMAN PADI Studi Keragaman Genetik Karakter Bunga yang Mendukung Persilangan Alami Padi Yuni Widyastuti, Indrastuti AR., dan Satoto Balai Besar Penelitian Tanaman Padi Jl. Raya 9 Sukamandi, Subang, Jawa Barat ABSTRACT. Genetic Variability of Floral Characters for Supporting Natural Outcrossing in Rice (Oryza sativa L.). The experiments were conducted in Glass House of ICRR during the DS 2005 and WS 2005/2006 to study the genetic variability of spikelet characters of Indica, Japonica, Javanica, and wild species of rice. Result indicated that floral characters of 10 genotypes tested varied greatly. Among the genotypes tested IR24, Oryza nivara, and Grogol showed the highest percentage of stigma exertion. Percentage of stigma exertion showed the highest coefficient of genotypic variation. Broad sense heritability values were 0.89 and 0.62, for percentage of stigma exertion and spikelet length, respectively. This indicated that phenotypic selection for these characters would be effective. There were positive correlation between stigma exertion and stigma length and between anther length and stigma length. Improvement of floral characters influencing outcrossing rate in rice appeared to be effective by using phenotypic selection among the segregants of derived from cross combination involving IR24 and Grogol varieties, and Oryza nivara as parents. Keywords: Genetic variability, floral characteristic, out crossing, and Oryza sativa ABSTRAK. Studi keragaman genetik karakter bunga yang mendukung persilangan alami (outcrossing) padi dilakukan di Rumah Kaca Sukamandi pada MK 2005 dan MH 2005/06. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui keragaman genetik karakter-karakter bunga padi jenis Indika, Japonika, Javanika, dan spesies liar yang dapat mendukung kemampuan persilangan alami. Di antara 10 genotipe yang diuji menunjukkan variasi yang besar untuk semua karakter bunga yang diamati. Genotipe IR24, Oryza nivara, dan Grogol menunjukkan persentase stigma eksersi yang paling tinggi dibanding yang lain. Persentase keluarnya stigma menunjukkan koefisien keragaman genetik tertinggi. Nilai heritabilitas tinggi dalam arti luas dengan nilai 0,89 dan 0,62, masing-masing untuk karakter eksersi stigma dan panjang spikelet. Hal ini menunjukkan seleksi fenotipe untuk karakter-karakter tersebut efektif dilakukan. Karakter yang memiliki koefisien korelasi positif dan sangat nyata adalah eksersi stigma terhadap panjang anter dan panjang anter terhadap panjang stigma. Peningkatan karakter-karakter bunga yang mempengaruhi persilangan dapat dilakukan melalui seleksi fenotipe di antara segregan dari kombinasi persilangan yang menggunakan IR24, padi liar O. Nivara, dan Grogol sebagai tetuanya. Kata kunci: Keragaman genetik, karakter bunga, persilangan alami, padi Program pemuliaan padi umumnya difokuskan pada peningkatan potensi hasil, mendukung upaya mencukupi kebutuhan pangan, khususnya beras. Salah satu alternatif yang dapat dilakukan untuk memperoleh varietas yang mempunyai potensi hasil tinggi adalah dengan memanfaatkan heterosis melalui pengembangan teknologi padi hibrida (Yuan 1998). Padi hibrida yang telah berhasil secara komersial di Cina, India, dan negara Asia lainnya sebagian besar dirakit dengan menggunakan metode tiga galur. Metode tersebut mempunyai kelemahan pada prosedur produksi benih yang rumit yang dapat menyebabkan hasil benih menjadi rendah karena rendahnya persentase pembentukan biji (seed set) pada produksi benih F1 hibrida. Persentase pembentukan biji pada produksi benih F1 hibrida ditentukan oleh faktor eksternal dan internal. Faktor eksternal yang utama antara lain adalah ketepatan waktu berbunga antara galur mandul jantan (GMJ) dengan galur pemulih kesuburan (R), sedangkan faktor internal yang utama adalah karakter-karakter bunga pada GMJ. Usaha untuk meningkatkan kemampuan persilangan alami pada GMJ diharapkan dapat membantu meningkatkan produksi benih hibrida sehingga memudahkan pengembangannya. Keberhasilan produksi benih hibrida antara lain ditentukan oleh karakter bunga, kesesuaian waktu pembungaan kedua tetua, dan karakter morfologi yang lain yang mempengaruhi transfer tepungsari dari tetua jantan (R) ke tetua betina (GMJ). Salah satu ciri GMJ yang baik adalah mempunyai kemampuan menyerbuk silang yang tinggi sehingga dapat menghasilkan benih yang tinggi (Virmani et al. 1998). GMJ dengan potensi persilangan alami (outcrossing) yang tinggi akan sangat mendukung produksi benih hibrida (Sahoo et al. 1998). Tingkat outcrossing yang tinggi dipengaruhi antara lain oleh karakter-karakter bunga seperti ukuran stigma, waktu membuka bunga (anthesis), ukuran anter, persentase keluarnya stigma, dan faktor lingkungan (Ramalingam et al. 1997, Virmani and Athwal 1973). Selain itu outcrossing juga dipengaruhi oleh lingkungan makro maupun mikro di tempat tanaman tersebut tumbuh. Padi merupakan tanaman menyerbuk sendiri, meskipun telah ditemukan beberapa varietas dan di bawah kondisi tertentu dapat menyerbuk silang sampai 6,8%. Virmani (1994) menyebutkan, di antara beberapa padi liar, O. sativa f spontanea menunjukkan tingkat menyerbuk silang sampai 50% dan O. longistaminata serta O. perennis dapat mencapai 100%. Dibandingkan dengan kultivar padi budi daya, padi liar ternyata memiliki tingkat outcrossing yang lebih tinggi. 14

2 PENELITIAN PERTANIAN TANAMAN PANGAN VOL. 26 NO Tanaman padi menghasilkan bunga (spikelet) yang sempurna, terkumpul pada rangkaian malai. Setiap bunga terdiri atas enam stamen (yang terdiri atas dua ruang dan empat lokus), anther yang didukung oleh tangkai sari (filament) dan sebuah putik yang terdiri atas satu ovule (Virmani 1994). Periode dari membuka sampai menutupnya bunga disebut dengan lamanya pembungaan. Padi yang telah dibudidayakan umumnya memiliki lama pembungaan menit dan karakter ini sangat dipengaruhi oleh lingkungan saat terjadinya pembungaan. Beberapa kelompok padi seperti Indika, Japonika, Javanika, maupun jenis padi liar mempunyai perbedaan karakter bunga. Penelitian yang telah dilakukan Sahoo et al. (1998) terhadap 75 genotipe padi yang mempunyai karakter bunga yang berhubungan dengan outcrossing, yaitu waktu membukanya bunga, sudut membukanya bunga, persentase keluarnya stigma, panjang spikelet, panjang anter, panjang stigma, panjang malai, jumlah rumpun produktif per tanaman, hasil per tanaman, dan tinggi tanaman. Ada perbedaan yang signifikan untuk semua karakter bunga. Hal ini menunjukkan adanya tingkat keragaman genetik untuk karakter-karakter tersebut. Menurut Taillebois dan Guimaraes (1988), spikelet yang steril mempunyai stigma yang keluar dan waktu membuka yang lebih lama. Selain itu ada kaitan yang erat antara stigma yang keluar dengan pengisian biji. Tanaman GMJ dengan 100% stigmanya keluar dapat menghasilkan 80% gabah isi dalam kondisi polinasi yang prima. Penurunan beberapa karakter bunga seperti panjang anther, panjang stigma, dan eksersi stigma pada padi ternyata dikendalikan oleh beberapa gen (poligen). Huang dan Huang dalam Virmani (1994) melaporkan bahwa eksersi stigma dapat berkarakter dominan, parsial dominan, maupun resesif, bergantung pada tetua yang disilangkan. Mereka juga menemukan korelasi negatif antara eksersi stigma dengan kesuburan tepungsari. Karakter aditif dan nonaditif berperan sangat penting pada penurunan karakter bunga pada padi. Untuk merakit padi hibrida, karakter bunga yang ideal pada tetua betina adalah stigma yang panjang, persentase eksersi stigma yang tinggi, durasi pembungaan yang lama, dan sudut membuka bunga yang besar. Pada tetua jantan diperlukan anter yang panjang. Beberapa penelitian telah dilakukan untuk mengetahui karakter bunga pada GMJ. Ramesha et al. (1998) yang melakukan penelitian terhadap empat GMJ yaitu IR58025A, IR62829A, V20A, dan ZS97A melaporkan bahwa IR58025A menunjukkan tingkat outcrossing tertinggi dengan penilaian panjang filamen, panjang anter, panjang stigma, dan diameter tepungsari. Selain itu Singh dan Singh (1998) menemukan adanya variasi genetik pada karakter-karakter bunga dari 10 GMJ, di antaranya IR62829A yang menunjukkan karakter stigma yang lebih baik dibanding IR58025A. Penelitian mengenai keragaman genetik beberapa karakter bunga yang mempengaruhi terjadinya penyerbukan silang pada beberapa jenis padi tersebut sangat diperlukan dalam pemuliaan padi hibrida, terutama untuk meningkatkan penyerbukan silang. Penelitian ini bertujuan untuk mempelajari keragaman genetik karakter bunga yang mempengaruhi persilangan alami. Hasil studi keragaman ini diharapkan dapat dijadikan dasar untuk penelitian lanjutan pewarisan sifat yang mentransfer karakter-karakter bunga yang mendukung tingginya tingkat outcrossing ke galur-galur pelestari yang digunakan dalam pengembangan padi hibrida. BAHAN DAN METODE Penelitian dilakukan di Rumah Kaca Balai Besar Penelitian Tanaman Padi, Sukamandi, pada MK 2005 dan MH 2005/06. Sepuluh genotipe padi yang mewakili Indika, Japonika, Japonika Tropis/Javanika, dan padi liar (Tabel 1) ditanam dalam pot plastik yang diisi tanah. Tanaman dipupuk dengan urea 1,2 g, KCl 0,4 g, dan SP36 0,6 g/pot. Semua pupuk diberikan sebagai pupuk dasar. Pupuk N lanjutan diberikan berdasarkan pembacaan bagan warna daun (BWD). Rancangan yang digunakan adalah acak kelompok dengan tiga ulangan. Pada setiap ulangan, masing-masing genotipe ditanam 10 tanaman. Materi percobaan terdiri atas 10 varietas dari spesies padi Indika, Javanika, Japonika, dan padi liar (Tabel 1). Bibit dipindah tanam ke pot-pot percobaan pada umur 28 hari setelah sebar (HSS). Pengamatan dilakukan terhadap beberapa karakter bunga yang mendukung persilangan alami, yaitu persentase keluarnya stigma, lamanya bunga membuka, sudut membukanya bunga (saat membuka maksimum), panjang anter, dan panjang Tabel 1. Materi percobaan keragaman karakter bunga tanaman padi, Sukamandi MK 2005 dan MH 2005/06. Varietas/spesies No aksesi Golongan IR Indika Dusel 2352 Indika Dular 456 Indika Aceh-Aceh 498 Javanika IR Intermediet Japonika- Japónika Tropis Grogol 4656 Javanika Akitakomachi 1234 Japonika Taiken 5 Japonika O. nivara Padi liar O. rufipogon Padi liar 15

3 WIDYASTUTI ET AL.: KERAGAMAN KARAKTER BUNGA TANAMAN PADI stigma. Pengamatan morfologi tanaman dilakukan terhadap tinggi tanaman, jumlah anakan produktif, dan hasil. Persentase keluarnya stigma diukur dari bunga yang mekar dari lima contoh tanaman tiap ulangan dan 40 spikelet tiap tanaman. Waktu membukanya bunga dari lima contoh tanaman diukur pada saat mulai membuka sampai menutupnya spikelet. Panjang bunga, anter, dan stigma diukur di bawah mikroskop dengan satuan millimeter (mm) masing-masing tiga pengamatan yang diambil dari lima tanaman secara acak dari tiap ulangan. Sudut membukanya bunga diukur pada saat bunga membuka secara maksimum, kemudian diukur menggunakan busur untuk menentukan besarnya sudut antara lemma dan palea. Analisis statistik untuk karakter-karakter bunga menggunakan nilai rata-rata ulangan tiap genotipe. Data keluarnya stigma ditransformasi arcsin sebelum dianalisis. Ragam genotipe, ragam fenotipe, dan heritabilitas dihitung berdasarkan komponen ragam (Tabel 2). Selanjutnya ragam genotipe, fenotipe dan heritabilitas luas dihitung mengikuti rumus-rumus berikut ini: Ragam fenotipik (Vf) = M3/rm...(1) M 3 = Nilai kuadrat tengah genotipe m = Banyaknya musim pengujian Ragam genotipik (Vg) = (M 3 -M 4 )/rm...(2) M 3 = Nilai kuadrat tengah genotipe M 4 = Nilai kuadrat tengah interaksi genotipe x musim H = Vg/Vf...(3) Vf = ragam fenotipe Vg = ragam genotipe Ragam fenotipe, ragam genotipe, dan heritabilitas pada masing-masing musim dihitung berdasarkan komponen ragam pada Tabel 3. Ragam fenotipe (Vf) = N2/r...(4) N2 = Nilai kuadrat tengah genotipe Ragam genotipe (Vg) = (N2-N3)/r...(5) N2 = Nilai kuadrat tengah genotipe N3 = Nilai kuadrat tengah galat Tabel 2. Analisis varians pendugaan parameter genetik karakterkarakter bunga tanaman padi. Sukamandi, MK 2005 dan MH 2005/06. Sumber Variasi db Varians Nilai harapan varians Musim (m-1) M 1 2 e + rs 2 gm + gs 2 rm + rgs 2 m Ulangan dalam musim m(r-1) M 2 2 e + gs 2 rm Genotipe (g-1) M 3 2 e + rs 2 gm + rms 2 g Genotipe x Musim (g-1) (m-1) M 4 2 e + rs 2 gm Galat Gabungan m(g-1)(r-1) M 5 2 e Sumber: Singh dan Chaudary (1979) Tabel 3. Sidik ragam model acak pada analisis setiap lingkungan. Sumber Db Kuadrat Kuadrat tengah keragaman tengah harapan Ulangan (r-1) N1 2 e + gs 2 r Genotipe (g-1) N2 2 e + rs 2 g Galat (r-1)(g-1) N3 2 e Sumber: Singh dan Chaudary (1979) Heritabilitas dalam arti luas dihitung dengan menggunakan rumus 3. Koefisien keragaman genotipe (KVG) diduga dengan rumus: KVG = ( g/x) x (6) g = Akar kuadrat ragam genotipe x = Nilai tengah contoh HASIL DAN PEMBAHASAN Pada awal fase vegetatif pertanaman mengalami serangan hama tungau, namun tidak terjadi kerusakan. Perbedaan intensitas cahaya matahari yang diterima oleh tanaman pada musim kemarau dan musim hujan menyebabkan lamanya pembungaan beberapa tanaman dengan genotipe yang sama menjadi berbeda. Pada Juli-Agustus MK 2006, saat terjadinya pembungaan, suhu maksimal di rumah kaca Sukamandi berkisar antara 32,1-32,8 o C dengan kelembaban rata-rata 81,4-85,2%, sedangkan pada Desember MH 2005/06 suhu maksimum 31,9 o C saat tanaman berbunga dengan kelembaban udara rata-rata 90,6%. Perbedaan intensitas cahaya matahari dan kelembaban ini merupakan salah satu penyebab genotipe Dular dan Akitakhomachi lebih lama waktu pembungaannya pada musim hujan dibanding musim kemarau. 16

4 PENELITIAN PERTANIAN TANAMAN PANGAN VOL. 26 NO Karakter Bunga yang mendukung Terjadinya Outcrossing Penelitian menunjukkan adanya variasi yang sangat nyata untuk karakter panjang spikelet, anter, dan stigma, lebar spikelet, waktu membukanya bunga, persentase eksersi stigma, dan sudut membukanya bunga. Nilai tujuh karakter bunga dari 10 genotipe disajikan pada Tabel 4. Secara umum genotipe IR24, Oryza nivara, dan Grogol menunjukkan persentase eksersi stigma yang lebih tinggi dibandingkan dengan genotipe yang lain, yaitu 71,4%, 64,6%, dan 54,5%. Genotipe Grogol, Dusel, dan O. nivara mempunyai stigma yang paling panjang dibanding dengan yang lain yaitu 1,05, 1,04, dan 1,02 mm. Persentase eksersi stigma, panjang stigma, dan panjang anter adalah karakter yang potensial untuk meningkatkan keberhasilan persilangan alami pada padi budi daya. Eksersi stigma erat kaitannya dengan efektivitas GMJ. Perakitan padi hibrida di BB Padi menunjukkan bahwa IR58025A merupakan salah satu GMJ introduksi yang menurunkan hibrida-hibrida dengan tingkat pengisian gabah di atas 80%. Salah satu karakter bunga dari IR58025A adalah persentase eksersi stigmanya yang tinggi. Genotipe IR24 menunjukkan sudut membukanya bunga yang paling besar dibanding genotipe lain, yaitu Sedangkan Grogol, Taiken, dan Dular menunjukkan durasi pembungaan di atas 60 menit. Morfologi bunga genotipe Grogol dan IR24 memiliki ukuran spikelet yang lebih panjang dibanding genotipe lainnya, yaitu 8,70 dan 8,58 mm. Heritabilitas Karakter Bunga Koefisien keragaman genetik (Tabel 5) menunjukkan bahwa persentase eksersi stigma memiliki nilai yang paling tinggi dibanding karakter lain yang diamati yaitu 42,2. Berarti kemungkinan untuk memperbaiki karakter ini lebih besar dibandingkan dengan karakter bunga lainnya. Heritabilitas luas untuk persentase eksersi stigma dan panjang spikelet menunjukkan nilai 0,89 dan 0,62 yang berarti heritabilitasnya tinggi. Perbaikan karakter Tabel 4. Nilai beberapa karakter bunga 10 genotipe padi. Panjang (mm) Lebar Durasi Sudut Genotipe spikelet pembungaan % eksersi bunga buka Spikelet Anter Stigma (mm) (menit) stigma ( 0 ) IR24 8,58 1,95 0,92 3, ,44 35 Dusel 7,13 2,31 1,04 3, ,9 30 Dular 8,04 2,09 0,91 3, ,99 28 IR ,29 2,43 0,95 3, ,58 33 Aceh-aceh 7,69 2,56 0,97 3, ,81 31 Grogol 8,70 2,67 1,05 3, ,5 31 Akitakhomachi 7,04 1,91 0,86 3, Taiken 6,79 2,03 0,77 3, ,4 29 O. nivara 7,09 2,15 1,02 3, ,57 30 O. rufipogon 7,75 2,44 0,99 3, ,3 28 Rata-rata 7,61 2,254 0,948 3, ,549 30,5 F hitung 85,16** 7,06** 6,37** 6,59** 5,53** 208,91** 8,83** LSD 5% 0,21 0,099 0,098 0,19 4,63 1,12 2,13 KK (%) 8,74 14,38 12,51 9,15 17,25 18,46 10,66 ** Signifikan pada taraf 1% Tabel 5. Koefisien keragaman genetik dan heritabilitas beberapa karakter bunga 10 genotipe padi. Nilai Nilai Koefisien keragaman Karakter bunga rata-rata kisaran genetik Heritabilitas Panjang spikelet, mm 7,61 6,38-8,98 8,55 0,62 Lebar spikelet, mm 3,51 3,00-4,00 4,53 0,20 Panjang anter, mm 2,29 1,45-3,08 11,20 0,38 Panjang stigma, mm 0,95 0,54-1,18 7,48 0,26 Durasi pembungaan, menit 57, ,02 % Eksersi stigma 39, ,50 42,15 0,89 Sudut membuka bunga, o 4,00 2,96-4,78 5,92 0,24 17

5 WIDYASTUTI ET AL.: KERAGAMAN KARAKTER BUNGA TANAMAN PADI ini akan lebih mudah karena dapat diseleksi pada generasi awal. Eksersi stigma merupakan salah satu karakter bunga yang dapat mendukung terjadinya persilangan alami karena dengan posisi stigma yang berada di luar gluma pada saat spikelet membuka sampai dengan menutup memperbesar kemungkinan terjadinya pollinasi dari tepung sari tanaman lain. Beberapa karakter bunga yang menunjukkan heritabilitas sedang dengan kisaran nilai 0,20-0,38 yaitu lebar spikelet, panjang stigma dan anter, serta sudut membukanya bunga. Hal ini merupakan salah satu indikasi bahwa seleksi fenotipe untuk karakter-karakter tersebut bisa efektif. Sementara karakter lama pembungaan menunjukkan heritabilitas yang rendah karena pengaruh faktor eksternal seperti intensitas cahaya, suhu, maupun kelembaban yang sangat mempengaruhi cepat lambatnya bunga membuka. Hal ini terlihat jelas pada genotipe Dular dan Grogol yang menunjukkan durasi berbunga dua kali lebih lama pada musim hujan dibanding musim kemarau. Tabel 6. Koefisien korelasi genotipe padi beberapa karakter bunga. Karakter Panjang anter Panjang stigma Panjang spikelet 0,04 Panjang anter Panjang stigma Sudut membuka bunga 0,07 1** % Eksersi Durasi stigma pembungaan 0,05 0,13 0,40* **, berbeda nyata pada taraf 1% Korelasi Antarkarakter Bunga Koefisien korelasi untuk pasangan karakter yang diamati ditunjukkan pada Tabel 6. Panjang anter menunjukkan hubungan linear yang sempurna dengan panjang stigma. Hal ini berarti perbaikan karakter panjang stigma dapat dilakukan seiring dengan peningkatan panjang anter. Durasi pembungaan menunjukkan tidak adanya korelasi dengan panjang anter dan panjang spikelet serta berkorelasi negatif dengan panjang stigma dan sudut membukanya bunga. Sebagaimana telah dikemukakan, durasi pembungaan lebih dipengaruhi oleh faktor eksternal tanaman. Panjang spikelet tidak berkorelasi dengan karakter pembungaan lainnya. Persentase eksersi stigma mempunyai korelasi positif dengan panjang stigma. Hal tersebut berarti kemungkinan untuk meningkatkan persentase eksersi stigma dengan meningkatkan ukuran panjang stigma cukup besar. Semakin panjang stigma memungkinkan stigma akan terletak di luar spikelet pada saat dan setelah terjadinya pembungaan sehingga memperbesar keberhasilan polinasi. Seleksi terhadap ukuran panjang stigma dapat meningkatkan persentase eksersi stigma. Gambar 1 menunjukkan genotipe padi liar Oryza nivara, terlihat bahwa stigma, anter, dan filamennya mempunyai ukuran yang panjang. Gambar 1 juga dapat dilihat posisi stigma yang berada di luar gluma (eksersi stigma). Karakter tersebut pada tetua jantan dapat meningkatkan ketersediaan tepungsari dan penyebarannya ke kepala putik. Bunga varietas IR24 dan Grogol ditunjukkan pada Gambar 2 dan Gambar 1. Bunga liar Oryza nivara Gambar 2. Bunga padi varietas IR24. 0,14 0-1** -0,75**

6 PENELITIAN PERTANIAN TANAMAN PANGAN VOL. 26 NO DAFTAR PUSTAKA Gambar 3. Bunga padi varietas Grogol. KESIMPULAN 1. Di antara 10 genotipe yang diuji terdapat perbedaan yang sangat nyata pada karakter-karakter bunga yang diamati. Persentase keluar stigma (eksersi stigma) menunjukkan koefisien keragaman genetik tertinggi dibanding karakter yang lain. 2. Nilai heritabilitas tinggi dalam arti luas ditunjukkan oleh karakter panjang spikelet dan persentase eksersi stigma. Terdapat korelasi positif yang nyata antara panjang anter dengan stigma dan panjang stigma dengan persentase eksersi stigma 3. Varietas IR24, Grogol, dan spesies liar O. nivara menunjukkan karakter pembungaan yang dapat meningkatkan persilangan alami. Ramalingam, J, N. Nadrajan, C. Vanniarajan, and P. Rangsamy Floral traits influencing outcrossing rate in rice. Int. Rice Res. Notes. 22 (1): Ramesha, M S, M.I.Ahmed, B.C. Virakhtamath, C.H.M. Vijayakumar, and S. Singh New cytoplasmic male sterile (CMS) lines with diversified CMS sources and better outcrossing traits in rice. Int. Rice Res. Notes. 23(2):5. Sahoo SK, R. Singh, L.C. Prasad, R.M. Singh, and D.K. Singh Screening rice germplasm for floral attributes that influence outcrossing. Int. Rice Res. Notes. 23(1):7. Singh, R.K. and B.D. Chaudary Biometrical methods in quantitative genetic analysis. Kalyani Publisher New Delhi. 304p. Singh, R and B. Singh Genetic variability in floral traits of 10 cytosterile lines of rice (Oryza sativa L.). Int. Rice Res. Notes. 23(3):4. Taillebois, J. and E. Guimaraes Improving outcrossing rate in rice (Oryza sativa L.). In Hybrid rice. IRRI, Los Banos, Philippines. Virmani, S S, B.C. Virakhtamath, C.L. Casal, R.S. Toledo, M.T. Lopez, J.O. Manalo Hybrid rice breeding manual. IRRI. Los Banos.Philippines. Virmani, S S, and Athwal D S Genetic variability in floral characteristic influencing outcrosssing in Oryza sativa L. Crop Sci. 13 (1): Virmani, S.S Heterosis and Hybrid Rice Breeding. Monograps on Theoritical and Applied Genetics 22.IRRI. Los banos. Philippines. Yuan, L.P Increasing yield potential in rice by exploitation of heterosis. p:1-6. In S.S. Virmani (ed.) Hybrid rice technology new development and future prospects. Selected papers from the International Rice Res. Conf. IRRI. Los Banos, Philippines. 19